治疗化学气体暴露的方法与流程

治疗化学气体暴露的方法
1.相关申请的交叉引用
2.本技术要求于2021年1月29日提交的美国临时专利申请us 63/143,750的权益，其内容通过引用全部并入本文。


背景技术：

3.异丁司特(ibudilast)已在日本广泛用于缓解与缺血性中风或支气管哮喘相关的症状。在最近的临床试验中，已经探索了该药物在治疗多发性硬化症(ms)(一种中枢神经系统炎症性疾病)中的用途(news.medical.net；pharmaceutical news，2005年8月2日)。正如该出版物所披露的，这项临床试验预计将治疗“复发性缓解型多发性硬化症”，但没有提及进行性多发性硬化症。在美国专利us 6,395,747中，公开了异丁司特用于治疗多发性硬化症，其通常被理解为是指复发性和缓解型多发性硬化症，而不是进行性多发性硬化症。美国专利申请公开号20060160843公开了异丁司特用于治疗间歇性和短期疼痛，但这不是与进行性神经退行性疾病有关的疼痛。然而，美国专利us 9,314,452公开了异丁司特用于治疗肌萎缩性侧索硬化症(一种进行性神经退行性疾病)。类似地，美国专利us 8,138,201公开了异丁司特用于治疗原发性进行性多发性硬化症和/或继发性进行性多发性硬化症。
4.虽然迄今为止已经报道了异丁司特用于多种不同适应症的用途，但据发明人所知，其在治疗患者中化学性诱发的急性肺损伤的应用迄今为止很大程度上仍然未得到探索。


技术实现要素：

5.在一方面，本文公开了一种在有需要的对象中治疗化学性诱发的肺损伤的方法，该方法包括向所述对象给药治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐，或基本上由如下步骤组成或由如下步骤组成：向所述对象给药治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐。
6.在一些实施方案中，肺损伤是由选自氯、芥子气、光气、路易氏剂、氯化氢、二氧化硫、硫化氢、二氧化氮、氨、氢氟酸、臭氧、异氰酸甲酯的化学品和其中两种或更多种的组合诱发的。
7.在一些实施方案中，所述肺损伤包括化学烧伤、肺水肿、喉水肿、肺组织细胞凋亡、感染性肺炎(pneumonia)、非感染性肺炎(pneumonitis)、支气管炎、细支气管炎、纤维化、急性呼吸窘迫综合征、呼吸道痉挛、或其中两种或更多种的组合。
8.在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐经口服给药。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐静脉注射给药。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐通过皮下注射给药。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐通过肌内注射给药。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐通过吸入给药。
9.在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐给药1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天或10天或更长时间。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐
给药至少3个月。
10.在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐每天至少给药一次。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐每天给药两次。
11.在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量为每天0.1mg至720mg。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量为每天30mg至200mg。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量是每天40mg至600mg。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量是每天100mg至480mg。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量选自：30mg/天、60mg/天、90mg/天、100mg/天、120mg/天、150mg/天、180mg/天、210mg/天、240mg/天、270mg/天、300mg/天、360mg/天、400mg/天、440mg/天、480mg/天、520mg/天、580mg/天、600mg/天、620mg/天、640mg/天、680mg/天以及720mg/天。
12.在一些实施方案中，治疗有效量作为单个剂量或分成两个、三个或四个剂量给药。在一些实施方案中，持续给药异丁司特。
13.在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐是患者给药的唯一活性剂。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐与至少一种其他活性剂一起给药于患者。在一些实施方案中，所述至少一种其他活性剂包含皮质类固醇或由皮质类固醇组成。
附图说明
14.图1显示了在急性肺损伤绵羊模型中测试的4只动物(阴性对照(control-n)；阳性对照(control-p)；高剂量mn-166；低剂量mn-166)的pao2/fio2结果。
具体实施方式
15.除非另有说明，否则本公开的实施将采用本领域技术范围内的化学、生物化学和药理学的常规方法。这些技术在文献中有充分的解释。参见，例如；a.l.lehninger，biochemistry(worth publishers,inc.，current addition)；morrison和boyd，organic chemistry(allyn and bacon,inc.,current addition)；j.march，advanced organic(mcgraw hill，current addition)；remington；the science and practice of pharmacy，a.gennaro,ed.,20th ed.；fda’s orange book,goodman&gilman the pharmacological basis of therapeutics,j.griffith hardman,l.l.limbird,a.gilman,11th ed.,2005,the merck manual,18th edition,2007，以及the merck manual of medical information 2003。
16.本文引用的所有出版物，包括互联网文章、fda橙皮书(可从fda网站上获得)、书籍、手册、期刊文章、专利和专利申请，无论上文或下文，均通过引用整体并入本文。
17.定义
18.在详细描述本公开内容之前，应当理解，本公开不限于特定的给药模式、患者群体等，因为这些可能变化，这一点从本文的其他描述中将显而易见。
19.必须注意的是，如本说明书和权利要求书中所使用的，单数形式“一”、“一种”和“该”包括复数对像，除非上下文另外明确指出。因此，例如，提及“一种药物”包括单一药物以及两种或更多种相同或不同的药物，提及“任选的赋形剂”是指单一任选的赋形剂以及两
种或更多种相同的或不同的任选的赋形剂等。
20.在描述和要求保护本公开时，将根据下面描述的定义使用以下术语。
21.如本文使用的，术语“包含”或“包括”意在表示组合物和方法包括所列举的元素，但不排除其他元素。当使用“基本上由......组成”定义组合物和方法时，应当意为排除对于陈述的目的的组合来说具有任何实质性作用的其他元素。因此，如本文定义的基本上由该元素组成的组合物，将不排除不会对所要求保护的发明的基本和新颖性特征造成实质性影响的其他材料或步骤。“由......组成”意指不包括多于微量元素的其他成分和实质性方法步骤。由这些过渡术语中的每一个限定的实施方案都在本发明的范围内。当实施方案由这些术语之一(例如，“包含”)定义时，应当理解，本公开还包括替代的实施方案，例如，对于所述实施方案，还包括“基本上由......组成”和“由......组成”的实施方案。
[0022]“药学上可接受的赋形剂或载体”是指可以任选地包含在本公开的组合物中并且不会对患者造成明显的有害毒理作用的赋形剂。
[0023]“药学上可接受的盐”包括但不限于氨基酸盐、用无机酸制备的盐，例如氯化物、硫酸盐、磷酸盐、二磷酸盐、溴化物和硝酸盐，或由前述任何相应的无机酸形式制备的盐，例如盐酸盐等；或用有机酸制备的盐，例如苹果酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、乙基琥珀酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、对甲苯磺酸盐、棕榈酸盐、水杨酸盐和硬脂酸盐，以及埃托酸盐、葡萄糖酸盐和乳糖酸盐。类似地，含有药学上可接受的阳离子的盐包括但不限于钠、钾、钙、铝、锂和铵(包括取代的铵)。
[0024]
如本文所述的“活性分子”或“活性剂”包括在体内或体外可以被证明提供某些药理作用(通常是有益的)的任何试剂、药物、化合物、物质或混合物组合物。其包括食品、食品补充剂、营养素、保健品、药物、疫苗、抗体、维生素和其他有益物质。如本文所用，该术语还包括在患者中产生局部或全身作用的任何生理或药理活性物质。在具体的实施方案中，活性分子或活性剂可以包括异丁司特或其药学上可接受的盐。
[0025]“实质上”或“基本上”是指几乎全部的或完全的，例如，给定数量的95％或更高。
[0026]“任选的”或“任选地”是指随后描述的情况可能会发生也可能不会发生，因此描述包括该实例发生的情况和不发生的情况。
[0027]
术语“对象、受试者”、“个体”或“患者”在本文中可互换使用，并且是指脊椎动物，优选哺乳动物。哺乳动物包括但不限于小鼠、啮齿动物、大鼠、猿猴、人、农场动物、狗、猫、运动动物和宠物。
[0028]
本文提供的术语组合物或药剂的“药学有效量”或“治疗有效量”是指无毒但足以提供所需反应(例如减轻或恢复化学诱因引起的肺损伤)的组合物或药剂的量。所需的确切量将因对象而异，取决于对象的物种、年龄和一般状况、所治疗病症的严重性、所使用的特定药物、给药模式等。基于本文提供的信息，本领域普通技术人员可以使用常规实验来确定在任何个别情况下适当的“有效”量。
[0029]
术语“约”将被本领域普通技术人员理解，并且将根据其使用的上下文在一定程度上变化。如果在给定其使用上下文的情况下本领域普通技术人员不清楚该术语的使用，则“约”表示该特定术语的最多正负10％。例如，在一些实施方案中，它将表示特定术语的正负5％。本文提供了一些范围，数值前面带有术语“约”。本文使用术语“约”用于为其后的确切数字以及与该术语后的接近或近似数字提供文字支持。在确定一个数字是否接近或近似于
具体列举的数字时，接近或近似的未列举的数字可以是一个数字，在其呈现的上下文中提供了与具体列举的数字实质上等效的数字。
[0030]
如本文所用，术语“疗法”或“治疗”是指对患者的症状或相关病症的任何治疗，包括抑制症状或相关病症，即阻止或抑制临床症状的发展，例如化学烧伤、肺水肿、喉水肿、肺组织凋亡、感染性肺炎、非感染性肺炎、支气管炎、细支气管炎、纤维化、急性呼吸窘迫综合征、呼吸道痉挛、或其两种或更多种的组合；和/或缓解导致临床症状消退的症状或相关病症。
[0031]
在一些方面，术语治疗是指由于在肺损伤和症状进展后延迟给药异丁司特而导致的临床结果的改善。术语“临床结果”是指患者对治疗反应相关的任何临床观察或测量。临床结果的非限制性实例包括患有肺泡炎症、肺水肿、肺组织细胞凋亡、肺组织坏死、气道破坏或其任何组合的患者对治疗反应的临床观察或测量。
[0032]
本公开的其他目的、特征和优点将从以下详细描述中变得显而易见。然而，应当理解，尽管详细描述和具体实施例虽然表明了本公开的具体实施方案，但仅以说明的方式给出，因为根据该详细描述，在本公开的精神和范围内的各种改变和修改对于本领域技术人员将变得显而易见。
[0033]
本公开的方法是基于分子异丁司特的给药。异丁司特是一种小分子药物(分子量为230.3)，具有如下结构。
[0034][0035]
异丁司特也可以在chembank id 3227、cas#50847-11-5和beilstein手册参考号5-24-03-00396下找到。其分子式对应于c14h18n2o。已知异丁司特还有多种化学名称，包括2-甲基-1-(2-(1-甲基乙基)吡唑并(1,5-a)吡啶-3-基)1-丙酮；3-异丁酰基-2-异丙基吡唑并(1,5-a)吡啶，和1-(2-异丙基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-2-甲基-丙-1-酮。异丁司特的其他别名包括ibudilastum(拉丁语)、brn 0656579、kc-404和mn-166。其品牌名称为本文提及的异丁司特指包括其任何和所有药学上可接受的盐形式、前药形式(例如相应的缩酮、肟、肟衍生物、腙或缩氨基脲)、溶剂化物等，适合在其预期的用于给药的制剂中应用。
[0036]
异丁司特也是环核苷酸磷酸二酯酶(pde)3a、4、10a1和11a1的选择性抑制剂(gibson et al.，eur j pharmacol 538:39-42,2006)，具有toll样受体-4(tlr4)拮抗活性(yang et al.,cell death and disease(2016)7,e2234：doi:10.1038/cddis.2016.140)，并且据报道还具有白三烯d4和paf拮抗活性。与其他pde抑制剂和抗炎症性的药剂相比，其具有有效的抗炎作用，并且具有独特性。pde催化结合在3'-碳上的磷酸酯键水解，以生成相应的5'-核苷酸单磷酸。因此，它们调节环核苷酸的细胞浓度。由于许多激素和神经递质的细胞外受体利用环核苷酸作为第二信使，因此pde也调节细胞对这些细胞外信号的反应。至少有八类pde：ca
2+
/钙调蛋白依赖性pde(pde1)、cgmp刺激的pde(pde2)、cgmp抑制的pde(pde3)、camp特异性的pde(pde4)、cgmp结合的pde(pde5)、感光受体(pde6)、高亲和力camp特异性的pde(pde7)以及高亲和力cgmp特异性的pde(pde9)。异丁司特通过作用于炎症细胞
(例如神经胶质细胞)来抑制炎症，从而抑制促炎介质和神经活性介质的释放。异丁司特还可以抑制促炎细胞因子(il-1β、tnf-α)的产生，并可以增强抗炎细胞因子(il-4、il-10)的产生。与前述内容相关的参考文献包括以下内容：obernolte,r.,et al.(1993)“the cdna of a human lymphocyte cyclic-amp phosphodiesterase(pde iv)reveals a multigene family”gene 129:239-247；rile,g.,et al.(2001)“potentiation of ibudilast inhibition of platelet aggregation in the presence of endothelial cells”thromb.res.102:239-246；souness,j.e.,et al.(1994)“possible role of cyclic amp phosphodiesterases in the actions of ibudilast on eosinophil thromboxane generation and airways smooth muscle tone”br.j.pharmacol.111:1081-1088；suzumura,a.,et al.(1999)“ibudilast suppresses tnf.alpha.production by glial cells functioning mainly as type iii phosphodiesterase inhibitor in cns”brain res.837:203-212；takuma,k.,et al.(2001)“ibudilast attenuates astrocyte apoptosis via cyclic gmp signaling pathway in an in vitro reperfusion model”br.j.pharmacol.133:841-848。在治疗中枢神经系统(cns)癌症方面，异丁司特表现出良好的中枢神经系统渗透性。(sanftner,et al.xenobiotica 2009 39:964-977)。
[0037]
异丁司特也是巨噬细胞抑制因子(mif)的对羟基苯丙酮酸(hpp)互变异构酶活性的变构抑制剂(cho et al.,pnas-usa,2010june 107:11313-8)，从而抑制mif的催化和趋化功能。发明人意外地发现，异丁司特还能降低mif的血浆水平。mif血浆水平的这种降低是出乎意料的，因为mif的变构抑制和血浆中mif浓度之间没有已知的联系。然而，由于mif通过激活cd74与cd44或趋化因子受体cxcr2和cxcr4复合物参与细胞内信号传导，因此异丁司特对mif的抑制和mif血浆水平的降低都可以使mif的促炎作用降到最低。
[0038]
如前所述，提及到的任何一种或多种本文描述的药物，特别是异丁司特，是指涵盖适用情况下的任何的和所有的对映体、对映体的混合物，包括外消旋混合物、前药、药学上可接受的盐形式、水合物(例如，一水合物、二水合物等)、溶剂化物、不同的物理形式(例如，结晶固体、无定形固体)、代谢物等。
[0039]
治疗和给药方法
[0040]
如上所述，在一个方面，本公开涉及一种在有需要的对象中治疗化学性肺损伤的方法，所述方法包括向对象给药治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐，或基本上由以下组成，或由以下组成：向对象给药治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐。这种给药可有效的减轻或逆转对象的化学性肺损伤。肺损伤包括或由化学性烧伤、肺水肿、喉水肿、肺组织细胞凋亡、感染性肺炎、非感染性肺炎、支气管炎、细支气管炎、纤维化、急性呼吸窘迫综合征、呼吸道痉挛组成，或由以上两种或更多种的组合组成。
[0041]
在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐以每天约0.1mg至720mg、每天约30mg至200mg、每天约40mg至600mg、或每天约100mg至480mg的日剂量给药。在一些实施方案中，在给药第一剂量异丁司特后12小时内观察到对象中巨噬细胞迁移抑制因子血浆水平的降低。在一些实施方案中，在给药异丁司特1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天或10天后的12小时内观察到对象中巨噬细胞迁移抑制因子血浆水平的降低。
[0042]
异丁司特给药可以通过包含异丁司特制剂的多种递送模式实现。基于异丁司特的治疗制剂的优选递送方法包括全身递送和局部递送。此类给药途径包括但不限于口服、动
脉内、鞘内、脊柱内、肌内、腹膜内、鼻内以及吸入。
[0043]
更具体地，本公开的基于异丁司特的制剂可以通过任何合适的途径给药用于治疗，包括但不限于口服的、直肠的、鼻的、局部的(包括经皮的、喷雾的、面颊的和舌下的)、阴道的、肠胃外的(包括皮下的、静脉内的、肌内的和皮内的)、鞘内的和肺部的。在一些实施方案中，基于异丁司特的制剂经口服给药。在一些实施方案中，基于异丁司特的制剂通过注射给药。当然，优选的途径将随着接受者的状况和年龄、所治疗的具体症状以及所使用的药物的具体组合而变化。
[0044]
在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐经口服给药。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐经注射给药。
[0045]
当包含一种以上活性剂时，本公开的异丁司特组合物可作为单一组合物给药，所述组合物包含异丁司特和至少一种其它的活性剂的组合。就患者的依从性和给药的便利性而言，这种方法是优选的，因为患者通常不愿意在治疗期间每天服用多次多种药丸或剂型。替代地，本公开的组合物作为单独的剂型给药。在包含本公开的治疗组合物的药物作为单独的剂型给药且需要共同给药的情况下，异丁司特和每种其它的活性剂可以同时、以任何顺序或单独给药。
[0046]
剂量
[0047]
治疗量可以根据经验确定，并且将随着所治疗的具体病症、对象以及组合物中包含的每种活性剂的功效和毒性而变化。实际给药的剂量将取决于对象的年龄、体重和一般状况以及所治疗的状况的严重性、保健专业人员的判断以及所给药的特定组合。
[0048]
治疗有效量可以由本领域技术人员确定，并且将根据每个具体情况的要求进行调整。一般而言，异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量的总日剂量范围约为0.1mg/天至720mg/天、约40-600mg/天、约100-480mg/天，或更优选地，其量约为1-240mg/天、约30-240mg/天、约30-200mg/天、约30-120mg/天、约1-120mg/天、约50-150mg/天、约60-150mg/天、约60-120mg/天或约60-100mg/天，以单剂量或多剂量给药。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量约为30-200mg/天，以单剂量或多剂量给药。在一些实施方案中，多剂量包括每天两个、三个或四个剂量。
[0049]
优选的剂量包括大于约20mg bid或tid的剂量。也就是说，优选剂量大于约30mg/天、60mg/天、90mg/天、120mg/天、150mg/天、180mg/天、210mg/天、240mg/天、270mg/天、300mg/天、360mg/天、400mg/天、440mg/天、480mg/天、520mg/天、580mg/天、600mg/天、620mg/天、640mg/天、680mg/天和720mg/天或更多。
[0050]
在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量为至少30mg/天、至少40mg/天、至少50mg/天、至少60mg/天、至少70mg/天。mg/天，至少80mg/天，至少90mg/天，至少100mg/天，至少110mg/天，至少120mg/天，至少130mg/天，至少140mg/天，至少150mg/天，至少160mg/天，至少170mg/天，至少180mg/天，至少190mg/天，至少200mg/天，至少225mg/天每天，至少250mg/天，至少275mg/天，至少300mg/天，至少325mg/天，至少350mg/天，至少375mg/天，至少400mg/天、至少425mg/天、至少450mg/天、至少475mg/天、至少500mg/天、至少525mg/天、至少550mg/天、至少575mg/天，至少600mg/天、至少625mg/天、至少650mg/天、至少675mg/天、至少700mg/天或至少720mg/天。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量是至少60mg/天。在一些实施方案中，异丁司特或其药
学上可接受的盐的治疗有效量是至少100mg/天。
[0051]
根据剂量和待治疗的具体病症，给药可以每天一次、两次、三次或四次，持续一天至几天、几周、几个月、甚至几年，甚至可以是病人的一生。示例性给药方案将持续至少约一周、约1-4周、1-3个月、1-6个月、1-52周、1-24个月或更长的时间。在一些实施方案中，给药异丁司特或其药学上可接受的盐1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30天。在一些实施方案中，给药异丁司特或其药学上可接受的盐三个月或短于三个月。在一些实施方案中，给药异丁司特或其药学上可接受的盐至少三个月。在一些实施方案中，给药异丁司特或其药学上可接受的盐至少六个月。在一些实施方案中，给药异丁司特或其药学上可接受的盐1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月或更长。在一些实施方案中，给药异丁司特或其药学上可接受的盐约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10年或更长。在一些实施方案中，给药异丁司特或其药学上可接受的盐至少1年。在一些实施方案中，给药异丁司特或其药学上可接受的盐至少2年。在一些实施方案中，异丁司特或其药学上可接受的盐作为一次性单剂量给药。
[0052]
在一些实施方案中，治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐以每天单剂量给药。在一些实施方案中，治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐以每天两个剂量给药。在一些实施方案中，治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐以每天三个剂量给药。在一些实施方案中，治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐以每天四个剂量给药。在一些实施方案中，持续给药治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐。
[0053]
在一些实施方案中，每天至少一次给药异丁司特或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，每天至少两次给药异丁司特或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，每天一次给药异丁司特或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，每天两次给药异丁司特或其药学上可接受的盐。
[0054]
实际上，本公开的任何给定的组合物或活性剂的单位剂量，取决于临床医生的判断、患者的需要等。具体的给药方案是本领域普通技术人员已知的，或者可以使用常规方法通过实验确定。示例性给药方案包括但不限于每天给药五次、每天四次、每天三次、每天两次、每天一次、隔天一次、每周三次、每周两次、每周一次、每月两次、每月一次等。
[0055]
制剂
[0056]
异丁司特可以以制剂组合物的形式给药，所述组合物可以任选地包含如下所述的一种或多种附加的组分。
[0057]
赋形剂/载体
[0058]
除了异丁司特或其药学上可接受的盐之外，本公开的组合物还可包含一种或多种药学上可接受的赋形剂或载体。示例性的赋形剂包括但不限于聚乙二醇(peg)、peg 400、(2-羟丙基)-β-环糊精、氢化蓖麻油(hco)、克列莫佛(cremophors)、碳水化合物、淀粉(例如玉米淀粉)、无机盐、抗微生物剂、抗氧化剂、粘合剂/填充剂、表面活性剂、润滑剂(例如硬脂酸钙或硬脂酸镁)、助流剂如滑石粉、崩解剂、稀释剂、缓冲剂、酸、碱、涂膜以及它们的组合等。
[0059]
本公开的组合物可以包含一种或多种碳水化合物，例如糖、衍生糖如糖醇、醛糖酸、酯化糖和/或糖聚合物。具体的碳水化合物赋形剂包括，例如：单糖，例如果糖、麦芽糖、半乳糖、葡萄糖、d-甘露糖、山梨糖等；二糖，例如乳糖、蔗糖、海藻糖、纤维二糖等；多糖，例
therapeutics,j.griffith hardman,l.l.limbird,a.gilman,11th ed.,2005,the merck manual,18th edition,2007,and the merck manual of medical information 2003中找到。
[0071]
在一些实施方案中，一种或多种其他治疗活性剂是一种或多种皮质类固醇。皮质类固醇的非限制性实例包括可的松、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、地塞米松、倍他米松、氢化可的松、安西奈德、布地奈德、地奈德、氟轻松、氟轻松醋酸酯、哈西奈德、曲安奈德、倍氯米松、氟可龙、卤米松、莫米松、二丙酸氯米松、二丙酸倍他米松、戊酸倍他米松、丙酸氯倍他索、丁酸氯倍他松、醋酸氟泼尼定和糠酸莫米松。
[0072]
上文提供的剂量仅仅是指导性的；当然，在与异丁司特或其药学上可接受的盐联合治疗期间，给药的第二活性剂的精确量将相应地调整，并且会根据诸如预期患者群体、待治疗的具体症状或病症、给药的活性剂之间的潜在协同作用等因素调整，本领域的技术人员根据本文提供的指导能够轻易地确定。
[0073]
持续递送制剂
[0074]
优选地，配制组合物以改善异丁司特或其药学上可接受的盐的稳定性并延长其半衰期。例如，异丁司特或其药学上可接受的盐可以以控释或缓释制剂的形式递送。控释或缓释制剂的制备方法是将异丁司特或其药学上可接受的盐纳入载体或媒介例如脂质体、不可再吸收不可渗透的聚合物例如乙烯乙酸乙烯酯共聚物和共聚物、可溶胀的聚合物例如水凝胶以及可再吸收的聚合物例如胶原蛋白和某些多元酸或聚酯例如用于制造可吸收缝合线的。此外，异丁司特或其药学上可接受的盐可被封装、吸附或连接到颗粒载体上。颗粒载体的实施例包括那些衍生自聚甲基丙烯酸甲酯聚合物的，以及衍生自聚(丙交酯)和聚(丙交酯-共-乙交酯)(称为plg)的微粒。参见，例如jeffery et al.,pharm.res.(1993)10:362-368，以及mcgee et al.,j.microencap.(1996)。
[0075]
适合此目的的缓释聚合物是本领域已知的，包括疏水性聚合物例如纤维素醚。合适的纤维素醚的非限制性实例包括乙基纤维素、乙酸纤维素等；聚乙烯酯，例如聚乙酸乙烯酯、聚丙烯酸酯、甲基丙烯酸和丙烯酸酯聚合物(ph不依赖于的类型)；高分子量的聚乙烯醇和蜡，例如脂肪酸和甘油酯、甲基丙烯酸酯中性聚合物、聚乙烯醇-马来酸酐共聚物等；丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯共聚物；氨基烷基甲基丙烯酸酯共聚物；及其混合物。
[0076]
递送形式
[0077]
本文所描述的异丁司特或其药学上可接受的盐组合物涵盖所有类型的制剂，尤其是那些适合全身或鞘内给药的制剂。口服剂型包括片剂、锭剂、胶囊、糖浆、口服混悬剂、乳剂、颗粒剂和丸剂。在一些实施方案中，口服剂型是片剂。在一些实施方案中，片剂是缓释片剂。在一些实施方案中，口服剂型是胶囊。在一些实施方案中，胶囊是缓释胶囊。
[0078]
替代的制剂包括气溶胶、透皮贴剂、凝胶、霜剂、软膏、栓剂、粉末或可重构的冻干剂，以及液体。用于例如在注射之前重构固体组合物的合适稀释剂的实例包括注射用抑菌水、5％的葡萄糖水溶液、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液、盐水、无菌水、去离子水及其组合。对于液体药物组合物，设想的是溶液和悬浮液。优选地，本公开的异丁司特或其药学上可接受的盐的组合物适合口服给药。
[0079]
现在转向口服递送制剂，片剂可以通过任选地与一种或多种辅助成分或添加剂压缩或模塑制备。压缩片剂的制备方法是，例如通过在合适的压片机中将自由流动形式的活
性成分如粉末或颗粒任选地与粘合剂(例如聚维酮、明胶、羟丙基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如羟基乙酸淀粉钠、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠)和/或表面活性剂或分散剂混合压缩。
[0080]
模制片剂例如通过在合适的压片机中模制粉末状化合物与惰性液体稀释剂的混合物而制成。片剂可以任选地进行包衣或刻痕，并且可以被配制以提供活性成分的缓慢或受控释放，使用例如不同比例的羟丙基甲基纤维素以提供期望的释放曲线。片剂可以任选地具有包衣，例如薄膜、糖衣或肠溶衣，以提供在除胃之外的肠道部分中释放。片剂和胶囊制造的工艺、设备和委托制造商是本领域众所周知的。
[0081]
在口腔中局部给药的制剂包括含片和锭剂：含片包含通常在调味基质例如蔗糖、阿拉伯胶、黄蓍胶中的活性成分；锭剂包含在惰性基质例如明胶、甘油、蔗糖和阿拉伯胶中的活性成分。
[0082]
用于局部给药的药物组合物也可以配制为软膏、乳膏、悬浮液、洗剂、粉末、溶液、糊剂、凝胶、喷雾、气雾剂或油剂。
[0083]
替代地，制剂可以是用活性成分和任选的一种或多种赋形剂或稀释剂浸渍的贴剂(例如透皮贴剂)，或敷料(例如绷带或胶布)的形式。局部制剂也可以包括增强成分通过皮肤或其他受影响区域的吸收或渗透的化合物，例举几例如二甲基亚砜红没药醇、油酸、肉豆蔻酸异丙酯和d-柠檬烯等。
[0084]
对于乳剂，油性相由已知成分以已知方式构成。虽然该相可以仅包含乳化剂(也称为乳化剂emulgent)，但其理想地包含至少一种乳化剂与脂肪和/或油的混合物。优选地，将亲水性乳化剂与充当稳定剂的亲脂性乳化剂放在一起。带有或不带有稳定剂的乳化剂共同构成了所谓的乳化蜡，并且乳化蜡与油和/或脂肪一起构成了所谓的乳化软膏基质，其形成膏状制剂的油状分散相。示例性的乳化剂和乳液稳定剂包括tween 60、span 80、十八十六醇、肉豆蔻醇、硬脂酸甘油酯和十二烷基硫酸钠。
[0085]
用于直肠给药的制剂通常是具有合适基质的栓剂形式，所述基质包含例如可可脂或水杨酸盐。
[0086]
适合阴道给药的制剂通常采用栓剂、棉塞、乳膏、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾的形式。
[0087]
适合鼻腔给药的制剂，其中载体是固体，包括粒度例如在约20至约500微米范围内的粗粉。这种制剂通常通过鼻道快速吸入来给药，例如从靠近鼻子的粉末容器中快速吸入。替代地，用于鼻腔递送的制剂可以是液体形式，例如鼻腔喷雾剂或滴鼻剂。
[0088]
用于吸入的可雾化制剂可以是干粉形式(例如，适合通过干粉吸入器给药)，或者可以是液体形式，例如用于喷雾器中。用于提供雾化溶液的雾化器包括(aradigm)、(mallinkrodt)和acorn(marquest medical products)。本公开的组合物还可以使用加压的计量剂量吸入器(mdi)来递送，例如，计量剂量吸入器，其含有在药学上的惰性液体推进剂(例如、氯氟烃或碳氟化合物)中的如本文所述的药物组合的溶液或悬浮液。
[0089]
适合于肠外给药的制剂包括适合注射的水性和非水性的等渗无菌溶液以及水性和非水性无菌悬浮液。
[0090]
本公开的肠外制剂任选地包含在单位剂量或多剂量密封容器例如安瓿和小瓶中并可以储存在冷冻干燥(冻干)条件下，仅需要在使用前即刻添加无菌液体载体例如注射用
水。临时注射溶液和悬浮液可以由前文描述的无菌粉末、颗粒和片剂制备。
[0091]
本公开的制剂还可以是缓释制剂，使得与非持续释放制剂相比，每种药物组分随时间缓慢释放或吸收。缓释制剂可以采用活性剂的前药形式、延迟释放药物递送系统例如脂质体或聚合物基质、水凝胶或聚合物例如聚乙二醇与活性剂的共价结合。
[0092]
除了上面具体提到的成分之外，本公开的制剂可以任选地包括药学领域中常规的其他试剂和所采用的特定类型的制剂，例如，对于口服给药形式，用于口服给药的组合物还可以包括附加剂如甜味剂、增稠剂或调味剂。
[0093]
试剂盒
[0094]
本文还提供了一种试剂盒，其包含至少一种本公开的组合物并附有使用说明。
[0095]
在一些实施方案中，试剂盒含有至少一种本文描述的组合物，并附有使用说明书。例如，在每种药物本身作为单独的或分开的剂型给药的情况下，试剂盒内包含异丁司特以及本公开的组合物的其他每种药物成分以及使用说明书。药物成分可以以任何适合给药的方式包装，当需要与给药说明书一起考虑时，包装应清楚地表明每种药物成分的给药方式。
[0096]
例如，对于包含异丁司特和一种其他活性剂的说明性试剂盒，该试剂盒可以按任何适当的时间段(例如按天)进行组织。作为示例，对于第1天，一个有代表性的试剂盒可以包含异丁司特和另一种活性剂的第一种的单位剂量。如果每种药物每天给药两次，则对应于第1天，试剂盒可以包含异丁司特和另一种活性剂中的每一种的两排单位剂量形式，以及给药时间的说明。可替代地，如果一种或多种药物成分与组合中的其他药物成分相比，在给药时间或单位剂量在数量上有所不同，那么这将反映在包装和说明书中。根据上文，各种实施方案可以很容易地设想出来，并且当然地取决于除了异丁司特之外的用于治疗的药物特定组合、其相应的剂型、推荐剂量、预期的患者群体等。包装可以是常用于药品包装的任何形式，并且可以利用许多特征中的任何特征，例如不同的颜色、包装、防篡改包装、泡罩包装、干燥剂等。
[0097]
应当理解，虽然已经结合优选的具体实施方案描述了本公开内容，但是前面的描述以及后面的实施例旨在说明而不是限制本公开的范围。本公开范围内的其他方面、优点和修改对于本公开所属领域的技术人员来说将是显而易见的。
[0098]
本技术中提到的所有参考文献，包括任何专利、公开的专利申请、书籍、手册、期刊出版物或fda橙皮书，均通过引用整体并入本文。
[0099]
下面的实施例是为了说明本公开的各种实施方案而给出的，并不意味着以任何方式限制本公开。本领域技术人员容易理解，本公开非常适合实现所提到的目标并实现所提到的目的和优点，以及本文所包含的那些目标、目的和优点。当前的实施例结合本文描述的方法是实施方案的代表，并且是示例性的，并不限制本公开的范围。本领域技术人员将会想到，包含在由权利要求的范围所限定的本公开的实质中的各种变化和其他用途。
[0100]
实施例
[0101]
实施例1：对小鼠的氯功效研究
[0102]
本研究的目的是评估异丁司特对抗c57bl/6小鼠全身氯气吸入暴露的功效。动物暴露于575ppm(ld
50/7d
)的氯气中11分钟。根据下面表格，各组从暴露于氯气1小时之后开始每天一次接受异丁司特(低剂量：约4-6mg/kg；中剂量：约6-7.5mg/kg；高剂量：约7.5-10mg/kg)，通过尾静脉注射，每天一次持续7天。一组暴露于pde4抑制剂(咯利普兰(rolipram)并
作为阳性对照。暴露于氯气之后24小时，动物使用emka全身肺功能系统进行肺功能测试，然后收集灌洗液用于细胞计数和差异分析，并收集左肺叶用于组织病理学分析。在进行功效评估之前，将一组10只动物(下表中的第0组)暴露于氯中，以验证575ppm、暴露11分钟的致死率。在这部分研究结束时，动物被处安乐死，没有进行任何最终程序。
[0103]
研究设计：
[0104][0105]
共购买139只c57bl/6小鼠(包括备用)。动物抵达时年龄接近8-10周，并接受至少7天的隔离。
[0106]
施予氯之后，在一开始的4小时连续监测动物。在此期间，动物留在暴露设施中，保持外部噪音(即关门声)在最低限度。对动物至少额外监测3次(氯后约5-7小时、氯后约11-13小时、氯后约17-19小时)。24小时后，在研究期间每天监测动物一次。监测动物的嗜睡、驼背姿势、呼吸困难以及过多排尿和腹泻。记录动物在暴露于氯之前和尸检时的体重。
[0107]
在计划安乐死(第8天)时，使氯暴露后的动物接受肺功能测试。只有在计划安乐死后幸存的动物才会接受肺功能分析，被确定为垂死的动物不进行肺功能测试。
[0108]
在研究结束时，在氯暴露后8天，对动物实施安乐死。在整个研究期间，根据需要对垂死的动物实施安乐死。尸检在氯暴露后第8天进行。取左肺叶用于组织病理学，右肺叶被灌洗并速冻。收集的灌洗样品用于分析细胞计数和差异。
[0109]
实施例2：氯诱发的急性肺损伤(ali)绵羊模型：方案1
[0110]
绵羊模型允许测量各种复杂的心肺变量，这些变量可以用作治疗或液体复苏的终点。与啮齿类动物不同，羊可以插管或切开气管，对气道的损害最小，并且可以使用标准临床设备进行机械通气。此外，绵羊模型在急性肺损伤的基础标准护理(即液体复苏、肺功能监测和机械通气)方面与临床情况非常相似。他们的血容量足够大，可以为频繁的间歇性血气分析和循环细胞计数提供样本，而不会加重低血容量性休克。可以轻松地研究在非麻醉状态下的它们。重要的是，与猪和啮齿动物模型不同，绵羊对炎症的反应(生理和基因组)本质上与人类相似。
[0111]
手术准备：在至少7至14天的隔离时间后，测量羊的心率、体动脉压、肺动脉压(包括心输出量)、肺动脉楔压、左心房压、核心体温和中心静脉压以进行手术准备。这些仪器操作是在异氟烷麻醉下通过气管插管进行的。
[0112]
简要地，对36只雌性成年羊先用15mg/kg至20mg/kg肌内注射氯胺酮、随后用10mg/kg至15mg/kg静脉注射氯胺酮进行预麻醉。气管插管后，使用吸入异氟烷维持麻醉。对羊进行机械通气，在严格的无菌技术条件下进行手术。镇痛由长效(72小时)丁丙诺啡提供。
[0113]
使用股动脉和股静脉上的切口将16-gauge、24英寸的动脉和静脉导管放置在降主
动脉和腔静脉中。使用1/0ethibond缝合线将导管缝合到位，通过胁腹皮肤上的小切口取出导管，并使用2/0vicryl以简单的连续模式闭合伤口。使用市售的经皮导管导引器系统将swan-ganz热稀释肺动脉导管通过右颈外静脉放置在肺动脉中。并将导管(内径0.062英寸，外径0.125英寸)通过第五肋间隙放置在左心房中。为了防止心脏左心房插管期间可能出现的心律失常，将1mg/kg至3mg/kg的利多卡因局部涂抹于心脏表面。通过胸壁上的小刺切口将管子取出。肋骨与2条简单的间断1/0或2/0不锈钢丝缝合线相对。用简单的连续模式使用2/0vicryl缝合2层肌肉和皮下组织。用2/0vicryl以简单的连续模式缝合皮肤。在手术过程中，为了降低感染风险，静脉注射双倍剂量的头孢唑林(2g)。然后，让绵羊从麻醉中恢复，并在接受ali方案之前给予5至7天的时间从外科手术中恢复，并可以自由进食和饮水。通过皮下注射长效(72小时)buprenorphine
sr
(0.1mg/kg至0.27mg/kg)提供手术和术后-镇痛。
[0114]
在恢复期间，将绵羊连接至血流动力学监测器，静脉注射乳酸林格氏溶液复苏，并提供食物和水。用肝素盐水持续冲洗血管导管和管线。
[0115]
基线变量：手术恢复5至7天后，对清醒、未麻醉的羊进行呼吸和血液动力学变量的基线测量。
[0116]
基线变量包括以下内容：
[0117]
心肺血流动力学：
[0118]
·
心率；
[0119]
·
平均动脉压；
[0120]
·
心输出量；
[0121]
·
左心房压；
[0122]
·
中心静脉压；
[0123]
·
肺动脉压；
[0124]
·
肺动脉闭塞压；以及
[0125]
·
计算变量：心脏指数、全身血管和肺动脉阻力指数、肺毛细血管压力以及左心室和右心室每搏输出量指数；
[0126]
·
核心体温。
[0127]
动静脉血气分析、全血细胞计数：
[0128]
·
po2、co2、so2、血细胞比容、血红蛋白、ph、电解质(na、k、ca、cl)、乳酸和葡萄糖；
[0129]
·
计算变量-动脉血氧分压(pao2)/吸入氧分压(fio2)比率和肺分流分数；
[0130]
·
全血细胞计数。
[0131]
排除标准：如果出现以下任何症状，则将羊从研究中去除：
[0132]
·
pao2《90mmhg，在室内环境中；
[0133]
·
血细胞比容《20％；
[0134]
·
血红蛋白《7g/dl；
[0135]
·
核心体温》40℃(正常羊体温约为39.6℃)；
[0136]
·
白细胞》10k/μl。
[0137]
ali的诱发：在研究即将开始时，通过静脉注射5mg/kg的氯胺酮对绵羊进行麻醉，随后通过皮下注射0.1mg/kg丁丙诺啡进行长效(72小时)镇痛。进行气管切开术，并静脉注射异丙酚，初始推注剂量50mg，随后滴定以有效维持麻醉。绵羊在5cm h2o的呼气末正压
(peep)、潮气量(tv)12ml/kg下进行通气。将foley导管穿过尿道插入膀胱，以便连续收集尿液以测量尿量。动物在接触氯之前和安乐死之前(如果适用)应接受胸部x光检查。
[0138]
经由连接到氯罐的封闭通气回路，气管内输送空气中浓度为150ppm或200ppm的氯气30分钟，从而诱发损伤。呼吸机设置为潮气量12ml/kg、peep 5cm h2o以及呼吸频率20b/min。该设置使得动物之间的氯暴露程度具有可比性。
[0139]
吸入气体中的氯水平被认证为氯和通过呼吸机供应的未经稀释的医用级空气的预混合混合物。氯/空气混合物的总流量通过质量流量计确定，其中不锈钢部件紧接在调节器后面。用电加热器将氯罐预热(24小时)至40℃，以适于混合气体。在30分钟的损伤期间，每10分钟进行一次血气分析并记录心肺变量。在暴露期间，至少有2台监视器监测可能的氯泄漏。暴露是在具有负压和有毒气体排空罩的特殊房间里进行。至少3名身穿指定个人防护装备(包括呼吸机)的ticu工作人员引导暴露并提供防护。在接触氯气30分钟后，用空气(无氯)给羊通气10分钟，以冲掉羊气道和通气回路中的氯残留物。然后，将羊与呼吸机断开连接并转移到icu站。
[0140]
损伤后监测：羊被转移至icu站后，将羊置于机械呼吸机上(avea apvcmv模式：rr 20b/m，tv 12ml/kg，peep 5cm h2o)，连接至血流动力学监测仪在清醒状态下监测48小时。受损伤后48小时，在深度麻醉和镇痛下对羊进行人道安乐死。如果在研究过程中，发生以下情况之一，并且尽管进行复苏，1小时内仍没有逆转，则对羊进行人道安乐死。
[0141]
·
pao2/fio2比值《50mmhg；
[0142]
·
paco2》90mmhg；
[0143]
·
map《50mmhg。
[0144]
分组及治疗：受损伤后，羊被随机分配到以下4组之一：
[0145]
1.对照组：暴露于氯，用等量载体治疗；
[0146]
2.阳性对照组：暴露于氯，用pde4抑制剂(咯利普兰)治疗。
[0147]
3.mn-166(高剂量)组：暴露于氯，用高剂量mn-166(最高100mg/kg)治疗；和
[0148]
4.mn-166(低剂量)组：暴露于氯，用低剂量mn-166(最高50mg/kg)治疗。
[0149]
每组包括8只羊。整个研究的羊总数是36只，其中包括每组1只羊以备可能存在的技术错误(36＝每组8只羊
×
4组+4只羊(每组1只羊)以备实验失败/错误)。在研究期间，用乳酸林格氏液2ml/kg/h对绵羊进行液体复苏。
[0150]
终点：治疗后，以与基线变量相同的方式进行研究评估。下面提供了每项评估的描述。
[0151]
1.肺功能：1)通过间歇性(每6小时)动脉和静脉血气分析进行评估，其中包括动脉和静脉血pao2、co2、so2、碱过剩、ph和so2。此外，每6小时测量一次动脉血细胞比容、血红蛋白、电解质、葡萄糖和乳酸。计算pao2/fio2比率以确定ards的严重程度。研究结束时通过胸部x光检查证实了双侧肺部浸润。在损伤前也进行了胸部x光检查。肺分流分数通过标准公式计算；2)每6小时从呼吸机读数中获取一次肺力学，即肺顺应性、气道峰值和暂停压力以及死腔。
[0152]
2.除胸部x光检查外，死后还通过组织学(肺泡和间质水肿)和肺含水量(湿干重比)评估肺损伤和水肿形成。肺组织学还包括实质充血、出血、炎性细胞积聚、肺不张和气道上皮脱落。
[0153]
3.持续监测心肺血流动力学，每6小时记录一次基线中指示的变量。
[0154]
4.通过测定48小时累积的净液体平衡(每6小时测量一次液体流入和尿排出量)、血浆蛋白、体腔(胸腔和腹腔)的积液来评估全身血管通透性。
[0155]
5.每6小时测定一次完整的外周血细胞计数。
[0156]
采样：1)第一个24小时每6小时采集一次动脉血，第二个24小时每12小时采集一次动脉血，并将血浆和血清的等分试样储存在20℃下以供将来评估；2)在指定时间点采集等分尿液并储存在20℃下；3)研究结束时进行支气管肺泡灌洗，并将等分试样冷冻并储存在20℃下；4)损伤后48小时对动物进行人道安乐死，将气管、支气管、肺实质、心脏、肝脏和肾脏的等分试样在冷冻保存-80℃下并放置在福尔马林中。测量胸腔和腹腔液体的体积(如果存在)，并测量总蛋白。
[0157]
统计学分析：统计学分析是使用graphpad prism 8软件进行的，适用时采用双向或单向方差分析和t检验。
[0158]
肺功能：间歇评估呼吸参数，并在治疗组之间进行可量化比较。通过计算pao2/fio2比率来评估各个治疗组中ards的相对严重程度。其他需要评估的变量包括肺浸润、肺分流分数和肺力学。
[0159]
肺损伤和水肿形成：通过尸检组织学样本比对，在不同治疗组之间对异丁司特药物治疗的功效进行评估和比较。对出血、炎症细胞积聚、肺不张和气道上皮脱落的程度进行量化。通过胸部x光检查和比较确定肺含水量的差异。
[0160]
全身血管通透性：测量48小时内的累积净液体平衡，并比较药物治疗组、未治疗组和阳性对照组以评估疗效。
[0161]
实施例3：氯诱发的急性肺损伤(ali)绵羊模型：方案2
[0162]
手术准备：在至少7至14天的隔离时间后，测量羊的心率、体动脉压、肺动脉压(包括心输出量)、肺动脉楔压、左心房压、核心体温和中心静脉压以进行手术准备。这些仪器操作是在异氟烷麻醉下通过气管插管进行的。
[0163]
简要地，对36只雌性成年羊用15mg/kg至20mg/kg肌内注射氯胺酮、随后用10mg/kg至15mg/kg静脉注射氯胺酮进行预麻醉。气管插管后，使用吸入异氟烷维持麻醉。对羊进行机械通气，在严格的无菌技术条件下进行手术。镇痛由长效(72小时)丁丙诺啡提供。
[0164]
使用股动脉和股静脉上的切口将16-gauge、24英寸的动脉和静脉导管放置在降主动脉和腔静脉中。使用1/0ethibond缝合线将导管缝合到位，通过胁腹皮肤上的小切口取出导管，使用2/0vicryl以简单的连续模式闭合伤口。使用市售的经皮导管导引器系统将swan-ganz热稀释肺动脉导管通过右颈外静脉放置在肺动脉中。并将导管(内径0.062英寸，外径0.125英寸)通过第五肋间隙放置在左心房中。为了防止心脏左心房插管期间可能出现的心律失常，将1mg至3mg/kg的利多卡因局部涂抹于心脏表面。通过胸壁上的小刺切口将管子取出。肋骨与2条简单的间断1/0或2/0不锈钢丝缝合线相对。用简单的连续模式使用2/0vicryl缝合2层肌肉和皮下组织。用2/0vicryl以简单的连续模式缝合皮肤。在手术过程中，为了降低感染风险，静脉注射双倍剂量的头孢唑林(2g)。然后，让绵羊从麻醉中恢复，并在接受ali方案之前给予5至7天的时间从外科手术中恢复，并可以自由进食和饮水。通过皮下注射长效(72小时)buprenorphine
sr
(0.1mg/kg至0.27mg/kg)提供手术和术后-镇痛。
[0165]
在恢复期间，将绵羊连接至血流动力学监测器，静脉注射乳酸林格氏溶液复苏，并
提供食物和水。用肝素盐水持续冲洗血管导管和管线。
[0166]
基线变量：手术恢复5至7天后，对清醒、未麻醉的羊进行呼吸和血液动力学变量的基线测量。
[0167]
基线变量包括以下内容：
[0168]
心肺血流动力学：
[0169]
·
心率；
[0170]
·
平均动脉压；
[0171]
·
心输出量；
[0172]
·
左心房压；
[0173]
·
中心静脉压；
[0174]
·
肺动脉压；
[0175]
·
肺动脉闭塞压；以及
[0176]
·
计算变量：心脏指数、全身血管和肺动脉阻力指数、肺毛细血管压力以及左心室和右心室每搏输出量指数；
[0177]
·
核心体温。
[0178]
动静脉血气分析、全血细胞计数：
[0179]
·
po2、co2、so2、血细胞比容、血红蛋白、ph、电解质(na、k、ca、cl)、乳酸和葡萄糖；
[0180]
·
计算变量-动脉血氧分压(pao2)/吸入氧分压(fio2)比率和肺分流分数；
[0181]
·
全血细胞计数。
[0182]
排除标准：如果出现以下任何症状，则将羊从研究中去除：
[0183]
·
pao2《90mmhg，在室内环境中；
[0184]
·
血细胞比容《20％；
[0185]
·
血红蛋白《7g/dl；
[0186]
·
核心体温》40℃(正常羊体温约为39.6℃)；
[0187]
·
白细胞》10k/μl。
[0188]
ali的诱发：在研究即将开始时，通过静脉注射5mg/kg的氯胺酮对绵羊进行麻醉，随后通过皮下注射0.1mg/kg的丁丙诺啡进行长效(72小时)镇痛。进行气管切开术，并静脉注射异丙酚，初始推注剂量为50mg，随后滴定以有效维持麻醉。绵羊在5cm h2o的呼气末正压(peep)、潮气量(tv)12ml/kg下通气。将foley导管穿过尿道插入膀胱，以便连续收集尿液以测量尿量。动物在暴露于氯之前和安乐死之前(如果适用)应接受胸部x光检查。
[0189]
经由连接至氯罐的封闭通气回路，气管内输送空气中浓度为210ppm的氯气30分钟，从而诱发损伤。将呼吸机设置为潮气量12ml/kg、peep 5cm h2o以及呼吸频率20b/min。该设置使得动物之间的暴露程度具有可比性。
[0190]
吸入气体中的氯水平被认证为氯和通过呼吸机供应的未经稀释的医用级空气的预混合混合物。氯/空气混合物的总流量通过质量流量计测定，其中不锈钢部件紧接在调节器后面。用电加热器将氯罐预热(24小时)至40℃，以适于混合气体。在30分钟的损伤期间，每10分钟进行一次血气分析并记录心肺变量。在暴露期间，至少有2台监视器监测可能的氯泄漏。暴露是在具有负压和有毒气体排空罩的特殊的房间里进行。至少3名身穿指定个人防护装备(包括呼吸器)的ticu工作人员引导暴露并提供防护。在接触氯气30分钟后，用空气
(无氯)给羊通气10分钟，以冲掉羊气道和通气回路中的氯残留物。然后，将羊与呼吸机断开连接并转移到icu站。
[0191]
损伤后监测：羊被转移至icu站后，将羊置于机械呼吸机上(avea apvcmv模式：rr 20b/m，tv 12ml/kg，peep 5cm h2o)，连接到血流动力学监测仪并在清醒状态下监测48小时。受损伤后48小时，在深度麻醉和镇痛下对羊进行人道安乐死。如果在研究过程中，出现以下情况之一，并且尽管进行复苏，1小时内仍没有逆转，则对羊进行人道安乐死。
[0192]
·
pao2/fio2比值《50mmhg；
[0193]
·
paco2》90mmhg；
[0194]
·
map《50mmhg。
[0195]
分组及治疗：受损伤后，羊被随机分配到以下4组之一：
[0196]
·
阴性对照组：暴露于氯，用等量载体(5％ kolliphor el和50％丙二醇和盐水)治疗；
[0197]
·
阳性对照组：暴露于氯，用pde4抑制剂(咯利普兰，3mg)治疗；
[0198]
·
mn-166(高剂量)组：暴露于氯，用mn-166高剂量(20mg)治疗；以及
[0199]
·
mn-166(低剂量)组：暴露于氯，用mn-166低剂量(10mg)治疗。
[0200]
每只羊在30分钟的输注中接受了20ml的最终容量。
[0201]
每组包括8只羊。整个研究的羊总数为36只，其中包括每组1只羊以备可能存在的技术错误(36＝每组8只羊
×
4组+4只羊(每组1只羊)以备实验失败/错误)。在研究期间，用乳酸林格氏液2ml/kg/h对绵羊进行液体复苏。
[0202]
终点：治疗后，以与基线变量相同的方式进行研究评估。下面提供了每项评估的描述。
[0203]
1.肺功能：1)通过间歇性(每6小时)动脉和静脉血气分析进行评估，其中包括动脉和静脉血pao2、co2、so2、碱过剩、ph和so2。此外，每6小时测量一次动脉血细胞比容、血红蛋白、电解质、葡萄糖和乳酸。计算pao2/fio2比率以确定ards的严重程度。研究结束时通过胸部x光检查证实了双侧肺部浸润。在损伤前也进行了胸部x光检查。肺分流分数通过标准公式计算；2)每6小时从呼吸机读数中获取一次肺力学，即肺顺应性、气道峰值和暂停压力以及死腔。
[0204]
2.除胸部x光检查外，死后还通过组织学(肺泡和间质水肿)和肺含水量(湿干重比)评估肺损伤和水肿形成。肺组织学还包括实质充血、出血、炎症细胞积聚、肺不张和气道上皮脱落。
[0205]
3.连续监测心肺血流动力学，每6小时记录一次基线中指示的变量。
[0206]
4.通过测定48小时累积的净液体平衡(每6小时测量一次液体流入和尿排出量)、血浆蛋白、体腔(胸腔和腹腔)积液来评估全身血管通透性。
[0207]
5.每6小时测定一次完整的外周血细胞计数。
[0208]
采样：1)第一个24小时每6小时采集一次动脉血，第二个24小时每12小时采集一次动脉血，并将血浆和血清的等分试样储存在-20℃下以供将来评估；2)在指定时间点取样等份尿液并储存在-20℃下；3)研究结束时进行支气管肺泡灌洗，并将等分试样冷冻并储存在-20℃下。
[0209]
尸检：暴露在氯后48小时(或在达到安乐死标准后[参见上文])，通过静脉注射
100mg赛拉嗪、1500mg氯胺酮和0.3mg速效丁丙诺啡在麻醉下对绵羊放血，符合美国兽医协会安乐死小组的建议。如果适用，在尸检前使用便携式数字x光机进行胸部x光检查。
[0210]
死后取样：安乐死后，切除心脏和整个肺以及上呼吸道。采集器官重量以及心脏和肺的图像。将气管、支气管、肺实质、心脏、肝脏和肾脏的等分试样冷冻保存在-80℃下并放置在福尔马林中。测量胸腔和腹腔液体的体积(如果存在)，并测量总蛋白。还需采集肺组织的等分试样用于测量肺湿重与干重的比率。
[0211]
统计学分析：使用graphpad prism 8软件进行统计学分析，适用时采用双向或单向方差分析和t检验。
[0212]
中期研究结果：在氯暴露后的每个时间点计算pao2/fio2比率。4只动物[阴性对照(control-n)、阳性对照(control-p)、高mn-166、低mn-166]在不同时间点的pao2/fio2结果(mm hg)如下表和图1中所示。
[0213][0214]
在氯暴露后第3小时，在所有组中观察到pao2/fio2比率值恶化，仅用媒介物治疗的阴性对照组的动物在所有时间点的pao2/fio2均保持低于200mm hg(中度ards)或低于100mm hg(重度ards)。阳性对照组(用咯利普兰治疗，3mg)的动物在氯气暴露后18小时时间点pao2/fio2保持低于300mm hg(轻度ards)，并且在24小时时间点后保持低于200mm hg或低于100mm hg。低剂量mn-166(10mg)治疗组的动物在氯气暴露后6小时时间点pao2/fio2改善至300mm hg以上(重度ards)并保持在300mm hg以上。高剂量mn-166(20mg)治疗组的动物的pao2/fio2值在所有时间点从未降至300mm hg以下，并在30小时时间点增加至400mm hg以上。
[0215]
实施例4:对患有化学性诱发肺损伤的人类患者给药异丁司特
[0216]
具有以下症状(例如，化学品烧伤、肺水肿、喉水肿、肺组织细胞凋亡、感染性肺炎、非感染性肺炎、支气管炎、细支气管炎、纤维化、急性呼吸窘迫综合征或呼吸道痉挛中的一种或多种)的人类患者由于氯气、芥子气、光气、路易氏剂、氯化氢、二氧化硫、硫化氢、二氧化氮、氨、氢氟酸、臭氧、异氰酸甲酯或这些化学品中的两种或更多种的组合诱发的肺损伤最多给药100mg异丁司特。
[0217]
对异丁司特的反应通过呼吸频率测量、血氧水平测量(即，通过脉搏血氧计)、呼吸困难量表(例如，修改的医学研究委员会呼吸困难评分)、肺功能测试(即，通过肺活量计)、
胸部影像研究(即，胸部x光、胸部ct)、或其两种或更多种的任意组合。
[0218]
一些实施方案
[0219]
实施方案1：一种对有需要的对象治疗化学性诱发的肺损伤的方法，所述方法包括向所述对象给药治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐。
[0220]
实施方案2：根据实施方案1所述的方法，其中所述肺损伤是由选自氯、芥子气、光气、路易氏剂、氯化氢、二氧化硫、硫化氢、二氧化氮、氨、氢氟酸、臭氧、异氰酸甲酯的化学品及其中的两种或更多种的组合诱发的。
[0221]
实施方案3：根据实施方案1或实施方案2所述的方法，其中所述肺损伤包括化学性烧伤、肺水肿、喉水肿、肺组织细胞凋亡、感染性肺炎、非感染性肺炎、支气管炎、细支气管炎、纤维化、急性呼吸窘迫综合征、呼吸道损伤痉挛，或其中两种或多种的组合。
[0222]
实施方案4：根据实施方案1-3中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐口服给药。
[0223]
实施方案5：根据实施方案1-3中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐通过静脉注射给药。
[0224]
实施方案6：根据实施方案1-3中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐通过皮下注射给药。
[0225]
实施方案7：根据实施方案1-3中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐通过肌内注射给药。
[0226]
实施方案8：根据实施方案1-3中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐通过吸入给药。
[0227]
实施方案9：根据实施方案1-8中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐给药1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天或10天，或更多天。
[0228]
实施方案10：根据实施方案1-8中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐给药至少3个月。
[0229]
实施方案11：根据实施方案1-10中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐每天至少给药一次。
[0230]
实施方案12：根据实施方案1-10中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐每天给药两次。
[0231]
实施方案13：根据实施方案1-12中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量为每天0.1mg至720mg。
[0232]
实施方案14：根据实施方案1-12中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量为每天30mg至200mg。
[0233]
实施方案15：根据实施方案1-12中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量是每天40mg至600mg。
[0234]
实施方案16：根据实施方案1-12中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量是每天100mg至480mg。
[0235]
实施方案17：根据实施方案1-12中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量选自：30mg/天、60mg/天、90mg/天、100mg/天、120mg/天、150mg/天、180mg/天、210mg/天、240mg/天、270mg/天、300mg/天、360mg/天、400mg/天、440mg/天、
480mg/天、520mg/天、580mg/天、600mg/天、620mg/天、640mg/天、680mg/天和720mg/天。
[0236]
实施方案18：根据实施方案1-17中任意一项所述的方法，其中所述治疗有效量作为单剂量或分成两个、三个或四个剂量给药。
[0237]
实施方案19：根据实施方案1-17中任意一项所述的方法，其中异丁司特持续给药。
[0238]
实施方案20：根据实施方案1-19中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐是给药于患者的唯一活性剂。
[0239]
实施方案21：根据实施方案1-19中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐与至少一种其他活性剂一起给药于患者。
[0240]
实施方案22：根据实施方案21所述的方法，其中所述至少一种其他活性剂包含皮质类固醇。
[0241]
等同实施方案
[0242]
应当理解，尽管本公开已经通过某些实施方案和任选的技术特征进行了具体公开，但本领域技术人员可以对本文所公开的内容进行修改、改进和变化，并且这种修改、改进和变化被认为落入本公开内容的范围内。本文提供的材料、方法和示例是某些实施方案的代表，是示例性的，并且对本公开的范围不构成限定。
[0243]
本公开内容在本文中以宽泛和一般性描述方式进行解释。落入一般性描述的每个较窄的下位概念和次上位分组也构成了本公开的一部分。这包括从上位概念中删除任何内容的具有附带条件或负面限制的一般性描述，无论被删除的内容是否在本文中具体记载。
[0244]
此外，当本公开的特征或方面以马库什组方式描述时，本领域技术人员将认识到，本公开的内容也因此以马库什组的任何单个成员或成员子组的方式描述。
[0245]
尽管本公开内容支持仅指替代方案和“和/或”的定义，但是除非明确指出仅指替代方案或替代方案是相互排斥的，否则权利要求中使用的术语“或”用于表示“和/或”。

技术特征：
1.一种在有需要的对象中治疗化学性诱发的肺损伤的方法，该方法包括向所述对象给药治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述肺损伤是由选自氯、芥子气、光气、路易氏剂、氯化氢、二氧化硫、硫化氢、二氧化氮、氨、氢氟酸、臭氧、异氰酸甲酯的化学品和其中两种或更多种的组合诱发的。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述肺损伤包括化学性烧伤、肺水肿、喉水肿、肺组织凋亡、感染性肺炎、非感染性肺炎、支气管炎、细支气管炎、纤维化、急性呼吸窘迫综合征、呼吸道痉挛或其中两种或更多种的组合。4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐经口服给药。5.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐通过静脉注射给药。6.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐通过皮下注射给药。7.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐通过肌内注射给药。8.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐通过吸入给药。9.根据权利要求1-8中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐给药1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天或10天或更长时间。10.根据权利要求1-8中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐给药至少3个月。11.根据权利要求1-10中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐每天至少给药一次。12.根据权利要求1-10中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐每天给药两次。13.根据权利要求1-12中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量为每天0.1mg至720mg。14.根据权利要求1-12中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量为每天30mg至200mg。15.根据权利要求1-12中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量为每天40mg至600mg。16.根据权利要求1-12中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量为每天100mg至480mg。17.根据权利要求1-12中任意一项所述的方法，其中所述异丁司特或其药学上可接受的盐的治疗有效量选自：30mg/天、60mg/天、90mg/天、100mg/天、120mg/天、150mg/天、180mg/天、210mg/天、240mg/天、270mg/天、300mg/天、360mg/天、400mg/天、440mg/天、480mg/天、520mg/天、580mg/天、600mg/天、620mg/天、640mg/天、680mg/天和720mg/天。18.根据权利要求1-17中任意一项所述的方法，其中所述治疗有效量作为单剂量给药
或分为两个、三个或四个剂量。19.根据权利要求1-17中任意一项所述的方法，其中异丁司特持续给药。20.根据权利要求1-19中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐是给药于患者的唯一活性剂。21.根据权利要求1-19中任意一项所述的方法，其中异丁司特或其药学上可接受的盐与至少一种其他活性剂一起给药于患者。22.根据权利要求21所述的方法，其中所述至少一种其他活性剂包括皮质类固醇。

技术总结
本申请公开了一种在有需要的对象中治疗化学性诱发的肺损伤的方法，该方法包括向治疗对象给药治疗有效量的异丁司特或其药学上可接受的盐。接受的盐。接受的盐。


技术研发人员：松田和子 费德里科
受保护的技术使用者：美迪诺亚公司
技术研发日：2022.01.27
技术公布日：2023/10/15