一种抗衰皮肤调理剂及其应用的制作方法

1.本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种抗衰皮肤调理剂及其应用。


背景技术：

2.衰老是生命过程中不可避免的自然规律，它受遗传因素、环境因素及全身复杂的形态结构等各方面的影响，衰老的机理目前还处于研究阶段，存在体细胞突变学说、自由基学说、神经内分泌调节学说、基因衰减学说等多种机理学说。生命体在衰老过程中使胶原蛋白形成分子间交联，不但降低了皮肤的弹性和通透性，使养料及废物的扩散性能减弱，而且降低了胶原的可溶性使其难以被胶原酶水解，造成皮肤弹性下降，皱纹不易平复且不断加深，从而加快皮肤的衰老过程，因此延缓皮肤衰老的护肤产品越来越受到人们的青睐。
3.cn111329810a公开了一种抗氧化的抗衰老化妆品组合物，涉及化妆品技术领域。该抗氧化的抗衰老化妆品组合物包括以下重量份组分：复合植物油；烟酰胺；酵母提取物；密罗木叶/茎提取物；透明质酸钠；肌肽；3-o-乙基抗坏血酸；阿魏酸。该发明通过各组分的搭配共同作用下，从多层次，多途径的实现抗氧化功能，具有主动清除自由基以及激活人体增加清除自有基的酶含量等多重抗氧化作用。
4.cn105030610a公开了一种抗衰老组合物，包含基础组分以及分散于所述基础组分中的抗衰老因子，所述抗衰老因子选自大豆胚芽提取物、小麦胚芽提取物、红花胚芽提取物、玉米胚芽提取物中的至少三种。大豆胚芽提取物、小麦胚芽提取物、红花胚芽提取物、玉米胚芽提取物中的至少三种相互之间产生协同抗衰老作用，可协同促进胶原蛋白合成、快速抚平皮肤细纹、修复受损肌肤，从而达到延缓肌肤衰老的目的。
5.但以上现有技术抗衰老能力的效果都不明显，不能从根本上解决皮肤衰老问题，基于此，有必要开发一种更有效的抗衰老产品，以满足人们的需求。


技术实现要素：

6.针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种抗衰皮肤调理剂及其应用。
7.为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
8.第一方面，本发明提供了一种抗衰皮肤调理剂，所述抗衰皮肤调理剂包括雀嘴茶提取物和牡丹根皮提取物。
9.雀嘴茶提取物具有祛风除湿、舒筋活络等功效，且对高尿酸及其并发症有较好的治疗作用，多用于疾病的治疗中。本发明的抗衰皮肤调理剂选用雀嘴茶提取物是因为本发明的工作人员意外发现雀嘴茶提取物能够显著抑制d-胺基半乳糖(d-gal)诱导的成纤维细胞中衰老蛋白的增加，表现出优异的抗衰潜力，具有优异的抑制皮肤细胞衰老作用，可以明显改善皮肤的衰老状况，同时所述牡丹根皮提取物能够促进皮肤血液循环，活化衰老的表皮细胞，消除皱纹的作用，其与雀嘴茶提取物搭配使用，两者在抗衰老功效上具有协同增效的作用，可进一步的提高皮肤调理剂的抗衰效果。
10.优选的，所述雀嘴茶提取物与牡丹根皮提取物的质量比为1:(0.2-0.8)，例如可以
为1:0.2、1:0.3、1:0.4、1:0.5、1:0.6或1:0.7等，上述各项数值范围内的具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
11.第二方面，本发明提供了一种如第一方面所述的抗衰皮肤调理剂在化妆品中的应用。
12.优选地，所述化妆品包括精华液、化妆水、乳液、面霜或面膜；
13.优选地，所述抗衰皮肤调理剂在所述化妆品中的质量百分含量为1-15％，例如可以为2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％或14％等，上述各项数值范围内的具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
14.第三方面，本发明提供了一种具有抗衰保湿功效的精华液，所述具有抗衰保湿功效的精华液包括如第一方面所述的抗衰皮肤调理剂、保湿剂、增稠剂、润肤剂、去离子水。
15.本发明的具有抗衰保湿功效的精华液通过所述抗衰皮肤调理剂与保湿剂、润肤剂、增稠剂等组分的配合，既能够为皮肤细胞提供更多的营养及能量，进而具有更好的延缓皮肤衰老的效果，且能够起到较好的滋润肌肤、紧致肌肤的效果。
16.优选地，所述具有抗衰保湿功效的精华液按重量份数计包括如第一方面所述的抗衰皮肤调理剂1-15份、保湿剂5-20份、增稠剂0.1-0.5份、润肤剂1-10份、去离子水1-90份。
17.本发明的具有抗衰保湿功效的精华液中所述抗衰皮肤调理剂的添加量可以为2份、4份、5份、6份、8份、10份、12份或14份等；
18.所述保湿剂的添加量可以为6份、7份、9份、10份、12份、15份、17份或19份等；
19.所述增稠剂的添加量可以为0.1份、0.2份、0.3份、0.4份或0.5份等；
20.所述润肤剂的添加量可以为2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份或9份等；
21.所述去离子水的添加量可以为5份、10份、20份、30份、40份、50份、60份、70份、80份或90份等。
22.优选地，所述保湿剂包括甘油、丙二醇、丁二醇、己二醇或透明质酸钠中的任意一种或至少两种的组合。
23.优选地，所述保湿剂为甘油、丁二醇和透明质酸钠的组合；
24.优选地，所述甘油、丁二醇和透明质酸钠的质量比为(2-5):(1-2):(0.01-1)。
25.其中“2-5”可以为2.2、2.5、2.8、3、3.2、3.5、3.8、4、4.2、4.5或4.8等；
26.其中“1-2”可以为1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8或1.9等；
27.其中“0.01-1”可以为0.02、0.03、0.05、0.1、0.2、0.4、0.5、0.8或0.9等。
28.优选地，所述增稠剂包括卡波姆、丙烯酸(酯)类/c10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物或丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物中的任意一种或至少两种的组合。
29.优选地，所述润肤剂包括聚二甲基硅氧烷、角鲨烷或辛酸/癸酸甘油三酯中的任意一种或至少两种的组合。
30.优选地，所述具有抗衰保湿功效的精华液中还包括有舒缓抗炎剂。
31.优选地，所述舒缓抗炎剂在具有抗衰保湿功效的精华液总量中的质量百分含量为1-5％，例如可以为1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％或4.5％等。
32.优选地，所述舒缓抗炎剂包括马齿苋提取物、栀子果提取物、金盏花提取物、扁核木油、麦冬根提取物或齿叶乳香树脂提取物中的任意一种或至少两种的组合。
33.优选地，所述舒缓抗炎剂为马齿苋提取物、栀子果提取物和金盏花提取物的组合。
34.本发明中，所述马齿苋提取物、栀子果提取物和金盏花提取物三者配合，可有效对皮肤的炎症反应和不适症状进行快速调节舒缓，进而使皮肤维持稳定的健康状态。
35.优选地，所述马齿苋提取物、栀子果提取物和金盏花提取物的质量比为(1-3):(0.1-1):(0.5-1.5)。
36.其中“1-3”可以为1.2、1.5、1.8、2、2.2、2.5或2.8等；
[0037]“0.1-1”可以为0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8或0.9等；
[0038]“0.5-1.5”可以为0.6、0.7、0.8、0.9、1、1.1、1.2、1.3或1.4等。
[0039]
优选地，所述具有抗衰保湿功效的精华液还包括ph调节剂、防腐剂或芳香剂中的任意一种或至少两种的组合。
[0040]
第四方面，本发明提供了一种如第三方面所述的具有抗衰保湿功效的精华液的制备方法，所述制备方法包括：
[0041]
(1)将去离子水、保湿剂、增稠剂加入水相锅，搅拌升温保温；将润肤剂加入油相锅，搅拌升温保温；
[0042]
(2)保温结束后，将水、油锅抽入乳化锅，均质后，降温，加入如第一方面所述的抗衰皮肤调理剂，混合均匀后即得。
[0043]
优选地，步骤(1)所述保温的温度分别独立地为75-80℃(例如可以为75℃、76℃、77℃、78℃或79℃等)，保温的时间分别独立地为1-10min(2min、3min、4min、5min、6min、7min、8min或9min等)。
[0044]
优选地，步骤(2)所述均质的温度为75-80℃(例如可以为75℃、76℃、77℃、78℃或79℃等)，均质的时间为5-10min(例如可以为5min、6min、7min、8min、9min或10min等)。
[0045]
优选地，步骤(2)所述降温至35-45℃，例如可以为36℃、37℃、38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃或44℃等。
[0046]
优选地，步骤(2)还包括加入舒缓抗炎剂、ph调节剂、芳香剂或防腐剂中的任意一种或至少两种的组合。
[0047]
上述各项数值范围内的具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
[0048]
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
[0049]
(1)本发明的雀嘴茶提取物能够显著抑制d-胺基半乳糖(d-gal)诱导的成纤维细胞中衰老蛋白的增加，表现出优异的抗衰潜力，具有优异的抑制皮肤细胞衰老作用，可以明显改善皮肤的衰老状况，同时所述牡丹根皮提取物能够促进皮肤血液循环，活化衰老的表皮细胞，消除皱纹的作用，其与雀嘴茶提取物搭配使用，两者在抗衰老功效上具有协同增效的作用，可进一步的提高皮肤调理剂的抗衰效果。
[0050]
(2)本发明的具有抗衰保湿功效的精华液通过所述抗衰皮肤调理剂与保湿剂、润肤剂、增稠剂等组分的配合，既能够为皮肤细胞提供更多的营养及能量，进而具有更好的延缓皮肤衰老的效果，且能够起到较好的滋润肌肤、紧致肌肤的效果。
附图说明
[0051]
图1是测试例2中精华液在斑马鱼中的抗氧化效果图。
具体实施方式
[0052]
为更进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合本发明的优选实施例来进一步说明本发明的技术方案，但本发明并非局限在实施例范围内。
[0053]
本发明实施例中所述雀嘴茶提取物采用如下方法进行制备，所述制备方法为：
[0054]
(1)将100g干燥的雀嘴茶用60％乙醇-水进行加热回流提取，料液比为1：10g/ml，提取温度为65℃，时间为2h，提取次数2次；
[0055]
(2)将提取液进行在55℃下减压浓缩至无醇味后，4℃条件下冷却12h，待其充分析出沉淀，于3000r/min条件下离心15min，收集沉淀物；
[0056]
(3)将沉淀物采用蒸馏水加热重溶，上样于mci-gelchp 20p型树脂进行分离洗脱，分离洗脱步骤为：水洗脱2bv、20％乙醇-水洗脱5bv、50％乙醇水洗脱5bv；
[0057]
(4)收集50％乙醇-水洗脱部位，50℃下减压浓缩至固形物含量为25％，冷冻干燥，即得。
[0058]
所述牡丹根皮提取物为购买自上海际研生物科技有限公司；
[0059]
所述马齿苋提取物为购买自上海际研生物科技有限公司；
[0060]
所述金盏花提取物购买自现代百朗德生物科技有限公司，marigold extract；
[0061]
所述栀子果提取物为购买上海际研生物科技有限公司；；
[0062]
所述丙烯酸(酯)类/c10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物购买自路博润特种化工制造(上海)有限公司，pemulen tr-1polymer；
[0063]
所述聚二甲基硅氧烷购买自陶氏化学(上海)有限公司，pmx200-350cst。
[0064]
其余原料只要购买自正规经销商均可使用。
[0065]
实施例1
[0066]
本实施例提供一种抗衰皮肤调理剂，所述抗衰皮肤调理剂为质量比为1:0.5的雀嘴茶提取物和牡丹根皮提取物。
[0067]
实施例2
[0068]
本实施例提供一种抗衰皮肤调理剂，所述抗衰皮肤调理剂为质量比为1:0.2的雀嘴茶提取物和牡丹根皮提取物。
[0069]
实施例3
[0070]
本实施例提供一种抗衰皮肤调理剂，所述抗衰皮肤调理剂为质量比为1:0.8的雀嘴茶提取物和牡丹根皮提取物。
[0071]
实施例4
[0072]
本实施例提供一种抗衰皮肤调理剂，所述抗衰皮肤调理剂为质量比为1:1的雀嘴茶提取物和牡丹根皮提取物。
[0073]
实施例5
[0074]
本实施例提供一种抗衰皮肤调理剂，所述抗衰皮肤调理剂为质量比为1:0.1的雀嘴茶提取物和牡丹根皮提取物。
[0075]
对比例1
[0076]
本对比例提供一种抗衰皮肤调理剂，所述抗衰皮肤调理剂仅为雀嘴茶提取物。
[0077]
对比例2
[0078]
本对比例提供一种抗衰皮肤调理剂，所述抗衰皮肤调理剂仅为牡丹根皮提取物。
[0079]
对比例3
[0080]
本对比例提供一种抗衰皮肤调理剂，所述抗衰皮肤调理剂为质量比为1:0.5的雀嘴茶提取物和葡萄籽提取物。
[0081]
应用例1
[0082]
本应用例制备一种具有抗衰保湿功效的精华液，其配方如下：
[0083][0084]
其制备方法为：
[0085]
(1)将去离子水、保湿剂、增稠剂加入水相锅，搅拌升温至80℃保温5min；将润肤剂加入油相锅，搅拌升温至80℃保温5min；
[0086]
(2)保温结束后，将水、油锅抽入乳化锅，在80℃均质10min，降温至40℃，加入如实施例1的皮肤调理剂，混合均匀后即得。
[0087]
应用例2-5
[0088]
本应用例提供了五种具有抗衰保湿功效的精华液，其配方与应用例1的区别仅在于将实施例1的皮肤调理剂分别替换为添加量相同的实施例2-5的皮肤调理剂，其他条件均保持不变，制备方法参照应用例1。
[0089]
应用例6
[0090]
本应用例提供了一种具有抗衰保湿功效的精华液，其配方与应用例1的区别仅在于保湿剂不包含甘油，其减少量按份数比例分配至丁二醇和透明质酸钠中，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例1。
[0091]
应用例7
[0092]
本应用例提供了一种具有抗衰保湿功效的精华液，其配方与应用例1的区别仅在于保湿剂不包含丁二醇，其减少量按份数比例分配至甘油和透明质酸钠中，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例1。
[0093]
应用例8
[0094]
本应用例提供了一种具有抗衰保湿功效的精华液，其配方与应用例1的区别仅在于保湿剂不包含透明质酸钠，其减少量按份数比例分配至甘油和丁二醇中，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例1。
[0095]
应用例9
[0096]
本应用例制备一种具有抗衰保湿功效的精华液，其配方如下：
[0097][0098][0099]
其制备方法为：
[0100]
(1)将去离子水、保湿剂、增稠剂加入水相锅，搅拌升温至80℃保温5min；将润肤剂加入油相锅，搅拌升温至80℃保温5min；
[0101]
(2)保温结束后，将水、油锅抽入乳化锅，在80℃均质10min，降温至40℃，依次加入皮肤调理剂和舒缓抗氧剂，混合均匀后即得。
[0102]
应用例10
[0103]
本应用例提供了一种具有抗衰保湿功效的精华液，其配方与应用例9的区别仅在于舒缓抗炎剂不包含马齿苋提取物，其减少量按份数比例分配至栀子果提取物和金盏花提取物中，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例10。
[0104]
应用例11
[0105]
本应用例提供了一种具有抗衰保湿功效的精华液，其配方与应用例9的区别仅在于舒缓抗炎剂不包含栀子果提取物，其减少量按份数比例分配至马齿苋提取物和金盏花提取物中，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例10。
[0106]
应用例12
[0107]
本应用例提供了一种具有抗衰保湿功效的精华液，其配方与应用例9的区别仅在于舒缓抗炎剂不包含金盏花提取物，其减少量按份数比例分配至马齿苋提取物和栀子果提取物中，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例10。
[0108]
对比应用例1-3
[0109]
本对比应用例提供了两种具有抗衰保湿功效的精华液，其配方与应用例1的区别仅在于将实施例1的抗衰皮肤调理剂分别替换为添加量相同的对比例1-3的皮肤调理剂，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例1。
[0110]
对比应用例4
[0111]
本对比应用例提供了一种具有抗衰保湿功效的精华液，其配方与应用例1的区别仅在于不含有抗衰皮肤调理剂这一成分，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例1。
[0112]
试验例1
[0113]
促进弹性蛋白生成实验
[0114]
对应用例1-12提供的具有抗衰保湿功效的精华液和对比应用例1-4提供的具有抗衰保湿功效的精华液液进行促进弹性蛋白生成实验，方法如下：
[0115]
(1)将人成纤维细胞按照每孔20000枚的密度接种在96孔板上，加入培养基，在37℃培养箱中培养24小时，待细胞贴壁后，更换新的培养基，并分别加入各测试样品(控制样品终浓度为50mg/ml)，以20mmol/l的pbs溶液作为空白对照，然后在37℃培养箱中培养2天。
[0116]
(2)培养结束后，利用细胞裂解液将细胞洗脱下来，并超声破碎。采用biocolor弹性蛋白检测试剂盒对弹性蛋白的含量进行检测：用弹性蛋白沉淀剂处理样本，使弹性蛋白沉淀下来，离心分离，去除上清液，向沉淀中加入染料和反应液，反应形成弹性蛋白-染料复合物，离心分离并用pbs溶液洗涤三次，去除未结合的染料，添加染料释放剂，使弹性蛋白-染料复合物中的染料释放出来，采用分光光度计测定样品在513nm处的吸光度，根据吸光度-染料浓度标准曲线计算弹性蛋白的表达量(以空白组的表达量为1)；
[0117]
具体测试结果如下表1所示：
[0118]
表1
[0119]
测试样品弹性蛋白的表达量测试样品弹性蛋白的表达量应用例16.8应用例96.4应用例26.7应用例106.7应用例36.5应用例116.6应用例45.2应用例126.3应用例55.4对比应用例13.5应用例65.8对比应用例22.9应用例76.5对比应用例35.5应用例86.6对比应用例42.0
[0120]
由表1测试数据可知，本发明的应用例1-3提供的具有抗衰保湿功效的精华液的弹性蛋白的表达量在6.5以上，而对比应用例4的具有抗衰保湿功效的精华液弹性蛋白的表达量仅为2.0，这说明本发明的具有抗衰保湿功效的精华液中添加抗衰皮肤调理剂后可刺激细胞生长，增加皮肤弹性，从而改善肌肤状态。对比应用例1-2所述的具有抗衰保湿功效的精华液的弹性蛋白表达量仅为3.5或2.9，这充分说明所述雀嘴茶提取物与牡丹根皮提取物相互配合，在促进弹性蛋白的表达具有协同增效的作用。
[0121]
试验例2抗氧化测试
[0122]
对应用例1和对比应用例1-4的精华液进行斑马鱼胚胎中ros清除测试。
[0123]
试验生物：2dpf的斑马鱼幼鱼
[0124]
试验方法：选取发育正常的2dpf斑马鱼幼鱼，放入六孔细胞培养板中，每孔10尾，在不伤害幼鱼的情况下除去六孔板中的胚胎培养液，向每孔中快速加入3ml浓度为0.1％受试物稀释液。用铝箔纸包裹六孔细胞培养板，于(28.5℃
±
1.0℃)生化培养箱中避光孵育20h。孵育结束后，洗去受试物培养液，更换含活性氧测试溶液(cm-h2dcfd检测试剂)的胚胎培养液，孵育2h
±
1h，洗去培养液，将斑马鱼侧身摆放，于荧光体式显微镜下对幼鱼按统一的拍照参数进行拍照。。
[0125]
活性氧(ros)清除率计算方法如下：
[0126][0127]
上式中，t为受试物处理组鱼胚胎ros“平均信号强度”的平均值，c为空白对照组鱼胚胎ros“平均信号强度”的平均值。
[0128]
具体测试结果如表2和图1所示：
[0129]
表2
[0130]
测试样品ros清除率％应用例185对比应用例160对比应用例230对比应用例370对比应用例420空白对照组0
[0131]
由表2可知，应用例1制备得到的具有抗衰保湿功效的精华液对ros的清除率为85％，表明本发明的具有抗衰保湿功效的精华液中各成分相互配合，协同增效，具有较好的抗氧化效果。由对比例应用例1-2可知，所述抗衰皮肤调理剂中雀嘴茶提取物与牡丹根皮提取物相互配合，可以显著增强具有抗衰保湿功效的精华液的抗氧化效果。
[0132]
试验例3
[0133]
抗皱效果实验
[0134]
对应用例1-5提供的具有抗衰保湿功效的精华液和对比应用例1-4提供的具有抗衰保湿功效的精华液进行抗皱效果实验；具体测试方法如下所示：
[0135]
(1)实验对象：选取90名皮肤健康的35-55岁的女性志愿者，男女比例各占一半，随机分成9组(每组男女各5名)；
[0136]
(2)实验仪器：德国ck公司的皮肤皱纹测试仪vl650；
[0137]
(3)测试方法：采用德国ck公司的皮肤皱纹测试仪vl650并使用硅胶套取额头进行皱纹深度测量，分别对受测者额头皱纹进行测试，并取三次测试数据的平均值；所述具有抗衰保湿功效的精华液具体使用方法为早上8点进行洁面，洁面后分别在面部使用0.5
±
0.05g的各测试样品精华液；晚上8点进行洁面，洁面后分别在面部使用0.5
±
0.05g的各测试样品精华液，实验周期持续时间为60天；最后计算处理30天和60天后的皱纹深度减小的百分比；
[0138]
具体测试结果如下表3所示：
[0139]
表3
[0140][0141]
由表3测试数据可知，试验本发明的应用例1-3提供的具有抗衰保湿功效的精华液60天后的皱纹深度减小的百分比达到24％以上，这充分说明具有抗衰保湿功效的精华液中各成分相互配合，协同增效，能够有效对抗皮肤皱纹减缓皮肤老化的过程，减少静态纹的产生，通过促进皮肤弹性蛋白的表达和细胞的增殖生长改善皮肤的动态纹。
[0142]
试验例4
[0143]
保湿性能测试：
[0144]
测试应用例1、6-8制备的具有抗衰保湿功效的精华液，比较使用前后(使用操作保持一致性)，试用者皮肤含水量的变化，受试者共40名志愿者，其中女性：28名，男性12名，年龄在20-40岁，平均年龄28岁，随机分为4组，每组7名女性和3名男性。
[0145]
受试者洗净双手前臂，在设定的湿度环境下静坐30min，在受试者的左右前臂各选取3
×
3cm2的正方形实验区域，以左臂作为试验样品的测试区域，右臂的对称区域作为空白对照，用corneometer cm825检测每个实验部位的水分含量，重复3次，得出平均值进行记录。
[0146]
皮肤水合率的计算公式为：
[0147]
使用样品2小时后，受试者的平均皮肤水合率结果如表4所示：
[0148]
表4
[0149]
组别皮肤水合率应用例145.6％应用例635.8％应用例737.7％应用例838.2％
[0150]
由表4数据可知：本发明所涉及的具有抗衰保湿功效的精华液具有优异的保湿效果；其中保湿剂中甘油、丁二醇和透明质酸钠三种成分在上述功效上具有一定的协同增效作用，三者配合缺一不可。
[0151]
试验例5：抗炎功效测试
[0152]
测试样品：应用例1和9-12提供的具有抗衰保湿功效的精华液；
[0153]
测试方法如下所示：
[0154]
(1)sls诱导3d表皮模型检测炎症因子
[0155]
3d表皮模型进行稳定培养后，设置诱导组、样本组和空白对照组；在诱导组和样本组的表皮模型上加入0.3％sls，于37℃、5％co2及饱和湿度条件下诱导5-30min，用dpbs缓冲液彻底冲洗后，将精华液涂抹在表皮模型的表面，后孵育36-48h。将后培养的培养基收集，用elisa试剂盒进行il-1α和il-8的含量的检测。操作步骤与试剂盒说明书一致。利用软件计算标准曲线，以诱导对照组为100％计算相对表达量，相对表达量＝样本组含量/诱导对照组含量
[0156]
(2)uv诱导3d表皮模型检测炎症因子
[0157]
3d表皮模型进行稳定培养后，设置诱导组、样本组和空白对照组；针对诱导组和样本组的表皮模型利用紫外太阳光模拟器进行uv辐照，使用uv-meter进行辐照量监测，照射至uva剂量为5-20j，uvb剂量为50-200mj，将表皮模型逐个移入加有培养基的孔板中进行后孵育36-48h。将后培养的培养基收集，用elisa试剂盒进行pge2的含量的检测。操作步骤与试剂盒说明书一致。利用软件计算标准曲线，以诱导对照组为100％计算相对表达量，相对表达量＝样本组含量/诱导对照组含量
[0158]
(3)lps诱导raw264.7细胞检测炎症因子
[0159]
(3.1)受试物细胞毒性mtt检测及分析
[0160]
收集细胞形态良好，处于对数生长期的小鼠巨噬细胞raw264.7，接种与96孔板培养过夜。将精华液进行梯度稀释后，加入细胞进行后孵育，针对细胞进行mtt检测，酶标仪上读取波长在570nm处吸光度，以630nm为参比波长，记录测定结果，计算细胞活性。细胞存活率＝[(样本组-空白组)/(对照组-空白组)]x100％，选择细胞活性大于90％的浓度进行后续的抗炎测试。
[0161]
(3.2)lps诱导raw264.7细胞炎症模型上清液tnf-α、il-6、no分泌量检测
[0162]
raw264.7细胞接种于24孔细胞培养板中，培养过夜。设置空白对照组，lps诱导组及样本组，除空白对照组，lps诱导组和样本组加入lps至终浓度为1μg/ml，于37℃、5％co2及饱和湿度条件下培养24h，收集细胞培养基，使用联科鼠源elisa试剂盒检测上清液的tnf-α及il-6含量，使用griess试剂检测上清液no含量，操作步骤参照试剂盒说明书。利用数据软件计算标准曲线，计算tnf-α、il-6及no的含量，并计算以lps诱导组为100％的相对表达量。
[0163]
上述的tnf-α、il-6、il-1α、il-8和pge2炎症因子以及no的分析统计采用one-way anova统计分析。所有的统计分析均为双尾。p《0.05认为具有显著差异，用“*”表示，p《0.01认为具有非常显著差异，用“**”表示，p《0.001认为具有极其显著差异，用“***”表示。
[0164]
本实施例中检测的6个受试物在细胞水平及3d皮肤水平的实验显著性差异结果汇总如表5所示，依据表6标准进行评估及打分，受试物抗炎功效评估结果如表7所示。
[0165]
表5
[0166]
[0167][0168]
表6
[0169][0170]
表7
[0171][0172]
根据汇总得分的高低对受试物的抗炎效果进行排序，发现相对于应用例1，应用例9和10-12在综合评分中均比应用例1高，抗炎舒敏的效果比应用例1更强。这说明由应用例9和应用例10-12的对比充分说明本发明中舒缓抗炎剂中马齿苋提取物、栀子果提取物和金盏花提取物三者相互配合，具有协同增效的作用，能够有效抑制多种炎症因子的释放、传递，能起到抗炎舒敏的作用，从而有效修复炎症肌肤。
[0173]
试验例6：红细胞溶血实验
[0174]
红细胞溶血实验(red blood cellhaemolysis test,rbc)是兔眼刺激性实验的替代方法之一，基本原理是通过测定细胞血红蛋白溶出量及变性程度来评价化学品对眼组织细胞的损伤。rbc实验可用于评价化妆品的眼刺激性。
[0175]
对应用例1-12制备的具有抗衰保湿功效的精华液进行红细胞溶血实验。实验采用欧洲替代方法验证中心的rbc实验测试方法及判断标准，具体判断标准如表8所示，其中hd
50
为50％红细胞发生溶血时的样品浓度，di为蛋白质变性指数，l/d为hd
50
与di的比值。
[0176]
表8
[0177]
l/d分级l/d﹥100无刺激性10﹤l/d≦100微刺激性1﹤l/d≦10轻度刺激性0.1﹤l/d≦1中度刺激性l/d≦0.1重度刺激性
[0178]
应用例1-13制备的各待测样品的刺激性结果如表9所示。
[0179]
表9
[0180][0181][0182]
由表9的样品刺激性结果可知，本发明应用例1-12所制备的具有抗衰保湿功效的精华液的刺激性分级为无刺激性，说明本发明的具有抗衰保湿功效的精华液中各组分均具有温和无刺激的特点。
[0183]
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种抗衰皮肤调理剂及其应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
[0184]
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
[0185]
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

技术特征：
1.一种抗衰皮肤调理剂，其特征在于，所述抗衰皮肤调理剂包括雀嘴茶提取物和牡丹根皮提取物。2.如权利要求1所述的抗衰皮肤调理剂，其特征在于，所述雀嘴茶提取物与牡丹根皮提取物的质量比为1:(0.2-0.8)。3.如权利要求1或2所述的抗衰皮肤调理剂在化妆品中的应用。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述化妆品包括精华液、化妆水、乳液、面霜或面膜；优选地，所述抗衰皮肤调理剂在所述化妆品中的质量百分含量为1-15％。5.一种具有抗衰保湿功效的精华液，其特征在于，所述具有抗衰保湿功效的精华液包括如权利要求1或2所述的抗衰皮肤调理剂、保湿剂、增稠剂、润肤剂、去离子水。6.如权利要求5所述的具有抗衰保湿功效的精华液，其特征在于，所述具有抗衰保湿功效的精华液按重量份数计包括如权利要求1或2所述的抗衰皮肤调理剂1-15份、保湿剂5-20份、增稠剂0.1-0.5份、润肤剂1-10份、去离子水1-90份。7.如权利要求5或6所述的具有抗衰保湿功效的精华液，其特征在于，所述保湿剂包括甘油、丙二醇、丁二醇、己二醇或透明质酸钠中的任意一种或至少两种的组合；优选地，所述保湿剂为甘油、丁二醇和透明质酸钠的组合；优选地，所述甘油、丁二醇和透明质酸钠的质量比为(2-5):(1-2):(0.01-1)；优选地，所述增稠剂包括卡波姆、丙烯酸(酯)类/c10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物或丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物中的任意一种或至少两种的组合；优选地，所述润肤剂包括聚二甲基硅氧烷、角鲨烷或辛酸/癸酸甘油三酯中的任意一种或至少两种的组合。8.如权利要求5-7中任一项所述的具有抗衰保湿功效的精华液，其特征在于，所述具有抗衰保湿功效的精华液中还包括有舒缓抗炎剂；优选地，所述舒缓抗炎剂在所述具有抗衰保湿功效的精华液总量中的质量百分含量为1-5％；优选地，所述舒缓抗炎剂包括马齿苋提取物、栀子果提取物、金盏花提取物、扁核木油、麦冬根提取物或齿叶乳香树脂提取物中的任意一种或至少两种的组合；优选地，所述舒缓抗炎剂为马齿苋提取物、栀子果提取物和金盏花提取物的组合；优选地，所述马齿苋提取物、栀子果提取物和金盏花提取物的质量比为(1-3):(0.1-1):(0.5-1.5)；优选地，所述具有抗衰保湿功效的精华液还包括ph调节剂、防腐剂或芳香剂中的任意一种或至少两种的组合。9.如权利要求5-8中任一项所述的具有抗衰保湿功效的精华液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：(1)将去离子水、保湿剂、增稠剂加入水相锅，搅拌升温保温；将润肤剂加入油相锅，搅拌升温保温；(2)保温结束后，将水、油锅抽入乳化锅，均质后，降温，加入如权利要求1或2中任一项所述的抗衰皮肤调理剂，混合均匀后即得。
10.如权利要求9所述的具有抗衰保湿功效的精华液的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述保温的温度分别独立地为75-80℃，保温的时间分别独立地为1-10min；优选地，步骤(2)所述均质的温度为75-80℃，均质的时间为5-10min；优选地，步骤(2)所述降温至35-45℃；优选地，步骤(2)还包括加入舒缓抗炎剂、ph调节剂、芳香剂或防腐剂中的任意一种或至少两种的组合。

技术总结
本发明提供了一种抗衰皮肤调理剂及其应用，所述抗衰皮肤调理剂包括雀嘴茶提取物和牡丹根皮提取物。本发明的雀嘴茶提取物能够显著抑制D-胺基半乳糖(D-gal)诱导的成纤维细胞中衰老蛋白的增加，表现出优异的抗衰潜力，具有优异的抑制皮肤细胞衰老作用，可以明显改善皮肤的衰老状况，同时所述牡丹根皮提取物能够促进皮肤血液循环，活化衰老的表皮细胞，消除皱纹的作用，其与雀嘴茶提取物搭配使用，两者在抗衰老功效上具有协同增效的作用，可进一步的提高皮肤调理剂的抗衰效果。提高皮肤调理剂的抗衰效果。提高皮肤调理剂的抗衰效果。


技术研发人员：吴巧霞 王博 程颖 陈忠艺 曲丽萍 王飞飞 马骁 郭振宇
受保护的技术使用者：云南云科特色植物提取实验室有限公司 美达丝（上海）生物科技有限公司
技术研发日：2023.08.18
技术公布日：2023/10/5