一种对化学性肝损伤有辅助保护功能的配方及应用的制作方法

1.本技术涉及医药、保健、食品技术领域，尤其是涉及一种对化学性肝损伤有辅助保护功能的组合物及其应用。


背景技术：

2.化学性肝损伤系指由化学药物中毒、过敏等造成的肝损伤，这些化学物质包括酒精、环境中的化学有毒物质及某些药物，其中以药物性和酒精性肝损伤最为常见，且呈不断上升趋势。目前已上市药物中有1100种以上具有潜在的肝毒性，每年10万人中就有13.9～24.0人次发生药物性肝损伤，酒精性肝病是肝硬化的重要病因，我国肝硬化患者中酒精性肝硬化构成比呈上升趋势，且男性高于女性，东部地区高于西部地区。
3.显齿蛇葡萄叶，在广东、广西、四川、云南、湖南等地区流传已久，具有广泛的群众基础，老百姓认为其清热解毒，当茶饮用，可以治疗咽喉肿痛、感冒、牙疼、肝炎等。显齿蛇葡萄叶的有机成分中，以黄酮含量最为丰富，高达45％，已有的研究表明，显齿蛇葡萄叶总黄酮中最主要的组分是二氢杨梅素，具有抗氧化、护肝、抑菌、抗肿瘤、抗衰老、降血糖、降血脂等多重作用。肝纤维化(hf)是伴随各种急慢性肝病的一种创伤愈合瘢痕反应，这种反应有害于肝的再生恢复。肝纤维化过程中，肝脏内丙二醛(mda)含量上升，肝星状细胞(hsc)被激活，从而导致弥漫性细胞外基质(ecm)不断沉积，进而促进肝纤维化的发生，而转化生长因子β1(tgf-β1)则是激活hsc的重要因子之一。二氢杨梅素可以降低实验大鼠tgf-β1的水平，降低mda含量，提高机体抗氧化水平从而防止肝纤维化。对于脂肪肝大鼠，二氢杨梅素则通过降低肝脏腺苷酸活化蛋白激酶(ampk)磷酸化水平，降低脂质沉积来起到护肝作用。
4.赶黄草，主要分布于我国四川、云南、贵州等地，人工栽培品以四川省泸州古蔺为道地产区，民间历来作为药食两用植物，其最主要药理作用为保肝，对化学性肝损伤具有保护作用，以赶黄草为原料制备的肝苏颗粒在临床上已得到广泛应用。目前已从赶黄草中分离得到约120个化合物，其中黄酮类化合物大约为40个，黄酮类化合物是赶黄草的主要化学成分；赶黄草总黄酮在赶黄草中的含量为3.92％，赶黄草总黄酮是赶黄草的主要活性部位，赶黄草总黄酮主要由异槲皮苷、乔松素、槲皮素、山奈酚和芹菜素组成，其中乔松素、槲皮素、山奈酚和芹菜素为已报道的保护化学性肝损伤化合物。
5.陈皮，药理作用广泛，在肝、肺、心脑血管系统、呼吸及消化系统疾病中均发挥着积极作用，肝保护、抗肿瘤、抗呼吸系统疾病等。陈皮对肝脏疾病具有积极的预防、保护作用，可缓解肝损伤、肝纤维化、脂肪肝、肝衰竭等疾病的症状，主要药效成分为陈皮苷(hesperidin，hdn)。橙皮苷对刀豆蛋白a致小鼠免疫性肝损伤具有一定保护作用，机制可能与它清除自由基，增强机体抗脂质过氧化能力及降低白细胞介素-1(il-1)、肿瘤坏死因子-α(tnf-a)和干扰素-γ(ifn-γ)等炎性细胞因子的表达有关；陈皮苷可通过抑制肝细胞脂质过氧化反应及调控凋亡相关基因表达，保护扑热息痛诱导的小鼠急性肝损伤；橙皮苷还可显著抑制顺铂引起小鼠血清谷丙转氨酶(alt)和谷草转氨酶(ast)水平升高，减少丙二醛(mda)形成，恢复超氧化物歧化酶(sod)活性，抑制谷胱甘肽(gsh)耗竭，作用弱于黄芩苷。橙
皮苷和黄芩苷可明显减轻肝脏水样空泡样变性、炎症浸润和坏死。
6.枸杞子，我国传统的药食兼用的药材，营养成分非常丰富，具有补肾益精、养肝明目、补血安神、润肺止咳、生津止渴、延年益寿的功能，一直受到医疗专家和食疗专家的重视。从枸杞中提取的枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide，lbp)具有广泛的药理学作用，如提高免疫力、增强抗氧化能力、降血脂、降血糖、保肝等。枸杞多糖作为一类食源性的功能因子，对化学性肝损伤具有良好的逆转作用，它能够调节脂质代谢和增强机体抗氧化能力。实验表明，枸杞多糖能够显著改善由酒精所导致的实验小鼠的氧化损伤和炎症损伤。观察组织病理切片，枸杞多糖组小鼠肝细胞结构得到明显改善。


技术实现要素：

7.本技术提供一种对化学性肝损伤有保护功能的组合物。
8.本技术采用下述技术方案：
9.一种对化学性肝损伤有保护功能的组合物，所述组合物由显齿蛇葡萄叶、陈皮、枸杞子和赶黄草组成。
10.本技术的有益效果如下：
11.本技术的组合物经实验证明对化学性肝损伤有保护功能。
附图说明
12.此处所说明的附图用来提供对本技术的进一步理解，构成本技术的一部分，本技术的示意性实施例及其说明用于解释本技术，并不构成对本技术的不当限定。在附图中：
13.附图1为肝脏组织中的生化指标。
14.在附图1中，模型组mda显著高于正常组，各剂量组能够抑制mda的升高，且随着剂量的增加，抑制效果更显著。模型组gsh极显著低于正常组，各剂量组能够促进gsh的升高，且随着剂量的增加，促进效果更显著。模型组tg显著高于正常组，各剂量组能够抑制tg的升高，且随着剂量的增加，抑制效果更显著。
具体实施方式
15.为使本技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本技术具体实施例及相应的附图对本技术技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅是本技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本技术保护的范围。
16.本技术实施例提供一种对化学性肝损伤有保护功能的组合物，其剂型可以为袋泡茶、散剂、煎剂、片剂、丸剂、胶囊剂中的一种。其配伍信息如下：
17.[0018][0019]
该组合物药食兼用，具有保护化学性肝损伤的作用。当初饮用亦可生津止渴、润肺止咳、补肾益精、清热解毒。
[0020]
实施例1：酒精性肝损伤
[0021]
1.1配方：显齿蛇葡萄叶60g，陈皮18g，枸杞子8g，赶黄草4g。
[0022]
1.2样品制备：取上述配方，加900.00ml无菌水，常压，80℃，浸泡时间30min提取两次后合并浓缩至70ml，以下简称“样品”。
[0023]
1.3实验动物：spf级icr种雄性小鼠50只，体重18-22g，每组10只，由上海吉辉实验动物饲养有限公司提供。
[0024]
1.4动物处理：设定灌胃剂量为0.58、1.17、3.51g/kgbw(分别相当于人体推荐剂量的5、10、30倍)，分别为低、中、高剂量组，同时设定正常组和酒精性肝损伤模型组，每组10只。每天对小鼠灌胃1次，灌胃体积为0.2mg/10gbw，连续30天，正常组和酒精性肝损伤模型组给予等体积蒸馏水。实验期间，小鼠每2周称重一次，并记录数据。第30天，对各剂量组和酒精性肝损伤模型组给予50％乙醇(12ml/kg)灌胃，造成急性肝损伤模型，正常组给予蒸馏水灌胃。禁食16小时处死小鼠，进行各项指标检测及病理组织学检查。
[0025]
1.5生化指标检测
[0026]
取肝脏用生理盐水制成10％的肝匀浆，检测肝组织中还原型谷胱甘肽(gsh)、丙二醛(mda)、甘油三酯(tg)含量。结果见图1。
[0027]
1.6病理组织学检查
[0028]
从小鼠肝左叶中部做横切面取材，冰冻切片，苏丹红染色。镜检时从肝脏的一端视野开始记录细胞的病理变化，用40倍物镜连续观察整个组织切片，观察脂滴在肝脏的分布、范围和面积，并按以下标准进行评分：0分，肝细胞内脂滴散在、稀少；1分，含脂滴的干细胞不超过1/4；2分，含脂滴的肝细胞不超过1/2；3分，含脂滴的肝细胞不超过3/4；4分，肝细胞几乎被脂滴代替。检查结果见表1。
[0029]
表1肝脏病理组织检查结果
[0030][0031][0032]
模型组肝脏脂肪变性程度极显著高于正常组，各剂量组能够抑制肝脏脂肪变性程度，且随着剂量的增加，抑制效果更显著。
[0033]
实施例2：四氯化碳肝损伤
[0034]
2.1配方：显齿蛇葡萄叶60g，陈皮18g，枸杞子8g，赶黄草4g。
[0035]
2.2样品制备：取上述配方，加900.00ml无菌水，常压，80℃，浸泡时间30min提取两次后合并浓缩至70ml，以下简称“样品”。
[0036]
2.3实验动物：spf级icr种雄性小鼠50只，体重18-22g，每组10只，由北京华阜生物科技股份有限公司提供。
[0037]
2.4动物处理：设定灌胃剂量为0.58、1.17、3.51g/kgbw(分别相当于人体推荐剂量的5、10、30倍)，分别为低、中、高剂量组，同时设定正常组和四氯化碳损伤模型组，每组10只。除正常对照组外，其余各组小鼠灌胃0.2％四氯化碳橄榄油溶液，灌胃剂量为0.1ml/10gbw。于造模后24h、48h、72h，低、中、高剂量组每天对小鼠灌胃1次，灌胃体积为0.2mg/10gbw，正常组和四氯化碳损伤模型组给予等体积蒸馏水。73h后，全部动物处死，进行血清及肝脏组织病理学检查。
[0038]
2.5每天对小鼠灌胃1次，灌胃体积为0.2mg/10gbw，连续30天，正常组和酒精性肝损伤模型组给予等体积蒸馏水。实验期间，小鼠每2周称重一次，并记录数据。第30天，对各剂量组和酒精性肝损伤模型组给予50％乙醇(12ml/kg)灌胃，造成急性肝损伤模型，正常组给予蒸馏水灌胃。禁食16小时处死小鼠，进行各项指标检测及病理组织学检查。
[0039]
2.6血清检测
[0040]
眼眶取血后，4000r/min离心10分钟，分离血清，测定丙氨酸氨基转移酶(alt)及天冬氨酸氨基转移酶(ast)。结果见表2。
[0041]
表3血清alt及ast检测结果
[0042][0043]
与正常组比较，模型组alt及ast均明显升高，说明四氯化碳造成了小鼠肝损伤。与模型组比较，各剂量组对四氯化碳造成的肝损伤小鼠alt及ast均有显著的降低作用，说明该配方对四氯化碳造成的肝损伤的保护作用。
[0044]
2.7肝脏病理组织学检查
[0045]
称取肝脏组织0.4g，加入冷盐水9倍，离心后去上清，测定其中的丙二醛(mda)、超氧化物歧化酶(sod)、过氧化氢酶(cat)、谷胱甘肽(gsh)。结果见表3。
[0046]
表4肝脏组织检测结果
[0047][0048]
与正常组比较，模型组mda明显升高，sod、cat及gsh明显下降，说明四氯化碳造成了小鼠肝损伤。与模型组比较，各剂量组mda明显下降，sod、cat及gsh明显上升，说明该配方对四氯化碳造成的肝损伤的保护作用。
[0049]
以上所述仅为本技术的实施例而已，并不用于限制本技术。对于本领域技术人员来说，本技术可以有各种更改和变化。凡在本技术的精神和原理之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本技术的权利要求范围之内。

技术特征：
1.一种对化学性肝损伤有保护功能的组合物，其特征在于，所述组合物由显齿蛇葡萄叶、陈皮、枸杞子和赶黄草组成。2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物由50-70重量份的显齿蛇葡萄叶、10-30重量份的陈皮、5-15重量份的枸杞子和3-5重量份的赶黄草组成。3.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物由60重量份的显齿蛇葡萄叶、18重量份的陈皮、8重量份的枸杞子和4重量份的赶黄草组成。4.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物由65重量份的显齿蛇葡萄叶、25重量份的陈皮、10重量份的枸杞子和5重量份的赶黄草组成。5.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物由70重量份的显齿蛇葡萄叶、30重量份的陈皮、10重量份的枸杞子和5重量份的赶黄草组成。6.一种对化学性肝损伤有保护功能的药物，其特征在于，所述药物包括权利要求1-5任一项所述的组合物的活性成分和药学上可接受的载体或赋形剂。7.如权利要求6所述的药物，其特征在于，所述药物的剂型为袋泡茶、散剂、煎剂、片剂、丸剂或胶囊剂。8.如权利要求1-5任一项所述的组合物在制备保护化学性肝损伤的药物或食品中的应用。9.如权利要求1-5任一项所述的组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：称取组分，加水，常压、80℃浸泡提取两次后合并浓缩。

技术总结
本申请公开了一种对化学性肝损伤有保护功能的组合物，所述组合物由显齿蛇葡萄叶、陈皮、枸杞子和赶黄草组成。其优点表现在：通过实验证明，该组合物对化学性肝损伤有保护功能。该组合物对化学性肝损伤有保护功能。该组合物对化学性肝损伤有保护功能。


技术研发人员：宋昆元 陈伟伟
受保护的技术使用者：上海爱启医药技术有限公司
技术研发日：2023.08.03
技术公布日：2023/10/5