异硫氰酸酯衍生物及其制备方法和用途与流程

1.本发明属于药物技术领域，涉及异硫氰酸酯衍生物及其制备方法和用途。


背景技术：

2.恶性肿瘤已经成为人类的第二大死因，是目前威胁人类健康的重大疾病，而小分子化疗药物及靶向药物目前仍然是治疗恶性肿瘤的主要手段。小分子药物的重要来源之一，是从自然界尤其是植物中发现新的分子或者骨架结构。我国天然药物资源丰富，从传统中药中筛选出活性单体，并利用药物化学手段进行结构修饰和改造，对于发现新型抗肿瘤药物具有重大的意义。以萝卜硫素(sulforaphane)为代表的异硫氰酸酯类化合物，是一类发现于植物体内，以异硫氰基为其主要官能团的化学物质，广泛分布在植物中。该类化合物是蔬菜中所发现的具有抗癌效果活性物质之一，且具有对多种衰老性疾病的防控效果，具有很好的药用价值。迄今发现的异硫氰酸酯类化合物有100余种，主要包括:萝卜硫素(sulforaphane，sfn)、异硫氰酸烯丙酯(allyl isothiocyanate，aitc)、异硫氰酸苄酯(benzyl isothiocyanate,bitc)，以及其他各种人工合成或提取于植物体内的异硫氰基烷烃类、烯烃类、酚类等有机化合物。萝卜硫素是异硫氰酸酯类化合物中最具代表性的化合物，主要存在于十字花科植物中，具有显著的抗肿瘤、抗衰老效果，且毒副作用极小，因而受到广泛关注(springer ta.traffic signals for lymphocyte recirculation and leukocyte emigration：the multistep paradigm[j].cell，1994，76,301-314)。从1992年被发现其具有抗氧化，抗肿瘤等作用以来就成为了研究热点。研究发现，萝卜硫素可以有效地预防肝癌、肺癌、前列腺癌、乳腺癌、直肠癌、胃癌、腺癌、皮肤癌等癌症的发生。萝卜硫素还具有抗氧化、dna损伤修复、抑制i相代谢酶、诱导ii相代谢酶的表达、清除感染等活性，并在抑制促进生长的信号通路、细胞周期的阻滞及诱导细胞凋亡、抑制多种化学致癌物的代谢活化和抑制炎症等方面发挥着重的调节作用。目前认为萝卜硫素是潜在的肿瘤治疗药物。
[0003]
然而，天然的异硫氰酸酯类化合物缺乏更加安全高效的获取方法。植物体内异硫氰酸酯类化合物一般以其前体物质一一葡萄糖苷的形式存在，而葡萄糖苷本身无任何药效作用，需借助酶类如:黑芥子酶水解以发挥其药效功能。黑芥子酶等酶类难以提取、不易储存且受热变性的特性，限制了葡萄糖苷和异硫氰酸酯类化合物的运输、销售、储存及使用。此外，很多生物活性研究停留在酶及细胞层面。因此，以这类化合物作为先导化合物进行结构改造和修饰，开发新型抗肿瘤药物，具有重要的理论和现实意义。


技术实现要素：

[0004]
本发明的目的在于以萝卜硫素作为先导化合物，对其进行结构改造并设计、合成出新型异硫氰酸酯类衍生物。通过对此类化合物构效关系进行研究，寻找生物活性高、成药性良好的新型抗癌新药，并提供易于实现的制备方法。
[0005]
一方面，本发明提供一种异硫氰酸酯类衍生物，其特征在于所述化合物是芳氧基
烷基取代的异硫氰酸酯类化合物，具有通式i所示的结构：
[0006][0007]
其中：
[0008]
r1,r2可以占据环上2,3,4中的任何位置，分别独立地选自下述基团:h,oh,f,cl,br,i,cf3,or3,sr3,nr4r5,cn,n3,ncs,nco,so2cl,so2f,conr4r5,so2nr4r5,coor3,no2,cho,cf3,so3h,op(o)(o h)2,si(烷基)3,氟代烷基,取代或未取代的c1-c10烷基，取代或未取代的c1-c10烷烯基,取代或未取代的c1-c10烷炔基,c1-c10环烷基，c6-c10芳基，c6-c10杂芳基，c3-c20杂环烷基；或者，r1和r2相邻时可连接形成取代或未取代的c5-c12芳环，取代或未取代的c5-c12杂芳环，取代或未取代的c3-c10饱和或不饱和的环烷基环，取代或未取代的饱和或不饱和的c3-c10杂环烷基环，取代或未取代的c3-c10螺环烷基环，取代或未取代的c3-c10螺杂环烷基环；
[0009]
r3,r4,r5分别独立地选自下述基团:h,取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c1-c10烷烯基,取代或未取代的c1-c10烷炔基,c1-c10环烷基、c6-c10芳基、c6-c10杂芳基、c3-c20杂环烷基；或者r4和r5可相互连接成芳环,杂芳环,或饱和或不饱和的杂环烷基环；
[0010]
w1,w2,w3分别独立地为c或n；
[0011]
x为o,n或c；
[0012]
y1,y2分别独立地选自下述基团:h,oh，f,cl,br,cf3,or3,nr4r5,取代或未取代的c1-c10烷基、c1-c10环烷基、c6-c10芳基、c6-c10杂芳基、c3-c20杂环烷基；或者，y1和y2相互连接形成取代或未取代的c5-c12芳环，取代或未取代的c5-c12杂芳环，取代或未取代的饱和或不饱和的c3-c10环烷基环，取代或未取代的饱和或不饱和的c3-c10杂环烷基环，取代或未取代的c3-c10螺环烷基环，或取代或未取代的c3-c10螺杂环烷基环；
[0013]
杂原子为1个或多个n、s、o原子；
[0014]
l＝1或2；
[0015]
n＝1-3；
[0016]
m＝1-5。
[0017]
根据一些具体实施方式中，所述异硫氰酸酯衍生物，在通式i中:
[0018]
r1,r2分别独立地选自下述基团:h,oh，f,cl,br,cf3,or3,nr4r5,取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c1-c10烷烯基,取代或未取代的c1-c10烷炔基,c1-c10环烷基、c6-c10芳基、c6-c10杂芳基、c3-c20杂环烷基；或者，r1和r2相邻时可连接成取代或未取代的芳环,取代或未取代的杂芳环,取代或未取代的饱和或不饱和的杂环烷；
[0019]
w1,w2,w3分别独立地为c或n；
[0020]
x为o；
[0021]
y1,y2分别独立地选自下述基团:h,oh，f,cl,br,cf3,or3,nr4r5,取代或未取代的c1-c10烷基、c1-c10环烷基、c6-c10芳基、c6-c10杂芳基、c3-c20杂环烷基；或者y1和y2相互连接成取代或未取代的芳环,取代或未取代的杂芳环,或取代或未取代的饱和或不饱和的杂环烷基环；
[0022]
l＝1；
[0023]
n＝1或2；
[0024]
m＝1-5。
[0025]
根据另一些具体实施方式，在通式i中：
[0026]
l＝1；
[0027]
n＝1或2；
[0028]
m＝1-5。
[0029]
根据另一些具体实施方式，在通式i中：
[0030]
y1,y2相互连接成取代或未取代的芳环,取代或未取代的杂芳环,或取代或未取代的饱和或不饱和的杂环烷基环；
[0031]
l＝1；
[0032]
n＝1；
[0033]
m＝3。
[0034]
根据另一些具体实施方式，在通式i中：
[0035]
r1,r2分别独立地选自下述基团:h,oh，f,cl,br,cf3,och3,nr4r5；
[0036]
w1,w2,w3分别独立地为c或n；
[0037]
x为o；
[0038]
y1,y2相互连接成取代或未取代的芳环,取代或未取代的杂芳环,或取代或未取代的饱和或不饱和的杂环烷基环；
[0039]
l＝1；
[0040]
n＝1；
[0041]
m＝3。
[0042]
根据另一些具体实施方式，通式i中的y
1a
和y
2a
相互连接形成取代或未取代的c6芳环或c6杂芳环，亦即所述异硫氰酸酯衍生物具有通式ii的结构:
[0043][0044]
其中r1,r2，r6可以占据各自所在环上的任何位置，分别独立地选自下述基团:h,f,cl,br,i,or3,sr3,nr4r5,cn,n3,ncs,nco,so2cl,so2f,conr4r5,so2nr4r5,coor3,no2,cho,cf3,so3h,o-p(o)(o h)2,si(烷基)3,氟代烷基,取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c1-c10烷烯基,取代或未取代的c1-c10烷炔基,c1-c10环烷基，c6-c10芳基，c6-c10杂芳基，
c3-c20杂环烷基；或者，r1和r2相邻时可连接形成取代或未取代的c5-c12芳环，取代或未取代的c5-c12杂芳环，取代或未取代的饱和或不饱和的c3-c10环烷基环，取代或未取代的饱和或不饱和的c3-c10杂环烷基环，取代或未取代的c3-c10螺环烷基环，取代或未取代的c3-c10螺杂环烷基环，取代或未取代的c3-c10桥环烷基环，取代或未取代的c3-c10桥杂环烷基环；其中杂原子为n、s、o或其组合；
[0045]
其中r3,r4,r5分别独立地选自下述基团:h,取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c1-c10烷烯基,取代或未取代的c1-c10烷炔基,c1-c10环烷基、c6-c10芳基、c6-c10杂芳基、c3-c20杂环烷基；或者r4和r5可相互连接成芳环,杂芳环,饱和或不饱和的杂环烷基环；
[0046]
w1,w2,w3,w4,w5,w6,w7各自独立为c或n；
[0047]
x为o,n或c；
[0048]
l＝1或2；
[0049]
n＝1-3；
[0050]
m＝1-5。
[0051]
根据另一些具体实施方式，所述的异硫氰酸酯衍生物具有通式iii的结构:
[0052][0053]
其中r1,r2，r7可以占据各自所在环上的任何位置，分别独立地选自下述基团:h,f,cl,br,i,or3,sr3,nr4r5,cn,n3,ncs,nco,so2cl,so2f,conr4r5,so2nr4r5,coor3,no2,cho,cf3,so3h,o-p(o)(oh)2,-si(烷基)3,氟代烷基,取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c1-c10烷烯基,取代或未取代的c1-c10烷炔基,c1-c10环烷基、c6-c10芳基、c6-c10杂芳基、c3-c20杂环烷基；或者，r1r2相邻时可连接形成取代或未取代的c5-c12芳环，取代或未取代的c5-c12杂芳环，取代或未取代的饱和或不饱和的c3-c10环烷基环，取代或未取代的饱和或不饱和的c3-c10杂环烷基环，取代或未取代的c3-c10螺环烷基环，取代或未取代的c3-c10螺杂环烷基环，取代或未取代的c3-c10桥环烷基环，取代或未取代的c3-c10桥杂环烷基环；其中杂原子为n、s或o或其组合；
[0054]
其中r3,r4,r5分别独立地选自下述基团:h,取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c1-c10烷烯基,取代或未取代的c1-c10烷炔基,c1-c10环烷基、c6-c10芳基、c6-c10杂芳基、c3-c20杂环烷基；或者r4和r5可相互连接成芳环,杂芳环,饱和或不饱和的杂环烷基环；
[0055]
x为o,n或c；
[0056]
l＝1或2；
[0057]
n＝1-3；
[0058]
m＝1-5。
[0059]
另一方面，本发明提供了所述异硫氰酸酯衍生物的制备方法，其包括下述步骤：
[0060]
(1)在三苯基膦和diad催化下，m1与g-xh发生mitsunobu醚化反应生产中间体m3；
[0061]
(2)m3经过催化酰胺水解，脱去邻苯二甲酸结构，得到中间体m4；
[0062]
(3)用三乙胺催化，m4与硫羰基二咪唑发生亲核取代反应，得到中间体m5；
[0063]
(4)m5与h2o2进行氧化反应，制备目标产物:
[0064][0065]
在一种具体实施方式中，所述步骤(1)至(4)包括：
[0066]
(1)称取适量g-x置于双口烧瓶中，室温下加入三苯基膦(3eq)，加入适量体积的二氯甲烷，氮气置换后，转移至冰浴下(0℃)，待体系温度稳定，边搅拌边滴加diad(3eq)，有大量热放出,缓慢滴加m1(1.3eq)的二氯甲烷溶液，冰浴搅拌过夜；反应液加入适量的1n的盐酸溶液，二氯甲烷萃取两次，合并有机相，饱和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，纯化后得产物(m3)用于下一步反应；
[0067]
(2)称取上一步产物(m3)于圆底烧瓶中，加入适量体积的乙醇胺，加入20％naoh水溶液，氮气置换，转移至50℃反应，搅拌反应5h后，lc-ms检测显示反应完全后，停止反应；加入适量体积的乙酸乙酯和水，调节ph至10，分液，水相用适量体积的乙酸乙酯萃取第二次，合并有机相，半饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，得到产物m4；
[0068]
(3)用适量体积的二氯甲烷溶解上一步的产物m4，加入三乙胺(1.0eq)，氮气置换
后，转移至冰浴下搅拌，用适量体积的二氯甲烷溶解硫羰基二咪唑(1.0eq)，在冰浴下滴加到m4的二氯甲烷体系中，加毕，继续冰浴搅拌20min，转移至室温搅拌过夜,lc-ms检测显示反应完全后，停止反应；后处理:反应液加入适量体积的二氯甲烷，用半饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，浓缩得到产物m5；
[0069]
(4)将上一步产物m5溶入适量体积的乙醇和乙酸(5/1,v/v)，冰浴下搅拌，缓慢滴加双氧水(4.0eq)，转移至室温搅拌反应，搅拌过夜，lc-ms监测反应完全后，在45℃水浴中旋干大部分乙醇，加入适量体积的二氯甲烷萃取，再次萃取水相，合并有机相，半饱和食盐水洗4-5次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，高压反相层析柱纯化，得到目标化合物(i’)。
[0070]
再一方面，本发明提供了所述异硫氰酸酯衍生物在治疗或预防疾病方面的用途，其中所述疾病为癌症。所述治疗疾病方面的用途包括将治疗有效量的所述异硫氰酸酯衍生物或其药用组合物施用于有需要的患者。
[0071]
另外，本发明还提供了所述异硫氰酸酯衍生物在制备药物方面的用途，其中所述药物包括治疗有效量的所述异硫氰酸酯衍生物或其药用组合物。所述药物用于治疗或预防疾病，其中所述疾病为癌症。
[0072]
所述癌症包括诸如胰腺癌、肝癌、肺癌、乳腺癌、黑色素瘤、多发骨髓瘤、胃癌、结直肠癌等实体肿瘤，或者诸如血液肿瘤的非实体肿瘤。
具体实施方式
[0073]
下面结合实施实例对本发明做进一步描述，使本专业的技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。本发明中实验所使用的起始原料或购买自试剂供应商或经由本领域公知的方法由已知原料制备。
[0074]
下述定义用以阐明其在本文语境中的具体用法。
[0075]
所述“烷基”是指饱和或不饱和的直链或支链的多至12个碳原子，例如含有1-12、1-10、1-8、1-6或1-4个碳原子的烷基，并且所述烷基可以具有一个或多个取代基，例如含有1-12、1-10、1-8、1-6或1-4个碳原子，并且所述烷基可以具有一个或多个取代基；所述烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、1-丙基、2-丙基(异丙基)、1-丁基、2-甲基-1-丙基(异丁基)、2-丁基(仲丁基)、-2-甲基-2-丙基(叔丁基)、1-戊基、2-戊基、3-戊基、-2-甲基2-丁基、3-甲基-2-丁基、3-乙基-1-丁基、2-甲基-1-丁基、1-己基、2-己基、3-己基、2-甲基-2-戊基、，2-甲基-3-戊基、2,3-二甲基-2-丁基、3,3-二甲基-2-丁基、己基、辛基、癸基、十二烷基等。所述“环烷基”是指单环或双环烷基，饱和或不饱和的但不具有芳香特征，例如含有3-10个碳原子，并且所述环烷基可以具有一个或多个取代基，其选自卤素、c1-c6的直链或支链烷基、c1-c6直链或支链的三卤代烷基、羟基、胺基、c1-c6的直链或支链烷胺基、其中每个烷基部分都可以是直链或支链的c1-c6的二烷胺基。所述“芳基”是指从母体芳环体系的单个碳原子去除至少一个氢原子而得到的芳烃基，所述芳基可具有6至30个碳原子，例如约6-10个碳原子，例如2，3，4，5，6位任选的带有一个或多个不同取代基的苯基、苄基，并且所述芳基可以具有一个或多个取代基，其选自卤素、羟基、c1-c6的直链或支链烷基、c1-c6直链或支链烷氧基、氰基、硝基、氨基、c1-c6直链或支链烷胺基、其中每个烷基部分可以是直链或支链的c1-c6的二烷胺基、羧基、c1-c6的直链或支链烷氧羰基、c1-c6的直链或支链烷基羰
基、氨基部分任选地被一个或两个相同或不同的c1-c6的直链或支链烷基取代的氨羰基。所述“杂芳基”是指含有5-12个环原子的芳族单环基、芳族双环基或一个环为芳族而另一个环部分氢化的双环基，环系中包含一、二或三个选自氧、氮或硫的杂原子；并且所述芳杂基可以带有一个或多个相同或不同取代基，其选自卤素、羟基、c1-c6的直链或支链烷基、c1-c6直链或支链烷氧基、氰基、硝基、氨基、c1-c6直链或支链烷胺基、其中每个烷基部分可以是直链或支链的c1-c6的二烷胺基、羧基、c1-c6的直链或支链烷氧羰基、c1-c6的直链或支链烷基羰基、氨基部分任选地被一个或两个相同或不同的c1-c6的直链或支链烷基取代的氨羰基。所述“杂环烷基”是指在环系中含有一个或两个选自氧、硫或氮的杂原子的单环或双环基团，它们是饱和或不饱和的但不具有芳族特征，它们含有3-10个碳原子，并且所述杂环烷基可以具有一个或多个相同或不同的取代基，其选自卤素、c1-c6的直链或支链烷基、c1-c6直链或支链的三卤代烷基、羟基、胺基、c1-c6的直链或支链烷胺基、其中每个烷基部分都可以是直链或支链的c1-c6的二烷胺基所述杂环烷基可任选地被一个或多个在环烷基中所述及的那些取代基取代。
[0076]
本文中术语“取代的”或“取代基”用来表示，在用其表示的基团上的一个或多个(例如，在一些实施方式中为1-20，在其他实施方式中为1-10，在一些实施方式中为1、2、3、4或5，在一些实施方式中为1、2或3，以及在其他实施方式中为1或2)氢被选自指定的取代基或本领域技术人员已知的合适基团所取代。所述取代基包括例如烷基，烯基，炔基，烷氧基，卤素，卤代烷基，羟基，羟烷基，芳基，杂芳基，杂环，环烷基，烷酰基，烷氧基羰基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，三氟甲硫基，二氟甲基，酰基氨基，硝基，三氟甲基，三氟甲氧基，羧基，羧基烷基，酮基，硫代，烷硫基，烷基亚磺酰基，烷基磺酰基和氰基。例如，在一些实施例中，所述取代基包括oh，nh2，n(ch3)2，f，cl，br，i，cf3，och3，co2h，co2ch3，cn，ncs,so3h,so2cl,so2f，si(ch3)3，op(o)(oh)2，芳基和杂芳基。
[0077]
本文中术语“有效量”是指能够有效地治疗疾病或症状的量。例如，所述“有效量”可以是有效地减缓所治疗的疗疾病或症状的进展或程度的剂量。对治疗上有效量是在本领域技术人员能力范围内能够确定的。术语“有效量”是指包括本文所描述的化合物或其药用组合物的量。
[0078]
本文中术语“治疗”包括(i)防止或预防疾病或症状的发生，抑制或阻止疾病或症状的发展和/或减轻或缓解疾病或症状的程度。
[0079]
在本发明的实施方案中，本发明提供的上述异硫氰酸酯衍生物如式(i)所示的制备方法，其中，式(ii)化合物可以参考下列的方法来制备：
[0080]
合成路线1：
[0081][0082]
合成步骤：
[0083]
1.m1的合成
[0084][0085]
称取适量化合物1,碳酸铯(2.5eq)置于圆底烧瓶，加入适量的乙腈，置换氮气3次，转移至冰浴下(0℃)搅拌，待体系温度稳定，滴加2-巯基乙醇(2.0eq)，0℃继续搅拌反应两小时。lc-ms检测显示反应完全后，停止反应。
[0086]
后处理：在冰浴下用6n的盐酸溶液调酸淬灭至ph＝2-3，旋干大部分乙腈，用适量的乙酸乙酯萃取两次，合并有机相，水洗涤两次除去2-巯基乙醇，再用半饱和碳酸氢钠溶液洗去亚酰胺保护基断一半的酸，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干得到m1,纯度大于98％。
[0087]
esi-ms：m/z[m+h]+＝280.4。
[0088]
2.m3a的合成
[0089][0090]
称取适量m2a置于双口烧瓶中，室温下加入三苯基膦(3eq)，加入适量体积的二氯
甲烷，氮气置换后，转移至冰浴下(0℃)，待体系温度稳定，边搅拌边滴加diad(3eq)，有大量热放出,缓慢滴加m1(1.3eq)的二氯甲烷溶液，冰浴搅拌过夜。
[0091]
后处理：反应液加入适量的1n的盐酸溶液，二氯甲烷萃取两次，合并有机相，饱和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，纯化后得m3。
[0092]
3.m4a的合成
[0093][0094]
称取适量m3a于圆底烧瓶中，加入适量体积的乙醇胺，加入20％naoh水溶液，氮气置换，转移至50℃反应，搅拌反应5h后，lc-ms检测显示反应完全后，停止反应。
[0095]
后处理：加入适量体积的乙酸乙酯和水，调节ph至10，分液，水相用适量体积的乙酸乙酯萃取第二次，合并有机相，半饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，得到产物m4a不做更多的纯化，直接用于下一步反应。
[0096]
4.m5a的合成
[0097][0098]
用适量体积的二氯甲烷溶解上一步的m4a(当量均按m3a计算)，加入三乙胺(1.0eq)，氮气置换后，转移至冰浴下搅拌，用适量体积的二氯甲烷溶解硫羰基二咪唑(1.0eq)，在冰浴下滴加到m4a的二氯甲烷体系中，加毕，继续冰浴搅拌20min，转移至室温搅拌过夜,lc-ms检测显示反应完全后，停止反应。后处理:反应液加入适量体积的二氯甲烷，用半饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，浓缩得到m5a，直接用于下一步。
[0099]
5.化合物(i’a)的合成
[0100][0101]
将m5a溶入适量体积的乙醇和乙酸(5/1,v/v)，冰浴下搅拌，缓慢滴加双氧水(4.0eq)，转移至室温搅拌反应，搅拌过夜，lc-ms检测m5a显示反应完全后，在45℃水浴中旋干大部分乙醇，加入适量体积的二氯甲烷萃取，再次萃取水相，合并有机相，半饱和食盐水洗4-5次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，高压反相层析柱纯化，得到化合物(i)。
[0102]
实施例1：化合物2'-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-[1,1'-biphenyl]-2-ol的制备
[0103][0104]
合成路线：
[0105][0106]
合成步骤：
[0107]
1.化合物2-(4-((2-((2'-hydroxy-[1,1'-biphenyl]-2-yl)oxy)ethyl)thio)butyl)isoindoline-1,3-dione的合成
[0108][0109]
称取起始化合物1,1'-biphenyl]-2,2'-diol(m2')(2.00g，10.74mmol)于双口烧瓶中，加入三苯基膦(3.84g，14.65mmol)，加入20ml的二氯甲烷，氮气置换，转移至冰浴下(0℃)，待体系温度稳定，滴加diad(2.96g，14.65mmol)，有大量热放出,加毕,再缓慢滴加m1(2.73g，9.76mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液，冰浴搅拌过夜。
[0110]
后处理：反应液加入20ml 1n的盐酸溶液，二氯甲烷萃取两次，合并有机相，饱和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，通过高压反相色谱纯化，得到2-(4-((2-((2'-hydroxy-[1,1'-biphenyl]-2-yl)oxy)ethyl)thio)butyl)isoindoline-1,3-dione(m3')油状物3.22g，收率74.35％。无需进一步纯化，直接用于下一步。
[0111]
esi-ms：m/z[m+h]
+
＝448.15。
[0112]
2.化合物2'-(2-((4-aminobutyl)thio)ethoxy)-[1,1'-biphenyl]-2-ol的合成。
[0113][0114]
称取2-(4-((2-((2'-hydroxy-[1,1'-biphenyl]-2-yl)oxy)ethyl)thio)butyl)isoindoline-1,3-dione(m3')(1.00g，2.24mmol)于圆底烧瓶中，加入5ml的乙醇胺，氮气置换，转移至50℃反应。反应5h至lc-ms检测显示反应完全。
[0115]
亦可称取m3'于圆底烧瓶中，加入20％naoh水溶液，氮气置换，转移至50℃反应，搅拌反应5h后，lc-ms检测显示反应完全后，停止反应。
[0116]
后处理：加入20ml的乙酸乙酯和20ml的水，水相用20ml乙酸乙酯萃取第二次，合并有机相，半饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，得到2'-(2-((4-aminobutyl)thio)ethoxy)-[1,1'-biphenyl]-2-ol油状物。
[0117]
无需进一步纯化，直接用于下一步。
[0118]
esi-ms：m/z[m+h]
+
＝318.15。
[0119]
3.化合物2'-(2-((4-isothiocyanatobutyl)thio)ethoxy)-[1,1'-biphenyl]-2-ol的合成
[0120][0121]
用10ml二氯甲烷溶解上一步的2'-(2-((4-aminobutyl)thio)ethoxy)-[1,1'-biphenyl]-2-ol(m4')(当量均按m3'计算)，加入三乙胺(226mg，2.23mmol)，氮气置换，转移至冰浴下搅拌，用5ml的二氯甲烷溶解硫羰基二咪唑(0.40g，2.23mmol)，在冰浴下滴加到m4的二氯甲烷体系中，加毕，继续冰浴搅拌20min，转移至室温搅拌过夜,至lc-ms检测显示反应完全后停止反应。
[0122]
后处理:反应液中加入10ml的二氯甲烷，用10ml半饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，旋干得到2'-(2-((4-isothiocyanatobutyl)thio)ethoxy)-[1,1'-biphenyl]-2-ol(m5')。无需进一步纯化，直接用于下一步。
[0123]
esi-ms：m/z[m+h]
+
＝360.10。
[0124]
4.化合物2'-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-[1,1'-biphenyl]-2-ol的合成
[0125][0126]
于上述步骤中得到的2'-(2-((4-isothiocyanatobutyl)thio)ethoxy)-[1,1'-biphenyl]-2-ol(m5')中加入10ml的乙醇和2ml的乙酸，冰浴下搅拌，缓慢滴加双氧水(321.45mg，9.45mmol)，转移至室温搅拌反应，搅拌过夜，中控ms显示反应完全，45℃旋干大部分乙醇，加入20ml的二氯甲烷和20ml水萃取，20ml二氯甲烷再次萃取水相，合并有机相，半饱和食盐水洗4-5次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，高压反相色谱纯化，得到2'-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-[1,1'-biphenyl]-2-ol的油状物。纯度大于97％，收率71％。
[0127]
esi-ms：m/z[m+h]
+
＝376.11；
[0128]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.43
–
7.36(m,1h),7.35
–
7.27(m,2h),7.21(dd,j＝7.5,1.3hz,1h),7.15(t,j＝7.5hz,1h),7.08(d,j＝8.3hz,1h),7.04
–
6.97(m,2h),4.58
–
4.39(m,2h),3.47(dd,j＝13.2,7.8hz,2h),3.20
–
3.09(m,1h),2.96(ddd,j＝13.9,5.6,3.2hz,1h),2.62(dt,j＝13.5,6.7hz,1h),2.50
–
2.38(m,1h),1.78
–
1.65(m,4h)。
[0129]
实施例2：化合物4-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)quinoline的制备
[0130]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物4-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)quinoline：
[0131][0132]
合成路线：
[0133][0134]
合成步骤：
[0135]
1.化合物2-(4-((2-(quinolin-4-yloxy)ethyl)thio)butyl)isoindoline-1,3-dione的合成
[0136][0137]
称取quinolin-4-ol(m2”)(2.00g，13.78mmol)于双口烧瓶中，加入三苯基膦(10.84g，41.33mmol)，加入20ml的二氯甲烷，氮气置换，转移至冰浴下(0℃)，待体系温度稳定，滴加diad(8.36g，41.33mmol)，有大量热放出,缓慢滴加m1(5.00g，17.91mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液，冰浴搅拌过夜。
[0138]
后处理：反应液加入20ml 1n的盐酸溶液，二氯甲烷萃取两次，合并有机相，饱和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，通过高压反相色谱纯化得m3”油状物3.40g，收率约60.71％。
[0139]
esi-ms：m/z[m+h]+＝407.137。
[0140]
2.化合物4-((2-(quinolin-4-yloxy)ethyl)thio)butan-1-amine的合成
[0141]
[0142]
称取m3-015(1.00g，2.46mmol)于圆底烧瓶中，加入5ml的乙醇胺，氮气置换，转移至50℃反应，搅拌反应5h后，中控ms显示反应完全，停止反应。
[0143]
亦可称取m3”于圆底烧瓶中，加入20％naoh水溶液，氮气置换，转移至50℃反应，搅拌反应5h后，lc-ms检测显示反应完全后，停止反应。
[0144]
后处理：加入20ml的乙酸乙酯和20ml的水，调节ph至10，分液，水相用10ml萃取第二次，合并有机相，半饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，得到油状物m4”，直接往后下一步。
[0145]
esi-ms：m/z[m+h]+＝277.13
[0146]
3.化合物4-(2-((4-isothiocyanatobutyl)thio)ethoxy)quinoline的合成
[0147][0148]
用20ml二氯甲烷溶解上一步的m4”(当量均按m3”计算)，加入三乙胺(226mg，2.46mmol)，氮气置换，转移至冰浴下搅拌，用10ml的二氯甲烷溶解硫羰基二咪唑(0.40g，2.46mmol)，在冰浴下滴加到m4'的二氯甲烷体系中，加毕，继续冰浴搅拌20min，转移至室温搅拌过夜,lc-ms中控反应完全，停止反应。
[0149]
后处理:反应液加入10ml的二氯甲烷，用10ml半饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，旋干得到m5”，直接用于下一步。
[0150]
esi-ms：m/z[m+h]+＝318.10。
[0151]
4.化合物4-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)quinoline的合成
[0152][0153]
将上步得到m5”加入10ml的乙醇和2ml的乙酸，冰浴下搅拌，缓慢滴加双氧水(251.03mg，7.38mmol)，转移至室温搅拌反应，搅拌过夜，中控ms显示反应完全，45℃旋干大部分乙醇，加入20ml的二氯甲烷萃取，10ml二氯甲烷再次萃取水相，合并有机相，半饱和食盐水洗4-5次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，高压反相色谱纯化，得到api,纯度大于99％，收率约76％。
[0154]
esi-ms：m/z[m+h]+＝335.10；
[0155]
1h nmr(400mhz,d2o)δ8.75(d,j＝6.7hz,1h),8.28(d,j＝8.5hz,1h),7.91(d,j＝3.0hz,2h),7.73
–
7.67(m,1h),7.31(d,j＝6.8hz,1h),3.51
–
3.30(m,4h),1.84
–
1.67(m,4h),1.08(d,j＝6.4hz,4h)。
[0156]
实施例3：化合物5,5'-diallyl-2,2'-bis(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-1,1'-biphenyl的制备
[0157]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物5,5'-diallyl-2,2'-bis(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-1,1'-biphenyl：
[0158][0159]
合成路线：
[0160][0161]
合成步骤：
[0162]
1.化合物2,2'-(((((5,5'-diallyl-[1,1'-biphenyl]-2,2'-diyl)bis(oxy))bis(ethane-2,1-diyl))bis(sulfanediyl))bis(butane-4,1-diyl))bis(isoindoline-1,3-dione)的合成
[0163][0164]
称取5,5'-diallyl-[1,1'-biphenyl]-2,2'-diol(m2”')(0.86g，3.22mmol)于双口烧瓶中，加入三苯基膦(2.82g，10.74mmol)，加入20ml的甲苯，氮气置换，转移至冰浴下(0℃)，待体系温度稳定，滴加diad(2.18g，10.74mmol)，缓慢滴加2-(4-((2-hydroxyethyl)thio)butyl)isoindoline-1,3-dione(m1)(2.00g，7.12mmol)的甲苯(5ml)溶液，加毕，转移至80摄氏度回流反应5h,lc-ms中控反应完全，停止反应。
[0165]
后处理：旋干甲苯，反应液加入20ml的二氯甲烷和20ml 1n的盐酸溶液，20ml二氯甲烷萃取两次，合并有机相，饱和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，旋干，通过硅胶柱层析纯化得到m3”'油状物3.91g，收率约69.20％。
[0166]
esi-ms：m/z[m+h]+＝789.29。
[0167]
2.化合物4,4'-((((5,5'-diallyl-[1,1'-biphenyl]-2,2'-diyl)bis(oxy))bis(ethane-2,1-diyl))bis(sulfanediyl))bis(butan-1-amine)的合成
[0168][0169]
称取m3”'(1.27g，1.61mmol)于圆底烧瓶中，加入10ml的乙醇胺，加入20％naoh水溶液，氮气置换，转移至50℃反应。反应5h后，lc-ms中控反应完全，停止反应。后处理：加入20ml的乙酸乙酯和20ml的水，水相用20ml乙酸乙酯萃取第二次，合并有机相，半饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，得到油状物m4”'，直接用于下一步。
[0170]
esi-ms：m/z[m+h]+＝529.28。
[0171]
3.化合物((5,5'-diallyl-[1,1'-biphenyl]-2,2'-diyl)bis(oxy))bis(ethane-2,1-diyl))bis((4-isothiocyanatobutyl)sulfane的合成
[0172][0173]
用20ml二氯甲烷溶解上一步的m4”'(当量均按m3”'计算)，加入三乙胺(0.97g，9.61mmol)，氮气置换，转移至冰浴下搅拌，用10ml的二氯甲烷溶解硫羰基二咪唑(1.71g，9.61mmol)，在冰浴下滴加到m4”'的二氯甲烷体系中，加毕，继续冰浴搅拌20min，转移至室温搅拌过夜,中控反应完全，停止反应。
[0174]
后处理:反应液加入10ml的二氯甲烷，用10ml半饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，旋干得到m5”'，直接用于下一步。
[0175]
esi-ms：m/z[m+h]+＝613.20；
[0176]
4.化合物5,5'-diallyl-2,2'-bis(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-1,1'-biphenyl的合成
[0177][0178]
加入20ml的乙醇和2ml的乙酸，冰浴下搅拌，缓慢滴加双氧水(1.00g，
[0179]
29.41mmol)，转移至室温搅拌反应，搅拌过夜，中控ms显示反应完全，45℃旋干大部分乙醇，加入20ml的二氯甲烷和20ml水萃取，20ml二氯甲烷再次萃取水相，合并有机相，半饱和食盐水洗4-5次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，高压反相色谱纯化，得到化合物5,5'-diallyl-2,2'-bis(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-1,1'-biphenyl，纯度99％，三步收率约62％。
[0180]
esi-ms：m/z[m+h]+＝645.18；
[0181]
1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.14(d,j＝8.3hz,2h),7.04(s,2h),6.91(dd,j＝8.4,3.2hz,2h),5.95(ddt,j＝16.8,10.0,6.7hz,2h),5.06(t,j＝12.7hz,4h),4.41
–
4.20(m,4h),3.51(d,j＝5.7hz,4h),3.35(d,j＝6.7hz,4h),3.18
–
2.73(m,4h),2.61
–
2.27(m,4h),1.78
–
1.60(m,8h)。
[0182]
实施例4：化合物2-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)phenol的制备
[0183]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物2-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)phenol：
[0184][0185]
esi-ms：m/z[m+h]+＝300.00；
[0186]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.979(s,1h),6.981(d,j＝8hz,1h),6.814(d,j＝0.8hz,2h),6.755
–
6.713(m,1h),4.343
–
4.305(m,2h),3.739(t,j＝6.0hz,2h),3.259
–
3.211(m,1h),3.071-3.013(m,1h),2.969-2.833(m,2h),1.806
–
1.754(m,4h)。
[0187]
实施例5：化合物4-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)pyridine的制备
[0188]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物4-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)pyridine：
[0189]
[0190]
esi-ms：m/z[m+h]+＝285.15；
[0191]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.41(dd,j＝4.8,1.6hz,2h),7.03(dd,j＝4.4,1.6hz,2h),4.49
–
4.40(m,2h),3.74(t,j＝5.6hz,2h),3.27
–
3.24(m,1h),3.11-3.05(m,1h),2.93-2.78(m,2h),1.79
–
1.76(m,4h)。
[0192]
实施例6：化合物2-(2-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)benzyl)phenol的制备由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物2-(2-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)benzyl)phenol：
[0193][0194]
esi-ms：m/z[m+h]+＝390.00；
[0195]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.29(s,1h),7.174(td,j＝7.2,1.6hz,1h),7.042-6.983(m,3h),6.914(d,j＝7.6hz,1h),6.856(t,j＝7.6hz,1h),6.796(d,j＝8hz,1h),6.676(t,j＝7.6hz,1h),4.411
–
4.282(m,2h),3.825(dd,j＝18.4,15.6hz,2h),3.718(t,j＝6.0hz,2h),3.274-3.205(m,1h),3.080-3.025(m,1h),2.888-2.730(m,2h),1.770-1.720(m,4h)。
[0196]
实施例7：化合物5,5'-diallyl-2'-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-[1,1'-biphenyl]-2-yl dihydrogen phosphate的制备
[0197][0198]
合成路线:
[0199][0200]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物(z)5,5'-diallyl-2'-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-[1,1'-biphenyl]-2-ol，取250ml双口烧瓶，加入(z)5,5'-diallyl-2'-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-[1,1'-biphenyl]-2-ol(2g,4.34mmol),加入50ml的二氯甲烷，加入三乙胺(1.78g,17.6mmol),氮气置换，转移至-20摄氏度，待体系温度稳定，缓慢滴加三氯氧磷(0.81g,5.27mmol),继续反应7h，用饱和的碳酸氢钠水溶液调节ph＝8左右，萃取分液，旋干有机相，通过高压反相色谱纯化得到目标产品400mg，纯度大于96％，收率约20％。
[0201]
esi-ms：m/z[m+h]+＝536.13；
[0202]
1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.50(d,j＝8hz,1h),7.03(d,j＝8hz,1h),6.96(s,3h),6.66(d,j＝8hz,1h),5.99-5.80(m,2h),5.06(dd,j＝36,16hz),4.06(s,1h),3.95(s,1h),3.34(d,j＝8hz),3.25(s,1h),2.85(s,1h),2.52(s,1h),2.22(s,1h),1.43(s,4h)。
[0203]
实施例8：化合物4-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-6,7-dimethoxyquinoline的制备
[0204]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物4-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-6,7-dimethoxyquinoline：
[0205][0206]
合成路线：
[0207][0208]
合成步骤：
[0209]
1.化合物2-(4-((2-((6,7-dimethoxyquinolin-4-yl)oxy)ethyl)thio)butyl)isoindoline-1,3-dione的合成
[0210]
[0211]
取m2
””
(7.7g,37.55mmol)于三口烧瓶中，加入三苯基膦(14.77g,56.32mmol)，加入100ml的二氯甲烷，氮气置换，转移至冰浴下(0℃)，待体系温度稳定，滴加diad(11.39g,56.32mmol),缓慢滴加m1(11.01g,39.42mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液，冰浴搅拌过夜。
[0212]
后处理：反应液加入80ml 1n的盐酸溶液，二氯甲烷萃取两次，合并有机相，饱和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，旋干。加入70ml的乙醇，冰浴下重结晶，过夜，抽滤，少量乙醇洗涤两次，旋干得到m3
””
。收率78％。
[0213]
2.化合物4-((2-((6,7-dimethoxyquinolin-4-yl)oxy)ethyl)thio)butan-1-amine(m4-053)的合成。
[0214][0215]
称取m3
””
(9.35g,20mmol)于圆底烧瓶中，加入50ml的乙醇胺，氮气置换，转移至80℃反应。反应5小时,lcms中控，一直有少量脱一半的副产物反应不完，转移至室温，加入氢氧化钠(1.14,28.4mmol)水溶液5ml，置换氮气，室温搅拌过夜，原料反应完全，停止反应。
[0216]
后处理：加入100ml的乙酸乙酯和100ml的水，水相用100ml乙酸乙酯萃取第二次，合并有机相，半饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，得到油状物m4”'，直接往后下一步。
[0217]
esi-ms：m/z[m+h]+＝337.2。
[0218]
3.化合物4-(2-((4-isothiocyanatobutyl)thio)ethoxy)-6,7-dimethoxyquinoline的合成
[0219][0220]
用100ml二氯甲烷溶解上一步m4
””
，加入三乙胺(1.92g，18.9mmol,按m1算)，氮气置换，转移至冰浴下搅拌，用40ml的二氯甲烷溶解硫羰基二咪唑(3.4g，18.9mmol,按m1算)，在冰浴下滴加到m4
””
的二氯甲烷体系中，加毕，继续冰浴搅拌20min，转移至室温搅拌过夜,lcms中控反应完全，停止反应。
[0221]
后处理：半饱和食盐水洗涤两次(除咪唑)，无水硫酸钠干燥，旋干得到m5
””
，直接用于下一步。
[0222]
esi-ms：m/z[m+h]+＝379.11。
[0223]
4.化合物4-(2-((4-isothiocyanatobutyl)thio)ethoxy)-6,7-dimethoxyquinoline的合成
[0224]
加入100ml的乙醇和10ml的乙酸，冰浴下搅拌，缓慢滴加双氧水(4.3g，37.9mmol,按m1算)，转移至室温搅拌反应，搅拌过夜，中控ms显示反应完全，45℃旋干大部分乙醇，加入100ml的二氯甲烷和30ml水萃取，30ml二氯甲烷再次萃取水相，合并有机相，半饱和食盐水洗4-5次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，用50ml ea冰浴重结晶纯化，抽滤得到
白色固体8g,纯度大于99％。
[0225]
esi-ms：m/z[m+h]+＝395.10；
[0226]
1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.18(dd,j＝8.4,2.3hz,1h),7.14
–
7.05(m,1h),6.99(dd,j＝12.2,5.3hz,2h),6.89(d,j＝8.2hz,1h),6.09(s,1h),6.03
–
5.88(m,2h),5.16
–
4.99(m,3h),4.53
–
4.34(m,2h),3.46(dd,j＝9.2,3.8hz,1h),3.36(dd,j＝8.3,6.7hz,4h),3.12(ddd,j＝12.7,8.5,4.1hz,1h),2.93(ddd,j＝13.9,5.5,3.4hz,1h),2.62(dt,j＝13.6,6.8hz,1h),2.46(dt,j＝13.3,7.5hz,1h),1.79
–
1.56(m,4h)。
[0227]
实施例9：化合物4-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-1h-indole的制备
[0228]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物4-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-1h-indole：
[0229][0230]
esi-ms：m/z[m+h]+＝322.95；
[0231]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.099(s,1h),7.229(t,j＝2.8hz,1h),7.02(dd,j＝19.6,8.0hz,1h),7.019(s,1h),6.566(d,j＝7.2hz,1h),6.413(t,j＝2.0hz,1h),4.520
–
4.393(m,2h),3.738(t,j＝6.0hz,2h),3.319(dd,j＝9.2,5.2hz,1h),3.147
–
3.091(dt,j＝13.6,4.0hz,1h),2.989
–
2.892(m,1h),1.793(d,j＝3.6hz,4h)。
[0232]
实施例10：化合物8-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)quinazolin-2-amine的制备
[0233]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物8-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)quinazolin-2-amine(zxs-093)：
[0234][0235]
esi-ms：m/z[m+h]+＝351.15；
[0236]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.072(s,1h),7.390(d,j＝7.2hz,1h),7.266(d,j＝7.6hz,1h),7.140(t,j＝7.6,1h),6.838(s,1h),4.549-4.465(m,2h),3.739(t,j＝6.0hz,2h),3.379
–
3.274(m,1h),3.182-3.095(d,dt,j＝5.2,13.6,4.4hz,1h),3.021-2.890(m,2h),1.794(s,4h))。
[0237]
实施例11：化合物2,2'-bis(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-1,1'-biphenyl的制备
[0238]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物2,2'-bis(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-1,1'-biphenyl：
[0239][0240]
esi-ms：m/z[m+h]+＝565.40，
[0241]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.342(dd j＝15.6,1.6hz,1h),7.342(s,1h),7.195-7.166(dt,j＝7.6,2.4hz,2h),7.124(dd j＝8.0,2.8hz,2h),7.014(t,j＝7.2,1h),4.387-4.238(m,4h),3.675(t,j＝5.8,4h),3.156-3.096(m,2h),2.981-2.907(m,2h),2.573(t,j＝6.6hz,4h),1.703
–
1.563(m,8h)。
[0242]
实施例12：化合物4-(3-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)propoxy)quinoline的制备
[0243]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物4-(3-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)propoxy)quinoline：
[0244][0245]
esi-ms：m/z[m+h]+＝349.45；
[0246]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.734(d,j＝5.2hz,1h),8.211(d,j＝8.4hz,1h),7.952(d,j＝8.4hz,1h),7.749(t,j＝8.0hz,1h),7.572(t,j＝8.0hz,1h),7.033(d j＝5.2hz,1h),4.392(t,j＝4.4,1h),3.735(t,j＝4.4,1h),3.081-3.009(m,1h),2.947-2.839(m,1h),2.801-2.733(m,1h),2.316-2.317(m,1h),1.774(s,4h)。
[0247]
实施例13：化合物4-(2-((2-isothiocyanatoethyl)thio)ethoxy)quinoline的制备
[0248]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物4-(2-((2-isothiocyanatoethyl)thio)ethoxy)quinoline：
[0249][0250]
esi-ms：m/z[m+h]+＝291.15；
[0251]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.747(d,j＝5.2hz,1h),8.156(d,j＝8.4hz,1h),7.962(d,j＝8.4hz,1h),7.759(dd,t,j＝15.2,1.6,1.6hz,1h),7.586(dd,t,j＝15.2,1.2,1h),7.069(d,j＝5.2hz,1h),4.450(t,j＝6.4,2h),3.922(t,j＝6.4,2h),3.143(t,j＝6.4,2h),3.012(t,j＝6.8,2h)。
[0252]
实施例14：化合物4-(2-((2-isothiocyanatoethyl)sulfinyl)ethoxy)quinoline的制备
[0253]
由实施例13之终产物开始，采用与上述化合物实施例1类似的氧化方法得到化合物4-(2-((2-isothiocyanatoethyl)sulfinyl)ethoxy)quinoline：
[0254][0255]
esi-ms：m/z[m+h]+＝307.40；
[0256]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.771(d,j＝5.2,2.8hz,1h),8.186-8.156(dd,j＝
[0257]
8.4,3.6hz,1h),7.975(d,j＝8.4hz,1h),7.771(t,j＝8.0hz,1h),7.596(td,j＝7.2,0.8hz,1h),7.153(t,j＝4.4hz,1h),4.765-4.569(m,2h),,3.598-3.458(m,2h),1.912-1.818(d,4h)。
[0258]
实施例15：化合物4-(2-((6-isothiocyanatohexyl)sulfinyl)ethoxy)quinoline的制备
[0259]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物4-(2-((6-isothiocyanatohexyl)sulfinyl)ethoxy)quinoline：
[0260][0261]
esi-ms：m/z[m+h]+＝363.50；
[0262]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.764(d,j＝5.2hz,1h),8.161(d,j＝8.4hz,1h),7.977(d,j＝8.4hz,1h),7.769(t,j＝8.0hz,1h),7.597(t,j＝8.0hz,1h),7.141(d,j＝5.2hz,1h),4.723-4.472(m,1h),4.634-4.575(td,j＝9.6,3.6hz,1h),3.664(t,j＝6.4,2h),3.384-3.415(m,1h),3.258-3.203(dt,j＝14,4.4hz,1h),2.964-2.798(m,2h),1.754-1.624(m,4h),1.482-1.380(m,4h)。
[0263]
实施例16：化合物2-chloro-2'-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-1,1'-biphenyl的制备
[0264]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物2-chloro-2'-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-1,1'-biphenyl：
[0265][0266]
esi-ms：m/z[m+h]+＝394.00；
[0267]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.540-7.500(m,1h),7.426-7.367(m,3h),7.341-7.307(m,1h),7.718(t,j＝8.0hz,2h),7.059(t,j＝7.2hz,1h),4.405-4.276(m,2h),3.677(t,j＝5.6hz,2h),3.139-3.072(m,1h),2.953-2.896(m,1h),2.580(t,j＝6.8,2h),1.699-1.581(m,4h)。
[0268]
实施例17：化合物4-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-1h-indazole(zxs-156)的制备
[0269]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物4-(2-((4-isothiocyanatobutyl)sulfinyl)ethoxy)-1h-indazole：
[0270][0271]
esi-ms：m/z[m+h]+＝324.35；
[0272]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.07(s,1h),7.99(s,1h),7.26(t,j＝8.0hz,1h),7.12(d,j＝8.0hz,1h),6.63(d,j＝8.0hz,1h),4.57-4.48(m,2h),3.74(t,j＝4.0hz,2h),3.39-3.32(m,1h),3.18-3.11(m,1h),2.97-2.93(m,1h),2.89-2.84(m,1h),1.82-1.77(m,1h)。
[0273]
实施例18：化合物(e)-4-(2-((4-isothiocyanatobut-1-en-1-yl)sulfinyl)ethoxy)quinoline的制备
[0274]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物(e)-4-(2-((4-isothiocyanatobut-1-en-1-yl)sulfinyl)ethoxy)quinoline：
[0275][0276]
esi-ms：m/z[m+h]+＝333.40；
[0277]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.751(d,j＝5.2hz,1h),8.178(dd,j＝7.6,4.8hz,1h),7.966(d,j＝8.4hz,1h),7.762(t,j＝7.6hz,1h),7.595(td,j＝8.0,2.8hz,1h),7.116(dd,j＝9.2,5.2hz,1h),6.931-6.677(m,1h),6.346-6.266(m,1h),4.686-4.555(m,2h),3.839-3.740(m,2h),3.563-3.4343(m,2h),2.802-2.540(m,2h)。
[0278]
实施例19：化合物4-((5-isothiocyanatopentyl)oxy)quinoline的制备
[0279]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物4-((5-isothiocyanatopentyl)oxy)quinoline：
[0280][0281]
esi-ms：m/z[m+h]+＝273.10；
[0282]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.196-8.172(dt,j＝8.0,0.8hz,1h),8.008(d,j＝7.6hz,1h),7.743-7.725(m,2h),7.398-7.358m,1h),6.049(d,j＝7.6hz,1h),4.257(t,j＝7.2hz,2h),3.668(t,j＝6.4hz,2h),1.787-1.641(m,4h),1.437-1.360(m,2h)。
[0283]
实施例20：化合物4-(2-(2-isothiocyanatoethoxy)ethoxy)quinoline的制备
[0284]
由对应起始物开始，采用与上述化合物实施例1类似的制备方法得到化合物：
[0285][0286]
esi-ms：m/z[m+h]+＝275.08；
[0287]
1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.741(d,j＝5.2hz,1h),8.215(dd,j＝8.4,1.2hz,1h),7.955(d,j＝8.4hz,1h),7.752(td,j＝7.2,1.6hz,1h),7.752(td,j＝6.8,1.2hz,1h),7.050(d,j＝5.2hz,1h),4.417(t,j＝4.4hz,2h),3.980(t,j＝4.4hz,2h),3.881(t,j＝4.8hz,2h),3.781(t,j＝5.2hz,2h)。
[0288]
实施例21：人肿瘤细胞株增殖活性测试
[0289]
1)利用celltiter-glo检测方法，测定了化合物对10个肿瘤细胞株增殖活性的影响。选取了肿瘤细胞株a549(肺癌人类肺泡基底上皮细胞)、hep g2(人肝癌细胞)、mia paca-2(人胰腺癌细胞)、thp-1(人单核细胞白血病细胞)、sw1463(kras突变结直肠癌)、mm1r(多发骨髓瘤)、mp41(黑色素瘤)、bt-549(人乳腺管癌细胞)、hcc 1806(人乳癌细胞)、mda-mb-231(人乳腺癌细胞)，采用celltiter-glo法对所合成的化合物进行体外抗肿瘤活性评价，并用staurosporine为阳性对照药。取对数生长期的肿瘤细胞，向离心管中加适当体积的培养基，轻柔吹打使细胞重悬均匀。使用vi-cell xr细胞计数仪计数。将细胞悬液调至合适浓度。将细胞悬液加入96孔板中，100μl/孔。标记细胞名称，种板密度，日期等详细信息，将培养板放置于co2培养箱中过夜。
[0290]
2)待测化合物用dmso配制成20mm的储存液使用hpd300自动加药仪加入相应细胞孔中，在37℃5％二氧化碳培养箱中孵育120小时。
[0291]
3)细胞增殖抑制实验部分示例
[0292][0293]
4)实施例中的化合物对a549(肺癌人类肺泡基底上皮细胞)、hep g2(人肝癌细胞)、mia paca-2(人胰腺癌细胞)、thp-1(人单核细胞白血病细胞)、sw1463(kras突变结直肠癌)、mm1r(多发骨髓瘤)、mp41(黑色素瘤)、bt-549(人乳腺管癌细胞)、hcc
[0294]
1806(人乳癌细胞)、mda-mb-231(人乳腺癌细胞)的增殖表现出抑制作用。其中zxs-055对sw1463(kras突变结直肠癌)、mm1r(多发骨髓瘤)、mp41(黑色素瘤)表现出明显的抑制作用，其ic50值分别为0.265、0.017、0.098，zxs-136对hep g2(人肝癌细胞)、mia paca-2(人胰腺癌细胞)、thp-1(人单核细胞白血病细胞)的增殖抑制明显，ic50值分别为0.308、0.602、0.227和0.628。细胞增殖抑制实验数据依表明该系列化合物对a549(肺癌人类肺泡基底上皮细胞)的抑制作用弱于对其他已测瘤株的抑制作用。
[0295]
5)通过细胞增殖抑制实验数据进行构效分析。化合物中的-ncs结构应为药效或者增加药效的结构，其中zxs-059丢失-ncs结构后其细胞增殖抑制作用明显下降。对比zxs-136和zxs-015,化合物的侧链长度适当延长有利于增加化合物的细胞增殖抑制作用。
[0296]
6)总之，通过对萝卜硫素的结构中引入其他不同的基团，或者对其自己结构修改，活得了更多的具有肿瘤细胞增殖抑制作用的衍生物。保留-ncs结构的同时，当侧链延长，化合物的抗肿瘤活性变化趋势明显。在化合物的环状结构部分，具有偶联芳环或者芳杂环、并联双环结构的化合物具有比单环结构更好的肿瘤细胞增殖抑制活性。因此，在进一步以萝卜硫素为基本骨架寻求抗肿瘤活性更好，选择性更高，具有更优势的成药特性的化合物提供有价值的信息。
[0297]
异硫氰酸酯衍生物对肿瘤细胞的半数抑制浓度(ic
50
)
[0298][0299][0300]
细胞学ic50数据测试化合物来源于实施例中的化合物，非一一对应关系，测试用阳性对照物为星形孢菌素(staurosporine)。

技术特征：
1.一种异硫氰酸酯衍生物，其特征在于，具有通式i的结构：其中：r1，r2可以占据环上2，3，4中的任何位置，分别独立地选自下述基团：h，oh，f，cl，br，i，cf3，or3，sr3，nr4r5，cn，n3，ncs，nco，so2cl，so2f，conr4r5，so2nr4r5，coor3，no2，cho，cf3，so3h，op(o)(oh)2，si(烷基)3，氟代烷基，取代或未取代的c1-c10烷基，取代或未取代的c1-c10烷烯基，取代或未取代的c1-c10烷炔基，c1-c10环烷基，c6-c10芳基，c6-c10杂芳基，c3-c20杂环烷基；或者，r1和r2相邻时可连接形成取代或未取代的c5-c12芳环，取代或未取代的c5-c12杂芳环，取代或未取代的c3-c10饱和或不饱和的环烷基环，取代或未取代的饱和或不饱和的c3-c10杂环烷基环，取代或未取代的c3-c10螺环烷基环，取代或未取代的c3-c10螺杂环烷基环；r3，r4，r5分别独立地选自下述基团：h，取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c1-c10烷烯基，取代或未取代的c1-c10烷炔基，c1-c10环烷基、c6-c10芳基、c6-c10杂芳基、c3-c20杂环烷基；或者r4和r5可相互连接成芳环，杂芳环，或饱和或不饱和的杂环烷基环；w1，w2，w3分别独立地为c或n；x为o，n或c；y1，y2分别独立地选自下述基团：h，oh，f，cl，br，cf3，or3，nr4r5，取代或未取代的c1-c10烷基、c1-c10环烷基、c6-c10芳基、c6-c10杂芳基、c3-c20杂环烷基；或者，y1和y2相互连接形成取代或未取代的c5-c12芳环，取代或未取代的c5-c12杂芳环，取代或未取代的饱和或不饱和的c3-c10环烷基环，取代或未取代的饱和或不饱和的c3-c10杂环烷基环，取代或未取代的c3-c10螺环烷基环，或取代或未取代的c3-c10螺杂环烷基环；杂原子为1个或多个n、s、o原子；l＝1或2；n＝1-3；m＝1-5。2.根据权利要求1所述的异硫氰酸酯衍生物，在通式i中：r1，r2分别独立地选自下述基团：h，oh，f，cl，br，cf3，or3，nr4r5，取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c1-c10烷烯基，取代或未取代的c1-c10烷炔基，c1-c10环烷基、c6-c10芳基、c6-c10杂芳基、c3-c20杂环烷基；或者，r1和r2相邻时可连接成取代或未取代的芳环，取代或未取代的杂芳环，取代或未取代的饱和或不饱和的杂环烷；w1，w2，w3分别独立地为c或n；x为o；
c20杂环烷基；或者，r1和r2相邻时可连接形成取代或未取代的c5-c12芳环，取代或未取代的c5-c12杂芳环，取代或未取代的饱和或不饱和的c3-c10环烷基环，取代或未取代的饱和或不饱和的c3-c10杂环烷基环，取代或未取代的c3-c10螺环烷基环，取代或未取代的c3-c10螺杂环烷基环，取代或未取代的c3-c10桥环烷基环，取代或未取代的c3-c10桥杂环烷基环；其中杂原子为n、s、o或其组合；其中：r3，r4，r5分别独立地选自下述基团：h，取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c1-c10烷烯基，取代或未取代的c1-c10烷炔基，c1-c10环烷基、c6-c10芳基、c6-c10杂芳基、c3-c20杂环烷基；或者r4和r5可相互连接成芳环，杂芳环，饱和或不饱和的杂环烷基环；w1，w2，w3，w4，w5，w6，w7各自独立为c或n；x为o，n或c；l＝1或2；n＝1-3；m＝1-5。7.根据权利要求1所述的异硫氰酸酯衍生物，其特征在于，具有通式iii的结构：其中：r1，r2，r7可以占据各自所在环上的任何位置，分别独立地选自下述基团：h，f，cl，br，i，or3，sr3，nr4r5，cn，n3，ncs，nco，so2cl，so2f，conr4r5，so2nr4r5，coor3，no2，cho，cf3，so3h，o-p(o)(oh)2，-si(烷基)3，氟代烷基，取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c1-c10烷烯基，取代或未取代的c1-c10烷炔基，c1-c10环烷基、c6-c10芳基、c6-c10杂芳基、c3-c20杂环烷基；或者，r1r2相邻时可连接形成取代或未取代的c5-c12芳环，取代或未取代的c5-c12杂芳环，取代或未取代的饱和或不饱和的c3-c10环烷基环，取代或未取代的饱和或不饱和的c3-c10杂环烷基环，取代或未取代的c3-c10螺环烷基环，取代或未取代的c3-c10螺杂环烷基环，取代或未取代的c3-c10桥环烷基环，取代或未取代的c3-c10桥杂环烷基环；其中杂原子为n、s或o或其组合；其中：r3，r4，r5分别独立地选自下述基团：h，取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c1-c10烷烯基，取代或未取代的c1-c10烷炔基，c1-c10环烷基、c6-c10芳基、c6-c10杂芳基、c3-c20杂环烷基；或者r4和r5可相互连接成芳环，杂芳环，饱和或不饱和的杂环烷基环；x为o，n或c；l＝1或2；n＝1-3；m＝1-5。
8.权利要求1-7任一项所述的异硫氰酸酯衍生物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：1)在三苯基膦和diad催化下,m1与g-xh发生mitsunobu醚化反应生产中间体m3；2)m3经过催化酰胺水解，脱去邻苯二甲酸结构，得到中间体m4；3)用三乙胺催化，m4与硫羰基二咪唑发生亲核取代反应，得到中间体m5；4)m5与h2o2进行氧化反应，制备目标产物(i’)：9.一种药用组合物，其包括有效剂量权利要求1-7任一项所述的异硫氰酸酯衍生物作为药用活性成分，以及药学上可接受的载体和赋形剂。10.权利要求1-7任一项所述异硫氰酸酯衍生物或其药用组合物在制备药物方面的用途，其中所述药物用于预防或治疗癌症。11.权利要求10所述的用途，其中所述癌症为胰腺癌、肝癌、肺癌、乳腺癌、黑色素瘤、多发骨髓瘤、胃癌、结直肠癌或血液肿瘤。

技术总结
本发明提供了一种异硫氰酸酯衍生物及其制备方法和用途。所述异硫氰酸酯衍生物，尤其是芳氧基烷基取代的异硫氰酸酯类化合物，具有广谱的抗肿瘤活性和很强的成药性。广谱的抗肿瘤活性和很强的成药性。


技术研发人员：刘进军 王凤亮
受保护的技术使用者：青岛真兴医药技术有限公司
技术研发日：2023.06.20
技术公布日：2023/10/19