一种含环丙酰胺化合物及其应用的制作方法

1.本发明涉及药物化学领域，具体涉及一种含环丙酰胺化合物及其应用。


背景技术：

2.蛋白质激酶是催化蛋白质中特定残基磷酸化的酶家族，并广义地分类为酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸激酶。由于突变、过度表达或不适当调节、调节异常或失调，以及生长因子或细胞因子的过度产生或产生不足所导致的不适当的激酶活性涉及许多疾病，其包括但不限于癌症、心血管疾病、变态反应、哮喘和其它呼吸疾病、自身免疫病、炎症疾病、骨病、代谢紊乱及神经病症和神经变性病症(例如阿尔茨海默病)。因此，蛋白质激酶已成为一类重要的作为治疗性介入的靶点的酶。
3.janus激酶(jak)家族是一类非受体性蛋白酪氨酸激酶，其通过与信号转导子和转录激活子(signal transducer and activator of transcription；简称：stat)之间的相互作用在细胞因子受体信号通路中发挥着重要作用。stat是一组能与靶基因调控区dna结合的胞质蛋白。作为jak的下游底物，stat可以在外界信号的刺激下，发生酪氨酸磷酸化从而被激活，随后转入细胞核调节基因的转录。
4.许多异常的免疫应答，如过敏、哮喘、(异体)移植排斥、类风湿性关节炎、肌萎缩性脊髓侧索硬化症和多发性硬化症等自身免疫性疾病，骨髓增生失调，白血病和淋巴瘤等血液系统恶性肿瘤，它们的调节都与jak/stat信号通路有关。
5.janus激酶(jak)家族包括jak1、jak2、jak3和tyk2四个成员。jak1、jak2及tyk2广泛存在于各种组织和细胞中，而jak3主要分布于淋巴细胞中。
6.jak1可与il-10、il-19、il-20、il-22、il-26、il-28、ifn-а、ifn-γ、gp130家族中的il-6以及含γc的其它受体等结合(rodigs.j.,etal.cell,1998,93:373-383)。jak1是免疫相关疾病、炎症和癌症等疾病领域的新型靶点。jak1抑制剂可用于治疗/预防自身免疫性疾病炎症(hornakovat.,etal.,blood,2010,115:3287-3295)，如白血病、淋巴瘤、黑色素瘤、关节炎、银屑病、红斑狼疮、获得性免疫缺陷综合症(hous.,etal.,hμm.genet.,2013,132:1049-1058)等。
7.jak2在包括il-3、ifn-γ、epo、gh等多种受体信号的调节过程中发挥重要作用(levyd.e.,etal.,nat.rev.mol.cellbiol.,2002,3:651-662)。jak2抑制剂对于骨髓纤维化、实体瘤和血液肿瘤等疾病的治疗具有很大的医疗价值和市场潜力。
8.jak3通过与il-2、il-4、il-7、il-9、il-15、il-21等细胞因子受体复合物中的γ共链(γc)相结合，调节细胞信号传导。jak3抑制剂能够阻止t细胞的活化，并防止移植手术后的移植排斥。此外，jak3抑制剂也可调节淋巴细胞，巨噬细胞和肥大细胞的功能。jak3抑制剂将有望用于治疗或预防涉及淋巴细胞，巨噬细胞或肥大细胞功能相关的多种疾病。
9.托法替尼是首个获fda批准的新型口服的jak抑制剂，其作用于jak1和jak3，用于治疗类风湿性关节炎(ra)。然而，托法替尼在缓解ra症状的同时也会带来一些副反应，引发一定的感染、恶性肿瘤和淋巴瘤的发生。研究表明，托法替尼的感染和死亡率的整体风险与
生物制剂治疗ra的风险相似。考虑到jak在许多调节通路及免疫过程中的多效性，非选择性的jak抑制剂将带来不良反应的风险，选择性jak抑制剂已成为目前研究的重要方向。
10.比利时galapagos公司的filgotinib是新一代jak1选择性抑制剂，具有降低托法替尼导致贫血或感染的风险。但是，filgotinib的活性相对较弱，针对jak1的ic50大于10nm，临床给药剂量也相对较高(expert opin.investig.drugs.2016,25,1355)。
11.尽管市场上已公开了一系列的jak抑制剂，但仍需要开发新的具有更好的药效和jak选择性的化合物，经过不断努力，本发明开发出一种具有通式(i)所示的结构的化合物，并发现具有此类结构的化合物表现出优异的效果。


技术实现要素：

12.本发明的目的在于提供一种含环丙酰胺化合物。所述含环丙酰胺化合物选自：通式(i)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐。所述立体异构体包括对映异构体、非对映异构体、内消旋体或外消旋体等。
13.为了达到上述目的，本发明采用的技术方案如下：
14.本发明提供了通式(i)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐：
[0015][0016]
其中，
[0017]
x选自-ch或n；
[0018]
y选自氢或卤素，n为1或2；
[0019]
ar选自其中m为1-4的整数；
[0020]
w1选自
[0021]
w2选自
[0022]
r选自氢、c
1-c6烷基、c
1-c6的烷氧基或卤素；
[0023]
z1、z2和z3各自独立地选自-c(r3r4)-、-s(o)
2-、-s(o)-、-ch(s(o)2r
′
)-或-ch(s(o)2nr
′r″
)-；
[0024]
r1和r2各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基；
[0025]r′
和r
″
各自独立地选自取代或未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2；
[0026]
r3和r4各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基。
[0027]
优选地，上述化合物或其立体异构体，或其可药用盐具有通式(ii)所示的结构：
[0028][0029]
其中，
[0030]
x选自-ch或n；
[0031]
y选自氢或卤素，n为1或2；
[0032]
m为1-4的整数；
[0033]
w1选自
[0034]
r选自氢、c
1-c6烷基、c
1-c6的烷氧基或卤素；
[0035]
z1、z2和z3各自独立地选自-c(r3r4)-、-s(o)
2-、-s(o)-、-ch(s(o)2r
′
)-或-ch(s(o)2nr
′r″
)-，且当y为氢时，z2不为-s(o)
2-；
[0036]r′
和r
″
各自独立地选自取代或未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2；
[0037]
r3和r4各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基。
[0038]
优选地，上述化合物或其立体异构体，或其可药用盐具有通式(iii)所示的结构：
[0039][0040]
其中，
[0041]
x选自-ch或n；
[0042]
y选自氢或卤素，n为1或2；
[0043]
w2选自
[0044]
r1和r2各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基；
[0045]r′
选自取代或未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2。
[0046]
优选地，上述化合物或其立体异构体，或其可药用盐具有通式(ⅳ)所示的结构：
[0047][0048]
其中，
[0049]
x选自-ch或n；
[0050]
y选自氢或卤素，n为1或2；
[0051]
m为1-4的整数；
[0052]
r选自氢、c
1-c6烷基、c
1-c6的烷氧基或卤素；
[0053]
z1选自-c(r3r4)-、-s(o)
2-、-s(o)-、-ch(s(o)2r
′
)-或-ch(s(o)2nr
′r″
)-；
[0054]r′
和r
″
各自独立地选自取代或未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2；
[0055]
r3和r4各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基。
[0056]
优选地，上述化合物或其立体异构体，或其可药用盐具有通式(
ⅴ
)所示的结构：
[0057]
[0058]
其中，
[0059]
x选自-ch或n；
[0060]
y选自氢或卤素，n为1或2；
[0061]
m为1-4的整数；
[0062]
r选自氢、c
1-c6烷基、c
1-c6的烷氧基或卤素；
[0063]
z2选自-c(r3r4)-、-s(o)
2-、-s(o)-、-ch(s(o)2r
′
)-或-ch(s(o)2nr
′r″
)-，且当y为氢时，z2不为-s(o)
2-；
[0064]r′
和r
″
各自独立地选自取代或未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2；
[0065]
r3和r4各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基。
[0066]
优选地，上述化合物或其立体异构体，或其可药用盐具有通式(ⅵ)所示的结构：
[0067][0068]
其中，
[0069]
x选自-ch或n；
[0070]
y选自氢或卤素，n为1或2；
[0071]
m为1-4的整数；
[0072]
r选自氢、c
1-c6烷基、c
1-c6的烷氧基或卤素；
[0073]
z3选自-c(r3r4)-、-s(o)
2-、-s(o)-、-ch(s(o)2r
′
)-或-ch(s(o)2nr
′r″
)-；
[0074]r′
和r
″
各自独立地选自取代或未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2；
[0075]
r3和r4各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基。
[0076]
优选地，上述化合物或其立体异构体，或其可药用盐具有通式(ⅶ)所示的结构：
[0077][0078]
其中，
[0079]
x选自-ch或n；
[0080]
y选自氢或卤素，n为1或2；
[0081]
r1和r2各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基。
[0082]
优选地，上述化合物或其立体异构体，或其可药用盐具有通式(
ⅷ
)所示的结构：
[0083][0084]
其中，
[0085]
x选自-ch或n；
[0086]
y选自氢或卤素，n为1或2；
[0087]r′
选自取代或未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2。
[0088]
优选地，上述y选自h或f。
[0089]
优选地，上述通式中的选自选自
[0090]
优选地，上述z1选自-ch(so2r
′
)-，r
′
选自未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基；r选自氢、甲基、甲氧基或卤素。
[0091]
优选地，上述y为h时，z2选自-cr3r
4-或-ch(s(o)2r
′
)-，其中，r3和r4各自独立地选
自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基，r
′
选自c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，r选自氢、甲基、甲氧基或卤素；上述y为卤素时，z2选自-so
2-，r选自氢、甲基、甲氧基或卤素。
[0092]
优选地，上述z3选自-so
2-或-s(o)-；r选自氢、甲基、甲氧基或卤素。
[0093]
优选地，上述r1和r2各自独立地选自氢、氟、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、三氟甲基、环丙基或环戊基。
[0094]
优选地，上述r
′
选自取代或未取代的甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、异戊基、环丙基、环戊基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2。
[0095]
进一步的，本发明还提供了下式所示化合物或其立体异构体，或其可药用盐：
[0096][0097][0098]
进一步的，本发明还提供了下式所示化合物或其立体异构体，或其可药用盐：
[0099][0100]
[0101]
进一步的，本发明还提供了一种药物组合物，包括治疗有效量的上述化合物或其立体异构体或其可药用盐成分，以及药学上可接受的载体。
[0102]
进一步的，本发明还提供了上述化合物或其立体异构体，或其可药用盐，或者上述药物组合物在制备用于治疗jak信号通路异常的相关疾病的药物中的用途。
[0103]
上述疾病为自身免疫疾病。
[0104]
优选地，所述自身免疫疾病选自类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎、特应性皮炎或系统性红斑狼疮。
[0105]
上述疾病为骨髓增殖性肿瘤类疾病。
[0106]
优选地，所述骨髓增殖性肿瘤类疾病选自原发性血小板增多症、真性红细胞增多症或原发性骨髓纤维化疾病。
[0107]
本发明化合物具有良好的jak1、jak2或jak3激酶抑制活性，并且本发明化合物对jak1、jak2或jak3激酶具有明显的选择性。
具体实施方式
[0108]
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0109]
需要说明的是，除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
[0110]
术语“烷基”指饱和的脂肪族烃基团，包括1至20个碳原子的直链和支链基团。优选含有1至10个碳原子的烷基，更优选含有1至6个碳原子的烷基，最优选含有1至4个碳原子的烷基，最佳为甲基。
[0111]
非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2，3-二甲基戊基、2，4-二甲基戊基、2，2-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2，3-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己基、2，2-二甲基己基、3，3-二甲基己基、4，4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2，2-二乙基戊基、正癸基、3，3-二乙基己基、2，2-二乙基己基及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯
基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、氨基、卤代烷基、羟烷基、羧基或羧酸酯基。
[0112]
术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包括3至20个碳原子，优选包括3至12个碳原子，更优选包含3至10个碳原子，最优选包含3至6个碳原子，最佳为环丙基或环戊基。单环环烷基的非限制性实例包含环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等，优选环丙基、环戊基。多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。环烷基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、氨基、卤代烷基、羟烷基、羧基或羧酸酯基。
[0113]
术语“烷氧基”指-o-(烷基)和-o-(未取代的环烷基)，其中烷基、环烷基的定义如上所述。非限制性实例包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。烷氧基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自为烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氨基、卤代烷基、羟烷基、羧基或羧酸酯基。
[0114]“卤代烷基”指烷基被一个或多个卤素取代，其中烷基的定义如上所述。
[0115]“羟基”指-oh基团。
[0116]“羟烷基”指被羟基取代的烷基，其中烷基的定义如上所述。
[0117]“卤素”指氟、氯、溴或碘，优选氟或碘。
[0118]“氨基”指-nh2。
[0119]“氰基”指-cn。
[0120]“硝基”指-no2。
[0121]“氧代基”指＝o。
[0122]“羧基”指-c(o)oh。
[0123]“羧酸酯基”指-c(o)o(烷基)或(环烷基)，其中烷基、环烷基的定义如上所述。
[0124]“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。例如，“任选被烷基取代的杂环烷基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环烷基团被烷基取代的情形和杂环烷基团不被烷基取代的情形。
[0125]“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
[0126]
以下将结合具体实施例来进一步阐述本发明的技术方案。除非另有说明，下列实施例中所使用的仪器、耗材和试剂等均可通过常规商业手段获得，实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
[0127]
实施例1：化合物1-11的合成
[0128][0129]
通式结构合成路线
[0130]
步骤一：
[0131]
将氰甲基磷酸二乙酯(177mg，1mmol)溶于干燥四氢呋喃(10ml)中，冰浴下加入氢化钠(60mg，1.5mmol)，搅拌一小时后，加入相应的醛(1mmol)。反应于室温搅拌过夜。加入饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭，乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物直接用于下一步。
[0132]
步骤二：
[0133]
将n-(5-(1h-吡唑-4-基)咪唑[1,2-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺(134mg，0.5mmol)、上步的残余物(0.6mmol)和1,8-二氮杂环[5,4,0]十一烯-7(两滴)溶于乙腈加热至80℃反应8小时。恢复至室温后加入水(20ml)，浓缩除去大部分乙腈后，乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用柱层析色谱(二氯甲烷:甲醇＝100:0-100:5)纯化得到化合物。
[0134]
实施例2：化合物1的合成
[0135]
按照实施例1合成路线，在步骤一使用环戊基甲醛得到化合物1(70mg)，收率36％。lcms(esi+):389.42(m+h)
+
。
[0136]
实施例3：化合物2的合成
[0137]
按照实施例1合成路线，在步骤一使用环丙基甲醛得到化合物2(100mg)，收率56％。lcms(esi+):361.42(m+h)
+
。
[0138]
实施例4：化合物3的合成
[0139]
按照实施例1合成路线，在步骤一使用2-环丙基乙醛得到化合物3(73mg)，收率39％。lcms(esi+):375.38(m+h)
+
。
[0140]
实施例5：化合物4的合成
[0141]
按照实施例1合成路线，在步骤一使用丙醛得到化合物4(80mg)，收率41％。lcms(esi+):349.16(m+h)
+
。
[0142]
实施例6：化合物5的合成
[0143]
按照实施例1合成路线，在步骤一使用丁醛得到化合物5(79mg)，收率43％。lcms(esi+):363.20(m+h)
+
。
[0144]
实施例7：化合物6的合成
[0145]
按照实施例1合成路线，在步骤一使用2-甲氧基乙醛得到化合物6(55mg)，收率30％。lcms(esi+):365.06(m+h)
+
。
[0146]
实施例8：化合物7的合成
[0147]
按照实施例1合成路线，在步骤一使用戊醛得到化合物7(72mg)，收率38％。lcms(esi+):377.08(m+h)
+
。
[0148]
实施例9：化合物8的合成
[0149]
按照实施例1合成路线，在步骤一使用4-甲基戊醛得到化合物8(87mg)，收率46％。lcms(esi+):377.12(m+h)
+
。
[0150]
实施例10：化合物9的合成
[0151]
按照实施例1合成路线，在步骤一使用3-甲氧基丙醛得到化合物9(80mg)，收率42％。lcms(esi+):379.09(m+h)
+
。
[0152]
实施例11：化合物10的合成
[0153]
按照实施例1合成路线，在步骤一使用4,4,4-三氟丁醛得到化合物10(105mg)，收率50％。lcms(esi+):417.16(m+h)
+
。
[0154]
实施例12：化合物11的合成
[0155]
除步骤二用n-(5-(1h-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑基[1,5-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺代替n-(5-(1h-吡唑-4-基)咪唑[1,2-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺，其余均按照实施例1合成路线得到化合物11(79mg)，收率41％。lcms(esi+):390.25(m+h)
+
。
[0156]
实施例13：化合物12,13和14的合成
[0157][0158]
通式结构合成路线
[0159]
步骤一：
[0160]
将氰甲基磷酸二乙酯(177mg，1mmol)溶于干燥四氢呋喃(10ml)中，冰浴下加入氢化钠(60mg，1.5mmol)，搅拌一小时后，加入环己酮衍生物(1mmol)。反应于室温搅拌过夜。加入饱和氯化铵溶液(20ml)淬灭，乙酸乙酯萃取(20ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物直接用于下一步。
[0161]
步骤二：
[0162]
将n-(5-(1h-吡唑-4-基)咪唑[1,2-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺(135mg，0.5mmol)、步骤一得到的残余物(0.6mmol)和1,8-二氮杂环[5,4,0]十一烯-7(两滴)溶于乙腈加热至80℃反应8小时。恢复至室温后加入水(20ml)，浓缩除去大部分乙腈后，乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用柱层析色谱(二氯甲烷:甲醇＝100:0-100:5)纯化得到化合物。
[0163]
实施例14：化合物12的合成
[0164]
按照实施例13合成路线，在步骤一使用4,4-二氟环己酮得到化合物12(74mg)，收率35％。lcms(esi+):425.02(m+h)
+
。
[0165]
实施例15：化合物13的合成
[0166]
按照实施例13合成路线，在步骤一使用4-三氟甲基环己酮得到化合物13(113mg)，收率49％。lcms(esi+):457.01(m+h)
+
。
[0167]
实施例16：化合物14的合成
[0168]
按照实施例13合成路线，在步骤一使用环己酮得到化合物14(99mg)，收率50％。lcms(esi+):389.08(m+h)
+
。
[0169]
实施例17：化合物15的合成
[0170]
[0171]
步骤一：
[0172]
将(4-(溴甲基)苯基)-硼酸(215mg，1mmol)和3-(甲基砜)氮杂环丁烷(135mg，1mmol)溶于乙腈中。分批加入碳酸钾(207mg，1mmol)，室温反应过夜。过滤，滤液浓缩。残余物直接用于下一步。
[0173]
步骤二：
[0174]
将上步得到的残余物(135mg，0.5mmol)、n-(5-溴咪唑[1,2-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺(140mg，1mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(36mg，0.1mmol)和碳酸钾(138mg，2mmol)溶于二氧六环(10ml)和水(10ml)中，置换氮气三次，于110℃搅拌反应8小时。恢复至室温后加入水(20ml)和乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用柱层析色谱(二氯甲烷:甲醇＝100:0-100:5)纯化得到化合物15(119mg)，收率56％。lcms(esi+):212.99(m/2+h)
+
。
[0175]
实施例18：化合物16的合成
[0176][0177]
步骤一：
[0178]
将(4-(溴甲基)苯基)-硼酸(108mg，0.5mmol)和4-(甲基砜)哌啶(84mg，0.5mmol)溶于乙腈(5ml)中，分批加入碳酸钾(138mg，1mmol)，室温反应过夜，过滤，滤液浓缩，残余物直接用于下一步。
[0179]
步骤二：
[0180]
将步骤一的残余物溶于二氧六环(10ml)和水(10ml)中，再加入n-(5-溴咪唑[1,2-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺(140mg，0.5mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(36mg，0.1mmol)和碳酸钾(138mg，2mmol)，置换氮气三次，于110℃搅拌反应8小时。恢复至室温后加入水(20ml)，乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用柱层析色谱(二氯甲烷:甲醇＝100:0-100:5)纯化得到化合物16(108mg)，收率48％。lcms(esi+):227.13(m/2+h)+。
[0181]
实施例19：化合物17的合成
[0182][0183]
步骤一：
[0184]
将四氢-2h-硫代吡喃-4-醇-1,1-二氧化物(150mg，1mmol)和对甲苯磺酰氯(215mg，1mmol)溶于吡啶(5ml)中，室温反应过夜。浓缩后残余物用柱层析色谱(石油醚:乙酸乙酯＝100:0-50:50)纯化得到化合物1,1-二氧代四氢-2h-硫代吡喃-4-基-4-甲基苯磺酸酯。
[0185]
步骤二：
[0186]
将对羟基苯硼酸(138mg，1mmol)、n-(5-溴咪唑[1,2-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺(279mg，1mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(73mg，0.1mmol)和碳酸钾(276mg，2mmol)溶于二氧六环(10ml)和水(10ml)中，置换氮气三次，于100℃搅拌反应8小时。恢复至室温后加入水(20ml)，乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用柱层析色谱(二氯甲烷:甲醇＝100:0-100:5)纯化得到化合物n-(5-(4-羟基苯基)咪唑[1,2-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺。
[0187]
步骤三：向n,n-二甲基甲酰胺(5ml)中加入步骤一制得的1,1-二氧代四氢-2h-硫代吡喃-4-基-4-甲基苯磺酸酯(152mg，0.5mmol)、步骤二制得的n-(5-(4-羟基苯基)咪唑[1,2-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺(146mg，0.5mmol)和碳酸钾(138mg，1mmol)。加热至80℃反应5小时。恢复至室温后加入水(20ml)，乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用柱层析色谱(二氯甲烷:甲醇＝100:0-100:5)纯化得到化合物17(137mg)，收率62％。lcms(esi+):425.98(m+h)
+
。
[0188]
实施例20：化合物18的合成
[0189][0190]
按照实施例19合成路线，在步骤二用2-氟-4羟基苯硼酸代替对羟基苯硼酸得到化合物18(104mg)，收率50％。lcms(esi+):443.98(m+h)
+
。
[0191]
实施例21：化合物19的合成
[0192][0193]
按照实施例19合成路线，在步骤二用n-(5-溴-[1,2,4]三氮唑[1,5-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺代替n-(5-溴咪唑[1,2-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺得到化合物19(58mg)，收率43％。lcms(esi+):427.15(m+h)
+
。
[0194]
实施例22：化合物20的合成
[0195][0196]
步骤一：
[0197]
向甲醇中加入(2-氟-4-甲酰苯基)硼酸(168mg，1mmol)、4-(甲基砜)哌啶(135mg，1mmol)和一滴乙酸，室温搅拌两个小时后加入氰基硼氢化钠(126mg，2mmol)，继续搅拌过夜。浓缩后加入水(20ml)，乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物直接用于下一步。
[0198]
步骤二：
[0199]
将步骤一的残余物直接溶于二氧六环(10ml)和水(10ml)中，再加入n-(5-溴咪唑[1,2-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺(140mg，0.5mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(36mg，0.05mmol)和碳酸钾(138mg，1mmol)，置换氮气三次，于100℃搅拌反应8小时。恢复至室温后加入水(20ml)，乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用柱层析色谱(二氯甲烷:甲醇＝100:0-100:5)纯化得到化合物20(120mg)，收率51％。lcms(esi+):236.13(m/2+h)
+
。
[0200]
实施例23：化合物21的合成
[0201][0202]
步骤一：
[0203]
将四氢噻喃-4-醇(590mg，5mmol)和对甲苯磺酰氯(1.1g，6mmol)溶于吡啶(10ml)中，室温反应过夜。浓缩后残余物用柱层析色谱(石油醚:乙酸乙酯＝100:0-50:50)纯化得到化合物四氢-2h-硫代吡喃-4-基-4-甲基苯磺酸酯。
[0204]
步骤二：将对羟基苯硼酸(1.38g，10mmol)、n-(5-溴-[1,2,4]三氮唑[1,5-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺(2.81g，10mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(730mg，1mmol)和碳酸钾(2.76g，20mmol)溶于二氧六环(20ml)和水(20ml)中，置换氮气三次，于110℃搅拌反应8小时。恢复至室温后加入水(20ml)，乙酸乙酯萃取(20ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用柱层析色谱(二氯甲烷:甲醇＝100:0-100:5)纯化得到化合物n-(5-(4-羟基苯基)-[1,2,4]三氮唑[1,5-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺。
[0205]
步骤三：
[0206]
向n,n-二甲基甲酰胺(5ml)中加入步骤一得到的四氢-2h-硫代吡喃-4-基-4-甲基苯磺酸酯(272mg，1mmol)、步骤二得到的n-(5-(4-羟基苯基)-[1,2,4]三氮唑[1,5-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺(294mg，1mmol)和碳酸钾(276mg，2mmol)。加热至80℃反应5小时。恢复至室温后加入水(20ml)，乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用柱层析色谱(二氯甲烷:甲醇＝100:0-100:5)纯化得到化合物n-(5-(4-((1-四氢硫代吡喃-4-基)氧)苯基)-[1,2,4]三氮唑[1,5-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺。
[0207]
将n-(5-(4-((1-四氢硫代吡喃-4-基)氧)苯基)-[1,2,4]三氮唑[1,5-a]吡啶-2-基)环丙烷甲酰胺(197mg，1mmol)溶于甲醇(5ml)中，于冰浴下加入n-溴代琥珀酰亚胺
(178mg，2mmol)和叔丁醇钾(112mg，2mmol)，室温反应过夜。加入饱和食盐水(20ml)，乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用柱层析色谱(二氯甲烷:甲醇＝100:0-100:5)纯化得到化合物21(66mg)，收率32％。lcms(esi+):411.03(m+h)
+
。
[0208]
实施例24：化合物22的合成
[0209][0210]
步骤一：将叔丁基(5-溴咪唑[1,2-a]吡啶-2-基)氨基甲酸酯(311mg，1mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中。于冰浴下加入三氟乙酸(5ml)，室温反应五小时后浓缩。残余物直接用于下一步。
[0211]
步骤二：将步骤一的残余物溶于二氯甲烷(10ml)中，加入反式2-氟环丙烷甲酸(114mg，1.1mmol)，于冰浴下加入n,n-二异丙基乙胺(260mg，2mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯(570mg，1.5mmol)，反应于室温过夜。反应结束后加入水(20ml)，二氯甲烷萃取(10ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用柱层析色谱(二氯甲烷:甲醇＝100:0-100:5)纯化得到化合物反式-n-(5-溴咪唑[1,2-a]吡啶-2-基)-2-氟环丙烷甲酰胺。
[0212]
步骤三：将反式-n-(5-溴咪唑[1,2-a]吡啶-2-基)-2-氟环丙烷甲酰胺(149mg，0.5mmol)、4-((1,1-二氧代硫代吗啡林)甲基苯硼酸频哪醇酯(175mg，0.5mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(36mg，0.05mmol)和碳酸钾(138mg，1mmol)溶于二氧六环(10ml)和水(10ml)中，置换氮气三次，于110℃搅拌反应8小时。恢复至室温后加入水(20ml)，乙酸乙酯萃取(10ml
×
3)，合并有机相，饱和食盐水(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用柱层析色谱(二氯甲烷:甲醇＝100:0-100:5)纯化得到化合物22(124mg)，收率56％。lcms(esi+):443.55(m+h)
+
。
[0213]
拆分条件：先将化合物22溶于二氯甲烷(浓度10mg/ml)，再用乙醇稀释至2.5mg/ml。手性色谱柱unichiral cmd-5h(21.2mm i.d x 250mml)，流动相乙醇/二乙胺(100:1)，流速12ml/min，uv254nm，柱温25℃。拆分后分别得到化合物22-1及化合物22-2。
[0214]
保留时间：化合物22-1：10.69min(》99％ee)，化合物22-2：13.54min(》99％ee)。
[0215]
实施例25：化合物23的合成
[0216][0217]
按照实施例24合成路线在步骤一用叔丁基(5-溴-[1,2,4]三氮唑[1,5-a]吡啶-2-基)氨基甲酸酯)代替叔丁基(5-溴咪唑[1,2-a]吡啶-2-基)氨基甲酸酯，得到化合物23(100mg)，收率45％。lcms(esi+):444.17(m+h)
+
。
[0218]
拆分条件：将化合物23溶于乙醇(4mg/ml)。手性色谱柱unichiral cmd-5h(21.2mm i.d x 250mml)，流动相乙醇，流速12ml/min，uv254nm，柱温25℃。拆分后分别得到化合物23-1及化合物23-2。
[0219]
保留时间：化合物23-1：11.58min(》99％ee)，化合物23-2：16.47min(》99％ee)。
[0220]
实施例26：化合物24-33的合成
[0221]
利用适当的原料，参照如实施例24和实施例25的合成路线可以合成化合物24-33。
[0222]
具体的，化合物的编号、结构、合成方法和表征数据如下：
[0223]
[0224][0225]
实施例27：jak1/jak2/jak3激酶活性测试
[0226]
1.实验耗材
[0227]
jak1：thermofisherpv47742059141d
[0228]
jak2：carna08-04514cbs-0374h
[0229]
jak3：carna08-04619cbs-0798b
[0230]
atp(10mm)：cst9804
[0231]
dtt：100mm
[0232]
mgcl2：1m
[0233]
mncl2：1m
[0234]
htrfkinase-tkkit(htrf酪氨酸激酶试剂盒)：cis-bio62tk0pec
[0235]
htrf96welllowvolumeplate(htrf96孔微量检测板)：cis-bio66pl96100
[0236]
2.测试条件
[0237]
jak1：0.32ng/μl，atp4μm，底物1μm，时间4h
[0238]
jak2：0.008ng/μl，atp4μm，底物1μm，时间2h
[0239]
jak3：0.1ng/μl，atp3μm，底物1μm，时间3h
[0240]
3.jak1激酶活性测试
[0241]
3.1试剂配制
[0242]
1)1
×
激酶缓冲液配制：将5
×
激酶缓冲液用无菌水稀释至1
×
激酶缓冲液，然后加
入5mm mgcl2、1mm mncl2和1mm dtt；
[0243]
2)5
×
jak1配制：jak1浓度为160ng/μl，配置为终浓度的5
×
即1.6ng/μl，稀释100倍；
[0244]
3)5
×
atp配制：4μm的atp，配置为其5
×
即20μm，由10mm的atp直接稀释500倍就是所需的atp浓度；
[0245]
4)5
×
底物配制：1μm的5
×
即5μm，底物浓度为500μm，稀释100
×
即为5μm的底物；
[0246]
5)2.5
×
化合物配制：化合物缓冲液浓度为10mm，处理浓度为10μm起始，先配制为100
×
的缓冲液，即1mm，由10mm稀释10
×
，然后1：3梯度稀释，共10个浓度；稀释后的化合物取2μl至78μl的1
×
激酶缓冲液中即为2.5
×
的化合物，在阳性对照组和空白对照组中加入2μl二甲基亚砜(dmso)；
[0247]
6)1μm的streptavidin-xl665配制：streptavidin-xl665的浓度为16.67μm，使用检测缓冲液稀释16.67倍即可；
[0248]
7)1
×
tk-antibody配制：tk-antibody储存液为100
×
的溶液，使用时用检测缓冲液稀释至1
×
即可。
[0249]
3.2测试方法
[0250]
1)在htrf 96孔微量检测板中，加入4μl上述2.5
×
的化合物，随后在孔的一侧加入2μl 5
×
底物，在孔的另一侧加入2μl 5
×
jak1，在空白对照组中加入2μl 1
×
激酶缓冲液；
[0251]
2)将板用封板膜封起来，放入离心机，1000rpm离心2分钟；
[0252]
3)在每孔中加入2μl 5
×
atp，封上封板膜，1000rpm离心1分钟，将板放至30℃培养箱中孵育4h；
[0253]
4)孵育结束，将上述streptavidin-xl665和1
×
tk-antibody按1：1混合，每孔加入10μl，1000rpm离心1分钟；
[0254]
5)将板放回培养箱继续孵育1h，孵育结束后在多功能酶标仪上读取htrf665/620信号。
[0255]
4.jak2激酶活性测试
[0256]
4.1试剂配制
[0257]
1)1
×
激酶缓冲液配制：将5
×
激酶缓冲液用无菌水稀释至1
×
激酶缓冲液，然后加入5mm mgcl2和1mm dtt；
[0258]
2)5
×
jak2配制：jak2浓度为166ng/μl，配置为终浓度的5
×
即0.04ng/μl，先稀释为1.66ng/μl，然后由1.66ng/μl稀释41.5倍，配置为0.04ng/μl；
[0259]
3)5
×
atp配制：4μm的atp，配置为其5
×
即20μm，由10mm的atp直接稀释500倍就是所需的atp浓度；
[0260]
4)5
×
底物配制：1μm的5
×
即5μm，底物浓度为500μm，稀释100
×
即为5μm的底物；
[0261]
5)2.5
×
化合物配制：化合物缓冲液浓度为10mm，处理浓度为10μm起始，先配制为100
×
的缓冲液，即1mm，由10mm稀释10
×
，然后1：3梯度稀释，共10个浓度；稀释后的化合物取2μl至78μl的1
×
激酶缓冲液中即为2.5
×
的化合物，在阳性对照组和空白对照组中加入2μl二甲基亚砜(dmso)；
[0262]
6)1μm的streptavidin-xl665配制：streptavidin-xl665的浓度为16.67μm，使用检测缓冲液稀释16.67倍即可；
[0263]
7)1
×
tk-antibody配制：tk-antibody储存液为100
×
的溶液，使用时用检测缓冲液稀释至1
×
即可。
[0264]
4.2测试方法
[0265]
1)在htrf 96孔微量检测板中，加入4μl上述2.5
×
的化合物，随后在孔的一侧加入2μl 5
×
底物，在板的另一侧加入2μl 5
×
jak2，在空白对照组中加入2μl 1
×
激酶缓冲液；
[0266]
2)将板用封板膜封起来，放入离心机，1000rpm离心2分钟；
[0267]
3)在每孔中加入2μl 5
×
atp，封上封板膜，1000rpm离心1分钟，将板放至30℃培养箱中孵育2h；
[0268]
4)孵育结束，将上述streptavidin-xl665和1
×
tk-antibody按1：1混合，每孔加入10μl，1000rpm离心1分钟；
[0269]
5)将板放回培养箱继续孵育1h，孵育结束后在多功能酶标仪上读取htrf665/620信号。
[0270]
5.jak3激酶活性测试
[0271]
5.1试剂配制
[0272]
1)1
×
激酶缓冲液配制：将5
×
激酶缓冲液用无菌水稀释至1
×
激酶缓冲液，然后加入5mm mgcl2和1mm dtt；
[0273]
2)5
×
jak3配制：jak3浓度为124ng/μl，配置为终浓度的5
×
即0.5ng/μl，稀释248倍就是所需要的浓度；
[0274]
3)5
×
atp配制：3μm的atp，配置为其5
×
即15μm，由10mm的atp直接稀释666.67倍就是所需的atp浓度；
[0275]
4)5
×
底物配制：1μm的5
×
即5μm，底物浓度为500μm，稀释100
×
即为5μm的底物；
[0276]
5)2.5
×
化合物配制：化合物缓冲液浓度为10mm，处理浓度为10μm起始，先配制为100
×
的缓冲液，即1mm，由10mm稀释10
×
，然后1：3梯度稀释，共10个浓度；稀释后的化合物取2μl至78μl的1
×
激酶缓冲液中即为2.5
×
的化合物，在阳性对照组和空白对照组中加入2μl二甲基亚砜(dmso)；
[0277]
6)1μm的streptavidin-xl665配制：streptavidin-xl665的浓度为16.67μm，使用时用检测缓冲液稀释16.67倍即可；
[0278]
7)1
×
tk-antibody配制：tk-antibody储存液为100
×
的溶液，使用时用检测缓冲液稀释至1
×
即可。
[0279]
5.2测试方法
[0280]
1)在htrf 96孔微量检测板中，加入4μl上述2.5
×
的化合物，随后在孔的一侧加入2μl 5
×
底物，在板的另一侧加入2μl 5
×
jak3，在空白组中加入2μl 1
×
激酶缓冲液；
[0281]
2)将板用封板膜封起来，放入离心机，1000rpm离心2分钟；
[0282]
3)在每孔中加入2μl 5
×
atp，封上封板膜，1000rpm离心1分钟，将板放至30℃培养箱中孵育3h；
[0283]
4)孵育结束，将上述streptavidin-xl665和1
×
tk-antibody按1：1混合，每孔加入10μl，1000rpm离心1分钟；
[0284]
5)将板放回培养箱继续孵育1h，孵育结束后在多功能酶标仪上读取htrf665/620信号。
[0285]
本发明化合物对jak 1、jak 2和jak 3激酶抑制活性通过以上的试验进行测定，测得的ic50值见下表1。
[0286]
表1本发明化合物对jak 1、jak 2和jak 3激酶的活性抑制的ic50
[0287]
[0288][0289]
由表1可知，与已知对照药物(filgotinib)相比，本发明化合物具有良好的jak1、jak2或jak3激酶抑制活性，并且本发明化合物对jak1、jak2或jak3激酶具有明显的选择性。
[0290]
实施例28：药代动力学测试
[0291]
1.实验动物
[0292]
健康雄性c57小鼠3只，购自上海中英sippr/bklab动物有限公司，周龄为6－8周。
[0293]
2.实验方法
[0294]
小鼠口服给药前禁食过夜，给药后4小时恢复供食，自由饮水。按10mg化合物/kg体重，给小鼠灌胃给药10mg/kg(10ml/kg)，采用小鼠面静脉半连续法取血方式，采集全血样品；于受试动物给药后0.125h，0.25h，0.5h，1h，2h，4h，8h和24h分别采血约30μl，置于内含抗凝剂肝素钠的试管内，放置冰上直到离心，15min内，于6-8℃离心机以6800g离心6min，在血液采集/离心的1小时内将血浆转移到适当标记的试管中，并在-80℃左右冷冻保存。
[0295]
3.色谱和质谱条件
[0296]
色谱柱为omegaacquity uplc beh c18(2.1
×
50mm，1.7μm)；流动相a：h2o-0.1％fa，流动相b：acn-0.1％fa，流速：0.80ml/min，梯度洗脱程序：起始，10％b；0.6min，10％b；1.0min，90％b；1.11min，90％b；1.40min，10％b；柱温：40℃，进样量为2μl；
[0297]
质谱方法：lc-ms/ms-19(tq5500)(sciex，usa)，离子源为esi源，检测方式正离子检测，扫描方式为多反应监测(mrm)方式，m/z：271.10/172.00da(甲苯磺丁脲，内标)。
[0298]
4.血浆样品制备
[0299]
取样品10μl血浆样品加内标工作液(甲苯磺丁脲，100ng/ml)200μl，涡旋1min，18000g离心10min，将200μl上清液转移到96孔微量检测板上，取1μl上清液注入lc-ms/ms分析。
[0300]
5.结果分析
[0301]
使用phoenix winnonlin 7.0软件计算药代动力学(pk)参数，通过非房室模型估算得到小鼠口服药代动力学参数，包括auc，cmax，tmax，t1/2等，代表化合物15和
filgotinib小鼠口服药代动力学参数结果参见表2。
[0302]
表2本发明化合物的口服药代动力学参数
[0303][0304]
由表2可知，与已知对照药物(filgotinib)相比，单位剂量的本发明化合物15具有更高的系统暴露量(auc)。
[0305]
以上详细描述了本技术的优选实施方式，但是，本技术并不限于上述实施方式中的具体细节，在本技术的技术构思范围内，可以对本技术的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本技术的保护范围。
[0306]
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本技术对各种可能的组合方式不再另行说明。
[0307]
此外，本技术的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本技术的思想，其同样应当视为本技术所公开的内容。

技术特征：
1.通式(i)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐：其中，x选自-ch或n；y选自氢或卤素，n为1或2；ar选自其中m为1-4的整数；w1选自w2选自r选自氢、c
1-c6烷基、c
1-c6的烷氧基或卤素；z1、z2和z3各自独立地选自-c(r3r4)-、-s(o)
2-、-s(o)-、-ch(s(o)2r
′
)-或-ch(s(o)2nr
′
r
″
)-；r1和r2各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基；r
′
和r
″
各自独立地选自取代或未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2；r3和r4各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基。2.如权利要求1所述的通式(i)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，其特征在于，具有通式(ii)所示的结构：
其中，x选自-ch或n；y选自氢或卤素，n为1或2；m为1-4的整数；w1选自r选自氢、c
1-c6烷基、c
1-c6的烷氧基或卤素；z1、z2和z3各自独立地选自-c(r3r4)-、-s(o)
2-、-s(o)-、-ch(s(o)2r
′
)-或-ch(s(o)2nr
′
r
″
)-，且当y为氢时，z2不为-s(o)
2-；r
′
和r
″
各自独立地选自取代或未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2；r3和r4各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基。3.如权利要求1所述的通式(i)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，其特征在于，具有通式(iii)所示的结构：其中，x选自-ch或n；y选自氢或卤素，n为1或2；w2选自
r1和r2各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基；r
′
选自取代或未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2。4.如权利要求2所述的通式(ii)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，其特征在于，具有通式(ⅳ)所示的结构：其中，x选自-ch或n；y选自氢或卤素，n为1或2；m为1-4的整数；r选自氢、c
1-c6烷基、c
1-c6的烷氧基或卤素；z1选自-c(r3r4)-、-s(o)
2-、-s(o)-、-ch(s(o)2r
′
)-或-ch(s(o)2nr
′
r
″
)-；r
′
和r
″
各自独立地选自取代或未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2；r3和r4各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基。5.如权利要求2所述的通式(ii)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，其特征在于，具有通式(
ⅴ
)所示的结构：其中，x选自-ch或n；y选自氢或卤素，n为1或2；
m为1-4的整数；r选自氢、c
1-c6烷基、c
1-c6的烷氧基或卤素；z2选自-c(r3r4)-、-s(o)
2-、-s(o)-、-ch(s(o)2r
′
)-或-ch(s(o)2nr
′
r
″
)-，且当y为氢时，z2不为-s(o)
2-；r
′
和r
″
各自独立地选自取代或未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2；r3和r4各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基。6.如权利要求2所述的通式(ii)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，其特征在于，具有通式(ⅵ)所示的结构：其中，x选自-ch或n；y选自氢或卤素，n为1或2；m为1-4的整数；r选自氢、c
1-c6烷基、c
1-c6的烷氧基或卤素；z3选自-c(r3r4)-、-s(o)
2-、-s(o)-、-ch(s(o)2r
′
)-或-ch(s(o)2nr
′
r
″
)-；r
′
和r
″
各自独立地选自取代或未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2；r3和r4各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基。7.如权利要求3所述的通式(iii)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，其特征在于，具有通式(ⅶ)所示的结构：
其中，x选自-ch或n；y选自氢或卤素，n为1或2；r1和r2各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基。8.如权利要求3所述的通式(iii)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，其特征在于，具有通式(
ⅷ
)所示的结构：其中，x选自-ch或n；y选自氢或卤素，n为1或2；r
′
选自取代或未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2。9.如权利要求1-8中任一项权利要求所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，其特征在于，y选自h或f。10.如权利要求1-9中任一项权利要求所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，其特征在于，通式中的选自选自11.如权利要求4所述的通式(ⅳ)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，其特
征在于，z1选自-ch(so2r
′
)-，r
′
选自未取代的c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基；r选自氢、甲基、甲氧基或卤素。12.如权利要求5所述的通式(v)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，其特征在于，y为h时，z2选自-cr3r
4-或-ch(s(o)2r
′
)-，其中，r3和r4各自独立地选自氢、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基或c
3-c7环烷基，r
′
选自c
1-c6烷基或c
3-c7环烷基，r选自氢、甲基、甲氧基或卤素；y为卤素时，z2选自-so
2-，r选自氢、甲基、甲氧基或卤素。13.如权利要求6所述的通式(ⅵ)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，其特征在于，z3选自-so
2-或-s(o)-；r选自氢、甲基、甲氧基或卤素。14.如权利要求7所述的通式(ⅶ)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，其特征在于，r1和r2各自独立地选自氢、氟、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、三氟甲基、环丙基或环戊基。15.如权利要求8所述的通式(
ⅷ
)所示的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，其特征在于，r
′
选自取代或未取代的甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、异戊基、环丙基、环戊基，所述取代基选自下列基团组成的组：卤素、c
1-c6烷氧基、c
1-c6烷硫基、c
3-c7环烷基、羟基、氨基、nhc
1-c6烷基和n(c
1-c6烷基)2。16.下式所示化合物或其立体异构体，或其可药用盐：
17.下式所示化合物或其立体异构体，或其可药用盐：18.一种药物组合物，其特征在于，包括治疗有效量的根据权利要求1-17中任一项所述
的化合物或其立体异构体或其可药用盐成分，以及药学上可接受的载体。19.权利要求1-17中任一项所述的化合物或其立体异构体，或其可药用盐，或者权利要求18所述的药物组合物在制备用于治疗jak信号通路异常的相关疾病的药物中的用途。20.如权利要求19所述的用途，其特征在于，所述疾病为自身免疫疾病；优选地，所述自身免疫疾病选自类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎、特应性皮炎或系统性红斑狼疮。21.如权利要求19所述的用途，其特征在于，所述疾病为骨髓增殖性肿瘤类疾病；优选地，所述骨髓增殖性肿瘤类疾病选自原发性血小板增多症、真性红细胞增多症或原发性骨髓纤维化疾病。

技术总结
本发明涉及药物化学领域，具体涉及一种如式(I)所示的含环丙酰胺化合物及其应用。该含环丙酰胺化合物对于自身免疫疾病和骨髓增殖性肿瘤类疾病具有很大的医疗价值和市场潜力。性肿瘤类疾病具有很大的医疗价值和市场潜力。性肿瘤类疾病具有很大的医疗价值和市场潜力。


技术研发人员：王彤 郝岩 徐余冬 余强 丁炬平 王永圣 陈彬 赵家宏
受保护的技术使用者：盛世泰科生物医药技术（苏州）有限公司
技术研发日：2022.01.18
技术公布日：2023/7/31