西奥罗尼在抗胰腺癌中的用途的制作方法

1.本发明涉及药物应用领域，尤其涉及西奥罗尼在制备治疗胰腺癌的药物中的新用途。


背景技术：

2.胰腺癌是发生于胰腺外分泌腺的恶性肿瘤。胰腺恶性肿瘤可来自胰腺外分泌腺、内分泌腺或非上皮组织，其中95％为胰腺癌，该疾病预后最差，其发病率和死亡率很高。主要是使用药物、手术、放化疗等方法治疗疾病。胰腺癌的治疗仍以争取手术切除为主，对不能手术者常做姑息性短路手术、化学疗法和放射治疗。目前尚无有效的单个化疗药物或联合的化疗方案，可延长胰腺癌患者的生命或改善生活质量。常用化疗药物有吉西他滨、5-氟尿嘧啶、顺铂、泰素帝、草酸铂、阿瓦斯汀、卡培他滨等。
3.西奥罗尼是深圳微芯生物科技股份有限公司自主研发的具有完全知识产权的全新蛋白激酶抑制剂。西奥罗尼是以多蛋白激酶为靶点的小分子抗肿瘤靶向药物，通过对vegfr/pdgfr/c-kit、aurora b、csf-1r靶点的高选择抑制活性，具有抗肿瘤血管生成、抑制肿瘤细胞有丝分裂、调控肿瘤炎性微环境等三通路抗肿瘤协同作用机制，发挥综合抗肿瘤作用。与传统的vegfr类靶向抑制剂(如舒尼替尼/sunitinib、索拉菲尼/sorafenib等)相比，西奥罗尼对有丝分裂关键酶aurora b的抑制活性是其所特有的，具有潜在的降低肿瘤组织基因组不稳定性及抑制肿瘤细胞转移的作用。西奥罗尼通过抑制肿瘤血管生成、细胞有丝分裂和肿瘤炎性微环境三种互补的作用机制发挥抗肿瘤活性，同时其高靶标选择性也降低了因脱靶效应带来的副作用风险。
4.cn200910223861.5公开了西奥罗尼化合物，其具体公开了一种萘酰胺的衍生物、其制备方法及应用。该类化合物同时具有蛋白激酶抑制活性和组蛋白去乙酰化酶抑制活性，可以用于治疗与蛋白激酶活性异常或组蛋白去乙酰化酶活性异常相关的疾病，包括炎症、自身免疫性疾病、癌症、神经系统疾病和神经退化性疾病、心血管疾病、代谢病、过敏、哮喘以及与激素相关的疾病。
5.cn201610856945.2公开了西奥罗尼的非溶剂化晶体a、b、c及其制备方法，还涉及含有所述晶体的药物组合物，以及所述晶体在制备用于治疗与蛋白激酶活性异常或组蛋白去乙酰化酶活性异常相关的疾病的药物中的应用。
6.目前尚未有关于西奥罗尼单用或联用于治疗胰腺癌的研究和报道。


技术实现要素：

7.本发明的目的是提供西奥罗尼或其衍生物在制备用于预防和/或改善和/或治疗胰腺癌的药物中的用途。
8.上述用途中，所述西奥罗尼衍生物包括其可药用盐、非溶剂化晶体a、b或c。西奥罗尼的非溶剂化晶体a、b和c公开于cn201610856945.2中，其全文内容被引入本发明。
9.上述用途中，所述西奥罗尼或其衍生物单位剂量为5-100mg。优选为10-100mg。更
优选为25mg。
10.本发明还提供了西奥罗尼或其衍生物联合hdac抑制剂在制备用于预防和/或改善和/或治疗胰腺癌的药物中的用途。
11.上述用途中，所述西奥罗尼衍生物包括其可药用盐、非溶剂化晶体a、b或c。西奥罗尼的非溶剂化晶体a、b和c公开于cn201610856945.2中，其全文内容被引入本发明。
12.上述用途中，所述hdac抑制剂选自恩替诺特(entinostat)、伏立诺他
13.(vorinostat)、帕比司他(panobinostat)、莫西司他(mocetinostat)、贝利司他(belinostat)、普雷司他(pracinostat)、罗米地辛(romidepsin)、西达本胺(chidamide)，或其衍生物。
14.优选的，所述hdac抑制剂选自西达本胺或其衍生物。
15.上述用途中，所述西达本胺衍生物包括其可药用盐、对映异构体、晶型a或晶型b。cn201210489178.8公开了西达本胺的晶型a和晶型b，cn201410136761.x公开了西达本胺的对映异构体，它们被全文引入本发明中。
16.上述用途中，所述西奥罗尼或其衍生物的单位剂量为5-100mg。优选为10-100mg。更优选为25mg。
17.上述用途中，所述西达本胺或其衍生物的单位剂量为5-100mg。优选为5-60mg。更优选为5mg。
18.本发明还提供了西奥罗尼或其衍生物联合fak抑制剂在制备用于预防和/或改善和/或治疗胰腺癌的药物中的用途。
19.上述用途中，所述西奥罗尼衍生物包括其可药用盐、非溶剂化晶体a、b或c。西奥罗尼的非溶剂化晶体a、b和c公开于cn201610856945.2中，其全文内容被引入本发明。
20.上述用途中，所述fak抑制剂选自pnd1186、gsk-2256098、tae226、pf-562271、pf-431396、pf-04554878、bi-4464。优选的，所述fak抑制剂选自pnd1186。
21.上述用途中，所述西奥罗尼或其衍生物的单位剂量为5-100mg。优选为10-100mg。更优选为25mg。
22.上述用途中，所述pnd1186的单位剂量为10-200mg。优选为20-200mg。更优选为200mg。
23.本发明还提供了西奥罗尼或其衍生物用于预防和/或改善和/或治疗胰腺癌。
24.上述用途中，所述西奥罗尼衍生物包括其可药用盐、非溶剂化晶体a、b或c。西奥罗尼的非溶剂化晶体a、b和c公开于cn201610856945.2中，其全文内容被引入本发明。
25.上述用途中，所述西奥罗尼或其衍生物单位剂量为5-100mg。优选为10-100mg。更优选为25mg。
26.本发明还提供了西奥罗尼或其衍生物联合hdac抑制剂用于预防和/或改善和/或治疗胰腺癌。
27.上述用途中，所述西奥罗尼衍生物包括其可药用盐、非溶剂化晶体a、b或c。西奥罗尼的非溶剂化晶体a、b和c公开于cn201610856945.2中，其全文内容被引入本发明。
28.上述用途中，所述hdac抑制剂选自恩替诺特(entinostat)、伏立诺他
29.(vorinostat)、帕比司他(panobinostat)、莫西司他(mocetinostat)、贝利司他(belinostat)、普雷司他(pracinostat)、罗米地辛(romidepsin)、西达本胺(chidamide)，
或其衍生物。
30.优选的，所述hdac抑制剂选自西达本胺或其衍生物。
31.上述用途中，所述西达本胺衍生物包括其可药用盐、对映异构体、晶型a或晶型b。cn201210489178.8公开了西达本胺的晶型a和晶型b，cn201410136761.x公开了西达本胺的对映异构体，它们被全文引入本发明中。
32.上述用途中，所述西奥罗尼或其衍生物的单位剂量为5-100mg。优选为10-100mg。更优选为25mg。
33.上述用途中，所述西达本胺或其衍生物的单位剂量为5-100mg。优选为5-60mg。更优选为5mg。
34.本发明还提供了西奥罗尼或其衍生物联合fak抑制剂用于预防和/或改善和/或治疗胰腺癌。
35.上述用途中，所述西奥罗尼衍生物包括其可药用盐、非溶剂化晶体a、b或c。西奥罗尼的非溶剂化晶体a、b和c公开于cn201610856945.2中，其全文内容被引入本发明。
36.上述用途中，所述fak抑制剂选自pnd1186、gsk-2256098、tae226、pf-562271、pf-431396、pf-04554878、bi-4464。优选的，所述fak抑制剂选自pnd1186。
37.上述用途中，所述西奥罗尼或其衍生物的单位剂量为5-100mg。优选为10-100mg。更优选为25mg。
38.上述用途中，所述pnd1186单位剂量为10-200mg。优选为20-200mg。更优选为200mg。
39.本发明还提供了一种药物组合物，其包括作为活性成分的西奥罗尼或其衍生物和fak抑制剂，以及药学上可接受的辅料。
40.上述药物组合物中，所述fak抑制剂选自pnd1186、gsk-2256098、tae226、pf-562271、pf-431396、pf-04554878、bi-4464。优选的，所述fak抑制剂为pnd1186。
41.上述药物组合物中，所述西奥罗尼或其衍生物的单位剂量为5-100mg。优选为10-100mg。更优选为25mg。
42.上述药物组合物中，所述pnd1186的单位剂量为10-200mg。优选为20-200mg。更优选为200mg。
43.本发明还提供了一种药盒，其包括上述所述的药物组合物。
44.上述药盒中，所述西奥罗尼或其衍生物和fak抑制剂为具有相同或不同规格的单位制剂，所述西奥罗尼或其衍生物和所述fak抑制剂置于同一容器中、或者分别置于不同容器中。
45.本发明还提供了预防和/或改善和/或治疗胰腺癌的方法，向有需要的患者施用西奥罗尼或其衍生物，或者联合施用西奥罗尼或其衍生物和hdac抑制剂，或者联合施用西奥罗尼或其衍生物和fak抑制剂。
46.上述方法中，所述西奥罗尼衍生物包括其可药用盐、非溶剂化晶体a、b或c。
47.上述方法中，所述hdac抑制剂选自恩替诺特(entinostat)、伏立诺他(vorinostat)、帕比司他(panobinostat)、莫西司他(mocetinostat)、贝利司他(belinostat)、普雷司他(pracinostat)、罗米地辛(romidepsin)、西达本胺(chidamide)，或其衍生物。优选的，所述hdac抑制剂选自西达本胺或其衍生物
48.上述方法中，所述fak抑制剂选自pnd1186、gsk-2256098、tae226、pf-562271、pf-431396、pf-04554878、bi-4464。优选的，所述fak抑制剂为pnd1186
49.上述方法中，所述西奥罗尼或其衍生物的单位剂量为5-100mg。优选为10-100mg。更优选为25mg。
50.上述方法中，所述西奥罗尼衍生物包括其可药用盐、非溶剂化晶体a、b或c。西奥罗尼的非溶剂化晶体a、b和c公开于cn201610856945.2中，其全文内容被引入本发明。
51.上述方法中，所述西达本胺或其衍生物的单位剂量为5-100mg。优选为5-60mg。更优选为5mg。
52.上述方法中，所述西达本胺衍生物包括其可药用盐、对映异构体、晶型a或晶型b。cn201210489178.8公开了西达本胺的晶型a和晶型b，cn201410136761.x公开了西达本胺的对映异构体，它们被全文引入本发明中。
53.上述方法中，所述pnd1186的单位剂量为10-200mg。优选为20-200mg。更优选为200mg。
54.本发明西奥罗尼单药、西奥罗尼联用hdac抑制剂以及西奥罗尼联用fak抑制剂对治疗胰腺癌具有显著的作用，为胰腺癌的治疗提供了一种更好的选择。
附图说明
55.图1实施例1中不同组别胰腺癌pdx模型小鼠的肿瘤体积变化；
56.图2实施例1中b00329 pdx模型小鼠的终点解剖肿瘤大小；
57.图3实施例1中不同组别胰腺癌pdx模型小鼠的肿瘤重量变化；g1：vehicle组；g2：西奥罗尼组；注：采用独立样本t检验，vs g1*：p《0.05,
58.**：p《0.01,***：p《0.001；
59.图4实施例1中不同组别胰腺癌pdx模型小鼠的体重变化；
60.图5实施例2中不同组别胰腺癌pdx模型小鼠的肿瘤体积变化；
61.图6实施例2中不同组别胰腺癌pdx模型小鼠的终点肿瘤照片；
62.图7实施例2中不同组别胰腺癌pdx模型小鼠的肿瘤重量变化；g3：vehicle组；g4：西奥罗尼组；注：采用独立样本t检验，vs g3*：p《0.05,**：
63.p《0.01,***：p《0.001；
64.图8实施例2中不同组别胰腺癌pdx模型小鼠的体重变化；
65.图9实施例3中不同组别小鼠原位胰腺接种mpa
kpc
胰腺癌模型的肿瘤重量变化；g1：vehicle组；g2：西奥罗尼组；g3：pnd1186组；g4：西奥罗尼
66.+pnd1186联用组；注：采用独立样本t检验，vs g1*：p《0.05,**：p《0.01,
67.***：p《0.001；
68.图10实施例3中不同组别小鼠原位胰腺接种mpa
kpc
胰腺癌模型的体重变化；图11实施例4中不同组别小鼠原位胰腺接种mpa
kpc-luciferase胰腺癌模型的荧光成像照片；
69.图12实施例4中不同组别小鼠原位胰腺接种mpa
kpc-luciferase胰腺癌模型的肿瘤体积变化(荧光强度)；
70.图13实施例4中不同组别小鼠原位胰腺接种mpa
kpc-luciferase胰腺癌模型的体重变化。
具体实施方式
71.本发明公开了西奥罗尼对胰腺癌的治疗用途，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明所述应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
72.实施例1西奥罗尼单药在ncg小鼠胰腺癌pdx模型(b00329)的药效学探索
73.1.实验方法
74.胰腺癌pdx模型编号b00329为胰尾部位，pdx模型来源于集萃药康生物有限公司。将pdx瘤块复苏后以2.5mm
×
2.5mm
×
2.5mm接种到36只ncg雌性小鼠中(集萃药康生物有限公司)，每周进行肿瘤体积的测量(肿瘤体积(mm3)＝0.5
×
肿瘤长径
×
肿瘤短径2)，待肿瘤体积于100mm3左右挑选20只肿瘤体积接近的动物进行分组，其中vehicle(g1)和西奥罗尼组(g2)各10只。将分组当天定义为第0天(d0)，从d0开始给药，给药剂量如表1所示。
75.表1各组给药剂量与方法
[0076][0077]
注：给药体积按照小鼠体重调整，10μl/g
×
小鼠体重(g)。
[0078]
药物配制：
[0079]
vehicle组(模型组)：0.5％cmc+0.1％tween80；
[0080]
西奥罗尼组：相应质量的西奥罗尼加入到与vehicle组相同的溶剂中，涡旋震荡成浓度为1mg/ml混悬液。
[0081]
各组于d3、d7、d10、d14、d17、d21称量小鼠体重，测量肿瘤体积，计算tgi
tv
，计算公式如下：
[0082][0083]vnt
：编号为n的小鼠在第t天的肿瘤体积
[0084]vn0
：编号为n的小鼠在第0天的肿瘤体积
[0085]
rtvn：编号为n的小鼠在第t天的肿瘤相对体积
[0086]
mean rtv
treat
：给药组rtv平均值
[0087]
mean rtv
vehicle
：vehicle组rtv平均值
[0088]
实验终点为d21，剥离整个胰腺拍照、称重，取肿瘤样品固定，计算tgi
tw
(肿瘤重量抑制率)，计算公式如下：
[0089]
tgi
tw
＝(1-meantw treat/meantw vehicle)x100％
[0090]
meantwtreat：给药组小鼠终点处理时肿瘤重量的平均值
[0091]
meantw vehicle：vehicle组小鼠终点处理时肿瘤重量的平均值
[0092]
实验结果以平均值
±
标准误差(mean
±
sem)表示。两组样本之间比较采用独立样
本t检验(t-test)，数据使用spss进行分析，p《0.05为具有显著性差异。作图软件为graphpad prism。
[0093]
2.实验结果
[0094]
2.1西奥罗尼显著抑制pdx肿瘤生长
[0095]
如图1所示，该pdx模型肿瘤体积随着时间在递增，而西奥罗尼给药组肿瘤生长速度显著低于对照组。如表2所示，在d10、d14、d17、d21时，与对照组(vehicle)相比，西奥罗尼组的肿瘤体积明显减小，d10时具有显著性差异(p《0.05)，d14时具有显著性差异(p《0.01)，d17、d21时具有极显著性差异(p《0.001)。以上数据说明西奥罗尼可以显著抑制pdx肿瘤的生长。
[0096]
表2不同组别肿瘤体积抑制率变化(tgi
tv
)和肿瘤体积p值统计分析
[0097]
g2 vs g1d0d3d7d10d14d17d21tgi
tv
0％5.86％16.85％27.23％35.44％31.46％33.67％肿瘤体积p值0.9980.4060.0660.013*0.002**0.001***0.000369***
[0098]
注：采用独立样本t检验，vs g1*：p《0.05,**：p《0.01,***：p《0.001。
[0099]
2.2西奥罗尼终点显著降低肿瘤重量
[0100]
如图2所示，终点解剖后对照组肿瘤大小比较均匀，重量约为0.31g，西奥罗尼给药21天后显著降低肿瘤重量，均值约为0.13g(图3)。可以看出，西奥罗尼给药组可以显著降低肿瘤重量(p＝0.000016)。终点的tgi
tw
为57.58％。
[0101]
2.3西奥罗尼不降低动物体重
[0102]
如图4所示，整个给药期间，对照组和给药组动物体重都没有显著变化，说明该剂量下动物对西奥罗尼耐受。
[0103]
3.实验结论
[0104]
西奥罗尼单药能显著抑制pdx模型肿瘤生长和降低肿瘤重量，且对动物体重没有显著的影响。
[0105]
实施例2西奥罗尼单药在ncg小鼠胰腺癌pdx模型(b00455)的药效学探索
[0106]
1.实验方法
[0107]
胰腺癌pdx模型编号b00455为胰尾部位，pdx模型来源于集萃药康生物有限公司。将pdx瘤块复苏后以2.5mm
×
2.5mm
×
2.5mm大小接种到36只ncg雌性小鼠中(集萃药康生物有限公司)，每周进行肿瘤体积的测量(肿瘤体积(mm3)＝0.5
×
肿瘤长径
×
肿瘤短径2)，待肿瘤体积于100mm3左右挑选20只肿瘤体积接近的动物进行分组，其中vehicle(g3)和西奥罗尼组(g4)各10只。将分组当天定义为第0天(d0)，从d0开始给药，给药剂量如表3所示。
[0108]
表3各组给药剂量与方法
[0109][0110]
药物配制：
[0111]
vehicle组(模型组)：0.5％cmc+0.1％tween80；
[0112]
西奥罗尼组：相应质量的西奥罗尼加入到与vehicle组相同的溶剂中，涡旋震荡成浓度为1mg/ml混悬液。
[0113]
给药后，各组于d2、d5、d7、d12、d16、d19、d22称量小鼠体重，测量肿瘤体积，计算tgi
tv
(肿瘤体积抑制率)，实验终点为d22。
[0114]
tgi
tv
，计算公式如下：
[0115][0116]vnt
：编号为n的小鼠在第t天的肿瘤体积
[0117]vn0
：编号为n的小鼠在第0天的肿瘤体积
[0118]
rtvn：编号为n的小鼠在第t天的肿瘤相对体积
[0119]
mean rtv
treat
：给药组rtv平均值
[0120]
mean rtv
vehicle
：vehicle组rtv平均值
[0121]
实验结果以平均值
±
标准误差(mean
±
sem)表示。两组样本之间比较采用独立样本t检验(t-test)，数据使用spss进行分析，p《0.05为具有显著性差异。作图软件为graphpad prism。
[0122]
2.实验结果
[0123]
2.1西奥罗尼显著抑制pdx肿瘤生长
[0124]
如图5所示，该pdx模型肿瘤体积随着时间在递增，而西奥罗尼给药组肿瘤生长速度显著低于对照组。如表4所示，在d12、d16、d19、d22时，与vehicle组(g3)相比，西奥罗尼组(g4)的肿瘤体积明显减小，d12时具有显著性差异(p《0.01)，d16、d19、d22时具有极显著性差异(p《0.001)。提示西奥罗尼可以显著抑制肿瘤生长。
[0125]
表4不同组别肿瘤体积抑制率变化(tgi
tv
)和肿瘤体积p值统计分析
[0126][0127]
注：采用独立样本t检验，vs g3*：p《0.05,**：p《0.01,***：p《0.001。
[0128]
2.2西奥罗尼终点显著降低肿瘤重量
[0129]
如图6所示，终点解剖后对照组肿瘤大小比较均匀，重量约为0.83g，西奥罗尼给药21天后显著降低肿瘤重量，均值约为0.38g(图7)。可以看出，西奥罗尼给药组可以显著降低肿瘤重量(p＝1.2914e-7)。终点的tgi
tw
为54.20％。
[0130]
2.3西奥罗尼不降低动物体重
[0131]
如图8所示，整个给药期间，对照组和给药组动物体重都没有显著变化，说明该剂量下动物对西奥罗尼耐受。
[0132]
3.实验结论
[0133]
西奥罗尼单药能显著抑制pdx模型肿瘤生长和降低肿瘤重量，且对动物体重没有显著的影响。
[0134]
实施例3在c57bl/6小鼠胰腺癌mpa
kpc
原位移植模型中的药效学评价1.实验方法
[0135]
mpa
kpc
原位自发胰腺癌模型是将小鼠的kras(g12d)和tp53进行突变后形成的肿瘤
模型，将瘤块分离并重新原位移植到小鼠胰腺，形成肿瘤模型并用于药效研究。动物来源：集萃药康生物有限公司。
[0136]
40只5～6周龄的c57bl/6雌性小鼠原位胰腺接种mpa
kpc
瘤块(集萃药康生物有限公司)，接种瘤块大小为2mm*2mm*2mm/只。于接种后第6天进行分组，g1 vehicle组，g2西奥罗尼组，g3 pnd1186组(pnd1186购自上海楼岚生物科技有限公司)，g4西奥罗尼+pnd1186联用组，并将分组当天定义为第0天(d0)。从d0开始给药，给药剂量如表5所示。
[0137]
表5各组给药剂量与方法
[0138][0139][0140]
药物配制：
[0141]
vehicle组(模型组)：0.5％cmc+0.1％tween80；
[0142]
西奥罗尼组：相应质量的西奥罗尼加入到与vehicle组相同的溶剂中，涡旋震荡成浓度0.5mg/ml和1mg/ml两种混悬液；
[0143]
pnd1186：相应质量的pnd1186加入到与vehicle组相同的溶剂中，涡旋震荡成浓度3mg/ml和6mg/ml两种混悬液。
[0144]
给药后，于d3、d7、d10、d14、d20称量小鼠体重；d21为实验终点，剥离整个胰腺拍照、称重，取肿瘤样品固定，计算tgi
tw
(肿瘤重量抑制率)。
[0145]
tgi
tw
＝(1-meantw treat/meantw vehicle)x100％
[0146]
meantwtreat：给药组小鼠终点处理时肿瘤重量的平均值
[0147]
meantw vehicle：vehicle组小鼠终点处理时肿瘤重量的平均值
[0148]
实验结果以平均值
±
标准误差(mean
±
sem)表示。两组样本之间比较采用独立样本t检验(t-test)，数据使用spss进行分析，p《0.05为具有显著性差异。作图软件为graphpad prism。
[0149]
2.实验结果
[0150]
2.1西奥罗尼单药或联合pnd1186具有显著的肿瘤抑制效果
[0151]
如表6和图9所示，与vehicle组(g1)相比，西奥罗尼组(g2)、pnd1186组(g3)和西奥罗尼+pnd1186联用组(g4)的瘤重显著减轻，g3组具有显著性差异(p《0.01)，g2和g4组具有极显著性差异(p《0.001)。g4联用组的肿瘤抑制效果优于西奥罗尼和pnd1186单药，提示联合用药具备更好的肿瘤抑制优势。
[0152]
表6不同组别肿瘤抑制率(tgi
tw
)变化及p值统计分析
[0153]
组别肿瘤重量(g)tgi
tw
p值g12.9459
±
0.6214——g21.2915
±
0.641156.16％0.000125***
g31.9710
±
0.212233.09％0.003**g41.0871
±
0.610663.10％0.000059***
[0154]
注：数据以mean
±
sem表示。采用独立样本t检验，vs g1*：p《0.05,**：p《0.01,
[0155]
***：p《0.001。
[0156]
2.2西奥罗尼单药或联合pnd1186未显著影响动物体重
[0157]
整个给药期间，西奥罗尼和pnd1186都有稍微降低动物体重趋势，但体重降低并不显著，联合给药组动物体重与单药组比没有显著降低，说明联合给药的毒副作用不比单药组更严重。
[0158]
3.实验总结
[0159]
西奥罗尼和fak抑制剂pnd1186单药能显著抑制小鼠原位胰腺癌的肿瘤生长，而联合给药具有比两个单药更优的肿瘤抑制效果，且对动物体重没有显著的影响。
[0160]
实施例4、在c57bl/6小鼠胰腺癌mpa
kpc-luciferase原位移植模型中的药效学评价(西奥罗尼联合西达本胺)
[0161]
1.实验方法
[0162]
mpa
kpc
原位自发胰腺癌模型是将小鼠的kras(g12d)和tp53进行突变后形成的肿瘤模型。将分离的肿瘤组织进行单细胞培养并在体外形成细胞系，该细胞系通过绿色荧光酶素(luciferase)标记，并混合基质胶原位移植到小鼠胰腺组织，形成原位肿瘤，通过小鼠荧光成像系统检测动物肿瘤大小并用以药效研究。动物来源：集萃药康生物有限公司。
[0163]
60只6～7周龄的c57bl/6雌性小鼠原位胰腺接种mpa
kpc-luciferase细胞(集萃药康生物有限公司)，接种剂量为5
×
105cells/100μl/只(肿瘤细胞和基质胶按体积比4:1配比)。于接种后第6天进行活体成像，根据成像结果选取40只小鼠均分为4组，g1 vehicle组，g2西奥罗尼组，g3西达本胺组，g4西奥罗尼+西达本胺联用组，并将分组当天定义为第0天(d0)。从d0开始给药，给药剂量如表7所示。
[0164]
表7各组给药剂量与方法
[0165][0166]
注：单药按体重调整给药体积，10μl/g
×
小鼠体重(g)；两个药物联合给药时，药物不能混在一起，给药时间间隔半小时，给药总体积按10μl/g
×
小鼠体重(g)，每个药物配制浓度提高一倍。
[0167]
药物配制：
[0168]
vehicle组(模型组)：0.5％cmc+0.1％tween80；
[0169]
西奥罗尼组：相应质量的西奥罗尼加入到与vehicle组相同的溶剂中，涡旋震荡成浓度0.5mg/ml和1mg/ml两种混悬液；
[0170]
西达本胺：溶剂为0.2％cmc，将相应质量的西达本胺加入到溶剂中涡旋震荡成浓度2mg/ml和4mg/ml两种混悬液。
[0171]
给药后，于d3、d7、d10、d14称量小鼠体重；于d7、d14用小动物活体成像仪检测肿瘤体积大小，记录荧光值，计算tgi
tv
(肿瘤荧光值抑制率)。
[0172]
tgi
tv
，计算公式如下：
[0173][0174]vnt
：编号为n的小鼠在第t天的肿瘤体积
[0175]vn0
：编号为n的小鼠在第0天的肿瘤体积
[0176]
rtvn：编号为n的小鼠在第t天的肿瘤相对体积
[0177]
mean rtv
treat
：给药组rtv平均值
[0178]
mean rtv
vehicle
：vehicle组rtv平均值
[0179]
实验结果以平均值
±
标准误差(mean
±
sem)表示。两组样本之间比较采用独立样本t检验(t-test)，数据使用spss进行分析，p《0.05为具有显著性差异。作图软件为graphpad prism。
[0180]
2.实验结果
[0181]
2.1西奥罗尼单药或联用西达本胺具有显著的肿瘤抑制效果
[0182]
如下图11、12和表8所示，该肿瘤模型随着时间增长，肿瘤的荧光强度增加(g1组)，说明该模型肿瘤生长符合药效评价标准。给药第7天，西达本胺单药组和联合用药组都能显著降低肿瘤荧光值，其中联合给药组有更显著的抑制效果(表9)。给药14天后，西奥罗尼和西达本胺单药组都能显著抑制肿瘤生长，tgi
tv
分别为49.96％和51.99％，而联合给药组具有更显著的肿瘤抑制药效，tgi
tv
为87.06％(图12和表9)，提示联合用药能更好抑制胰腺癌的生长。
[0183]
表8不同组别肿瘤荧光值变化
[0184][0185][0186]
注：数据以mean
±
sem表示。
[0187]
表9不同组别肿瘤荧光值抑制率变化(tgi
tv
)
[0188]
组别d-1d7d14g2 vs g10.00％3.18％49.96％g3 vs g10.00％46.33％51.99％g4 vs g10.00％76.67％87.06％
[0189]
2.2西奥罗尼单药或联合西达本胺未显著影响动物体重
[0190]
如图13所示，动物给药期间体重有略微降低，但都未达到显著水平(《0.5％)，也不影响动物活动状态。无论是单药还是联合给药，动物体重皆在正常范围，无显著下降，说明药物剂量属于动物耐受范围之内。
[0191]
3.实验结论
[0192]
西奥罗尼和西达本胺单药能显著抑制小鼠原位胰腺癌的肿瘤生长，而联合给药具有比两个单药更优的肿瘤抑制效果，且对动物体重没有显著的影响。

技术特征：
1.西奥罗尼或其衍生物在制备用于预防和/或改善和/或治疗胰腺癌的药物中的用途；进一步的，所述西奥罗尼衍生物包括其可药用盐、非溶剂化晶体a、b或c。2.西奥罗尼或其衍生物联合hdac抑制剂在制备用于预防和/或改善和/或治疗胰腺癌的药物中的用途；进一步的，所述西奥罗尼衍生物包括其可药用盐、非溶剂化晶体a、b或c；所述hdac抑制剂选自恩替诺特(entinostat)、伏立诺他(vorinostat)、帕比司他(panobinostat)、莫西司他(mocetinostat)、贝利司他(belinostat)、普雷司他(pracinostat)、罗米地辛(romidepsin)、西达本胺(chidamide)，或其衍生物；优选的，所述hdac抑制剂选自西达本胺或其衍生物；进一步的，所述西达本胺衍生物包括其可药用盐、对映异构体、晶型a或晶型b。3.西奥罗尼或其衍生物联合fak抑制剂在制备用于预防和/或改善和/或治疗胰腺癌的药物中的用途；进一步的，所述西奥罗尼衍生物包括其可药用盐、非溶剂化晶体a、b或c；所述fak抑制剂选自pnd1186、gsk-2256098、tae226、pf-562271、pf-431396、pf-04554878、bi-4464；优选的，所述fak抑制剂选自pnd1186。4.西奥罗尼或其衍生物用于预防和/或改善和/或治疗胰腺癌；进一步的，所述西奥罗尼衍生物包括其可药用盐、非溶剂化晶体a、b或c。5.西奥罗尼或其衍生物联合hdac抑制剂用于预防和/或改善和/或治疗胰腺癌；进一步的，所述西奥罗尼衍生物包括其可药用盐、非溶剂化晶体a、b或c；所述hdac抑制剂选自恩替诺特(entinostat)、伏立诺他(vorinostat)、帕比司他(panobinostat)、莫西司他(mocetinostat)、贝利司他(belinostat)、普雷司他(pracinostat)、罗米地辛(romidepsin)、西达本胺(chidamide)，或其衍生物；优选的，所述hdac抑制剂选自西达本胺或其衍生物；进一步的，所述西达本胺衍生物包括其可药用盐、对映异构体、晶型a或晶型b。6.西奥罗尼或其衍生物联合fak抑制剂用于预防和/或改善和/或治疗胰腺癌；进一步的，所述西奥罗尼衍生物包括其可药用盐、非溶剂化晶体a、b或c；所述fak抑制剂选自pnd1186、gsk-2256098、tae226、pf-562271、pf-431396、pf-04554878、bi-4464；优选的，所述fak抑制剂为pnd1186。7.一种药物组合物，其包括作为活性成分的西奥罗尼或其衍生物和fak抑制剂，以及药学上可接受的辅料；进一步的，所述fak抑制剂选自pnd1186、gsk-2256098、tae226、pf-562271、pf-431396、pf-04554878、bi-4464；优选的，所述fak抑制剂为pnd1186。8.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于：所述西奥罗尼或其衍生物的单位剂量为5-100mg，优选为10-100mg，更优选为25mg；所述pnd1186的单位剂量为10-200mg，优选为20-200mg，更优选为200mg。9.一种药盒，其包括权利要求8或9所述的药物组合物。10.根据权利要求9所述的药盒，其特征在于：所述西奥罗尼或其衍生物和fak抑制剂为具有相同或不同规格的单位制剂，所述西奥罗尼或其衍生物和所述fak抑制剂置于同一容器中、或者分别置于不同容器中。11.预防和/或改善和/或治疗胰腺癌的方法，其特征在于：向有需要的患者施用西奥罗
尼或其衍生物；或者联合施用西奥罗尼或其衍生物和hdac抑制剂；或者联合施用西奥罗尼或其衍生物和fak抑制剂；进一步的，所述hdac抑制剂选自恩替诺特(entinostat)、伏立诺他(vorinostat)、帕比司他(panobinostat)、莫西司他(mocetinostat)、贝利司他(belinostat)、普雷司他(pracinostat)、罗米地辛(romidepsin)、西达本胺(chidamide)，或其衍生物；所述fak抑制剂选自pnd1186、gsk-2256098、tae226、pf-562271、pf-431396、pf-04554878、bi-4464；优选的，所述hdac抑制剂为西达本胺或其衍生物，所述fak抑制剂为pnd1186。

技术总结
本发明涉及药物应用领域，具体涉及西奥罗尼治疗胰腺癌。本发明公开了西奥罗尼或其衍生物在制备用于预防和/或改善和/或治疗胰腺癌的药物中的用途；同时还公开了西奥罗尼或其衍生物联合HDAC抑制剂或联合FAK抑制剂在制备用于预防和/或改善和/或治疗胰腺癌的药物中的用途。本发明西奥罗尼单药、或与HDAC抑制剂联用、或与FAK抑制剂联用能够有效预防和/或改善和/或治疗胰腺癌。和/或治疗胰腺癌。和/或治疗胰腺癌。


技术研发人员：黄圣健 毛旭华 熊秋韵 潘德思 鲁先平
受保护的技术使用者：成都微芯药业有限公司
技术研发日：2023.04.04
技术公布日：2023/10/19