一种放射性诊断药物配体的制备方法与流程

1.本发明涉及一种有机合成技术领域，尤其涉及一种放射性诊断药物配体的制备方法。


背景技术：

2.前列腺癌是男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤，已居全球癌症发病第4位。在世界范围内，中国属于前列腺癌发病率相对较低的地区，但近几年发病率的绝对数值呈现快速升高的趋势，已成为严重威胁我国人群健康的泌尿系统恶性肿瘤。
3.psma是一种高表达于前列腺癌及肿瘤新生血管内皮细胞的ⅱ型跨膜蛋白，在去势治疗和化疗后进展或复发的转移性前列腺癌的这类治疗前，需用显像性放射性核素(68ga,18f,64cu)标记的psma-pet显像预先探查证实患者的病灶有psma高表达。小分子抑制剂psma-11，药效基团是谷氨酸脲-赖氨酸(gul)结构，以hbed-cc(n,n
′‑
双[2-羟基-5-(羟乙基)苄基]乙二胺-n,n
′‑
二乙酸)作为偶联剂，该偶联剂表现出了较dota更好的亲水性、热稳定性，室温下就可以与psma快速反应并稳定存在。
[0004]
目前，大多数制备方法采用h-glu(otbu)-otbu为起始原料制备psmai-11，具体过程是该药物以h-glu(otbu)-otbu通过三光气先形成异氰酸酯中间体，然后与固定到二氯树脂的fmoc-lys(aloc)-oh以脲基形式结合，经过连续切割脱保护、偶联后与螯合剂hebd亲核取代制备纯化得到psma-11。
[0005]
但现有技术中最后两步为液相法，合成方法生产时间长，采用固液相结合的方式降低了药物合成的效率；且固液结合生产的方式检测不方便，中控反应时需要多次通过切割裂解树脂再结合lc-ms中控反应，操作不方便。为解决现有技术中存在的问题，需要制备一种全固相合成psma-11的合成方法，来改善药物合成的效率。


技术实现要素：

[0006]
本发明克服了现有技术的不足，提供一种放射性诊断药物配体的制备方法。
[0007]
为达到上述目的，本发明采用的技术方案为：一种放射性诊断药物配体的制备方法，包括：
[0008]
s1、将2-氯树脂与二氯甲烷溶胀冷却形成混合溶液，另取fmoc-lys(aloc)-oh、二氯甲烷与碱配成溶液后加入所述混合溶液中，继续加入碱和甲醇进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物1；
[0009]
s2、将树脂化合物1加入哌啶dmf溶液反应，茚三酮显色为蓝色后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物2；
[0010]
s3、将h-glu(otbu)-otbu.hcl和碱溶于二氯甲烷降温，加入triphosgene溶液和树脂化合物2进行反应后加入甲醇抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物3；
[0011]
s4、将树脂化合物3、钯催化剂和吗啡啉加至非质子溶剂中进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物4；
[0012]
s5、将树脂化合物4、fmoc-6-ahx-oh和hbtu混合并加入dmf，加入碱进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物5；
[0013]
s6、将树脂化合物5加入哌啶dmf溶液，茚三酮显色为蓝色后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物6；
[0014]
s7、将树脂化合物6、hbe和hbtu混合并加入dmf，加入碱后进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物7；
[0015]
s8、在树脂化合物7中滴加tfa溶液进行反应后抽滤并淋洗滤饼，滤液旋蒸浓缩得到浓缩液；将所述浓缩液滴加至冷乙醚中离心得到粗肽；制备色谱分离并冷冻干燥后得到产品psma-11。
[0016]
本发明一个较佳实施例中，在所述s1-s7中，所述碱是无机碱，为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸铯中的一种。
[0017]
本发明一个较佳实施例中，在所述s1-s7中，所述碱是有机碱，为三乙胺、三甲胺、二异丙基乙胺、吡啶、4-n,n-二甲基吡啶、叔丁醇钾、甲醇钠、乙醇钠中的一种。
[0018]
本发明一个较佳实施例中，在所述s4中，所述钯催化剂为四三苯基膦钯。
[0019]
本发明一个较佳实施例中，在所述s4中，所述非质子溶剂为ch2cl2、chcl3、ccl4、1,2-二氯乙烷、1,2-二溴乙烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、乙醚、1,4-二氧六环、乙腈、石油醚、正己烷、甲苯、二氯甲烷、二甲亚砜、n,n二甲基甲酰胺中的一种或多种。
[0020]
本发明一个较佳实施例中，在所述s1-s7中，抽滤时选用dmf和dcm来洗涤滤饼。
[0021]
本发明一个较佳实施例中，在所述s8中，抽滤时选用tfa来淋洗滤饼。
[0022]
本发明一个较佳实施例中，在所述s3中，triphosgene溶液为溶于二氯甲烷的triphosgene，二氯甲烷与triphosgene的料液比为20～50：1,降温温度为-60℃～-100℃。
[0023]
本发明一个较佳实施例中，在所述s1中，溶胀冷却温度为0
±
5℃。
[0024]
本发明一个较佳实施例中，在所述s8中，制备色谱分离使用0.1％tfa水溶液和0.1％tfa乙腈溶液，添加树脂化合物7的控制温度为0
±
5℃，冷冻干燥的控制时长为72～96h。
[0025]
本发明解决了背景技术中存在的缺陷，本发明具备以下有益效果：
[0026]
(1)本发明提供了一种放射性诊断药物配体的制备方法，公开了一种全固相合成psma-11的合成方法，设计出了诊疗一体化药物的全新合成技术路线，解决了现有技术中采用固液相结合方式会降低药物合成效率的问题；本发明缩短了生产时间，提高了药物合成的效率，同时也提高了药物产率。
[0027]
(2)本发明中该药物分子的工艺合成采用全新的多肽合成技术，采用全固相树脂合成的方式，简化了现有技术中采用固液结合生产方式导致的中控反应时需要多次通过切割裂解树脂再结合lc-ms中控反应的繁琐步骤，改善了药物合成的效率，提高了最终药物合成的产率，为后期工业化生产及临床样品的生产提供有力保障。
附图说明
[0028]
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明中记载的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，
还可以根据这些附图获得其他的附图；
[0029]
图1是本发明的优选实施例的制备流程图。
具体实施方式
[0030]
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0031]
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其他方式来实施，因此，本发明的保护范围并不受下面公开的具体实施例的限制。在本发明创造的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。
[0032]
如图1所示，一种放射性诊断药物配体的制备方法的制备流程图，包括：
[0033]
s1、将2-氯树脂与二氯甲烷溶胀冷却形成混合溶液，另取fmoc-lys(aloc)-oh、二氯甲烷与碱配成溶液后加入混合溶液中，继续加入碱和甲醇进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物1；
[0034]
s2、将树脂化合物1加入哌啶dmf溶液反应，茚三酮显色为蓝色后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物2；
[0035]
s3、将h-glu(otbu)-otbu.hcl和碱溶于二氯甲烷降温，加入triphosgene溶液和树脂化合物2进行反应后加入甲醇抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物3；
[0036]
s4、将树脂化合物3、钯催化剂和吗啡啉加至非质子溶剂中进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物4；
[0037]
s5、将树脂化合物4、fmoc-6-ahx-oh和hbtu混合并加入dmf，加入碱进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物5；
[0038]
s6、将树脂化合物5加入哌啶dmf溶液，茚三酮显色为蓝色后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物6；
[0039]
s7、将树脂化合物6、hbe和hbtu混合并加入dmf，加入碱后进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物7；
[0040]
s8、在树脂化合物7中滴加tfa溶液进行反应后抽滤并淋洗滤饼，滤液旋蒸浓缩得到浓缩液；将浓缩液滴加至冷乙醚中离心得到粗肽；制备色谱分离并冷冻干燥后得到产品psma-11。
[0041]
本发明提供了一种放射性诊断药物配体的制备方法，公开了一种全固相合成psma-11的合成方法，设计出了诊疗一体化药物的全新合成技术路线，解决了现有技术中采用固液相结合方式会降低药物合成效率的问题；本发明缩短了生产时间，提高了药物合成的效率，同时也提高了药物产率。
[0042]
需要说明的是，在s1-s7中，碱若是无机碱，则为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸铯中的一种；在s1-s7中，碱若是有机碱，则为三乙胺、三甲胺、二异丙基乙胺、吡啶、4-n,n-二甲基吡啶、叔丁醇钾、甲醇钠、乙醇钠中的一种。
[0043]
在s4中，钯催化剂为四三苯基膦钯；非质子溶剂为ch2cl2、chcl3、ccl4、1,2-二氯
乙烷、1,2-二溴乙烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、乙醚、1,4-二氧六环、乙腈、石油醚、正己烷、甲苯、二氯甲烷、二甲亚砜、n,n二甲基甲酰胺中的一种或多种。
[0044]
在s1-s7中，抽滤时选用dmf和dcm来洗涤滤饼；在s8中，抽滤时选用tfa来淋洗滤饼。
[0045]
在s1中，取5～50g的2-氯树脂与50～100ml二氯甲烷溶胀冷却形成混合溶液，取质量为1～10g的fmoc-lys(aloc)-oh、与60～80ml二氯甲烷配成溶液并缓慢加入5～20ml碱，滴加至上述混合溶液中，于0～30min滴加完毕后继续反应3～4h；然后加入5～10ml碱和10～30ml甲醇反应20～30min。需要说明的是，溶胀冷却温度为0
±
5℃。
[0046]
在s2中，具体步骤为将树脂化合物1加入50～200ml哌啶dmf溶液，溶液浓度为80％～150％，并在室温下反应40～50min。
[0047]
在s3中，称取质量为5～10g的h-glu(otbu)-otbu.hcl和5～20ml的碱溶于150～300ml的二氯甲烷中进行降温，降温温度控制在-60℃～-100℃；同时滴加triphosgene溶液；triphosgene溶液为溶于二氯甲烷的triphosgene，二氯甲烷与triphosgene的料液比为20～50：1；50～60min滴加完毕后于-40℃～-80℃下保温10～60min，然后自然升温，升至室温继续搅拌反应1.5～2h，然后加入树脂化合物2，继续室温反应16～18h。
[0048]
在s4中，需要说明的是，加入的钯催化剂的质量为1～5g，并向非质子溶剂中滴加10～20ml吗啡啉，于室温搅拌反应4～4.5h。
[0049]
在s5中，需要说明的是，加入的fmoc-6-ahx-oh与hbtu的质量比为1:1～2，下一步加入100～150mldmf后在室温下滴加2～10ml碱，于20～30min滴加完毕，接着继续室温反应1.5～2h。
[0050]
在s6中，具体步骤为将树脂化合物5加入50～200ml哌啶dmf溶液，溶液浓度为80％～150％，并在室温反应时长为40～50min。
[0051]
在s7中，加入的hbed与hbtu的质量比为1:0.5～1,接着加入100～150mldmf后于0～10℃再次滴加2～10ml碱，于20～30min滴加完毕，接着继续搅拌反应2.5～3h。
[0052]
在s8中，于0
±
5℃下将树脂化合物7滴加至200～400ml的tfa溶液中，溶液浓度为67％～105％，滴加完毕后保温反应50～60min，然后升至室温继续搅拌反应2～3h。
[0053]
在s8中，将浓缩液缓慢滴加分散至700～1000ml冷乙醚后离心得到粗肽；需要说明的是，制备色谱分离使用0.1％tfa水溶液和0.1％tfa乙腈溶液，添加树脂化合物7的控制温度为0
±
5℃，冷冻干燥的控制时长为72～96h。
[0054]
本发明中该药物分子的工艺合成采用全新的多肽合成技术，采用全固相树脂合成的方式，简化了现有技术中采用固液结合生产方式导致的中控反应时需要多次通过切割裂解树脂再结合lc-ms中控反应的繁琐步骤，改善了药物合成的效率，提高了最终药物合成的产率，为后期工业化生产及临床样品的生产提供有力保障。
[0055]
本发明在制备时，首先将2-氯树脂与二氯甲烷溶胀冷却形成混合溶液，另取fmoc-lys(aloc)-oh、二氯甲烷与碱配成溶液后加入混合溶液中，继续加入碱和甲醇进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物1；然后将树脂化合物1加入哌啶dmf溶液反应，茚三酮显色为蓝色后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物2；
[0056]
下一步将h-glu(otbu)-otbu.hcl和碱溶于二氯甲烷降温，加入triphosgene溶液和树脂化合物2进行反应后加入甲醇抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物3；然后将树脂
化合物3、钯催化剂和吗啡啉加至非质子溶剂中进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物4；然后将树脂化合物4、fmoc-6-ahx-oh和hbtu混合并加入dmf，加入碱进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物5；
[0057]
接着将树脂化合物5加入哌啶dmf溶液，茚三酮显色为蓝色后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物6；然后将树脂化合物6、hbe和hbtu混合并加入dmf，加入碱后进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物7；
[0058]
最后在树脂化合物7中滴加tfa溶液进行反应后抽滤并淋洗滤饼，滤液旋蒸浓缩得到浓缩液；将浓缩液滴加至冷乙醚中离心得到粗肽；制备色谱分离并冷冻干燥后得到产品psma-11。
[0059]
实施例1
[0060]
s1、树脂化合物resin-1的制备：
[0061]
将2-氯树脂10g与60ml二氯甲烷混合后溶胀冷却至0℃；另取fmoc-lys(aloc)-oh 5.5g与80ml二氯甲烷60ml混合，缓慢加入碱8ml配成溶液，滴加至上述溶液中，25min滴加完毕，继续反应4h；然后加入8.8ml碱、20ml甲醇反应30min；反应结束后抽滤，滤饼用dmf3*80ml、dcm3*80ml洗涤，干燥得到树脂化合物1。
[0062]
s2、树脂化合物resin-2的制备：
[0063]
将树脂化合物1加入100ml20％哌啶dmf溶液，室温反应45min后，茚三酮显色为蓝色后，抽滤，滤饼用dmf3*80ml、dcm3*80ml洗涤，干燥得到树脂化合物2。
[0064]
s3、树脂化合物resin-3的制备：
[0065]
称取h-glu(otbu)-otbu.hcl 7.3g，碱12ml溶于200ml二氯甲烷，降温至-78℃，开始滴加溶于100ml二氯甲烷的triphosgene 2.5g，60min滴加完毕，滴加完毕后于-60℃下保温30min，然后自然升温，升至室温继续搅拌反应1.5h，然后加入树脂化合物2，继续室温反应17h；反应结束后，加入60ml甲醇，抽滤，滤饼用dmf3*80ml、dcm3*80ml洗涤，干燥得到树脂化合物3。
[0066]
s4、树脂化合物resin-4的制备：
[0067]
将树脂化合物3与钯催化剂2.2g加入到非质子溶剂中，滴加加入吗啡啉12ml，于室温搅拌反应4.5h；反应结束，抽滤，滤饼用dmf3*80ml、dcm3*80ml洗涤，干燥得到树脂化合物4。
[0068]
s5、树脂化合物resin-5的制备：
[0069]
将树脂化合物4与10.5g fmoc-6-ahx-oh以及11.4ghbtu混合，并加入dmf120ml，然后于室温下滴加碱5.8ml，30min滴加完毕，接着继续室温反应2h；反应结束，抽滤，滤饼用dmf3*80ml、dcm3*80ml洗涤，干燥得到树脂化合物5。
[0070]
s6、树脂化合物resin-6的制备：
[0071]
将树脂化合物5加入100ml20％哌啶dmf溶液，室温反应45min后，茚三酮显色为蓝色后，抽滤，滤饼用dmf3*80ml、dcm3*80ml洗涤，干燥得到树脂化合物6。
[0072]
s7、树脂化合物resin-7的制备：
[0073]
将树脂化合物6、hbed 5g、hbtu 3.8g，并加入dmf150ml，然后于5℃滴加碱2ml，25min滴加完毕，接着继续搅拌反应3h；反应结束，抽滤，滤饼用dmf3*80ml、dcm3*80ml洗涤，干燥得到树脂化合物7。
[0074]
s8、合成psma-11：
[0075]
将树脂化合物7于0℃下滴加355ml的95％tfa溶液，滴加完毕后保温反应60min，然后升至室温继续搅拌反应2.5h；反应结束，抽滤，滤饼用40mltfa淋洗，滤液旋蒸浓缩得到浓缩液，将浓缩液缓慢滴加分散至800ml冷乙醚中，离心得到粗肽；制备色谱分离(0.1％tfa水溶液，0.1％tfa乙腈溶液)，冷冻干燥90h，得到产品2.2gpsma-11。
[0076]
以上依据本发明的理想实施例为启示，通过上述的说明内容，相关人员完全可以在不偏离本项发明技术思想的范围内，进行多样的变更以及修改。本项发明的技术性范围并不局限于说明书上的内容，必须要根据权利要求范围来确定技术性范围。

技术特征：
1.一种放射性诊断药物配体的制备方法，其特征在于，包括：s1、将2-氯树脂与二氯甲烷溶胀冷却形成混合溶液，另取fmoc-lys(aloc)-oh、二氯甲烷与碱配成溶液后加入所述混合溶液中，继续加入碱和甲醇进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物1；s2、将树脂化合物1加入哌啶dmf溶液反应，茚三酮显色为蓝色后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物2；s3、将h-glu(otbu)-otbu.hcl和碱溶于二氯甲烷降温，加入triphosgene溶液和树脂化合物2进行反应后加入甲醇抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物3；s4、将树脂化合物3、钯催化剂和吗啡啉加至非质子溶剂中进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物4；s5、将树脂化合物4、fmoc-6-ahx-oh和hbtu混合并加入dmf，加入碱进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物5；s6、将树脂化合物5加入哌啶dmf溶液，茚三酮显色为蓝色后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物6；s7、将树脂化合物6、hbe和hbtu混合并加入dmf，加入碱后进行反应后抽滤并洗涤滤饼，干燥得到树脂化合物7；s8、在树脂化合物7中滴加tfa溶液进行反应后抽滤并淋洗滤饼，滤液旋蒸浓缩得到浓缩液；将所述浓缩液滴加至冷乙醚中离心得到粗肽；制备色谱分离并冷冻干燥后得到产品psma-11。2.根据权利要求1所述的一种放射性诊断药物配体的制备方法，其特征在于：在所述s1-s7中，所述碱是无机碱，为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸铯中的一种。3.根据权利要求1所述的一种放射性诊断药物配体的制备方法，其特征在于：在所述s1-s7中，所述碱是有机碱，为三乙胺、三甲胺、二异丙基乙胺、吡啶、4-n,n-二甲基吡啶、叔丁醇钾、甲醇钠、乙醇钠中的一种。4.根据权利要求1所述的一种放射性诊断药物配体的制备方法，其特征在于：在所述s4中，所述钯催化剂为四三苯基膦钯。5.根据权利要求1所述的一种放射性诊断药物配体的制备方法，其特征在于：在所述s4中，所述非质子溶剂为ch2cl2、chcl3、ccl4、1,2-二氯乙烷、1,2-二溴乙烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、乙醚、1,4-二氧六环、乙腈、石油醚、正己烷、甲苯、二氯甲烷、二甲亚砜、n,n二甲基甲酰胺中的一种或多种。6.根据权利要求1所述的一种放射性诊断药物配体的制备方法，其特征在于：在所述s1-s7中，抽滤时选用dmf和dcm来洗涤滤饼。7.根据权利要求1所述的一种放射性诊断药物配体的制备方法，其特征在于：在所述s8中，抽滤时选用tfa来淋洗滤饼。8.根据权利要求1所述的一种放射性诊断药物配体的制备方法，其特征在于：在所述s3中，triphosgene溶液为溶于二氯甲烷的triphosgene，二氯甲烷与triphosgene的料液比为20～50：1,降温温度为-60℃～-100℃。9.根据权利要求1所述的一种放射性诊断药物配体的制备方法，其特征在于：在所述s1
中，溶胀冷却温度为0
±
5℃。10.根据权利要求1所述的一种放射性诊断药物配体的制备方法，其特征在于：在所述s8中，制备色谱分离使用0.1％tfa水溶液和0.1％tfa乙腈溶液，添加树脂化合物7的控制温度为0
±
5℃，冷冻干燥的控制时长为72～96h。

技术总结
本发明公开了一种放射性诊断药物配体的制备方法，包括：本发明通过SPPS固相合成法分别连接氨基酸序列H-Glu(OtBu)-OtBu.HCl、Fmoc-Lys(Aloc)-OH、Fmoc-6-Ahx-OH，然后脱除Fmoc，与HBED偶联反应缩合，切割去保护后得到产品PSMA-11。本发明提供了一种放射性诊断药物配体的制备方法，公开了一种全固相合成PSMA-11的合成方法，设计出了诊疗一体化药物的全新合成技术路线，该药物分子的工艺合成采用全新的多肽合成技术，采用全固相树脂合成的方式，改善了药物合成的效率，提高了最终药物合成的产率，为后期工业化生产及临床样品的生产提供有力保障。产提供有力保障。产提供有力保障。


技术研发人员：朱凯波 吕思青 孙荣玉
受保护的技术使用者：江苏华益科技有限公司
技术研发日：2023.07.17
技术公布日：2023/10/20