一种脯氨酰羟化酶抑制剂及其用途的制作方法

1.本发明属于医药技术领域，具体涉及一种具有脯氨酰羟化酶抑制作用的吡啶并三唑类化合物及其药物组合物，进一步涉及其制备方法及其制药用途。


背景技术：

2.在贫血、外伤、组织坏死及缺损等情况下，组织或细胞常处于低氧状态。低氧导致一系列转录诱导因子的表达，它们参与了血管形成，铁、糖代谢及细胞的生长和增殖。其中，缺氧诱导性因子(hypoxia inducible factor,hif)是体细胞在缺氧状态下启动的一种转录因子，在生物细胞内通过介导一系列基因调节来响应细胞缺氧状态。hif是含有氧调控的α-亚单位(hifα)和组成型表达的β-亚单位(hifβ/arnt)的杂二聚体。在含氧(含氧量正常的)细胞中，hifα亚单位通过逢希伯-林道肿瘤抑制因子(von hippel-lindau tumor suppressor，pvhl)e3连接酶复合物泛素化(ubiquitination)的机制被快速降解。在缺氧条件下，hifα不被降解，且活性hifα/β复合物在细胞核内积累，并活化各种基因的表达，包括糖酵解酶，葡萄糖转运蛋白，促红细胞生成素(epo)和血管内皮生长因子(vegf)。
3.促红细胞生成素(epo)是随hifα而产生的一种自然存在的激素，其剌激运载氧气贯穿全身的红细脂(红血球)的产生。epo通常由肾分泌，且内源性epo在氧减少(缺氧)的条件下增加。所有类型贫血的特征在于血液运载氧的能力减少，并因而伴有类似体征与症状，包括皮肤及粘膜苍白、虚弱、头晕、易疲劳和嗜睡，导致生活质量的下降。贫血通常与红细胞中或血红蛋白中血液缺乏的病况有关。贫血的普遍原因包括铁、维生素b12和叶酸缺乏，也会与慢性疾病并发，例如炎性疾病，包括具有继发骨髓炎性抑制的疾病等。贫血也与肾功能障碍有关，经常透析的大多数肾衰竭患者患有慢性贫血。
4.脯氨酰羟化酶(prolyl hydroxylase domain,phd)是调节hif的关键因子。在常氧状态下，phd可以羟基化hifα的两个关键脯氨酸残基pro402和pro564，增加其与pvhl的亲和力，加速降解的过程。在缺氧及其他病理状态下，phd催化的hif反应受阻，蛋白酶降解速度减慢，造成hifα在细胞内积聚，进而引起细胞对低氧的一系列适应性反应。通过phd抑制剂抑制phd，延长hif的作用，进而增加epo等基因的表达，可以有效治疗和预防hif相关和/或epo相关的病症，如贫血、局部缺血和缺氧的病症。
5.例如，美国专利申请us16757333公开了一种炔基吡啶类辅氨酰羟化酶抑制剂的晶型及其制备方法，所述炔基吡啶类辅氨酰羟化酶抑制剂结构式如下：
[0006][0007]
由于辅氨酰羟化酶抑制剂种类开发有限以及需求较高，因此，迫切需要研发此类
化合物，进而治疗贫血、局部缺血和缺氧等病症。


技术实现要素：

[0008]
本发明的目的是提供一种作为hif-phd抑制剂吡啶并三唑类化合物及其药物组合物，可用于治疗各种hif相关或epo相关的疾病，如贫血等。
[0009]
为实现上述发明目的，本发明技术方案如下：
[0010]
一方面，本发明提供一种式(i)所示的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药；
[0011][0012]
其中，
[0013]
r选自以下原子或基团的单元：
[0014][0015]
l为-ch
2-或-ch2o-；
[0016]
n的数值为0-2之间的整数；
[0017]
r1、r2、r3各自独立的选自为取代或未取代的烷基、环烷基、芳基、杂环基。
[0018]
优选地，所述芳基包括芳杂环。
[0019]
在一些实施例中，
[0020]
l为-ch
2-或-ch2o-；
[0021]
n的数值为0或1；
[0022]
r1为取代或未取代的c
1-4
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
卤代烷基、卤素、氰基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基中的至少一种；
[0023]
r2为取代或未取代的c
1-4
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
卤代烷基、卤素、氰基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基中的至少一种；
[0024]
r3为取代或未取代的c
1-10
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
卤代烷基、卤素、氰基、苯基或含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基中的至少一种。在一些实施例中，
[0025]
l为-ch
2-或-ch2o-；
[0026]
n的数值为0或1；
[0027]
r1为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
卤代烷基、卤
素、氰基、苯基或含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基中的至少一种；
[0028]
r2为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
卤代烷基、卤素、氰基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基中的至少一种；
[0029]
r3为取代或未取代的c
1-10
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、卤素、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基中的至少一种。
[0030]
在一些实施例中，
[0031]
n的数值为0；
[0032]
r1为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、卤素、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基为相对于母核结构对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；
[0033]
r2为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、卤素或含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基和含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基相对于母核结构为对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；
[0034]
r3为取代或未取代的c
1-5
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、卤素、含氧和/或氮的5-6元芳杂环或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环、或含氧和/或氮的5-6元杂环基相对于母核结构为对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代。
[0035]
在一些实施例中，
[0036]
n的数值为0；
[0037]
r1为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、卤素、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基为相对于母核结构对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；
[0038]
r2为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、卤素、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基为相对于母核结构对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；
[0039]
r3为取代或未取代的c
1-5
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基，所述取代基为c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、卤素、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基相对于母核结构为对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代。
[0040]
在一些实施例中，
[0041]
n的数值为0；
[0042]
r1为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-2
烷基、c
1-2
烷氧基、f、cl、br、i、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-2
烷基、c
1-2
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基相对于母核结构为对位取代，f、cl、br、i相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；
[0043]
r2为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-2
烷基、c
1-2
烷氧基、f、cl、br、i、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-2
烷基、c
1-2
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基相对于母核结构为对位取代，f、cl、br、i相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；
[0044]
r3为取代或未取代的c
1-4
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基，所述取代基为c
1-2
烷基、c
1-2
烷氧基、f、cl、br、i、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-2
烷基、c
1-2
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基相对于母核结构为对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代。
[0045]
在一些实施例中，
[0046]
n的数值为0；
[0047]
r1为取代或未取代的苯基，所述取代基为甲基、甲氧基、f、cl、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述甲基、甲氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环相对于母核结构为对位取代，f、cl相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；
[0048]
r2为取代或未取代的苯基，所述取代基为甲基、甲氧基、f、cl或含氧和/或氮的5-6元芳杂环；优选地，所述甲基、甲氧基和含氧和/或氮的5-6元芳杂环相对于母核结构为对位取代，f、cl相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；
[0049]
r3为取代或未取代的c
1-3
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环，所述取代苯基的取代基为甲基、甲氧基、f、cl或含氧和/或氮的5-6元芳杂环；优选地，所述甲基、甲氧基和含氧和/或氮的5-6元芳杂环相对于母核结构为对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代。
[0050]
在一些实施例中，
[0051]
n的数值为0；
[0052]
r1为取代或未取代的苯基，所述取代基为甲基或含氧和/或氮的5-6元芳杂环；优选地，所述甲基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环相对于母核结构为对位取代；
[0053]
r2为取代或未取代的苯基，所述取代基为甲基或含氧和/或氮的5-6元芳杂环；优选地，所述甲基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环相对于母核结构为对位取代；
[0054]
r3为取代或未取代的c
1-3
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环，所述取代基为甲基、甲氧基、f、cl或含氧和/或氮的5-6元芳杂环；优选地，所述甲基、甲氧基和含氧和/或氮的5-6元芳杂环相对于母核结构为对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代。
[0055]
在一些实施例中，
[0056]
n的数值为0；
[0057]
r1为苯基；
[0058]
r2为苯基；
[0059]
r3为取代或未取代的c
1-3
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环，所述取代基为甲基、甲氧基、卤素或含氧和/或氮的5-6元芳杂环；优选地，所述甲基、甲氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基相对于母核结构为对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代。
[0060]
术语“母核结构”是指式(i)所示的化合物结构中除r基团以外的剩余主体结构。
[0061]
在一些实施例中，所述化合物选自以下结构：
[0062][0063]
在一些实施例中，所述化合物选自以下结构：
[0064]
[0065][0066]
在一些实施例中，所述化合物选自以下结构：
[0067][0068]
在一些实施例中，所述化合物选自以下结构：
[0069][0070]
本发明中fg-4592为罗沙司他。
[0071]
除非有说明，本文所用的术语“烷基”包括具有特定数目碳原子的支链和直链饱和的脂肪烃基团，包括所有异构体。烷基的常用缩写例如甲基可以用“me”或ch3表示，乙基可以用“et”或ch2ch3表示，丙基可以用“pr”或ch2ch2ch3表示，丁基可以用“bu”或ch2ch2ch2ch3表示等。例如“c
1-4
烷基”(或“c
1-c4烷基”)是指具有特定数目碳原子的直链或支链烷基，包括所有异构体。c
1-4
烷基包括正、异、仲和叔丁基、正和异丙基，乙基和甲基。术语“c
1-10
烷基”等具有类似的含义。
[0072]
术语“烷氧基”表示通过氧桥连接的标明数目碳原子的直链和支链烷基。
[0073]
术语“卤素”(或“卤代”)是指氟、氯、溴和碘(或者称为氟代(f)、氯代(cl)、溴代(br)和碘代(i))。
[0074]
术语“芳基”是指芳香的单和多碳环系统，其中在多环系统中各个碳环是稠合的或通过单键相互连接。一般芳基包括苯基、萘基和亚联苯基。
[0075]
术语“杂环”是指碳原子及非碳原子构成的环状结构，环中的非碳原子举例如氮、氧和硫等。一般杂环基包括吡啶、喹啉、托烷、吩噻嗪、苯并二氮杂卓、呋喃、吡唑酮和嘧啶。
[0076]
术语“芳杂环”是指5或6元单环芳香环或7-12元双环，其由碳原子和一个或多个选自n、o和s的杂原子构成。芳杂环举例包括吡啶基、吡咯基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噻吩基(或噻吩基(thiophenyl))、噻唑基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、唑基、异唑基、二唑基、噻唑基、异噻唑基和噻二唑基、苯并三唑基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、二氢吲哚基、异二氢吲哚基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、色满基、异色满基、四氢喹啉基、喹啉基、四氢异喹啉基、异喹啉基、2，3-二氢苯并呋喃基、2，3-二氢苯并-1，4-二烯基、咪唑并(2，1-b)(1，3)噻唑和苯并-1，3-间二氧杂环戊烯基。
[0077]
术语“取代芳基”中的芳基如前定义，当未指定取代芳基的取代基时，取代基可选
自下列基团，包括但不限于：卤素、c
1-c
20
烷基、cf3、nh2、n(c
1-c6烷基)2、no2、氧代、cn、n3、-oh、-o(c
1-c6烷基)、c
3-c
10
环烷基、c
2-c6烯基、c
2-c6炔基、(c
0-c6烷基)s(o)
0-2-、芳基-s(o)
0-2-、(c
0-c6烷基)s(o)
0-2
(c
0-c6烷基)-、(c
0-c6烷基)c(o)nh-、h2n-c(nh)-、-o(c
1-c6烷基)cf3、(c
0-c6烷基)c(o)-、(c
0-c6烷基)oc(o)-、(c
0-c6烷基)2nc(o)-(c
0-c6烷基)o(c
1-c6烷基)-、(c
0-c6烷基)c(o)
1-2
(c
0-c6烷基)-、(c
0-c6烷基)oc(o)nh-、芳基、芳烷基、杂芳基、杂环基烷基、卤素-芳基、卤素-芳烷基、卤素-杂环、卤素-杂环基烷基、氰基-芳基、氰基-芳烷基、氰基-杂环和氰基-杂环基烷基。术语“取代苯基”具有类似的定义。
[0078]
除非明确说明，本文列出的所有范围是包含性的。例如，“n的数值为0-2之间的整数”是指n可以是0、1或2。
[0079]
术语“药学上可接受的盐”是指由药学可接受的无毒碱或酸制备的盐。当本发明的化合物是酸性时，其相应的盐可以容易地由无机碱或有机碱制备。衍生自这种无机碱的盐包括铝、铵、钙、铜(铜和亚铜)、铁、亚铁、锂、镁、锰(锰和亚锰)、钾、钠、锌等盐。优选的为铵、钙、镁、钾和钠等盐。由有机碱制备的盐包括来源于天然和合成来源的伯胺、仲胺和叔胺。可以形成盐的药学可接受的有机无毒碱包括精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、n，n
′‑
二苄基亚乙基二胺、二乙基胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、n-乙基吗啉、n-乙基哌啶、葡萄糖胺、氨基葡萄糖、组氨酸、哈胺(hydrabamine)、异丙胺、二环己基胺、赖氨酸、甲基葡萄糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤类、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。当本发明的化合物是碱性时，其相应的盐可以容易地由无机酸或有机酸制备。这种酸包括例如乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙磺酸、富马酸、葡糖酸、谷氨酸、氢溴酸、盐酸、羟乙基磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、扑酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、对甲苯磺酸等。
[0080]
术语“溶剂化物”是指由溶质(即式i化合物)或其药学可接受的盐和不妨碍溶质生物活性的溶剂形成的可变化学计量的复合物。溶剂的实例包括但不限于水、乙醇和乙酸。当溶剂是水时，该溶剂化物称为水合物。水合物包括但不限于半、一、一倍半、二和三水合物。
[0081]
术语“前药”是本发明化合物的功能性衍生物，其在体内容易转化为需要的化合物。
[0082]
另一方面，本发明提供上述化合物的制备方法，包括以下三种合成路线：
[0083]
路线1：
[0084][0085]
路线2：
[0086][0087]
路线3：
[0088][0089]
其中，r1、r2、r3具有与前述相同的定义。
[0090]
再一方面，本发明提供一种药物组合物，包含式(i)所示的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，以及一种或多种可药用载体、稀释剂、赋形剂。
[0091]
在药物组合物中，术语“组合物”包括包含活性成分和组成载体的惰性成分(药学可接受的赋形剂)的产品，以及任何由两种或多种成分的组合、络合或者聚集、或一种或多种成分的分解、或由一种或多种成分的其它类型反应或相互作用直接或间接地得到的产品。因此，本发明的药物组合物包括任何通过混合式i化合物、其它活性成分和药学可接受的赋形剂制备的组合物。
[0092]
本发明的药物组合物包含作为活性成分的式i所示的化合物(或其药学可接受的盐或溶剂化物)、药学可接受的载体和任选的其它治疗性成分或佐剂。药物组合物包括适合口服、直肠、局部和胃肠外(包括皮下、肌内和静脉内)给药的组合物，虽然在任何特定的情况下最合适的途径取决于特定的主体、对其给予活性成分的病症的性质和严重度。药物组合物可以通过药剂学领域公知的任何方法制备。
[0093]
活性成分可以以固体剂型或液体剂型口服给药，所述固体剂型例如胶囊、片剂、锭剂、糖锭剂、颗粒和粉剂，所述液体剂型例如酏剂、糖浆剂、乳剂、分散体和混悬液。活性成分还可以以无菌液体剂型例如分散体、混悬液或溶液胃肠外给药。可以用于将活性成分进行
给药的其它剂型还有用于局部给药的软膏、乳膏、滴剂、经皮贴剂或粉剂；用于眼睛给药的眼用溶液或混悬液形式，即滴眼液；用于吸入或鼻内给药的喷雾剂或粉末组合物，或用于直肠或阴道给药的乳膏、软膏、喷雾剂或栓剂。明胶胶囊包含活性成分和粉状载体，例如乳糖、淀粉、纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸等。可以使用类似的稀释剂来制备压制片剂。片剂和胶囊都可以被制备成缓释产品以在数小时内提供药物的持续释放。压制片剂可以包糖衣或包膜衣以掩盖任何令人不愉快的味道和保护该片剂不受空气影响，或者可以包肠溶衣用于在胃肠道内选择性崩解。用于口服给药的液体剂型可包含着色剂和矫味剂以增加患者的接受性。一般而言，水、合适的油、盐水、右旋糖(葡萄糖)水溶液、以及相关的糖溶液和二醇类如丙二醇或聚乙二醇是合适的胃肠外溶液的载体。用于胃肠外给药的溶液优选包含活性成分的水溶性盐、合适的稳定剂和根据需要使用的缓冲物质。抗氧化剂例如单独或组合的亚硫酸氢钠、亚硫酸钠或抗坏血酸是合适的稳定剂。还可以使用柠檬酸及其盐和edta钠。此外，胃肠外溶液还可以包含防腐剂，例如苯扎氯铵、尼泊金甲酯或尼泊金丙酯和氯丁醇。对于吸入给药而言，本发明的化合物可以方便地从加压包装或喷雾器中以喷雾剂形式递送。该化合物还可以以进行配制的粉末形式递送，该粉末组合物可以在吹入粉末吸入器装置的帮助下吸入。优选的用于吸入的递送系统是定量吸入(mdi)气雾剂，其可以配制成式i的化合物在合适的推进剂中的混悬液或溶液，所述推进剂例如碳氟化合物或烃。对于眼睛给药而言，眼用制剂可以用式i化合物在合适眼用载体中的合适重量百分比的溶液或混悬液进行配制，从而保持化合物与眼睛表面接触足够的时间以使化合物渗透到眼睛的角膜和内部区域。
[0094]
用于给予本发明化合物的有用的药物剂型包括但不限于硬和软明胶胶囊、片剂、胃肠外注射液和口服混悬液。
[0095]
当本发明的化合物逐步给药或与其它治疗剂结合给药时，可以使用和前述相同的剂型。当药物以物理组合给药时，剂型和给药途径应根据组合药物的相容性选择。本发明的化合物可以作为唯一活性成分或与第二活性成分组合给药，所述第二活性成分包括其已知可用于提高患者促红细胞生成素水平的活性成分。
[0096]
再一方面，本发明提供式(i)所示的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，或者上述药物组合物在制备用于通过抑制辅氨酰羟化酶来治疗抑制辅氨酰羟化酶介导的疾病的药物中的用途。
[0097]
在一些实施例中，所述抑制辅氨酰羟化酶介导的疾病为贫血、局部缺血、缺氧。
[0098]
在一些实施例中，所述贫血为肾性贫血。
[0099]
本发明的有益效果为：
[0100]
提出一种新的化合物，可以作为辅氨酰羟化酶抑制剂，具有较高的辅氨酰羟化酶抑制活性和epo诱导活性，可以有效治疗和预防hif相关和/或epo相关的病症，为贫血、局部缺血和缺氧等病症提供新思路。
具体实施方式
[0101]
以下非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面的理解本发明，但不以任何方式限制本发明。下述内容仅仅是对本技术要求保护的范围的示例性说明，本领域技术人员可以根据所公开的内容对本技术的发明作出多种改变和修饰，而其也应当属于本申
请要求保护的范围之中。
[0102]
下面以具体实施例的方式对本发明作进一步的说明。本发明实施例中所使用的各种化学试剂如无特殊说明均通过常规商业途径获得。
[0103]
实施例1
[0104]
(7-羟基-5-(苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羰基)氨基]乙酸的制备
[0105][0106]
步骤1制备5-(苯氧基)-7-(苄氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯将5-碘-7-(苄氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯(1.0g)，苯酚(310mg)，2-吡啶甲酸(55mg)，碘化亚铜(42mg)，磷酸钾(942mg)，二甲亚砜(5.0ml)依次加入反应瓶中，并置换氮气三次。升温至65℃，反应过夜，直至tlc监测原料反应完全。待冷却至室温，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，分离有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，柱层析得白色固体450mg。
[0107]
ms m/z(esi)[m+h]
+
:418.30
[0108]
步骤2制备5-(苯氧基)-7-(苄氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-甲酸
[0109]
将5-(苯氧基)-7-(苄氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯(450mg)溶于体积比为1：1的甲苯和四氢呋喃的混合溶液中(10ml)，然后加入甲磺酸(0.5ml)并搅拌，保持反应温度在60-70℃之间。直至tlc监测原料反应完全，停止反应。冷却至室温，加入少量乙酸乙酯，过滤，得到白色固体440mg。
[0110]
ms m/z(esi)[m+h]
+
:362.22
[0111]
步骤3制备[(7-(苄氧基)-5-(苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羰基)氨基]乙酸甲酯
[0112]
将5-(苯氧基)-7-(苄氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-甲酸(440mg)，edci(280mg)，hobt(197mg)，n,n-二甲基甲酰胺(5.0ml)，三乙胺(247mg)依次加入反应瓶中，室温下搅拌10分钟，然后将甘氨酸甲酯盐酸盐(306mg)加入体系中，并升温至60℃反应1.5小时。停止反应，冷却至室温，加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反应，抽滤得到黄色固体300mg。
[0113]
ms m/z(esi)[m+h]
+
:433.31
[0114]
步骤4制备[(7-羟基-5-(苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羰基)氨基]乙酸甲酯
[0115]
将[(7-(苄氧基)-5-(苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羰基)氨基]乙酸甲酯(300mg)，钯碳(30mg)溶于体积比为1:1的甲醇和四氢呋喃混合溶剂(4.0ml)，在氢气环境下，室温搅拌，直至tlc监测原料反应完全，停止反应。减压浓缩除去溶剂，柱层析分离，得到产物170mg。
[0116]
ms m/z(esi)[m+h]
+
:343.22
[0117]
步骤5制备[(7-羟基-5-(苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羰基)氨基]乙酸
[0118]
将[(7-羟基-5-(苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羰基)氨基]乙酸甲酯(170mg)溶于甲醇(2.0ml)中，随后加入30％氢氧化钠水溶液(1.0ml)，室温搅拌，直至tlc监测原料反应完全，用稀盐酸调节ph至1-2之间，过滤，得到产物150mg。
[0119]
1h nmr(400mhz,d-dmso)δ：14.52(s,1h),12.95(brs,1h),9.71(s,1h),8.59(s,1h),7.59
–
7.53(m,2h),7.44
–
7.41(m,3h),5.83(s,1h),4.02(d,j＝5.6hz,2h)
[0120]
ms m/z(esi):329.09
[0121]
实施例2
[0122]
(5-(2-氯苯氧基)-7-羟基-[1,2,4]三唑基[1,5-a]吡啶-8-羰基)甘氨酸的制备
[0123][0124]
按实施例3的方法，用428.1mg的2-氯苯酚替换苯酚，得到产物108.9mg。
[0125]
1h nmr(400mhz,d-dmso)δ：14.58(s,1h),12.97(brs,1h),9.71(t,j＝5.6hz,1h),8.63(s,1h),7.75(d,j＝7.6hz,1h),7.61(d,j＝8.0hz,1h),7.54(t,j＝8.0hz,1h),7.47(t,j＝7.2hz,1h),5.89(s,1h),4.21(d,j＝5.6hz,2h)
[0126]
ms m/z(esi)[m+h]
+
:363.17
[0127]
实施例3
[0128]
(5-(3-氯苯氧基)-7-羟基-[1,2,4]三唑基[1,5-a]吡啶-8-羰基)甘氨酸的制备
[0129][0130]
按实施例3的方法，用428.1mg的3-氯苯酚替换苯酚，得到产物201.6mg。
[0131]
1h nmr(400mhz,d-dmso)δ：14.54(s,1h),12.97(brs,1h),9.72(s,1h),8.58(s,1h),7.62(s,1h),7.57(t,j＝8.4hz,1h),7.47(d,j＝8.4hz,1h),7.41(d,j＝8.4hz,1h),6.10(s,1h),4.21(d,j＝5.6hz,2h)
[0132]
ms m/z(esi)[m+h]
+
:363.14
[0133]
实施例4
[0134]
(5-(4-氯苯氧基)-7-羟基-[1,2,4]三唑基[1,5-a]吡啶-8-羰基)甘氨酸的制备
[0135][0136]
按实施例3的方法，用428.1mg的4-氯苯酚替换苯酚，得到产物182.1mg。
[0137]
1h nmr(400mhz,d-dmso)δ：14.54(s,1h),12.96(s,1h),9.72(t,j＝5.6hz,1h),8.60(s,1h),7.62(d,j＝8.4hz,2h),7.48(d,j＝8.4hz,2h),6.02(s,1h),4.22(d,j＝5.6hz,2h)
[0138]
ms m/z(esi)[m+h]
+
:363.14
[0139]
实施例5
[0140]
(5-(对甲苯氧基)-7-羟基-[1,2,4]三唑基[1,5-a]吡啶-8-羰基)甘氨酸的制备
[0141][0142]
按实施例3的方法，用356.9mg的4-甲基苯酚替换苯酚，得到产物87.7mg。
[0143]
1h nmr(400mhz,d-dmso)δ：14.51(s,1h),12.95(s,1h),9.69(t,j＝5.6hz,1h),8.59(s,1h),7.37(d,j＝8.4hz,2h),7.31(d,j＝8.4hz,2h),5.77(s,1h),4.20(d,j＝5.6hz,2h),2.37(s,3h)
[0144]
ms m/z(esi)[m+h]
+
:343.16
[0145]
实施例6
[0146]
(5-(对甲氧基苯氧基)-7-羟基-[1,2,4]三唑基[1,5-a]吡啶-8-羰基)甘氨酸的制备
[0147][0148]
按实施例3的方法，用(409.2mg)4-甲氧基苯酚替换苯酚，得到产物223.7mg。
[0149]
1h nmr(400mhz,d-dmso)δ：14.51(s,1h),12.96(s,1h),9.70(t,j＝5.2hz,1h),8.60(s,1h),7.39(d,j＝8.8hz,2h),7.10(d,j＝8.8hz,2h),5.72(s,1h),4.21(d,j＝5.6hz,2h),3.82(s,3h)
[0150]
ms m/z(esi)[m+h]
+
:359.22
[0151]
实施例7
[0152]
(5-(3-吗啉苯氧基)-7-羟基-[1,2,4]三唑基[1,5-a]吡啶-8-羰基)甘氨酸的制备
[0153][0154]
按实施例3的方法，用(590mg)3-吗啉苯酚替换苯酚，得到产物110.7mg。
[0155]
1h nmr(400mhz,d-dmso)δ：14.51(s,1h),12.95(brs,1h),9.70(t,j＝5.2hz,1h),
8.59(s,1h),7.39(d,j＝8.0hz,2h),6.99(d,j＝12.0hz,2h),6.80(d,j＝7.6hz,2h),5.82(s,1h),4.21(d,j＝5.6hz,2h),3.73(t,j＝4.8hz,4h),3.18(t,j＝4.8hz,4h)
[0156]
ms m/z(esi)[m+h]
+
:414.23
[0157]
实施例8
[0158]
(5-(4-氟苯氧基)-7-羟基-[1,2,4]三唑基[1,5-a]吡啶-8-羰基)甘氨酸的制备
[0159][0160]
按实施例3的方法，用(369.6mg)4-氟苯酚替换苯酚，得到产物239.3mg。
[0161]
1h nmr(400mhz,d-dmso)δ：14.53(s,1h),12.98(brs,1h),9.71(s,1h),8.60(s,1h),7.53
–
7.49(m,2h),7.43
–
7.38(m,2h),5.86(s,1h),4.20(d,j＝5.6hz,2h)
[0162]
ms m/z(esi)[m+h]
+
:347.14
[0163]
实施例9
[0164]
(5-(丙氧基)-7-羟基-[1,2,4]三唑基[1,5-a]吡啶-8-羰基)甘氨酸的制备
[0165][0166]
按实施例3的方法，用(2ml)正丙醇替换苯酚，得到产物20.1mg。
[0167]
1h nmr(400mhz,d-dmso)δ：14.51(s,1h),12.92(brs,1h),9.65(t,j＝5.6hz,1h),8.47(s,1h),6.44(s,1h),4.39(t,j＝6.4hz,2h),4.18(d,j＝5.6hz,2h),1.91
–
1.82(m,2h),1.03(t,j＝7.2hz,3h)
[0168]
ms m/z(esi)[m+h]
+
:295.12
[0169]
实施例10
[0170]
[(7-羟基-5-(苯乙炔基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羰基)氨基]乙酸的制备
[0171][0172]
步骤1制备7-羟基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯
[0173]
在反应瓶中，将7-(苄氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯(15g)溶于甲醇和四氢呋喃的混合溶液中(25ml/50ml)，并在氢气的环境下室温搅拌，直至tlc监测
原料反应完全，停止反应。过滤除去溶液中的钯碳，然后将滤液减压浓缩，得到粗产物11.7g。
[0174]
ms m/z(esi):[m+h]
+
:236.24
[0175]
步骤2制备7-(特戊酰氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯
[0176]
将7-羟基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯(10.7g)置于反应瓶中并加入四氢呋喃(65ml)，然后依次加入三乙胺(8.0ml)，特戊酰氯(9.1g)。置换三次氮气并密封反应瓶。将反应混合物加热至60℃并搅拌过夜。直至tlc监测原料反应完全，停止反应。待反应液冷却至室温后，反应液用乙酸乙酯萃取，饱和碳酸氢钠水溶液，饱和氯化铵水溶液，饱和食盐水依次冲洗，而后减压浓缩，得到黄色固体12.0g。
[0177]
ms m/z(esi):[m+h]
+
:320.36
[0178]
步骤3制备5-碘-7-(特戊酰氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯
[0179]
将7-(特戊酰氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯(10.0g)溶于四氢呋喃(50ml)溶液中，然后加入碘单质(8.75g)，并将反应温度保持在-60度之下。5分钟后分批加入六甲基二硅基锂(62.7ml，1.0m)，并搅拌直至tlc监测原料反应完全。随后加入盐酸乙酸乙酯溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，亚硫酸钠水溶液洗涤。分离有机相，并使用饱和氯化铵水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液，饱和食盐水依次洗涤。分离有机相并减压浓缩，粗产物柱层析得产物5.9g。
[0180]
1h nmr(400mhz,cdcl3)δ：8.36(d,j＝5.2hz,1h),7.45(d,j＝5.2hz,1h),2.31(s,6h)
[0181]
ms m/z(esi):[m+h]
+
:446.26
[0182]
步骤4制备5-(苯乙炔基)-7-羟基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯
[0183]
将5-碘-7-(特戊酰氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯(5.9g)，碘化亚铜(70mg)，pd(dppf)cl2(285mg)，四氢呋喃(30ml)，三乙胺(6.6g)，苯乙炔(2.1g)依次加入反应瓶中。置换氮气三次，升温至50℃反应，直至tlc监测原料反应完全，加入氨水猝灭反应。乙酸乙酯萃取，分离有机相。氨水层用盐酸洗涤，乙酸乙酯萃取，随后合并有机相，减压浓缩，柱层析纯化，得红色固体1.9g。
[0184]
ms m/z(esi):[m+h]
+
:336.36
[0185]
步骤5制备5-(苯乙炔基)-7-羟基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-甲酸
[0186]
将5-(苯乙炔基)-7-羟基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯(1.8g)溶于体积比为2：1的甲苯和乙酸乙酯的混合溶液中(24ml)，然后加入甲磺酸(2.1g)并搅拌，保持反应温度在60-70℃之间。直至tlc监测原料反应完全，停止反应。待反应液冷却至室温后，加入乙酸乙酯(10ml)，析出大量固体，过滤得到绿色固体。随后将固体用少量n,n-二甲基乙酰胺溶解，并往体系中加入乙酸乙酯，析出固体，过滤得粗产物1.0g。
[0187]
ms m/z(esi):[m+h]
+
:280.26
[0188]
步骤6制备[(7-羟基-5-(苯乙炔基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羰基)氨基]乙酸甲酯
[0189]
在反应瓶a中，将5-(苯乙炔基)-7-羟基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-甲酸(0.8g)溶于二氯甲烷(20ml)中，滴加草酰氯(0.76g)，室温搅拌。在反应瓶b中，将甘胺酸甲酯盐酸盐(0.68g)，二氯甲烷(20ml)，三乙胺(3.0ml)依次加入，并在0℃下搅拌。tlc监测反
应瓶a中得原料反应完全，停止反应瓶a中的搅拌，并将反应瓶a中的物料加入反应瓶b中，0℃下搅拌直至tlc监测原料反应完全，用水淬灭反应。二氯甲烷萃取，饱和氯化铵水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液依次洗涤有机相，分离合并有机相，减压浓缩后，柱层析分离，得黄色固体0.8g。
[0190]
ms m/z(esi):[m+h]
+
:351.33
[0191]
步骤7制备[(7-羟基-5-(苯乙炔基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羰基)氨基]乙酸
[0192]
将[(7-羟基-5-苯乙炔基[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羰基)氨基]乙酸甲酯(0.8g)溶于乙醇(10ml)中，随后加入氢氧化钠水溶液(18ml,2.0m)，室温搅拌，直至tlc监测原料反应完全，用稀盐酸调节ph至4-5，过滤得淡黄色固体0.42g。
[0193]
1h nmr(400mhz,d-dmso)δ：14.33(s,1h),13.04(s,1h),9.90(s,1h),8.64(s,1h),7.74
–
7.72(m,2h),7.61
–
7.53(m,3h),7.37(s,1h),4.24(d,j＝5.6hz,2h)
[0194]
ms m/z(esi):[m+h]
+
:337.31
[0195]
实施例11
[0196]
[(7-羟基-5-(苯乙烯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羰基)氨基]乙酸的制备
[0197][0198]
步骤1制备5-(苯乙烯基)-7-(苄氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯
[0199]
将5-碘-7-(苄氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯(500mg)，pd(pph3)2cl2(70.2mg)，碳酸钠(360mg)，苯乙烯硼酸(200mg)溶于体积比为1:1的乙二醇二甲醚和脱气水的混合溶剂(30ml)中，并置换氮气三次。随后在80℃下搅拌，直至tlc监测原料反应完全，停止加热。待反应液冷却至室温后，用乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤有机相。分离有机相，减压浓缩，柱层析分，得到粗产物340mg。
[0200]
步骤2制备5-(苯乙烯基)-7-羟基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-甲酸
[0201]
将5-(苯乙烯基)-7-(苄氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羧酸叔丁酯(290mg)溶于二氯甲烷(10ml)溶液中，并冷却至-65℃，然后将三溴化硼二氯甲烷溶液(3.4ml,1.0m)加入反应体系中并搅拌，直至tlc监测原料反应完全。停止反应，将溶液减压浓缩除去，随后将残留物加入水(10ml)和甲醇(3.0ml)得混合溶剂中室温搅拌1小时，过滤得到固体250mg。
[0202]
ms m/z(esi):[m+h]
+
:282.04
[0203]
步骤3制备[(7-羟基-5-(苯乙烯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羰基)氨基]乙酸甲酯
[0204]
将5-(苯乙烯基)-7-羟基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-甲酸(143mg),n,n-二甲基甲酰胺(10ml)，dipea(329mg),pybop(395mg),甘胺酸甲酯盐酸盐(178mg)依次加入反应瓶中，室温搅拌过夜，过滤出固体，得50粗产物50mg。
[0205]
ms m/z(esi):[m+h]
+
:353.28
[0206]
步骤4制备[(7-羟基-5-(苯乙烯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羰基)氨基]乙酸
[0207]
将[(7-羟基-5-(苯乙烯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-8-羰基)氨基]乙酸甲酯(50mg)溶于甲醇(2.0ml)中，随后加入30％氢氧化钠水溶液(1.0ml)，室温搅拌，直至tlc监测原料反应完全，用稀盐酸调节ph至1-2之间，过滤，得到产物10mg。
[0208]
1h nmr(400mhz,d-dmso)δ：14.26(s,1h),12.98(s,1h),9.90(t,j＝16.4hz,1h),8.63(s,1h),8.22(d,j＝16.4hz,1h),7.76
–
7.71(m,3h),7.50
–
7.40(m,4h),4.23(d,j＝5.6hz,2h)
[0209]
ms m/z(esi):[m+h]
+
:339.21
[0210]
生物学测试
[0211]
1、phd2酶活抑制检测
[0212]
1.1试剂及耗材
[0213]
phd2酶：从active motif处购买；
[0214]
α-酮戊二酸钠盐：从sigma处购买；
[0215]
fitc-hif1α：从gl处购买；
[0216]
多孔板nunc
tm 384：从thermo scientific处购买。
[0217]
1.2试验方法
[0218]
(1)配制1
×
assay buffer；
[0219]
(2)化合物浓度梯度的配制：受试化合物测试浓度为10μm起始，3倍稀释，10个浓度，复孔测试；在384孔板中稀释成100倍终浓度的溶液，然后用echo550转移100nl到384反应板中备用。阴性对照孔和阳性对照孔中分别加100nl的100％dmso；
[0220]
(3)用1
×
assay buffer配制2倍终浓度的酶溶液；
[0221]
(4)在化合物孔和阳性对照孔分别加5μl的2倍终浓度的酶溶液；
[0222]
(5)在阴性对照孔中加5μl的1
×
assay buffer；
[0223]
(6)1000rpm离心30秒，振荡混匀后孵育15min；
[0224]
(7)用1
×
assay buffer配制2倍终浓度的tracer溶液，加入5.0μl的2倍终浓度的tracer溶液，起始反应；
[0225]
(8)将384孔板1000rpm离心30秒，振荡混匀60min，从envision(multimode platereader，perkin elmer)上读数得到mp值，导出数据并进行处理，得到待测化合物的抑制率，化合物编号1-9分别对应实施例1-9制备的化合物，结果如下表所示：
[0226]
表1.
[0227]
化合物编号ic
50
(nm)fg-459289.2enarodustat21.9实施例1化合物19.8实施例2化合物34.8实施例3化合物30.2实施例4化合物33.3
实施例5化合物44.1实施例6化合物47.6实施例7化合物34.1实施例8化合物35.4实施例9化合物34.0
[0228]
由上表可知，本发明实施例化合物具有良好的hif-脯氨酰羟化酶抑制活性，可见，化合物1-9抑制活性好。
[0229]
2、本发明化合物的体外促红细胞生成素(epo)诱导活性实验
[0230]
使用来自人肝癌的细胞株hep3b(atcc)，对本发明实施例10和11的化合物的体外促红细胞生成素(epo)诱导活性进行评价。将hep3b细胞在37℃，10％胎牛血清(fbs)的存在下，在emem培养基(eagle's minimum essential medium)中培养。实验步骤如下：
[0231]
(1)细胞准备：在96孔板中接种细胞，以每孔2*10^4，每孔100μl的量进行铺板；
[0232]
(2)化合物浓度梯度的配制：100μm,20μm,2复孔检测。在96孔板中配置200倍终浓度的溶液，使用细胞培养基再将化合物稀释200/3倍，然后吸取50μl对细胞进行给药。阴性对照孔加50μl含dmso的培养液使其终浓度含5
‰
dmso，阳性对照孔加50μl的最高浓度阳性化合物，37℃孵育24小时；
[0233]
(3)以每孔约400μl的1x wash buffer清洗反应板两次；
[0234]
(4)向适当的孔中加入100μl稀释好的的standard(包括标准空白对照)；
[0235]
(5)向样品孔中加入50μl样品和50μl sample diluent；
[0236]
(6)向所有孔中加入50μl 1x biotin conjugated antibody，室温孵育1小时；
[0237]
(7)以每孔约400μl 1x wash buffer清洗6次反应板；
[0238]
(8)每孔加入100μl 1x streptavidin-hrp。室温孵育15分钟；
[0239]
(9)以每孔约400μl 1x wash buffer清洗6次反应板；
[0240]
(10)每孔加入100μl tmb substrate solution。室温孵育10分钟；
[0241]
(11)每孔加入100μl stop solution；
[0242]
(12)用ensight读取od450。
[0243]
各化合物的epo诱导活性表示为半数最大效应浓度(ec50)。实验结果如下表所示：
[0244]
表2.
[0245]
编号ec
50
(μm)fg-459213.79enarodustat15.06实施例10化合物6.46实施例11化合物1.79
[0246]
由上表可知，本发明的化合物具有较高的epo诱导活性，可见，实施例10及11中得到化合物的诱导活性好。
[0247]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

技术特征：
1.一种式(i)所示的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药；其中，r选自以下原子或基团的单元：l为-ch
2-或-ch2o-；n的数值为0-2之间的整数；r1、r2、r3各自独立的选自为取代或未取代的烷基、环烷基、芳基、杂环基。2.根据权利要求1所述的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，所述芳基包括芳杂环。3.根据权利要求1所述的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，l为-ch
2-或-ch2o-；n的数值为0或1；r1为取代或未取代的c
1-4
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
卤代烷基、卤素、氰基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基中的至少一种；r2为取代或未取代的c
1-4
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
卤代烷基、卤素、氰基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基中的至少一种；r3为取代或未取代的c
1-10
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
卤代烷基、卤素、氰基、苯基或含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基中的至少一种。4.根据权利要求2所述的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，l为-ch
2-或-ch2o-；n的数值为0或1；r1为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
卤代烷基、卤素、氰
基、苯基或含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基中的至少一种；r2为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
卤代烷基、卤素、氰基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基中的至少一种；r3为取代或未取代的c
1-10
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、卤素、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基、含氧和/或氮的5-6元杂环基中的至少一种。5.根据权利要求3所述的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，n的数值为0；r1为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、卤素、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基为相对于母核结构对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；r2为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、卤素或含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基和含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基相对于母核结构为对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；r3为取代或未取代的c
1-5
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基，所述取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、卤素、含氧和/或氮的5-6元芳杂环或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环、或含氧和/或氮的5-6元杂环基相对于母核结构为对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；优选地，n的数值为0；r1为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、卤素、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基为相对于母核结构对位取代，卤素为邻位、间位或对位取代；r2为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、卤素、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基为相对于母核结构对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；r3为取代或未取代的c
1-5
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基，所述取代基为c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、卤素、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基相对于母核结构为对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代。6.根据权利要求5所述的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，
n的数值为0；r1为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-2
烷基、c
1-2
烷氧基、f、cl、br、i、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-2
烷基、c
1-2
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基相对于母核结构为对位取代，f、cl、br、i相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；r2为取代或未取代的苯基，所述取代基为c
1-2
烷基、c
1-2
烷氧基、f、cl、br、i、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-2
烷基、c
1-2
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基相对于母核结构为对位取代，f、cl、br、i相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；r3为取代或未取代的c
1-4
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基，所述取代基为c
1-2
烷基、c
1-2
烷氧基、f、cl、br、i、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述c
1-2
烷基、c
1-2
烷氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基相对于母核结构为对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；优选地，n的数值为0；r1为取代或未取代的苯基，所述取代基为甲基、甲氧基、f、cl、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基；优选地，所述甲基、甲氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环相对于母核结构为对位取代，f、cl相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；r2为取代或未取代的苯基，所述取代基为甲基、甲氧基、f、cl或含氧和/或氮的5-6元芳杂环；优选地，所述甲基、甲氧基和含氧和/或氮的5-6元芳杂环相对于母核结构为对位取代，f、cl相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；r3为取代或未取代的c
1-3
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环，所述取代苯基的取代基为甲基、甲氧基、f、cl或含氧和/或氮的5-6元芳杂环；优选地，所述甲基、甲氧基和含氧和/或氮的5-6元芳杂环相对于母核结构为对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；进一步优选地，n的数值为0；r1为取代或未取代的苯基，所述取代基为甲基或含氧和/或氮的5-6元芳杂环；优选地，所述甲基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环相对于母核结构为对位取代；r2为取代或未取代的苯基，所述取代基为甲基或含氧和/或氮的5-6元芳杂环；优选地，所述甲基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环相对于母核结构为对位取代；r3为取代或未取代的c
1-3
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环，所述取代基为甲基、甲氧基、f、cl或含氧和/或氮的5-6元芳杂环；优选地，所述甲基、甲氧基和含氧和/或氮的5-6元芳杂环相对于母核结构为对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代；更进一步优选地，n的数值为0；r1为苯基；r2为苯基；
r3为取代或未取代的c
1-3
烷基、苯基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环，所述取代基为甲基、甲氧基、卤素或含氧和/或氮的5-6元芳杂环；优选地，所述甲基、甲氧基、含氧和/或氮的5-6元芳杂环基或含氧和/或氮的5-6元杂环基相对于母核结构为对位取代，卤素相对于母核结构为邻位、间位或对位取代。7.根据权利要求6所述的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，所述化合物选自以下结构：水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，其特征在于，所述化合物选自以下结构：优选地，所述化合物选自以下结构：
进一步优选地，所述化合物选自以下结构：更进一步优选地，所述化合物选自以下结构：8.权利要求1-7任一项所述化合物的制备方法，其特征在于，包括以下三种合成路线：路线1：路线2：
路线3：其中，r1、r2、r3具有与所引用权利要求相同的定义。9.一种药物组合物，其特征在于，包含式(i)所示的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，以及一种或多种可药用载体、稀释剂、赋形剂。10.式(i)所示的化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐或前药，或者上述药物组合物在制备用于通过抑制辅氨酰羟化酶来治疗抑制辅氨酰羟化酶介导的疾病的药物中的用途；优选地，所述抑制辅氨酰羟化酶介导的疾病为贫血、局部缺血、缺氧；进一步优选为肾性贫血。

技术总结
本发明公开了一种脯氨酰羟化酶抑制，属于医药技术领域。本发明提供了一种吡啶并三唑类化合物，结构如下式所示，具有较高的辅氨酰羟化酶抑制活性和EPO诱导活性，可以有效治疗和预防HIF相关和/或EPO相关的病症，为贫血、局部缺血和缺氧等病症提供新思路。缺血和缺氧等病症提供新思路。缺血和缺氧等病症提供新思路。


技术研发人员：唐海涛 汤凡 葛海涛
受保护的技术使用者：江苏苏中药业研究院有限公司
技术研发日：2022.12.02
技术公布日：2023/7/31