含有哌嗪基的化合物的制作方法

1.本技术涉及含有哌嗪基的化合物、其制备方法、含有该化合物的药物组合物、以及其在治疗相关疾病(例如癌症)中的用途。


背景技术：

2.聚二磷酸腺苷核糖聚合酶[poly(adp-ribose)polymerase,parp]是一类催化adp核糖基化的细胞核酶，parp家族由18个成员组成，在dna损伤修复、炎症调控、转录调节、信号转导、基因组稳定性、细胞周期调控以及有丝分裂等一系列广泛的细胞代谢进程中发挥着重要作用。parp1是最重要的parp酶，占细胞内parp总活性的85％-90％，主要参与dna损伤修复。parp抑制剂可以选择性杀伤由brca基因缺陷导致同源重组修复(homologous recombination repair,hr)功能缺陷的肿瘤细胞，而不影响brca基因功能正常细胞的存活，这一现象即为协同致死。
[0003]
自2014年奥拉帕利(olaparib)批准上市以来，多款parp抑制剂已经被开发出来，并取得了广泛的成功。然而，药物的不良反应限制了它们与化疗药物联合使用的能力。因此提高parp1选择性的parp抑制剂可能具有更好的疗效和更低的毒性。
[0004]
发明详述
[0005]
一方面，本技术涉及式(ii)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，
[0006][0007]
其中，
[0008]
x、y各自独立地选自ch或n；
[0009]
环a选自苯基、吡啶基、或含有1～3个分别独立地选自n、o或s杂原子的8～12元杂芳基；
[0010]
r1各自独立地选自卤素、氨基、或任选被一个或多个d或卤素取代基取代的以下基团：c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷基氨基、(c
1-6
烷基)nh-c(＝o)-、c
1-6
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)nh-nh-c(＝o)-、(3～8元杂环烷基)nh-、(c
3-8
环烷基)nh-、或5～8元杂环基；
[0011]
n选自1、2、3或4；
[0012]
r选自：
[0013]
i.c
1-6
烷基，并且环a为含有1～3个分别独立地选自n、o或s杂原子的8～12元杂芳基；
[0014]
ii.c
1-6
烷基，并且r1为c
1-6
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)nh-nh-c(＝o)-、(3～8元杂环烷基)nh-、(c
3-8
环烷基)nh-、或5～8元杂环基；
[0015]
iii.c
3-8
环烷基或3～8元杂环烷基，所述c
3-8
环烷基或3～8元杂环烷基任选地被一
个或多个ra[0016]
取代；
[0017]
ra选自c
1-4
烷基、卤素、羟基、氨基、氰基、c
1-6
烷氧基、(c
1-6
烷基)nh-、或(c
1-6
烷基)2n-。
[0018]
另一方面，本技术涉及式(i)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，
[0019][0020]
其中，
[0021]
x、y各自独立地选自ch或n；
[0022]
r选自c
3-8
环烷基或3～8元杂环烷基，所述r任选地被一个或多个ra取代；
[0023]
ra选自c
1-4
烷基、卤素、羟基、氨基、氰基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷基nh-、或(c
1-6
烷基)2n-。
[0024]
在一些实施方案中，所述杂环烷基包含1、2或3个选自n、o或s的杂原子。在一些实施方案中，所述杂环烷基包含1、2或3个选自n或o的杂原子。在一些实施方案中，所述杂环烷基包含1个选自n或o的杂原子。
[0025]
在一些实施方案中，所述5～8元杂环基包含1、2或3个选自n、o或s的杂原子。在一些实施方案中，所述5～8元杂环基包含2个选自n、o或s的杂原子。
[0026]
在一些实施方案中，x和y选自ch、x选自ch且y选自n、或x选自n且y选自ch。
[0027]
在一些实施方案中，环a选自苯基、吡啶基、或含有1～3个分别独立地选自n、o或s杂原子的8～12元稠合杂芳基。
[0028]
在一些实施方案中，环a选自苯基、吡啶基、或含有1～3个分别独立地选自n或o杂原子的8～12元稠合杂芳基。
[0029]
在一些实施方案中，环a选自苯基、吡啶基、或含有1～3个分别独立地选自n或o杂原子的9或10元稠合杂芳基。
[0030]
在一些实施方案中，环a选自苯基、吡啶基、或含有1～3个选自n杂原子的9或10元稠合杂芳基。
[0031]
在一些实施方案中，环a选自苯基、吡啶基、或含有2个选自n杂原子的9或10元稠合杂芳基。
[0032]
在一些实施方案中，环a选自苯基、吡啶基、
[0033]
在一些实施方案中，环a选自苯基、
[0034]
在一些实施方案中，环a选自
[0035]
在一些实施方案中，结构片段选自选自
[0036]
在一些实施方案中，r1各自独立地选自卤素、或任选被一个或多个d或卤素取代基取代的以下基团：c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷基氨基、(c
1-6
烷基)nh-c(＝o)-、c
1-6
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)nh-nh-c(＝o)-、或5～8元杂芳基。
[0037]
在一些实施方案中，r1各自独立地选自卤素、或任选被一个或多个d或卤素取代基取代的以下基团：c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
烷基氨基、(c
1-4
烷基)nh-c(＝o)-、c
1-4
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-4
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-4
烷基)nh-nh-c(＝o)-、或5～6元杂芳基。
[0038]
在一些实施方案中，r1各自独立地选自f、cl、br、或任选被一个或多个d、f、cl或br取代基取代的以下基团：c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷基氨基、(c
1-3
烷基)nh-c(＝o)-、c
1-3
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-3
烷基)2n-nh-c(＝o)-、或5～6元杂芳基。
[0039]
在一些实施方案中，r1各自独立地选自f、cl、br、或任选被一个或多个d、f或cl取代基取代的以下基团：甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲基氨基、乙基氨基、正丙基氨基、异丙基氨基、甲氧基、乙氧基、ch3nh-c(＝o)-、ch3ch2nh-c(＝o)-、ch3ch2ch2nh-c(＝o)-、(ch3)2chnh-c(＝o)-、ch
3-o-nh-c(＝o)-、ch3ch
2-o-nh-c(＝o)-、ch3ch2ch
2-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2ch-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2n-nh-c(＝o)-、(ch3ch2)2n-nh-c(＝o)-、(ch3ch2ch2)2n-nh-c(＝o)-、呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、吡啶基、嘧啶基、或吡喃基。
[0040]
在一些实施方案中，r1各自独立地选自卤素、或任选被一个或多个d或卤素取代基取代的以下基团：c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷基氨基、(c
1-6
烷基)nh-c(＝o)-、c
1-6
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)nh-nh-c(＝o)-、5～8元杂芳基、(c
3-8
环烷基)nh-或(3～8元杂环烷基)nh-，所述杂环烷基含有1个、2个或3个选自n、o或s的杂原子。
[0041]
在一些实施方案中，r1各自独立地选自卤素、或任选被一个或多个d或卤素取代基取代的以下基团：c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
烷基氨基、(c
1-4
烷基)nh-c(＝o)-、c
1-4
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-4
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-4
烷基)nh-nh-c(＝o)-、5～6元杂芳基、(c
3-7
环烷基)nh-或(4～7元杂环烷基)nh-，所述杂环烷基含有1个、2个或3个选自n、o或s的杂原子。
[0042]
在一些实施方案中，r1各自独立地选自f、cl、br、或任选被一个或多个d、f、cl或br取代基取代的以下基团：c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷基氨基、(c
1-3
烷基)nh-c(＝o)-、c
1-3
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-3
烷基)2n-nh-c(＝o)-、5～6元杂芳基、(c
3-6
环烷基)nh-或(4～6元杂环烷基)nh-，所述杂环烷基含有1个或2个选自n、o或s的杂原子。
[0043]
在一些实施方案中，r1各自独立地选自f、cl、br、或任选被一个或多个d、f或cl取代基取代的以下基团：甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲基氨基、乙基氨基、正丙基氨基、异丙基氨基、甲氧基、乙氧基、ch3nh-c(＝o)-、ch3ch2nh-c(＝o)-、ch3ch2ch2nh-c(＝o)-、(ch3)2chnh-c(＝o)-、ch
3-o-nh-c(＝o)-、ch3ch
2-o-nh-c(＝o)-、ch3ch2ch
2-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2ch-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2n-nh-c(＝o)-、(ch3ch2)2n-nh-c(＝o)-、(ch3ch2ch2)2n-nh-c(＝o)-、呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、吡啶基、嘧啶基、吡喃基、(环丙基)nh-、(环丁基)nh-、(环戊基)nh-、(环己基)nh-、(氧杂环丁基)nh-、(氮杂环丁基)nh-、(硫杂环丁基)nh-、(四氢吡咯基)nh-、(四氢呋喃基)nh-、(四氢噻吩基)nh-、(哌啶基)nh-、(四氢吡喃基)nh-、(四氢噻喃基)nh-、(吗啉基)nh-或(哌嗪基)nh-。
[0044]
在一些实施方案中，r1各自独立地选自f、或任选被一个或多个d、f或cl取代基取代的以下基团：甲基、甲氧基、甲基氨基、ch3nh-c(＝o)-、ch
3-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2n-nh-c(＝o)-、异噁唑基、噻吩基、咪唑基、(四氢呋喃基)nh-或(环丙基)nh-。
[0045]
在一些实施方案中，r1各自独立地选自f、或任选被一个或多个d、f或cl取代基取代的以下基团：甲基、甲氧基、甲基氨基、ch3nh-c(＝o)-、ch
3-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2n-nh-c(＝o)-、异噁唑基、噻吩基或咪唑基。
[0046]
在一些实施方案中，r1各自独立地选自f、甲基、f3c-、甲氧基、甲基氨基、ch3nh-c(＝o)-、cd3nh-c(＝o)-、ch
3-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2n-nh-c(＝o)-、(cd3)nh-、、
[0047]
在一些实施方案中，r1各自独立地选自f、甲基、f3c-、甲氧基、甲基氨基、ch3nh-c(＝o)-、cd3nh-c(＝o)-、ch
3-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2n-nh-c(＝o)-、
[0048]
在一些实施方案中，结构片段选自选自
[0049]
在一些实施方案中，结构片段选自
[0050]
在一些实施方案中，结构片段选自选自
[0051]
在一些实施方案中，n选自1、2或3。
[0052]
在一些实施方案中，n选自1或2。
[0053]
在一些实施方案中，ra选自c
1-3
烷基、f、cl、br、羟基、氨基、氰基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷基nh-、或(c
1-3
烷基)2n-。
[0054]
在一些实施方案中，ra选自c
1-3
烷基。
[0055]
在一些实施方案中，ra选自甲基、乙基、正丙基、或异丙基。
[0056]
在一些实施方案中，ra选自甲基。
[0057]
在一些实施方案中，r选自c
1-3
烷基，并且环a为含有1～3个分别独立地选自n、o或s杂原子的8～12元杂芳基。
[0058]
在一些实施方案中，r选自甲基、乙基、正丙基或异丙基，并且环a为含有1～3个分别独立地选自n、o或s杂原子的8～12元稠合杂芳基。
[0059]
在一些实施方案中，r选自甲基、乙基、正丙基或异丙基，并且环a为含有2个选自n杂原子的9或10元稠合杂芳基。
[0060]
在一些实施方案中，r选自乙基，并且环a为
[0061]
在一些实施方案中，r选自乙基，并且环a为
[0062]
在一些实施方案中，r选自c
1-3
烷基，并且r1为c
1-6
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)nh-nh-c(＝o)-、5～8元杂芳基、(c
3-8
环烷基)nh-或(3～8元杂环烷基)nh-，所述杂环烷基含有1个、2个或3个选自n、o或s的杂原子。
[0063]
在一些实施方案中，r选自甲基、乙基、正丙基或异丙基，并且r1为c
1-4
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-4
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-4
烷基)nh-nh-c(＝o)-、5～6元杂芳基、(c
3-7
环烷基)nh-或(4～7元杂环烷基)nh-，所述杂环烷基含有1个、2个或3个选自n、o或s的杂原子。
[0064]
在一些实施方案中，r选自甲基、乙基、正丙基或异丙基，并且r1为c
1-3
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-3
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-3
烷基)nh-nh-c(＝o)-、5～6元杂芳基、(c
3-6
环烷基)nh-或(4～6元杂环烷基)nh-，所述杂环烷基含有1个或2个选自n、o或s的杂原子。
[0065]
在一些实施方案中，r选自乙基，并且r1为ch
3-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2n-nh-c(＝o)-、异噁唑基、噻吩基、咪唑基、(四氢呋喃基)nh-或(环丙基)nh-。
[0066]
在一些实施方案中，r选自乙基，并且r1为ch
3-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2n-nh-c(＝o)-、、(cd3)nh-、
[0067]
在一些实施方案中，r选自c
3-6
环烷基或3～6元杂环烷基，所述c
3-6
环烷基和3～6元杂环烷基任选地被一个或多个ra取代。
[0068]
在一些实施方案中，r选自c
3-6
环烷基或4～6元杂环烷基，所述c
3-6
环烷基和4～6元杂环烷基任选地被一个或多个ra取代。
[0069]
在一些实施方案中，r选自c
3-6
环烷基或4～6元杂环烷基，所述c
3-6
环烷基和4～6元杂环烷基任选地被1个、2个或3个ra取代。
[0070]
在一些实施方案中，r选自c
3-4
环烷基或4～6元杂环烷基，所述c
3-4
环烷基和4～6元杂环烷基任选地被1个ra取代。
[0071]
在一些实施方案中，r选自c
3-4
环烷基或4～6元杂环烷基，所述4～6元杂环烷基任选地被1个甲基取代。
[0072]
在一些实施方案中，r选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、硫杂环丁烷、四氢吡咯基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、哌啶基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、吗啉基或哌嗪基。
[0073]
在一些实施方案中，r选自环丙基、环丁基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢吡咯基、四氢呋喃基或四氢吡喃基。
[0074]
在一些实施方案中，r选自环丙基、环丁基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢吡咯基、四氢呋喃基或四氢吡喃基，所述氮杂环丁基和四氢吡咯基选地被1个甲基取代。
[0075]
在一些实施方案中，r选自在一些实施方案中，r选自所述
任选地被一个或多个ra取代。
[0076]
在一些实施方案中，r选在一些实施方案中，r选所述任选地被一个甲基取代。
[0077]
在一些实施方案中，r选自在一些实施方案中，r选自
[0078]
在一些实施方案中，本技术的式(i)化合物、式(ii)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐选自式(ii-a)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐、式(ii-b)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐、式(ii-c)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，
[0079][0080]
其中，r如上定义。
[0081]
在一些实施方案中，本技术的式(ii)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐选自式(ii-d)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，
[0082][0083]
其中，r和r1如上定义。
[0084]
可通过如下段落[1]至段落[4]中所述的内容对本技术的技术方案加以说明：
[0085]
[1]式(i)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，
[0086][0087]
其中，
[0088]
x、y各自独立地选自ch或n；
[0089]
r选自c
3-8
环烷基或3～8元杂环烷基，所述r任选地被一个或多个ra取代；
[0090]
ra选自c
1-4
烷基、卤素、羟基、氨基、氰基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷基nh-或(c
1-6
烷基)2n-。
[0091]
[2]如段落[1]所述的式(i)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其中x和y选自ch；或者，x选自ch且y选自n；或者，x选自n且y选自ch。
[0092]
[3]如段落[1]或[2]任一项所述的式(i)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其中ra选自c
1-3
烷基、f、cl、br、羟基、氨基、氰基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷基nh-或(c
1-3
烷基)2n-；或者，ra选自c
1-3
烷基；或者，ra选自甲基、乙基、正丙基或异丙基；或者，ra选自甲基。
[0093]
[4]如段落[1]-[3]任一项所述的式(i)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其中r选自c
3-6
环烷基或3～6元杂环烷基，所述c
3-6
环烷基和3～6元杂环烷基任选地被一个或多个ra取代；
[0094]
或者，r选自c
3-6
环烷基或4～6元杂环烷基，所述c
3-6
环烷基和4～6元杂环烷基任选地被一个或多个ra取代；
[0095]
或者，r选自c
3-4
环烷基或4～6元杂环烷基，所述c
3-4
环烷基和4～6元杂环烷基任选地被1个ra取代；
[0096]
或者，r选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、硫杂环丁烷、四氢吡咯基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、哌啶基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、吗啉基或哌嗪基；
[0097]
或者，r选自环丙基、环丁基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢吡咯基、四氢呋喃基或四氢吡喃基，所述氮杂环丁基和四氢吡咯基选地被1个甲基取代；
[0098]
或者，r选自或者，r选自
[0099]
在一些实施方案中，本技术的式(i)化合物、式(ii)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐不选自以下化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐：
[0100]
[0101]
[0102]
[0103]
[0104]
[0105]
[0106]
[0107][0108]
在一些实施方案中，本技术的式(i)化合物、式(ii)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐选自以下化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐：
[0109]
[0110][0111][0112]
在一些实施方案中，本技术的式(i)化合物、式(ii)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐选自以下化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐：
[0113][0114]
另一方面，本技术提供了药物组合物，其包含本技术的上述化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本技术的药物组合物还包括药学上可接受的辅料。
[0115]
另一方面，本技术提供了治疗哺乳动物与parp1相关疾病的方法，包括对需要该治疗的哺乳动物，优选人类，给予治疗有效量的上述化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。
[0116]
另一方面，本技术提供了上述化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐、或其药物组合物在制备治疗与parp1相关疾病的药物中的用途。
[0117]
另一方面，本技术提供了上述化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐、或其药物组合物在治疗与parp1相关疾病中的用途。
[0118]
另一方面，本技术提供了治疗与parp1相关疾病的上述化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。
[0119]
在一些实施方案中，所述parp1相关疾病选自肿瘤或癌症。在一些实施方案中，所述癌症选自乳腺癌、卵巢癌、结肠癌、胰腺癌或前列腺癌。
[0120]
技术效果
[0121]
本技术化合物对parp1聚合酶具有良好的选择性，对细胞增殖具有良好的抑制活
性，并且具有较好的体内药代动力学性质。
[0122]
定义
[0123]
除非另有说明，本技术中所用的下列术语具有下列含义。一个特定的术语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照本领域普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。
[0124]
术语“被取代”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为氧代(即＝o)时，意味着两个氢原子被取代，氧代不会发生在芳香基上。
[0125]
术语“任选”或“任选地”是指随后描述的事件或情况可以发生或不发生，该描述包括发生所述事件或情况和不发生所述事件或情况。例如，乙基“任选”被卤素取代，指乙基可以是未被取代的(ch2ch3)、单取代的(如ch2ch2f)、多取代的(如chfch2f、ch2chf2等)或完全被取代的(cf2cf3)。本领域技术人员可理解，对于包含一个或多个取代基的任何基团，不会引入任何在空间上不可能存在和/或不能合成的取代或取代模式。
[0126]
本文中的“一个或多个”指一个至十个以内的整数。例如“一个或多个”指一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个或十个；或者，“一个或多个”指一个、两个、三个、四个、五个或六个；或者，“一个或多个”指一个、两个或三个。本领域技术人员可理解，对于包含一个或多个取代基的任何基团，不会引入任何在空间上不可能存在和/或不能合成的取代或取代模式。
[0127]
本文中的c
m-n
，是该部分具有给定范围中的整数个碳原子。例如“c
1-6”是指该基团可具有1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子、4个碳原子、5个碳原子或6个碳原子。
[0128]
当任何变量(例如r)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的定义都是独立的。因此，例如，如果一个基团被2个r所取代，则每个r都有独立的选项。
[0129]
当一个取代基的键交叉连接到一个环上的两个原子时，这种取代基可以与这个环上的任意原子相键合。例如，结构单元表示其可在环己基或者环己二烯上的任意一个位置发生取代。
[0130]
术语“卤”或“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
[0131]
术语“羟基”是指-oh基团。
[0132]
术语“氨基”是指-nh2基团。
[0133]
术语“氰基”是指-cn基团。
[0134]
术语“烷基”是指通式为c
nh2n+1
的烃基。该烷基可以是直链或支链的。例如，术语“c
1-6
烷基”指含有1至6个碳原子的烷基(例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、新戊基、己基、2-甲基戊基等)。类似地，烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、烷基磺酰基和烷硫基的烷基部分(即烷基)具有上述相同定义。
[0135]
术语“烷氧基”是指-o-烷基。
[0136]
术语“烷基氨基”是指-nh-烷基。
[0137]
术语“环烷基”指完全饱和的并且可以以呈单环、桥环或螺环存在的碳环。除非另有指示，该碳环通常为3至10元环；优选为3至6元环。环烷基非限制性实例包括但不限于环
丙基、环丁基、环戊基、环己基、降冰片基(双环[2.2.1]庚基)、双环[2.2.2]辛基、金刚烷基等。
[0138]
术语“杂环烷基”是指完全饱和的并且可以以单环、桥环或螺环存在的环状基团。除非另有指示，该杂环通常为含有1至3个独立地选自硫、氧和/或氮的杂原子(优选1或2个杂原子)的3至8元环。3元杂环烷基的实例包括但不限于环氧乙烷基、环硫乙烷基、环氮乙烷基，4元杂环烷基的非限制性实例包括但不限于吖丁啶基、噁丁环基、噻丁环基，5元杂环烷基的实例包括但不限于四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、异噁唑烷基、噁唑烷基、异噻唑烷基、噻唑烷基、咪唑烷基、四氢吡唑基，6元杂环烷基的实例包括但不限于哌啶基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、吗啉基、哌嗪基、1,4-噻噁烷基、1,4-二氧六环基、硫代吗啉基、1,3-二噻烷基、1,4-二噻烷基，7元杂环烷基的实例包括但不限于氮杂环庚烷基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基。优选为具有4或6个环原子的单环杂环烷基。
[0139]
术语“杂环基”是指完全饱和的、部分饱和的或芳香的，并且可以以单环、桥环或螺环存在的环。除非另有指示，该杂环通常为含有1至3个独立地选自n、o、s的杂原子(优选1或2个杂原子)的3至10元环，或者5至8元环，或者5或6元环。杂环基的非限制性实例包括但不限于环氧乙烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、3,4-二氢吡喃基、3,6-二氢吡喃基、呋喃基、吡咯烷基、n-甲基吡咯烷基、二氢吡咯基、吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、吡唑基、4h-吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基、四氢噻吩基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、喹啉基、异喹啉基、2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷基、2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚烷基、3-氮杂双环[3.1.0]己烷基等。
[0140]
术语“杂芳基”是指单环或稠合多环体系，其中含有至少一个选自n、o、s的环原子，其余环原子为c，并且具有至少一个芳香环。优选的杂芳基具有单个5至8元环，尤其是具有单个5至6元环，或包含6至14个，尤其是6至10个环原子的多个稠合环。杂芳基的非限制性实例包括但不限于吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、喹啉基、异喹啉基、四唑基、三唑基、三嗪基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚基等。
[0141]
术语“稠合”是指两个或两个以上碳环或杂环以共有两个原子骈合，从而形成多环化合物，包括完全饱和的、部分饱和的和芳香的。除非另有指示，稠合环为5至20元，优选8至12元，更优选9至10元。稠合杂芳基的非限制性实例包括但不限于萘、蒽、菲、等。
[0142]
术语“治疗”意为将本技术所述化合物或制剂进行给药以改善或消除疾病或与所述疾病相关的一个或多个症状，且包括：
[0143]
(i)抑制疾病或疾病状态，即遏制其发展；
[0144]
(ii)缓解疾病或疾病状态，即使该疾病或疾病状态消退。
[0145]
术语“治疗有效量”意指(i)治疗本文中所述的特定疾病、病况或障碍，(ii)减轻、改善或消除本文中所述的特定疾病、病况或障碍的一种或多种症状，或(iii)预防或延迟本文中所述的特定疾病、病况或障碍的一种或多种症状发作的本技术化合物的用量。构成“治疗有效量”的本技术化合物的量取决于该化合物、疾病状态及其严重性、给药方式以及待被治疗的哺乳动物的年龄而改变，但可例行性地由本领域技术人员根据其自身的知识及本公
开内容而确定。
[0146]
术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。
[0147]
作为药学上可接受的盐，例如，可以提及金属盐、铵盐、与有机碱形成的盐、与无机酸形成的盐、与有机酸形成的盐、与碱性或者酸性氨基酸形成的盐等。
[0148]
术语“药物组合物”是指一种或多种本技术的化合物或其盐与药学上可接受的辅料组成的混合物。药物组合物的目的是有利于对有机体给予本技术的化合物。
[0149]
术语“药学上可接受的辅料”是指对有机体无明显刺激作用，而且不会损害该活性化合物的生物活性及性能的那些辅料。合适的辅料是本领域技术人员熟知的，例如碳水化合物、蜡、水溶性和/或水可膨胀的聚合物、亲水性或疏水性材料、明胶、油、溶剂、水等。
[0150]
词语“包括(comprise)”或“包含(comprise)”及其英文变体例如comprises或comprising应理解为开放的、非排他性的意义，即“包括但不限于”。
[0151]
除非另外特别说明，否则单数术语涵盖复数术语，并且复数术语涵盖单数术语。除非另外特别说明，否则词语“一个”或“一种”意指“至少一个”或“至少一种”。
[0152]
本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对映体、(r)-和(s)-对映体、非对映异构体、(d)-异构体、(l)-异构体，及其外消旋混合物和其它混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。
[0153]
除非另有说明，用楔形实线键和楔形虚线键表示一个立体中心的绝对构型，用直形实线键和直形虚线键表示立体中心的相对构型。
[0154]
可以通过手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(r)-和(s)-异构体以及d和l异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。
[0155]
本技术还包括与本文中记载的那些相同的，但一个或多个原子被原子量或质量数不同于自然中通常发现的原子量或质量数的原子置换的同位素标记的本技术化合物。可结合到本技术化合物的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘和氯的同位素，诸如分别为2h、3h、
11
c、
13
c、
14
c、
13
n、
15
n、
15
o、
17
o、
18
o、
31
p、
32
p、
35
s、
18
f、
123
i、
125
i和
36
cl等。
[0156]
某些同位素标记的本技术化合物(例如用3h及
14
c标记的那些)可用于化合物和/或底物组织分布分析中。氚化(即3h)和碳-14(即
14
c)同位素对于由于它们易于制备和可检测性是尤其优选的。正电子发射同位素，诸如
15
o、
13
n、
11
c和
18
f可用于正电子发射断层扫描(pet)研究以测定底物占有率。通常可以通过与公开于下文的方案和/或实施例中的那些类似的下列程序，通过同位素标记试剂取代未经同位素标记的试剂来制备同位素标记的本申
请化合物。
[0157]
此外，用较重同位素(诸如氘(即2h))取代可以提供某些由更高的代谢稳定性产生的治疗优点(例如增加的体内半衰期或降低的剂量需求)，并且因此在某些情形下可能是优选的，其中氘取代可以是部分或完全的，部分氘取代是指至少一个氢被至少一个氘取代。例示性的氘代化合物如下所示，但不限于此。
[0158]
本技术的药物组合物可通过将本技术的化合物与适宜的药学上可接受的辅料组合而制备，例如可配制成固态、半固态、液态或气态制剂，如片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、膏剂、乳剂、悬浮剂、栓剂、注射剂、吸入剂、凝胶剂、微球及气溶胶等。
[0159]
给予本技术化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物的典型途径包括但不限于口服、直肠、局部、吸入、肠胃外、舌下、阴道内、鼻内、眼内、腹膜内、肌内、皮下、静脉内给药。
[0160]
本技术的药物组合物可以采用本领域众所周知的方法制造，如常规的混合法、溶解法、制粒法、制糖衣药丸法、磨细法、乳化法、冷冻干燥法等。
[0161]
本文所述的通式ⅰ化合物的所有施用方法中，每天给药的剂量为0.01到200mg/kg体重，以单独或分开剂量的形式。
[0162]
本技术的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本技术的实施例。
[0163]
本技术具体实施方式的化学反应是在合适的溶剂中完成的，所述的溶剂须适合于本技术的化学变化及其所需的试剂和物料。为了获得本技术的化合物，有时需要本领域技术人员在已有实施方式的基础上对合成步骤或者反应流程进行修改或选择。
[0164]
本领域合成路线规划中的一个重要考量因素是为反应性官能团(如本技术中的氨基)选择合适的保护基，例如，可参考greene's protective groups in organic synthesis(4th ed).hoboken,new jersey:john wiley&sons,inc.本技术引用的所有参考文献整体上并入本技术。
[0165]
本技术采用下述缩略词：
[0166]
tfa代表三氟乙酸；boc代表叔丁氧羰基；etoh代表乙醇；nmp代表n-甲基吡咯烷酮；ruphos pd g3代表甲磺酸(2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯基)(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(ii)；nabh(oac)3代表三乙酰氧基硼氢化钠；sem代表(三甲基硅)乙氧基甲基。
具体实施方式
[0167]
为清楚起见，进一步用实施例来阐述本发明，但是实施例并非限制本技术的范围。对本领域的技术人员而言，在不脱离本发明精神和范围的情况下，针对本发明具体实施方式进行各种改变和改进将是显而易见的。本技术所使用的所有试剂是市售的，无需进一步纯化即可使用。
[0168]
本技术的化合物可以由有机合成领域技术人员参考以下实施例的路线或方法制备得到，所得化合物可以用已知的仪器或方法进行表征，包括但不限于质谱，核磁等。
[0169]
实施例1：化合物1的制备
[0170][0171]
步骤a：化合物1-1的制备
[0172]
向一100ml的单口瓶中，依次加入5-硝基-6-甲基烟酸乙酯(1g)、甲醇(10ml)以及钯碳(0.1g)，氢气置换三次后室温搅拌过夜。待反应完全，硅藻土过滤，浓缩滤液得到0.8g化合物1-1。
[0173]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:181.12.
[0174]
步骤b：化合物1-2的制备
[0175]
向一100ml的单口瓶中，依次加入化合物1-1(1g)、二氯甲烷(10ml)以及三乙胺(1.1g)，氮气保护下，将混合物置于冰盐浴条件下，缓慢滴加2-环丁基乙酰氯(1.15g),加毕，混合物室温条件下搅拌1小时。待反应完全，向反应体系中加入水(10ml)，二氯甲烷(30ml)萃取三次，合并有机相，有机相经干燥、浓缩、柱层析提纯得到1.1g化合物1-2。
[0176]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:277.07.
[0177]
步骤c：化合物1-3的制备
[0178]
向一50ml的单口瓶中，依次加入化合物1-2(0.78g)、无水1，4-二氧六环(10ml)以及氧化硒(1.1g)，氮气保护下，将混合物放置于80℃下反应3小时。待反应完全，向反应体系中加入水(10ml)，乙酸乙酯(30ml)萃取三次，合并有机相，有机相经干燥、浓缩、柱层析提纯得到0.5g化合物1-3。
[0179]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:291.13.
[0180]
步骤d：化合物1-4的制备
[0181]
向一50ml的单口瓶中，依次加入化合物1-3(0.5g)、无水n,n-二甲基甲酰胺(10ml)以及碳酸铯(2.81g)，氮气保护下，将混合物放置于60℃下反应2小时。待反应完全，过滤收集滤液，向滤液中加入乙酸乙酯(50ml)，先后用饱和氯化铵水溶液(30ml)和饱和氯化钠水溶液(30ml)各洗涤一次，有机相经干燥、浓缩、柱层析提纯得到0.2g化合物1-4。
[0182]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:273.16.
[0183]
步骤e：化合物1-5的制备
[0184]
向一100ml单口瓶中，依次加入无水四氢呋喃(10ml)和化合物1-4(0.2g)，开启搅
拌，冰浴降温至0-5℃，接着向体系中滴加四氢铝锂的四氢呋喃溶液(2.5m，0.5ml)，加毕，保温反应2小时。向体系中滴入盐酸水溶液(1m，2ml)，减压浓缩得黄色粗品，经柱层析纯化，得到0.12g化合物1-5。
[0185]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:231.17.
[0186]
步骤f：化合物1-6的制备
[0187]
向一25ml单口瓶中，依次加入无水二氯甲烷(10ml)和化合物1-5(0.12g)，开启搅拌，冰浴降温至0-5℃，接着向体系中先后滴加氯化亚砜(0.37g)和无水n,n-二甲基甲酰胺(0.1g)，加毕保温反应2小时。停止反应，将反应液减压浓缩并真空干燥至恒重，得到0.12g化合物1-6。
[0188]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:249.12.
[0189]
步骤g：化合物1-7的制备
[0190]
向一35ml微波管中依次加入1,4-二氧六环(20ml)、5-溴吡啶-2-羧酸甲酯(1g)、1-叔丁氧羰基哌嗪(1.035g)、碳酸铯(3.02g)以及甲磺酸(2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯基)(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(ii)(0.387g)，加毕，氮气置换后密封置于微波反应仪中加热至140℃反应1小时。待反应完全后经萃取、浓缩、柱层析纯化得到0.51g的化合物1-7。
[0191]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:322.19.
[0192]
步骤h：化合物1-8的制备
[0193]
向一100ml单口瓶中，依次加入甲胺盐酸盐(2.52g)、四氢呋喃(30ml)以及n,n-二异丙基乙胺(8.04g)，加毕，室温搅拌至物料完全溶解。氮气保护，将反应体系转移至冰浴中，降温至0℃，通过注射器缓慢加入双三甲基硅基胺基锂的四氢呋喃溶液(1m，65.7ml)，室温搅拌10分钟。将化合物1-7(4g)溶于四氢呋喃(20ml)，并通过注射器加到上述反应体系中，加毕，将反应体系转移至室温条件下搅拌。待反应结束，在冰浴条件下向反应体系中加入饱和氯化铵溶液(50ml)淬灭反应。经萃取、浓缩、柱层析纯化得到2.2g的化合物1-8。
[0194]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:321.24.
[0195]
步骤i：化合物1-9的制备
[0196]
向一50ml单口瓶中，依次加入化合物1-8(360mg)、二氯甲烷(10ml)以及三氟乙酸(1368mg)。加毕，室温下搅拌2小时。待反应完全，浓缩除去溶剂及过量的三氟乙酸，所得油状物直接用于下一步反应。
[0197]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:221.19.
[0198]
步骤j：化合物1的制备
[0199]
向一50ml单口瓶中，依次加入化合物1-9(180mg)、乙腈(10ml)、n,n-二异丙基乙胺(260mg)以及化合物1-6(100mg)，加毕，氮气保护后，置于80℃油浴条件下反应2小时。待反应结束后，经萃取、浓缩、硅胶柱层析、反相键合相柱层析纯化得到30mg的化合物1。
[0200]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.82(s,1h),8.52
–
8.32(m,2h),8.27(s,1h),7.83(d,j＝8.7hz,1h),7.72(s,1h),7.62(s,1h),7.39(d,j＝6.7hz,1h),3.65(s,2h),3.61
–
3.50(m,1h),3.34(s,4h),2.78(d,j＝4.5hz,3h),2.56(s,4h),2.28(d,j＝8.1hz,2h),2.08(dd,j＝18.5,9.4hz,2h),2.00(dd,j＝17.9,9.3hz,1h),1.81(d,j＝8.7hz,1h).
[0201]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:433.23541.
[0202]
实施例2：化合物2的制备
[0203][0204]
步骤a：化合物2-1的制备
[0205]
参照实施例1步骤b的方法，使用化合物1-1与2-环丙基乙酰氯反应制备化合物2-1。
[0206]
ms(esi,[m-h]-)m/z:261.08.
[0207]
步骤b：化合物2-2的制备
[0208]
参照实施例1步骤c的方法，使用化合物2-1与氧化硒反应制备化合物2-2。
[0209]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:277.13.
[0210]
步骤c：化合物2-3的制备
[0211]
参照实施例1步骤d的方法，使用化合物2-2与碳酸铯反应制备化合物2-3。
[0212]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:259.12.
[0213]
步骤d：化合物2-4的制备
[0214]
参照实施例1步骤e的方法，使用化合物2-3与四氢铝锂反应制备化合物2-4。
[0215]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:217.01.
[0216]
步骤e：化合物2-5的制备
[0217]
参照实施例1步骤f的方法，使用化合物2-4与氯化亚砜反应制备化合物2-5。
[0218]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:235.14.
[0219]
步骤f：化合物2的制备
[0220]
参照实施例1步骤j的方法，使用化合物2-5与化合物1-9反应制备化合物2。
[0221]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.88(s,1h),8.38(dd,j＝7.1,2.9hz,2h),8.26(d,j＝2.6hz,1h),7.82(d,j＝8.8hz,1h),7.60(s,1h),7.42(s,1h),7.38(dd,j＝8.8,2.7hz,1h),3.63(s,2h),3.34(s,4h),2.77(d,j＝4.8hz,3h),2.55(s,4h),2.14(ddd,j＝13.6,8.4,5.4hz,1h),1.02
–
0.92(m,2h),0.87
–
0.77(m,2h).
[0222]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:419.2193.
[0223]
实施例3：化合物3的制备
[0224][0225]
步骤a：化合物3-1的制备
[0226]
向一50ml三口瓶中，依次加入四氢呋喃-3-乙酸(542mg)、n,n-二甲基甲酰胺(20ml)、n-甲基咪唑(683mg)以及化合物1-1(500mg)，加毕后置于冰浴中搅拌，随后加入n,n,n',n'-四甲基氯甲脒六氟磷酸盐(1.56g)，加毕后氮气置换保护置于室温下反应。待反应结束后经萃取、浓缩、柱层析纯化得到0.5g的化合物3-1。
[0227]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:293.16.
[0228]
步骤b：化合物3-2的制备
[0229]
参照实施例1步骤c方法，使用化合物3-1与氧化硒反应制备化合物3-2。
[0230]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:307.18.
[0231]
步骤c：化合物3-3的制备
[0232]
参照实施例1步骤d方法，使用化合物3-2与碳酸铯反应制备化合物3-3。
[0233]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:289.17.
[0234]
步骤d：化合物3-4的制备
[0235]
参照实施例1步骤e方法，使用化合物3-3与四氢铝锂反应制备化合物3-4。
[0236]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:247.18.
[0237]
步骤e：化合物3-5的制备
[0238]
向一100ml两口瓶中，依次加入化合物3-4(180mg)、无水二氯甲烷(20ml)、四溴化碳(364mg)以及三苯基膦(288mg)。加毕后氮气置换保护后置于室温下反应。待反应结束后经浓缩、柱层析得到240mg的化合物3-5。
[0239]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:308.86.
[0240]
步骤f：化合物3的制备
[0241]
参照实施例1步骤j的方法，使用化合物3-5与化合物1-9反应制备化合物3。
[0242]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.93(s,1h),8.43(s,1h),8.42
–
8.37(m,1h),8.27(d,j＝2.5hz,1h),7.83(d,j＝8.8hz,1h),7.78(s,1h),7.64(s,1h),7.39(dd,j＝8.8,2.6hz,1h),4.05
–
3.98(m,1h),3.95
–
3.88(m,1h),3.84
–
3.77(m,1h),3.69
–
3.61(m,3h),3.60
–
3.51(m,1h),3.34(s,4h),2.78(d,j＝4.7hz,3h),2.56(s,4h),2.29
–
2.19(m,1h),2.07
–
1.97(m,1h).
[0243]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:449.2297.
[0244]
实施例4：化合物4的制备
[0245][0246]
步骤a：化合物4-1的制备
[0247]
向一250ml的三口瓶中，依次加入1-叔丁氧羰基哌嗪(3.94g)、2-溴-5-碘吡啶(5g)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.51g)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0.806g)、叔丁醇钠(3.39g)以及甲苯(50ml)。加毕，氮气置换保护后置于室温下反应。待反应结束后经萃取、干燥、柱层析纯化得到化合物4-1。
[0248]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:342.06.
[0249]
步骤b：化合物4-2的制备
[0250]
向一100ml的三口瓶中，依次加入化合物4-1(1g)、4-异噁唑硼酸频哪醇酯(0.627g)、磷酸三钾(1.24g)、二氯[1,1'-双(耳叔丁基膦)二茂铁钯(ii)(0.19g)、1,4-二氧六环(20ml)以及纯化水(10ml)。加毕，氮气置换保护置于室温下反应，待反应结束后经萃取、干燥、柱层析纯化得到化合物4-2。
[0251]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:331.19.
[0252]
步骤c：化合物4-3的制备
[0253]
向一100ml的单口瓶中，依次加入化合物4-2(250mg)、二氯甲烷(10ml)以及三氟乙酸(3ml)。加毕后氮气置换保护置于室温下反应。待反应结束后减压除去过量酸及溶剂，得到化合物4-3。
[0254]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:231.19.
[0255]
步骤d：化合物4的制备
[0256]
向一100ml的单口瓶中，依次加入化合物4-3(221mg)、化合物4-4(150mg)、n,n-二异丙基乙胺(0.706ml)、乙腈(15ml)以及碘化钾(22mg)。加毕后氮气置换保护置于油浴中加热至80℃反应。待反应结束后经萃取、干燥、柱层析纯化得到化合物4。
[0257]1h nmr(500mhz,dmso-d6+dcl)δ10.06(s,1h),9.65(s,1h),9.11(d,j＝1.5hz,1h),8.62(s,1h),8.43(d,j＝2.6hz,1h),8.39
–
8.30(m,2h),8.19(s,1h),4.83(s,2h),4.51
–
4.05(m,2h),3.70
–
3.36(m,6h),2.66(q,j＝7.3hz,2h),1.22(t,j＝7.4hz,3h).
[0258]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:417.2033.
[0259]
实施例5：化合物5的制备
[0260][0261]
步骤a：化合物5-1的制备
[0262]
向一35ml的微波管中，依次加入化合物4-1(1g)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)噻唑(0.678g)、四(三苯基膦)钯(0.675g)、碳酸钾(0.808g)、1,4-二氧六环(12ml)以及纯化水(3ml)。加毕后氮气置换保护置于微波反应仪中，120℃反应2小时，温度稳定后压力示数2bar。待反应结束后经萃取、干燥、柱层析纯化得到化合物5-1。
[0263]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:347.17.
[0264]
步骤b：化合物5-2的制备
[0265]
参照实施例4步骤c的方法，使用化合物5-1与三氟乙酸反应制备化合物5-2。
[0266]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:247.16.
[0267]
步骤c：化合物5的制备
[0268]
参照实施例4步骤d的方法，使用化合物4-4与化合物5-2反应制备化合物5。
[0269]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.84(s,1h),9.00(s,1h),8.41(d,j＝1.8hz,1h),8.38(s,1h),8.28(d,j＝2.8hz,1h),7.82(d,j＝8.8hz,1h),7.75(s,1h),7.63(s,1h),7.41(dd,j＝8.9,2.9hz,1h),3.66(s,2h),3.28(s,4h),2.60
–
2.53(m,6h),1.19(t,j＝7.4hz,3h).
[0270]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:433.1802.
[0271]
实施例6：化合物6的制备
[0272][0273]
步骤a：化合物6-1的制备
[0274]
向一100ml单口瓶中，依次加入化合物5-溴吡啶甲酸(500mg)、n,n-二甲基甲酰胺(15ml)、甲氧基胺盐酸盐(420mg)、三乙胺(1000mg)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(950mg)以及1-羟基苯并三唑(760mg)，室温反应6小时。向反应液中加入水(50ml)和乙酸乙酯(30ml)稀释，摇匀分液，保留有机相和水相，水相使用乙酸乙酯萃取两次(20ml
×
2)，合并有机相，水洗(30ml
×
2)，保留有机相，干燥并旋干、烘干。得0.5g化合物6-1。
1,1'-联苯(1.936g)以及甲苯(50ml)，体系经氮气置换，110℃回流5小时。待反应完全，体系过滤后制砂，经柱层析纯化得到6g化合物8-1。
[0296]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:322.18
[0297]
步骤b：化合物8-2的制备
[0298]
取一100ml三口瓶，向其中加入n,n-二异丙基乙胺(483mg)、氘代甲胺盐酸盐(132mg)以及四氢呋喃(10ml)，搅拌5分钟至完全溶解，然后氮气置换，冰浴至0℃，注射加入双三甲基硅基胺基锂(900mg)，搅拌10分钟，称取化合物8-1(200mg)溶解于四氢呋喃中，滴加进反应体系，保温反应2小时。待反应完全，冰浴下向体系中加入饱和氯化铵(20ml)用乙酸乙酯萃取水相，无水硫酸钠干燥，经柱层析纯化得到170mg化合物8-2。
[0299]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:324.12.
[0300]
步骤c：化合物8-3的制备
[0301]
参照实施例4步骤c的方法，使用化合物8-2与三氟乙酸反应制备化合物8-3。
[0302]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:224.21
[0303]
步骤d：化合物8的制备
[0304]
参照实施例4步骤d的方法，使用化合物7-1与化合物8-3反应制备化合物8。
[0305]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.86(s,1h),8.40
–
8.33(m,2h),8.26(d,j＝2.9hz,1h),7.82(d,j＝8.8hz,1h),7.60(d,j＝1.8hz,1h),7.41(s,1h),7.38(dd,j＝8.8,3.0hz,1h),3.63(s,2h),3.33(d,j＝5.1hz,4h),2.55(t,j＝5.0hz,4h),2.14(tt,j＝8.4,5.3hz,1h),1.01
–
0.94(m,2h),0.85
–
0.78(m,2h).
[0306]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:422.2383.
[0307]
实施例9：化合物9的制备
[0308][0309]
步骤a：化合物9-1的制备
[0310]
向一20ml的微波管中，依次加入3-溴-8-氯-1,7-萘啶(500mg)和30％(w/w)的甲胺乙醇溶液(10ml)。使用biotage微波反应仪设定功率200w，升温至90℃反应60分钟。待反应完全。直接浓缩得到498mg的化合物9-1，未提纯直接用于下一步反应。
[0311]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:238.05.
[0312]
步骤b：化合物9-2的制备
[0313]
在一50ml的三口瓶中，将化合物9-1(489mg)溶解在四氢呋喃(8ml)中，冰浴下滴加双三甲基硅基胺基锂的四氢呋喃溶液(1.3m，3.95ml)。加完后再滴加二碳酸二叔丁酯(672mg)，升至室温，搅拌过夜。待反应完全，滴加饱和氯化铵溶液(1ml)淬灭反应。加入硅胶
制砂(1g)，硅胶柱层析得到550mg的化合物9-2。
[0314]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:338.04.
[0315]
步骤c：化合物9-3的制备
[0316]
向一20ml的微波管中，依次加入化合物9-2(450mg)、叔丁醇钠(256mg)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(124mg)、甲磺酸(2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯基)(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(ii)(111mg)、1,4-二氧六环(10ml)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(297mg)。加毕，吹氮气1分钟后封盖。使用biotage微波反应仪设定功率200w，升温至130℃反应90分钟。待反应完全。直接浓缩制砂，柱层析得到400mg的化合物9-3。
[0317]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:444.38.
[0318]
步骤d：化合物9-4的制备
[0319]
在一50ml的单口瓶中，将化合物9-3(400mg)溶解在4m氯化氢的1,4-二氧六环溶液(5ml)中。室温搅拌2小时，待反应完全，浓缩得到450mg的化合物9-4的盐酸盐，未提纯直接用于下一步反应。
[0320]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:244.14.
[0321]
步骤e：化合物9的制备
[0322]
参照实施例4步骤d的方法，使用化合物4-4与化合物9-4反应制备化合物9。
[0323]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.86(s,1h),8.64(d,j＝2.7hz,1h),8.42(d,j＝1.6hz,1h),7.86
–
7.73(m,2h),7.64(s,1h),7.30(dd,j＝9.6,3.8hz,2h),6.68(d,j＝5.8hz,1h),3.67(s,2h),3.42
–
3.35(m,4h),2.95(d,j＝4.8hz,3h),2.65
–
2.58(m,4h),2.55(dd,j＝14.8,7.4hz,2h),1.19(t,j＝7.4hz,3h).
[0324]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:430.2346.
[0325]
实施例10：化合物10的制备
[0326][0327]
步骤a：化合物10-1的制备
[0328]
参照实施例8步骤b的方法，使用化合物8-1与1，1-二甲基肼盐酸盐反应制备化合物10-1。
[0329]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:350.26.
[0330]
步骤b：化合物10-2的制备
[0331]
参照实施例4步骤c的方法，使用化合物10-1与三氟乙酸反应制备化合物10-2。
[0332]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:250.24.
[0333]
步骤c：化合物10的制备
[0334]
参照实施例4步骤d的方法，使用化合物4-4与化合物10-2反应制备化合物10。
[0335]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.86(s,1h),9.18(s,1h),8.41(s,1h),8.24(s,1h),7.81(d,j＝8.8hz,1h),7.75(s,1h),7.63(s,1h),7.39(d,j＝6.7hz,1h),3.65(s,2h),3.33(s,4h),2.55(s,12h),1.18(t,j＝7.4hz,3h).
[0336]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:436.2461.
[0337]
实施例11：化合物11的制备
[0338][0339]
步骤a：化合物11-1的制备
[0340]
参照实施例6步骤a的方法，使用4-溴-2-氟苯甲酸与甲氧基胺盐酸盐反应制备化合物11-1。
[0341]
ms(esi,[m-h]-)m/z:246.03.
[0342]
步骤b：化合物11-2的制备
[0343]
参照实施例4步骤a的方法，使用化合物11-1与n-boc-哌嗪反应制备化合物11-2。
[0344]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:354.24.
[0345]
步骤c：化合物11-3的制备
[0346]
参照实施例4步骤c的方法，使用化合物11-2与三氟乙酸反应制备化合物11-3。
[0347]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:254.18.
[0348]
步骤d：化合物9的制备
[0349]
参照实施例4步骤d的方法，使用化合物7-1与化合物11-3反应制备化合物11。
[0350]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.87(s,1h),11.12(s,1h),8.42
–
8.33(m,1h),7.60(s,1h),7.48(t,j＝8.7hz,1h),7.42(s,1h),6.85
–
6.69(m,2h),3.67(s,3h),3.62(s,2h),3.29(s,4h),2.50(s,4h),2.14(ddd,j＝13.7,8.4,5.4hz,1h),1.03
–
0.93(m,2h),0.82(q,j＝5.9hz,2h).
[0351]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:452.2099.
[0352]
实施例12：化合物12的制备
[0353][0354]
步骤a：化合物12-1的制备
[0355]
取一50ml两口瓶依次加入5-溴-2-氰基吡啶(5g)、甲醇(30ml)以及甲醇钠的甲醇溶液(5m，2.78ml，加毕后氮气置换保护，置于油浴中反应过夜。待反应结束后经过滤、浓缩、柱层析纯化得到化合物12-1。
[0356]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:215.00.
[0357]
步骤b：化合物12-2的制备
[0358]
取一100ml单口瓶，依次加入化合物12-1(1.86g)、甲醇(30ml)、氨基乙醛缩二乙醇(1.73g)以及醋酸(1.98ml)。加毕后氮气置换保护，置于油浴中加热至回流反应。待反应结束后，包含化合物12-2的反应液直接用于下一步反应。
[0359]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:316.04.
[0360]
步骤c：化合物12-3的制备
[0361]
取一100ml单口瓶，向包含化合物12-2的反应液中加入稀盐酸(4m，6.9ml)。加毕后加热回流。待反应结束后向反应液中滴加饱和碳酸钠水溶液，调节ph至10，随后经萃取、浓缩、柱层析纯化得到化合物12-3。
[0362]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:224.01.
[0363]
步骤d：化合物12-4的制备
[0364]
取一250ml三口瓶依次加入化合物12-3(1.5g)和四氢呋喃(50ml)，加毕后氮气置换保护，降温至-10℃搅拌。随后向反应体系中缓慢滴加含有叔丁醇钾(2.3g)的四氢呋喃溶液，加毕后搅拌5分钟。随后通过注射器加入2-(三甲基硅烷基)乙氧甲基氯(2.375ml)。加毕后继续低温反应，待反应结束后经饱和氯化铵溶液淬灭、萃取、浓缩、柱层析纯化得到化合物12-4。
[0365]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:354.02.
[0366]
步骤e：化合物12-5的制备
[0367]
参照实施例8步骤a的方法，使用化合物12-4与n-boc-哌嗪反应制备化合物12-5。
[0368]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:460.36.
[0369]
步骤f：化合物12-6的制备
[0370]
参照实施例4步骤c的方法，使用化合物12-5与三氟乙酸反应制备化合物12-6。
[0371]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:230.22.
[0372]
步骤g：化合物12的制备
[0373]
参照实施例4步骤d的方法，使用化合物4-4与化合物12-6反应制备化合物12。
[0374]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.43(s,1h),11.86(s,1h),8.41(s,1h),8.27(s,1h),7.86(d,j＝8.3hz,1h),7.76(s,1h),7.64(s,1h),7.42(d,j＝7.3hz,1h),7.12(s,1h),6.97(s,1h),3.66(s,2h),3.28(s,4h),2.58(s,6h),1.19(s,3h).
[0375]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:416.2196.
[0376]
实施例13：化合物13的制备
[0377][0378]
步骤a：化合物13-1的制备
[0379]
向一10ml微波管加入1-(5-溴吡啶-2-基)乙胺(2g)和甲酸(6.87g)，130℃微波反应。反应结束后，减压旋蒸去除甲酸，加入饱和碳酸氢钠稀释，二氯甲烷萃取，柱层析纯化得到1.8g的化合物13-1。
[0380]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:229.077.
[0381]
步骤b：化合物13-2的制备
[0382]
向一100ml单口瓶中加入化合物13-1(1.8g)、三氯氧磷(1.807g)以及甲苯(20ml)，120℃反应。反应结束后减压旋蒸，加入甲醇稀释，柱层析纯化得到1.5g的化合物13-2。
[0383]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:211.04.
[0384]
步骤c：化合物13-3的制备
[0385]
参照实施例8步骤a的方法，使用化合物13-2与n-boc-哌嗪反应制备化合物13-3。
[0386]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:317.22.
[0387]
步骤d：化合物13-4的制备
[0388]
参照实施例4步骤c的方法，使用化合物13-3与三氟乙酸反应制备化合物13-4。
[0389]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:217.21.
[0390]
步骤e：化合物13的制备
[0391]
参照实施例4步骤d的方法，使用化合物4-4与化合物13-4反应制备化合物13。
[0392]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.85(s,1h),8.40(d,j＝1.8hz,1h),8.05(s,1h),7.75(s,1h),7.65
–
7.57(m,2h),7.36(d,j＝9.9hz,1h),6.67(dd,j＝9.8,1.8hz,1h),3.65(s,2h),3.01(t,j＝4.7hz,4h),2.55(ddd,j＝8.6,6.4,2.2hz,6h),2.34(s,3h),1.18(t,j＝7.4hz,3h).
[0393]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:403.2236.
[0394]
实施例14：化合物14的制备
[0395][0396]
步骤a：化合物14-1的制备
[0397]
向单口瓶中依次加入5-溴吡啶-2-羧酸甲酯(10g)，无水乙腈(150ml)，氟化银(20.26g)。加毕后氮气置换保护置于室温下反应，反应结束后经过滤、浓缩、柱层析纯化得到化合物14-1。
[0398]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:234.02。
[0399]
步骤b：化合物14-2的制备
[0400]
参照实施例1步骤g的方法，使用化合物14-1与1-叔丁氧羰基哌嗪反应制备化合物14-2。
[0401]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:340.17。
[0402]
步骤c：化合物14-3的制备
[0403]
参照实施例1步骤h的方法，使用化合物14-2与甲胺盐酸盐反应制备化合物14-3。
[0404]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:339.19。
[0405]
步骤d：化合物14-4的制备
[0406]
参照实施例1步骤i的方法，使用化合物14-3与三氟乙酸反应制备化合物14-4。
[0407]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:239.23。
[0408]
步骤e：化合物14的制备
[0409]
参照实施例1步骤j的方法，使用化合物14-4与化合物2-5反应制备化合物14。
[0410]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:437.2099。
[0411]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.86(s,1h),8.47
–
8.33(m,2h),7.84(d,j＝7.9hz,1h),7.60(s,1h),
[0412]
7.59
–
7.52(m,1h),7.42(s,1h),3.64(s,2h),3.24
–
3.11(m,4h),2.76(d,j＝4.8hz,3h),2.61
–
2.54(m,
[0413]
4h),2.21
–
2.10(m,1h),1.01
–
0.93(m,2h),0.87
–
0.79(m,2h)。
[0414]
实施例15：化合物15的制备
[0415][0416]
步骤a：化合物15-1的制备
[0417]
向一30ml的微波管中，依次加入3-溴-8-氯-1,7-萘啶(800mg)、n-甲基吡咯烷酮(15ml)、(r)-3-氨基四氢呋喃(372mg)、n,n-二异丙基乙胺(849mg)，氮气置换并封口后，置入微波反应器中升温至160℃反应3h。待反应结束降至室温，经萃取、洗涤、干燥、硅胶柱层析纯化得到化合物15-1。
[0418]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:294.06.
[0419]
步骤b：化合物15-2的制备
[0420]
参照实施例9步骤c的方法，使用化合物15-1与1-叔丁氧羰基哌嗪反应制备化合物15-2。
[0421]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:400.36.
[0422]
步骤c：化合物15-3的制备
[0423]
参照实施例4步骤c的方法，使用化合物15-2与三氟乙酸反应制备化合物15-3。
[0424]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:300.22.
[0425]
步骤d：化合物15的制备
[0426]
向一25ml的单口瓶中，依次加入无水乙腈(10ml)、15-3(400mg)、7-乙基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-3-甲醛(100mg)、三乙胺(200mg)、钛酸四异丙酯(141mg)、三乙酰氧基硼氢化钠(210mg)，加毕氮气置换后室温反应过夜。反应结束后，反应液经萃取、干燥、硅胶柱层析纯化得到化合物15。
[0427]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.85(s,1h),8.66(d,j＝2.8hz,1h),8.42(d,j＝1.8hz,1h),7.84
–
[0428]
7.72(m,2h),7.64(d,j＝1.8hz,1h),7.32(d,j＝2.8hz,1h),7.09(d,j＝6.8hz,1h),6.76(d,j＝5.8hz,1h),4.71
–
4.54(m,1h),3.96
–
3.84(m,2h),3.79
–
3.71(m,1h),3.69
–
3.62(m,3h),3.38(t,j＝4.9hz,4h),2.60(t,j＝5.0hz,4h),2.58
–
2.52(m,2h),2.28
–
2.18(m,1h),2.04
–
1.95(m,1h),1.19(t,j＝7.4hz,3h).
[0429]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:486.2630.
[0430]
实施例16：化合物16的制备
[0431][0432]
步骤a：化合物16-1的制备
[0433]
向一100ml的单口瓶中，依次加入3-溴-8-氯-1,7-萘啶(3g)、甲苯(30ml)、1-叔丁氧羰基哌嗪(2.75g)、叔丁醇钠(1.776g)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.713g)及三(二亚苄基丙酮)二钯(0.564g)，氮气保护，混合物在100℃油浴中反应4h。反应结束后，反应液经萃取、干燥、硅胶柱层析纯化得到化合物16-1。
[0434]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:349.14.
[0435]
步骤b：化合物16-2的制备
[0436]
参照实施例15步骤a的方法，使用化合物16-1与氘代甲胺盐酸盐反应制备化合物16-2。
[0437]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:347.30.
[0438]
步骤c：化合物16-3的制备
[0439]
参照实施例4步骤c的方法，使用化合物16-2与三氟乙酸反应制备化合物16-3。
[0440]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:247.21.
[0441]
步骤d：化合物16的制备
[0442]
参照实施例15步骤d的方法，使用7-乙基-6-氧代-5,6-二氢-1,5-萘啶-3-甲醛与化合物16-3反应制备化合物16。
[0443]1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.85(s,1h),8.64(d,j＝2.3hz,1h),8.42(s,1h),7.76(d,j＝6.3hz,2h),7.64(s,1h),7.39
–
7.24(m,2h),6.69(d,j＝5.8hz,1h),3.67(s,2h),3.38(s,4h),2.60(s,4h),2.55(q,j＝7.5hz,2h),1.19(t,j＝7.4hz,3h).
[0444]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:433.2550.
[0445]
实施例17：化合物17的制备
[0446][0447]
步骤a：化合物17-1的制备
[0448]
向一10ml微波管加入3-溴-8-氯-1,7-萘啶(500mg)，环丙胺(586mg)，n,n'-二异丙基乙胺(796mg)，无水乙醇(15ml)，置于微波反应器，120℃反应1h。反应结束后直接制砂，经
硅胶柱层析得到化合物17-1。
[0449]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:264.06.
[0450]
步骤b：化合物17-2的制备
[0451]
向一25ml微波管加入三(二亚苄基丙酮)二钯(173mg)，碳酸铯(1234mg)，3-溴-n-环丙基-1,7-萘啶-8-胺(500mg)，叔丁基哌嗪-1-甲酸酯(423mg)，2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(88mg)，1,4-二氧六环(15ml)，氮气置换，置于微波反应器中130℃反应1h。反应结束后使用乙酸乙酯萃取，干燥，硅胶柱层析得到产物17-2。
[0452]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:370.32.
[0453]
步骤c：化合物17-3的制备
[0454]
参照实施例4步骤c的方法，使用化合物17-2与三氟乙酸反应制备化合物17-3。
[0455]
ms(esi,[m+h]
+
)m/z:270.19.
[0456]
步骤d：化合物17的制备
[0457]
参照实施例15步骤d的方法，使用3-乙基-2-甲氧基喹啉-7-甲醛与化合物17-3反应制备化合物17。
[0458]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.84(s,1h),8.62(d,j＝2.8hz,1h),8.41(d,j＝1.8hz,1h),7.82(d,j＝5.8hz,1h),7.76(s,1h),7.64(d,j＝1.7hz,1h),7.31(d,j＝2.8hz,1h),7.21(d,j＝3.9hz,1h),6.76(d,j＝5.8hz,1h),3.67(s,2h),3.40
–
3.34(m,4h),2.90(tq,j＝7.5,3.9hz,1h),2.65
–
2.56(m,4h),2.55(dd,j＝7.4,1.2hz,2h),1.19(t,j＝7.4hz,3h),0.71(td,j＝6.9,4.6hz,2h),0.64
–
0.56(m,2h).
[0459]
hrms(esi,[m+h]
+
)m/z:456.2507.
[0460]
试验例1体外细胞增殖抑制活性
[0461]
1.1mda-mb-436细胞增殖抑制活性测定
[0462]
取处于生长状态良好的mda-mb-436细胞，收集至离心管，完全培养基(dmem高糖+10％fbs+1
×
胰岛素-转铁蛋白-硒(its-g)+16μg/ml还原型谷胱甘肽)调整细胞密度至2
×
104个/ml，接种于96孔板上(100μl/孔)，细胞培养箱过夜培养后，使用加样仪进行化合物加样，使化合物终浓度为400nm-0.02nm，2个复孔，同时设置对照。细胞培养箱中继续培养168小时后，加入检测试剂cck-8(厂家：北京同仁化学，10μl/孔)，细胞培养箱中孵育1.5小时后，perkinelmer envision酶标仪450nm处检测其吸光值，四参数分析，拟合量效曲线，计算ic
50
，结果如下所示：
[0463]
buffer 2、12.5nm fluorescent labeled dna和水组成的mixture，按照组别设置在384孔板中加入mixture或5
×
parptrap
tm assay buffer 2、1
×
parptrap
tm assay buffer 2、1
×
parptrap
tm assay buffer 2中制备的parp2(3.75ng/μl)和化合物，室温孵育60min后，每孔加入10
×
nad+或水，室温孵育60min。
[0475]
perkinelmer envision酶标仪fp-480/530检测其偏振值(fp)，计算mp，mp＝1000*(s-g*p)/(s+g*p)：s表示垂直光荧光强度，p表示平行光荧光强度，g表示校正因子。四参数分析，拟合量效曲线，计算ec
50
。
[0476]
试验例4体外药代动力学
[0477]
4.1体外肝微粒体稳定性试验
[0478]
肝微粒体温孵样本制备为混合pbs缓冲液(ph7.4)，肝微粒体溶液(0.5mg/ml)，受试化合物及nadph+mgcl2溶液于37℃及300rpm孵育1小时。0小时样本制备为混合pbs缓冲液(ph7.4)，肝微粒体溶液(0.5mg/ml)，受试化合物。样本加入含内标的乙腈溶液经蛋白沉淀制备上清液，稀释后用于lc/ms/ms测定。
[0479]
试验例5体内药代动力学
[0480]
5.1小鼠药代动力学
[0481]
icr小鼠，体重20～25g，适应3～5天后，随机分组，每组9只，按1mg/kg剂量灌胃实施例1溶液。
[0482]
采血时间点0min、5min、0.25min、0.5h、2h、6h、10h、24h，于眼眶取血制备待测血浆样品。
[0483]
吸取20μl待测血浆样品和标曲样品，加入含内标的乙腈溶液经蛋白沉淀得到上清液，稀释后用于lc/ms/ms测定。
[0484]
5.2大鼠药代动力学
[0485]
sd大鼠，体重180～220g，适应3～5天后，随机分组，每组3只，按0.5mg/kg剂量灌胃实施例1溶液。
[0486]
采血时间点0min、15min、30min、1h、2h、4h、6h、8h、10h、24h，于眼眶取血制备待测血浆样品。
[0487]
吸取50μl待测血浆样品和标曲样品，加入含内标的乙腈溶液经蛋白沉淀得到上清液，稀释后用于lc/ms/ms测定。

技术特征：
1.式(ii)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其中，x、y各自独立地选自ch或n；环a选自苯基、吡啶基、或含有1～3个分别独立地选自n、o或s杂原子的8～12元杂芳基；r1各自独立地选自卤素、氨基、或任选被一个或多个d或卤素取代基取代的以下基团：c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷基氨基、(c
1-6
烷基)nh-c(＝o)-、c
1-6
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)nh-nh-c(＝o)-、(3～8元杂环烷基)nh-、(c
3-8
环烷基)nh-、或5～8元杂环基；n选自1、2、3或4；r选自：i.c
1-6
烷基，并且环a为含有1～3个分别独立地选自n、o或s杂原子的8～12元杂芳基；ii.c
1-6
烷基，并且r1为c
1-6
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)nh-nh-c(＝o)-、(3～8元杂环烷基)nh-、(c
3-8
环烷基)nh-、或5～8元杂环基；iii.c
3-8
环烷基或3～8元杂环烷基，所述c
3-8
环烷基或3～8元杂环烷基任选地被一个或多个r
a
取代；r
a
选自c
1-4
烷基、卤素、羟基、氨基、氰基、c
1-6
烷氧基、(c
1-6
烷基)nh-、或(c
1-6
烷基)2n-。2.如权利要求1所述的式(ii)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其选自式(i)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其中，x、y各自独立地选自ch或n；r选自c
3-8
环烷基或3～8元杂环烷基，所述r任选地被一个或多个r
a
取代；r
a
选自c
1-4
烷基、卤素、羟基、氨基、氰基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷基nh-、或(c
1-6
烷基)2n-。3.如权利要求1或2所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其中x和y选自ch；或者，x选自ch且y选自n；或者，x选自n且y选自ch。4.如权利要求1所述的式(ii)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其中环a选自苯基、吡啶基、或含有1～3个分别独立地选自n、o或s杂原子的8～12元稠合杂芳基；或者，环a选自苯基、吡啶基、或含有1～3个分别独立地选自n或o杂原子的8～12元稠合杂芳基；或者，环a选自苯基、吡啶基、或含有1～3个分别独立地选自n或o杂原子的9或10元稠合
杂芳基；或者，环a选自苯基、吡啶基、或含有2个选自n杂原子的9或10元稠合杂芳基；或者，环a选自苯基、吡啶基、或者，环a选自苯基、5.如权利要求1所述的式(ii)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其中r1选自卤素、或任选被一个或多个d或卤素取代基取代的以下基团：c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷基氨基、(c
1-6
烷基)nh-c(＝o)-、c
1-6
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)nh-nh-c(＝o)-、5～8元杂芳基、(c
3-8
环烷基)nh-或(3～8元杂环烷基)nh-，所述杂环烷基含有1个、2个或3个选自n、o或s的杂原子；或者，r1各自独立地选自卤素、或任选被一个或多个d或卤素取代基取代的以下基团：c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、c
1-4
烷基氨基、(c
1-4
烷基)nh-c(＝o)-、c
1-4
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-4
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-4
烷基)nh-nh-c(＝o)-、5～6元杂芳基、(c
3-7
环烷基)nh-或(4～7元杂环烷基)nh-，所述杂环烷基含有1个、2个或3个选自n、o或s的杂原子；或者，r1各自独立地选自f、cl、br、或任选被一个或多个d、f、cl或br取代基取代的以下基团：c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷基氨基、(c
1-3
烷基)nh-c(＝o)-、c
1-3
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-3
烷基)2n-nh-c(＝o)-、或5～6元杂芳基、(c
3-6
环烷基)nh-或(4～6元杂环烷基)nh-，所述杂环烷基含有1个或2个选自n、o或s的杂原子；或者，r1各自独立地选自f、cl、br、或任选被一个或多个d、f或cl取代基取代的以下基团：甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲基氨基、乙基氨基、正丙基氨基、异丙基氨基、甲氧基、乙氧基、ch3nh-c(＝o)-、ch3ch2nh-c(＝o)-、ch3ch2ch2nh-c(＝o)-、(ch3)2chnh-c(＝o)-、ch
3-o-nh-c(＝o)-、ch3ch
2-o-nh-c(＝o)-、ch3ch2ch
2-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2ch-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2n-nh-c(＝o)-、(ch3ch2)2n-nh-c(＝o)-、(ch3ch2ch2)2n-nh-c(＝o)-、呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、吡啶基、嘧啶基、或吡喃基、(环丙基)nh-、(环丁基)nh-、(环戊基)nh-、(环己基)nh-、(氧杂环丁基)nh-、(氮杂环丁基)nh-、(硫杂环丁基)nh-、(四氢吡咯基)nh-、(四氢呋喃基)nh-、(四氢噻吩基)nh-、(哌啶基)nh-、(四氢吡喃基)nh-、(四氢噻喃基)nh-、(吗啉基)nh-或(哌嗪基)nh-；或者，r1各自独立地选自f、或任选被一个或多个d、f或cl取代基取代的以下基团：甲基、甲氧基、甲基氨基、ch3nh-c(＝o)-、ch
3-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2n-nh-c(＝o)-、异噁唑基、噻吩基、咪唑基、(四氢呋喃基)nh-或(环丙基)nh-；或者，r1各自独立地选自f、甲基、f3c-、甲氧基、甲基氨基、ch3nh-c(＝o)-、cd3nh-c(＝o)-、ch
3-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2n-nh-c(＝o)-、
6.如权利要求1所述的式(ii)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其中n选自1、2或3；或者，n选自1或2。7.如权利要求1或2所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其中r
a
选自c
1-3
烷基、f、cl、br、羟基、氨基、氰基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
烷基nh-、或(c
1-3
烷基)2n-；或者，r
a
选自c
1-3
烷基；或者，r
a
选自甲基、乙基、正丙基、或异丙基；或者，r
a
选自甲基。8.如权利要求1所述的式(ii)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其中r选自c
1-3
烷基，并且环a为含有1～3个分别独立地选自n、o或s杂原子的8～12元杂芳基；或者，r选自甲基、乙基、正丙基或异丙基，并且环a为含有1～3个分别独立地选自n、o或s杂原子的8～12元稠合杂芳基；或者，r选自甲基、乙基、正丙基或异丙基，并且环a为含有2个选自n杂原子的9或10元稠合杂芳基；或者，r选自乙基，并且环a为或者，r选自乙基，并且环a为任选地，r选自c
1-3
烷基，并且r1为c
1-6
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-6
烷基)nh-nh-c(＝o)-、5～8元杂芳基、(c
3-8
环烷基)nh-或(3～8元杂环烷基)nh-，所述杂环烷基含有1个、2个或3个选自n、o或s的杂原子；或者，r选自甲基、乙基、正丙基或异丙基，并且r1为c
1-4
烷基-o-nh-c(＝o)-、(c
1-4
烷基)2n-nh-c(＝o)-、(c
1-4
烷基)nh-nh-c(＝o)-、5～6元杂芳基、(c
3-6
环烷基)nh-或(4～6元杂环烷基)nh-，所述杂环烷基含有1个或2个选自n、o或s的杂原子；或者，r选自乙基，并且r1为ch
3-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2n-nh-c(＝o)-、异噁唑基、噻吩基、咪唑基、(四氢呋喃基)nh-或(环丙基)nh-；或者，r选自乙基，并且r1为ch
3-o-nh-c(＝o)-、(ch3)2n-nh-c(＝o)-、(cd3)nh-、任选地，r选自c
3-6
环烷基或3～6元杂环烷基，所述c
3-6
环烷基和3～6元杂环烷基任选地被一个或多个r
a
取代；或者，r选自c
3-6
环烷基或4～6元杂环烷基，所述c
3-6
环烷基和4～6元杂环烷基任选地被一个或多个r
a
取代；或者，r选自c
3-4
环烷基或4～6元杂环烷基，所述c
3-4
环烷基和4～6元杂环烷基任选地被1个r
a
取代；或者，r选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、硫杂环丁烷、四氢吡咯基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、哌啶基、
四氢吡喃基、四氢噻喃基、吗啉基或哌嗪基；或者，r选自环丙基、环丁基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢吡咯基、四氢呋喃基或四氢吡喃基，所述氮杂环丁基和四氢吡咯基选地被1个甲基取代；或者，r选自甲基取代；或者，r选自9.如权利要求1或2所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其选自式(ii-a)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐、式(ii-b)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐、式(ii-c)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐、式(ii-d)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，10.以下化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐：
11.药物组合物，其包含权利要求1-10任一项所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐。12.权利要求1-10任一项所述的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐、或权利要求11所述的药物组合物在制备治疗肿瘤或癌症的药物中的用途；任选地，所述癌症选自乳腺癌、卵巢癌、结肠癌、胰腺癌或前列腺癌。

技术总结
本申请属于药物化学领域，涉及含有哌嗪基的化合物，具体涉及式(II)所示化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐、其制备方法、含有该化合物的药物组合物以及其在治疗相关疾病(例如癌症)中的用途。病(例如癌症)中的用途。病(例如癌症)中的用途。


技术研发人员：张寅生 刘欣 秦慧 陈璞舟 李科 李久香
受保护的技术使用者：正大天晴药业集团股份有限公司
技术研发日：2023.01.17
技术公布日：2023/7/31