阿戈美拉汀用于制备治疗关节炎的药物的用途

1.本发明属于医药领域，具体涉及阿戈美拉汀用于制备治疗关节炎的药物的用途。


背景技术：

2.关节炎在全球发病率很高，种类繁多，其中最常见的是骨关节炎(osteoarthritis，oa)、类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，ra)、银屑病关节炎(psoriatic arthritis，psa)、痛风性关节炎、幼年特发性关节炎(juvenile idiopathic arthritis，jia)等。所有类型的关节炎都有共同的疾病特征，包括单核细胞浸润、炎症、滑膜肿胀、筋膜形成、关节僵硬和关节软骨破坏。关节炎的确切病因尚不清楚，也没有治愈方法。
3.阿戈美拉汀是一种新型的抗抑郁药物，临床主要用于抗抑郁、抗焦虑、调整睡眠节律及调节生物钟作用。作为一种新作用机制的抗抑郁药物，其安全性状况不同于ssri/snrais，不易出现临床相关的体重增加，性功能障碍发生率低，胃肠道反应风险低，无明显停药症状。
4.目前，没有阿戈美拉汀具有抗关节炎活性的报道。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供阿戈美拉汀用于制备治疗关节炎的药物的用途。
6.本发明上述目的通过如下技术方案实现：
7.阿戈美拉汀用于制备治疗关节炎的药物的用途。
8.进一步地，所述药物以阿戈美拉汀为活性成分，还含有药学上可以接受的载体或辅料，制成药学上可以接受的剂型。
9.进一步地，所述载体或辅料为固体、液体或半固体。
10.进一步地，所述剂型包括片剂、胶囊和注射剂。
11.有益效果：
12.本发明发现，阿戈美拉汀可以有效改善关节炎模型小鼠的关节炎症状。因此，阿戈美拉汀具有开发成治疗关节炎药物的前景。
附图说明
13.图1为各组cia小鼠临床症状评分；
14.图2为各组cia小鼠踝关节he染色；
15.图3为各组cia小鼠关节组织病理评分。
具体实施方式
16.下面结合实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。
17.一、实验材料
18.甲氨蝶呤：m813626，麦克林；
19.agomelatine：hy-17038，medchemexpress；
20.immunization grade chick type ii collagen：20012，chondrex；
21.complete freund's adjuvant：7001，chondrex；
22.incomplete freund's adjuvant：7002，chondrex；
23.戊巴比妥钠：p3761，sigma；
24.一次性注射器：1ml0.45*16(褐)，新津事丰。
25.二、实验方法
26.1、小鼠
27.7周龄dba/j1小鼠购买于北京华阜康生物科技有限公司，在四川大学华西医院成都前沿医学中心动物房喂养，每笼5只小鼠，自由饮水和进食，12小时照明/12小时关灯，温度保持在22-24℃，喂养1周后开始动物实验。本课题所涉及的实验方法已经获得四川大学华西医院生物伦理委员会批准。
28.2、构建实验性关节炎动物模型(cia模型)
29.配备鸡ii型胶原与完全弗氏佐剂的乳化剂。从-20℃冰箱取出鸡ii型胶原，在避光环境中，置于冰上解冻。取一个5ml的玻璃瓶置于冰浴环境，往玻璃瓶中放入一个大小合适的磁珠，加入完全弗式佐剂，打开电磁搅拌器使磁珠转动，转速为300rpm，然后缓慢滴入鸡ii型胶原。搅拌30分钟至1小时后检查鸡ii型胶原和完全佐剂是否乳化完成。乳化良好时，混合液滴入水中不分散。cia小鼠模型的构建，根据已经发表的研究方案进行(参考文献：brand dd,latham ka,rosloniec ef.collagen-induced arthritis.nature protocols 2007；rosloniec ef,whittington k,proslovsky a,brand dd.collagen-induced arthritis mouse model.currentprotocols 2021)：
30.第一次免疫，在第8周dba小鼠腹腔注射100μl 0.3％戊巴比妥钠，麻醉完成后，于小鼠尾根部1.5-2cm处皮下注射乳化剂100μl。推注完成后快速拔针并按压1分钟，观察小鼠无异常后放回笼中。
31.第一次免疫后的第21天，对小鼠进行加强免疫。按照第一次乳化剂的配制方法配制鸡ii型胶原和不完全佐剂的乳化剂，乳化成功后，在第一次免疫更靠近尾巴根部处进行皮下注射，每只注射100μl，充分按压且观察小鼠无异常后放回笼中。
32.3、药物配置
33.根据小鼠每天每次用量和给药时间称量药物，加入dmso溶解，每6只小鼠一天的用量分装到1.5ml的ep管中，放于-80℃保存，保存时间不能超过3个月。药物稀释液按超纯水：无水乙醇：2％乙酸＝8:3:1的比例进行配制。给小鼠喂养时，取一支1.5ml的ep管，加入药物稀释液，稀释后的药物体积为600ul，每只小鼠灌胃给药一天一次，每次100ul。注意在加dmso溶解药物时，要控制dmso的最终浓度不能超过5％。模型组给予含有同样dmso浓度的药物稀释液。
34.4、实验分组和给药
35.第一次免疫后的第19天，将小鼠随机分组，分为6只每组，分为正常小鼠组(不进行造模)、模型对照组(给予药物稀释液)、阳性对照药物组、药物组高剂量(10mg/kg)和低剂量
(1mg/kg)。从初次免疫第19天起，每天通过灌胃给药，每次每只小鼠用100μl液体，直到实验结束。在造模后的第49天，实验结束，处死小鼠，收集踝关节进行固定、脱钙、石蜡包埋、切片、he染色。
36.5、小鼠关节炎症评分
37.在加强免疫后，每2天对关节炎症进行一次评分。评分标准为：对于每个肢体，0分代表正常，1分代表1趾轻度红肿，2分代表2趾或以上轻度红肿，3分代表全腕/踝中度红肿或全趾中度红肿，4分代表全腕/踝或全趾重度红肿。每个肢体的最高分为4分，每只小鼠最高分为16分。
38.6、关节炎的病理评分
39.对各组小鼠he染色切片进行炎症、骨侵蚀、滑膜增殖三个方面评分，评分标准如表1。
40.表1关节炎的病理评分标准
[0041][0042]
7、数据处理
[0043]
数据作图采用prism6软件，数据分析采用spss软件，通过单因素anova和bonferroni法分析组间差异和两两比较。p＜0.05为有统计学意义，*p《0.05，**p《0.01，***p《0.001，****p《0.0001。
[0044]
三、实验结果
[0045]
我们测试了阳性药mtx和阿戈美拉汀(agomelatine，aom)对cia小鼠模型的治疗作用。结果显示与模型组相比，mtx(2mg/kg)和aom(10mg/kg)组能降低小鼠关节炎症状评分，差异有统计学意义(p＜0.05)(图1)。
[0046]
各组踝关节he染色切片如图2所示，与正常小鼠组相比，cia模型对照组局部存在大量炎性细胞浸润，滑膜增生明显，关节骨质破坏，说明关节炎模型造模成功；与cia模型对照组相比，各给药组炎性细胞浸润、滑膜增生、关节骨质破坏情况均明显缓解。各组关节组织病理评分结果如图3所示，与cia模型对照组相比，mtx、aom能降低踝关节滑膜炎症、滑膜
增生和骨质破坏评分，差异有统计学意义(p＜0.05)。
[0047]
上述实验结果表明，阿戈美拉汀可以有效改善关节炎模型小鼠的关节炎症状。因此，阿戈美拉汀具有开发成治疗关节炎药物的前景。
[0048]
上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。

技术特征：
1.阿戈美拉汀用于制备治疗关节炎的药物的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物以阿戈美拉汀为活性成分，还含有药学上可以接受的载体或辅料，制成药学上可以接受的剂型。3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述载体或辅料为固体、液体或半固体。4.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述剂型包括片剂、胶囊和注射剂。

技术总结
本发明公开了阿戈美拉汀用于制备治疗关节炎的药物的用途。阿戈美拉汀可以有效改善关节炎模型小鼠的关节炎症状。因此，阿戈美拉汀具有开发成治疗关节炎药物的前景。现有技术没有公开过本发明请求保护的技术方案，本发明具有突出的实质性特点和显著的进步。有突出的实质性特点和显著的进步。有突出的实质性特点和显著的进步。


技术研发人员：陈月红 谢其冰 尹耕 刘欢 田韵如 李芊蔚
受保护的技术使用者：四川大学华西医院
技术研发日：2023.08.28
技术公布日：2023/10/19