一种同时检测养阴清肺丸中七种有效成分的方法与流程

1.本发明属于化学检测技术领域，具体涉及一种同时检测养阴清肺丸中七种有效成分的方法。


背景技术：

2.养阴清肺丸由地黄、麦冬、玄参、川贝母、白芍、牡丹皮、甘草、薄荷八味药味组成，具有养阴润燥、清肺利咽的功效，临床上主要用于阴虚肺燥、咽喉干痛、干咳少痰或痰中带血。该制剂现收载于《中国药典》2020年版一部中，有大蜜丸、小蜜丸、水蜜丸、水丸4种规格。在【含量测定】项中，仅对丹皮酚进行控制，不能很好地满足质量控制需求。现有关于养阴清肺丸的研究中，均仅对芍药苷进行了考察和研究。中药复方制剂中包含的药味多，含有的化学成分种类复杂，仅以单一成分作为指标对其进行考察并不能实现全面、客观评价其质量的目的。因此，建立一种能够同时测定养阴清肺丸中哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和甘草酸7种指标成分的方法，对养阴清肺丸中白芍、地黄、玄参、甘草、牡丹皮5味药味的投料情况进行考察和研究，能为提高养阴清肺丸的质控标准提供一定的理论依据和技术支撑。


技术实现要素：

3.本发明采用分段变换波长法，旨在建立一种能够同时测定养阴清肺丸中哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和甘草酸7种指标成分的方法，从而能够对养阴清肺丸中白芍、地黄、玄参、甘草、牡丹皮等5味中药的投料情况进行检测。
4.本发明的技术方案如下：
5.一种同时检测养阴清肺丸中七种有效成分的方法，步骤如下：将养阴清肺丸样品溶液注入液相色谱仪中，采用分段变换波长法，进行色谱检测，以实现七种有效成分的定性和定量检测。
6.上述色谱检测选自如下色谱条件：
7.采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂；以乙腈为流动相a，以0.1％磷酸水溶液为流动相b，进行梯度洗脱，梯度洗脱选自如下洗脱条件：0～3min，3％a；3～16min，3～16％a；16～20min，16％a；20～26min，16～25％a；26～31min，25～30％a；31～33min，30～37％a；33～38min，37～42％a；38～40min，42～45％a；40～45min，45～100％a；柱温为30℃；进样量为4μl；流速为1.0ml/min。
8.上述分段变换波长法选自如下条件：
9.0～8min，波长210nm，测定哈巴苷；8～18min，波长230nm，测定芍药苷；18～21min，波长278nm，测定甘草苷；21～27min，波长332nm，测定毛蕊花糖苷；27～33min，波长278nm，测定哈巴俄苷、丹皮酚；33～45min，波长252nm，测定甘草酸。
10.上述检测方法中，所述七种有效成分为哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和甘草酸。
11.本发明提供了上述方法在检测养阴清肺丸中的中药投料情况中的应用。
12.上述应用中，所述中药为白芍、地黄、玄参、甘草和牡丹皮。
13.本发明提供了上述方法在养阴清肺丸质量控制和评价中的应用。
14.在上述质量控制和评价应用中，所述养阴清肺丸中各有效成分的含量标准为：
15.以哈巴苷和哈巴俄苷总量计，拟定限度为：大蜜丸应不少于0.30mg/g，小蜜丸应不少于0.30mg/g，水蜜丸应不少于0.35mg/g，水丸应不少于0.50mg/g；拟定甘草苷限度为：大蜜丸应不少于70μg/g，小蜜丸应不少于70μg/g，水蜜丸应不少于130μg/g，水丸应不少于150μg/g；拟定甘草酸限度为：大蜜丸应不少于0.30mg/g，小蜜丸应不少于0.30mg/g，水蜜丸应不少于0.35mg/g，水丸应不少于0.40mg/g；拟定芍药苷限度为：大蜜丸应不少于0.60mg/g，小蜜丸应不少于0.60mg/g，水蜜丸应不少于0.85mg/g，水丸应不少于1.0mg/g；拟定丹皮酚限度为：大蜜丸应不少于0.50mg/g，小蜜丸应不少于0.50mg/g，水蜜丸应不少于0.60mg/g，水丸应不少于0.70mg/g。
16.本发明的有益效果为：
17.本发明通过采用uplc分段变换波长法，实现了养阴清肺丸中哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和甘草酸的含量的同时测定，七种有效成分均能实现良好的分离，无其他成分干扰。且各成分均在各自的线性范围内线性关系良好，加样回收率在95～105％之间。本发明的检测方法简便、准确、有效，从而可用于养阴清肺丸的质量控制和整体质量评价。
附图说明
18.图1为混合对照品的uplc色谱图；其中，1为哈巴苷，2为芍药苷，3为甘草苷，4为毛蕊花糖苷，5为哈巴俄苷，6为丹皮酚，7为甘草酸铵；
19.图2为水蜜丸供试品的uplc色谱图；
20.图3为大蜜丸供试品的uplc色谱图；
21.图4为缺白芍牡丹皮阴性的uplc色谱图；
22.图5为缺玄参地黄阴性的uplc色谱图；
23.图6为缺甘草阴性的uplc色谱图；
24.图7为缺玄参阴性的uplc色谱图；
25.图8为缺白芍阴性的uplc色谱图。
具体实施方式
26.本发明所采用的试验仪器及原料如下：
27.agilent 1290infinity快速高分离液相色谱仪；me204t/02型梅特勒天平；as10200bt型超声波清洗器(auto science)。色谱柱：agilent sb-c18(4.6mm
×
100mm，2.7μm)。
28.哈巴苷(批号：111729-201707，纯度：96.8％)、芍药苷(批号：110736-201943，纯度：100％)、甘草苷(批号：111610-201908，纯度：95.0％)、毛蕊花糖苷(批号：111530-201914，纯度：95.2％)、哈巴俄苷(批号：111730-201709，纯度：95.9％)、丹皮酚(批号：110708-201407，纯度：99.9％)、甘草酸铵(批号：110731-201720，纯度：97.7％)，上述对照
品均购自中国食品药品检定研究院。
29.经uv光谱检测，哈巴苷、哈巴俄苷、芍药苷、毛蕊花糖苷、丹皮酚、甘草苷、甘草酸的λ
max
(最大吸收波长)分别为210、282、230、332、274、278、252nm，选择在最大吸收波长处进行检测，该成分在仪器上的响应因子最高，因此考虑使每一成分都处在最佳的检测波长下，采用分段变换波长法进行测定，因丹皮酚与哈巴俄苷色谱峰保留时间接近，最大波长也相近，故采用278nm对丹皮酚与哈巴俄苷进行测定。
30.乙腈(色谱纯，fisher scientific)，其余试剂均为分析纯(国药集团化学试剂有限公司)，娃哈哈纯净水。
31.各样品溶液的制备，如下：
32.1、对照品溶液
33.取哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚、甘草酸铵对照品适量，精密称定，用70％甲醇分别制成每1ml含435、883.75、255、135、146、1036.67、711μg的对照品储备液，再分别精密吸取各对照品储备液适量，用70％甲醇制成适宜浓度的对照品混合溶液。甘草酸重量按照“甘草酸铵重量/1.0207”计算。
34.2、供试品溶液
35.取本品水蜜丸或水丸，研成细粉，取约1.5g，精密称定；或取重量差异项下的大蜜丸或装量差异项下的小蜜丸，剪碎，取约2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250w，频率33khz)30min，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
36.3、阴性对照溶液
37.按处方比例及工艺分别配制缺白芍牡丹皮、缺地黄玄参、缺甘草、缺玄参、缺白芍的阴性样品，按上述供试品溶液制备方法，分别制备丸剂阴性对照溶液。
38.本发明所采用的其它材料，如无特殊声明，均可通过市售渠道获得。本发明所使用的其它术语，除非有另外说明，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义。下面结合具体实施例，并参照数据进一步详细的描述本发明。以下实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。
39.实施例
40.uplc检测试验：
41.分别取4μl对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液，注入液相色谱仪(uplc)，进行色谱检测。
42.色谱条件如下：
43.用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a，以0.1％磷酸水溶液为流动相b，梯度洗脱：0～3min，3％a；3～16min，3～16％a；16～20min，16％a；20～26min，16～25％a；26～31min，25～30％a；31～33min，30～37％a；33～38min，37～42％a；38～40min，42～45％a；40～45min，45～100％a；柱温30℃；进样量4μl；流速1.0ml/min；分段变换波长测定：0～8min，210nm，测定哈巴苷；8～18min，230nm，测定芍药苷；18～21min，278nm，测定甘草苷；21～27min，332nm，测定毛蕊花糖苷；27～33min，278nm，测定哈巴俄苷、丹皮酚；33～45min，252nm，测定甘草酸。
44.色谱图如图1～8所示：
45.由上图可知，本发明采用分段变换波长法，能够将这七种有效成分同时测定出来，谱图清晰。此外，阴性样品在与对照品色谱峰相应的位置上无吸收峰，表明处方中的其他成分对测定结果无影响。
46.(一)线性关系考察
47.取哈巴苷、芍药苷、哈巴俄苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、丹皮酚、甘草酸铵对照品适量，精密称定，用70％甲醇将上述7种成分分别配制成每1ml含174μg、70.71μg、29.18μg、135μg、101μg、31μg、72.47μg的对照溶液
①
；然后再取哈巴苷、芍药苷、哈巴俄苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、丹皮酚、甘草酸铵对照品适量，精密称定，用70％甲醇将上述7种成分分别配制成每1ml含1391.6μg、3535.4μg、145.9μg、359.3μg、607.9μg、3110.5μg、1421.5μg的对照溶液
②
。
48.线性浓度
①
：分别精密量取上述7种成分的对照溶液
①
各1ml，置于100ml量瓶中；
49.线性浓度
②
：分别量取哈巴苷、芍药苷、哈巴俄苷、丹皮酚、甘草酸铵对照溶液
①
各1ml及毛蕊花糖苷、甘草苷对照溶液
①
各0.5ml，置于10ml量瓶中；
50.线性浓度
③
：分别量取哈巴苷、芍药苷、甘草苷、丹皮酚对照溶液
②
各0.5ml、毛蕊花糖苷对照溶液
②
0.8ml、哈巴俄苷、甘草酸铵对照溶液
②
各1ml，置于25ml量瓶中；
51.线性浓度
④
：精密量取上述7种成分的对照溶液
②
各0.5ml，置于10ml量瓶中；
52.线性浓度
⑤
：精密量取上述7种成分的对照溶液
②
各1ml，置于100ml量瓶中；
53.分别在上述容量瓶中加入70％甲醇定容至刻度，制成5个浓度的混合线性对照溶液(μg/ml)。
54.表1各成分线性对照溶液浓度
55.化学成分线性浓度
①
线性浓度
②
线性浓度
③
线性浓度
④
线性浓度
⑤
哈巴苷1.717.427.869.9139.2芍药苷0.77.170.7176.8353.5哈巴俄苷0.32.95.87.314.6毛蕊花糖苷1.46.811.518.035.9甘草苷1.05.112.230.460.8丹皮酚0.33.162.2155.5311.1甘草酸铵0.77.358.971.1142.2
56.分别精密吸取上述各混合线性对照溶液，注入液相色谱仪，以对照品浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标进行线性回归。
57.试验结果如表2所示，各成分在各自浓度范围内线性关系良好。本发明中的线性关系指的是注入仪器的溶液浓度与峰面积成正比，线性关系良好说明在该浓度范围内，可以使用峰面积及线性方程计算待测成分的浓度。
58.(二)检出限和定量限
59.将7种化合物的混合对照品溶液逐级稀释后进样，以信噪比s/n＝3时的溶液浓度，计算方法的检出限(lod)；以s/n＝10时的溶液浓度，计算方法的定量限(loq)。在本发明中，定量限是指样品中被测物能被定量测定的最低量；检出限是指样品按照分析方法的要求进行提取处理并检测，能区分于噪声的最低检出浓度。试验结果如表2所示。
60.表2各成分线性关系、定量限及检出限
[0061][0062]
(三)精密度试验
[0063]
取混合对照品溶液按实施例中的液相色谱条件连续测定6次，由各成分的峰面积计算精密度，结果显示，哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和苷草酸铵的精密度分别为1.48％、0.14％、0.27％、0.17％、0.26％、0.16％、0.15％，均小于2.0％，表明仪器的精密度良好。
[0064]
(四)重复性试验
[0065]
取水蜜丸(17035288)、大蜜丸(18010541)样品，按上述供试品溶液中的方法分别制备供试品溶液6份，进样测定，计算各成分含量rsd，结果显示，水蜜丸中哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和苷草酸的重复性分别为1.10％、1.51％、0.65％、0.77％、0.49％、0.98％、0.51％，大蜜丸中哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和苷草酸的重复性分别为1.60％、1.69％、0.94％、0.51％、0.30％、0.75％、0.12％，均小于2.0％，表明方法的重复性良好。
[0066]
(五)稳定性试验
[0067]
取上述重复性试验中的水蜜丸、大蜜丸供试品溶液各一份，分别在0h、2h、8h、10h、12h、24h时进样测定，记录各成分峰面积并计算rsd，结果显示，水蜜丸中哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和苷草酸的稳定性分别为1.05％、0.59％、0.97％、1.01％、1.14％、0.48％、0.55％，大蜜丸中哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和苷草酸的稳定性分别为1.41％、0.86％、0.99％、1.03％、1.47％、0.83％、0.64％，均小于2.0％，表明各成分在24h内基本稳定。
[0068]
(六)加样回收试验
[0069]
取哈巴苷、芍药苷、哈巴俄苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、丹皮酚、甘草酸铵对照品适量，精密称定，用70％甲醇分别制成每1ml含347.9μg、353.54μg、389.16μg、359.28μg、405.27μg、1555.24μg、379.08μg的对照溶液。
[0070]
水蜜丸：取粉碎后的水蜜丸供试品(17035288)约0.75g，精密称定，分别精密加入上述哈巴苷、芍药苷、哈巴俄苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、丹皮酚、甘草酸铵对照品溶液1750μl、4750μl、200μl、350μl、500μl、700μl、1750μl，按照上述供试品溶液的制备方法制备6份测试溶液，进样测定并计算回收率，结果显示，哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和苷草酸的平均回收率分别为103.05％、103.51％、100.61％、97.81％、101.06％、95.67％、101.40％；rsd分别为1.94％、2.14％、2.92％、1.45％、1.17％、1.83％、1.46％。
[0071]
大蜜丸：取已剪碎的大蜜丸供试品(18010541)约1.25g，精密称定，分别精密加入上述哈巴苷、芍药苷、哈巴俄苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、丹皮酚、甘草酸铵对照品溶液1600μl、
5000μl、300μl、350μl、500μl、800μl、1450μl，按照上述供试品溶液的制备方法制备6份测试溶液，进样测定并计算回收率，结果显示，哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和苷草酸的平均回收率分别为103.46％、104.24％、100.17％、95.97％、102.65％、95.41％、101.31％；rsd分别为0.83％、1.97％、2.62％、0.76％、2.43％、2.33％、2.35％。
[0072]
应用例
[0073]
本次收集到的样品包括养阴清肺丸的全部4个规格，其中水蜜丸涉及3个企业共46批次样品，大蜜丸涉及12个企业共46批次样品，水丸涉及1个企业共1批次样品，小蜜丸涉及1个企业共3批次样品。对上述养阴清肺丸样品按上述实施例的方法测定其含量。
[0074]
根据《中国药典》2015年版一部中饮片的标准限量，地黄中毛蕊花糖苷含量应不得少于0.020％，根据《中国药典》2015年版一部中饮片的标准限量，甘草中甘草苷含量应不得少于0.50％、甘草酸含量应不得少于2.0％，玄参中哈巴苷和哈巴俄苷总量不得少于0.45％，白芍中芍药苷含量应不得少于1.6％，牡丹皮中丹皮酚含量应不得少于1.2％。
[0075]
根据养阴清肺丸制备工艺，甘草、玄参、地黄均为原粉入药，转移率按照70％计算，因小蜜丸生产厂家未提供制备工艺和制成量，因此小蜜丸暂按大蜜丸的制成量计算；水蜜丸制成量分别为972g和1050g，因此水蜜丸按照制成量1000g计算理论值；根据大蜜丸的制备工艺每100g粉末加入70～90g炼蜜不等，即大蜜丸制成量应在1377g～1539g之间，以制成量最大值1539g计算理论值，制剂中各成分含量的理论值见表3。
[0076]
表3制剂中各成分含量理论值
[0077][0078]
处方中，玄参也含有毛蕊花糖苷成分，结合地黄理论值和样品测定结果，将毛蕊花糖苷含量限度拟定为水蜜丸应不少于100.0μg/g，大(小)蜜丸应不少于60.0μg/g，水丸应不少于120.0μg/g。
[0079]
结合理论值及样品测定情况，以哈巴苷和哈巴俄苷总量计，拟定限度为：大(小)蜜丸应不少于0.30mg/g，水蜜丸应不少于0.35mg/g，水丸应不少于0.50mg/g。拟定甘草苷限度为：大(小)蜜丸应不少于70μg/g，水蜜丸应不少于130μg/g，水蜜丸应不少于150μg/g；拟定甘草酸(甘草酸重量＝甘草酸铵重量/1.0207)限度为：大(小)蜜丸应不少于0.30mg/g，水蜜丸应不少于0.35mg/g，水丸应不少于0.40mg/g；拟定芍药苷限度为：大(小)蜜丸应不少于0.60mg/g，水蜜丸应不少于0.85mg/g，水蜜丸应不少于1.0mg/g；拟定丹皮酚限度为：大(小)蜜丸应不少于0.50mg/g，水蜜丸应不少于0.60mg/g，水蜜丸应不少于0.70mg/g；
[0080]
试验结果如表4～6所示。
[0081]
表4养阴清肺丸(大蜜丸)中各成分含量测定结果
[0082][0083]
表5养阴清肺丸(水蜜丸)中各成分含量测定结果
[0084][0085]
表6养阴清肺丸(小蜜丸、水丸)中各成分含量测定结果
[0086][0087]
经文献查询，哈巴苷、哈巴俄苷归属玄参；芍药苷归属白芍、牡丹皮；丹皮酚归属牡丹皮；毛蕊花糖苷归属地黄、玄参；甘草苷、甘草酸归属甘草。
[0088]
经测定，投料质量较差的药味主要涉及玄参和地黄。大蜜丸1家企业全部3批次样品均未检测出哈巴苷和哈巴俄苷，其中，1批次样品未检出毛蕊花糖苷，1批次样品中毛蕊花糖苷含量较低(64μg
·
g-1
)，1批次样品中毛蕊花糖苷含量在所有样品中处于中上游水平(156μg
·
g-1
)，提示该企业应关注玄参、地黄药材的投料风险。1家生产企业全部3批次样品均未检出哈巴苷且哈巴俄苷的含量均较低(0.074～0.085mg
·
g-1
)，毛蕊花糖苷含量均处于正常水平，有研究表明，不同产地玄参，哈巴苷、哈巴俄苷含量差异较大，大部分玄参中哈巴苷含量高于哈巴俄苷含量，也有部分产地玄参的哈巴俄苷含量高于哈巴苷含量，提示该厂家需关注玄参药材的投料风险。
[0089]
甘草中黄酮类(如甘草苷)和三萜类(如甘草酸)成分含量较大，为甘草的主要药效成分。有研究显示，甘草中甘草苷、甘草酸的含量与基原、产地和生长年限相关，不同企业、同一企业不同批次的产品，甘草苷与甘草酸含量差异较大，可能与所用原药材的来源和生长年限有关。水蜜丸有1家生产企业5批次样品甘草苷含量处于较低水平(≤140μg
·
g-1
)，12批次样品甘草酸含量均处于较低水平(≤0.35mg
·
g-1
)，提示该企业在后续生产中，应注意关注甘草药材的质量风险。
[0090]
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。

技术特征：
1.一种同时检测养阴清肺丸中七种有效成分的方法，其特征在于，步骤如下：将养阴清肺丸样品溶液注入液相色谱仪中，采用分段变换波长法，进行色谱检测，以实现七种有效成分的定性和定量检测。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱检测选自如下色谱条件：采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂；以乙腈为流动相a，以0.1％磷酸水溶液为流动相b，进行梯度洗脱，梯度洗脱选自如下洗脱条件：0～3min，3％a；3～16min，3～16％a；16～20min，16％a；20～26min，16～25％a；26～31min，25～30％a；31～33min，30～37％a；33～38min，37～42％a；38～40min，42～45％a；40～45min，45～100％a；柱温为30℃；进样量为4μl；流速为1.0ml/min。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述分段变换波长法选自如下条件：0～8min，波长210nm，测定哈巴苷；8～18min，波长230nm，测定芍药苷；18～21min，波长278nm，测定甘草苷；21～27min，波长332nm，测定毛蕊花糖苷；27～33min，波长278nm，测定哈巴俄苷、丹皮酚；33～45min，波长252nm，测定甘草酸。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述七种有效成分为哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和甘草酸。5.权利要求1～4任一项所述方法在检测养阴清肺丸中的中药投料情况中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述中药为白芍、地黄、玄参、甘草和牡丹皮。7.权利要求1～4任一项所述方法在养阴清肺丸质量控制和评价中的应用。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述养阴清肺丸中各有效成分的含量标准为：以哈巴苷和哈巴俄苷总量计，拟定限度为：大蜜丸应不少于0.30mg/g，小蜜丸应不少于0.30mg/g，水蜜丸应不少于0.35mg/g，水丸应不少于0.50mg/g；拟定甘草苷限度为：大蜜丸应不少于70μg/g，小蜜丸应不少于70μg/g，水蜜丸应不少于130μg/g，水丸应不少于150μg/g；拟定甘草酸限度为：大蜜丸应不少于0.30mg/g，小蜜丸应不少于0.30mg/g，水蜜丸应不少于0.35mg/g，水丸应不少于0.40mg/g；拟定芍药苷限度为：大蜜丸应不少于0.60mg/g，小蜜丸应不少于0.60mg/g，水蜜丸应不少于0.85mg/g，水丸应不少于1.0mg/g；拟定丹皮酚限度为：大蜜丸应不少于0.50mg/g，小蜜丸应不少于0.50mg/g，水蜜丸应不少于0.60mg/g，水丸应不少于0.70mg/g。

技术总结
本发明公开了一种同时检测养阴清肺丸中七种有效成分的方法，属于化学检测技术领域。本发明所述的同时检测养阴清肺丸中七种有效成分的方法，步骤如下：将养阴清肺丸样品溶液注入液相色谱仪中，采用分段变换波长法，进行色谱检测，以实现七种有效成分的定性和定量检测。本发明通过采用UPLC分段变换波长法，实现了养阴清肺丸中哈巴苷、芍药苷、甘草苷、毛蕊花糖苷、哈巴俄苷、丹皮酚和甘草酸的含量的同时测定，七种有效成分均能实现良好的分离，无其他成分干扰。且各成分均在各自的线性范围内线性关系良好，加样回收率在95～105％之间。本发明的检测方法简便、准确、有效，从而可用于养阴清肺丸的质量控制和整体质量评价。清肺丸的质量控制和整体质量评价。清肺丸的质量控制和整体质量评价。


技术研发人员：袁航 陈正伟 尹丽华 卢京光 殷世宁 钟建青 陈安珍
受保护的技术使用者：青岛市食品药品检验研究院(青岛市药品不良反应监测中心、青岛市实验动物和动物实验中心)
技术研发日：2023.05.11
技术公布日：2023/8/1