双功能化合物及其制备方法、药物组合物和用途与流程

1.本技术属于医药技术领域，具体涉及一种双功能化合物及其制备方法、药物组合物和用途。


背景技术：

2.肾细胞癌(renal cell carcinoma,rcc)是泌尿系统癌症中第二大致死病因，转移与化疗抵抗是肾细胞癌的主要特征。肾细胞癌患者中有85％是透明细胞肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma, ccrcc)。分子生物学研究标明，90％的透明细胞肾细胞癌带有vhl基因的失活，vhl基因失活被认为是透明细胞肾细胞癌的驱动因素。vhl蛋白是e3泛素连接酶复合物的一个组成成分，其能够识别缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factors 1α,hif-1α)和缺氧诱导因子2α(hypoxia inducible factors 2α,hif-2α)并将其泛素化，进而被蛋白酶体降解。研究表明，vhl基因失活使透明细胞肾细胞癌细胞中的hif-2α表达增加，hif-2α是一种转录因子，其表达增加会导致下游调控的基因表达增加，例如增加vegfa的表达分泌，进而促进血管新生；增加细胞周期蛋白(ccdn1)的表达，促进细胞增殖；增加葡萄糖转运体的表达，进而增强细胞的代谢等，以上结果会促进肿瘤的生长，转移等。除肾细胞癌之外，研究表明，在肝癌、乳腺癌和结直肠癌中，由于肿瘤组织缺氧导致hif-2α表达上调，同样会促进癌症的发生发展。
3.由于hif-2α是一种转录因子，没有与其结合的内源性小分子配体，因此，hif-2α被认为是难以成药的靶点。2009年，科学家研究发现，在其蛋白内部存在一定大小的空腔，可以结合小分子，并通过化合物库筛选，得到了具有一定抑制活性的化合物，但是由于亲和力不足，难以成药。


技术实现要素：

4.本技术为了克服上述缺陷，提供了双功能化合物及其制备方法、药物组合物和用途，该双功能化合物能够解决缺氧诱导因子2α难成药的问题，从而用于治疗与hif-2α高表达相关的疾病。
5.第一方面，本技术实施例提供了双功能化合物，所述化合物具有以下通式：
[0006][0007]
上式中：所述l为连接子；
[0008]
所述r1选自卤素、-no2、-cn、-s(o)2ra、-s(o)ra和-p(o)rbrc中的任意一种，ra,rb和rc各自独立的选自c1-c6烷基和c1-c6卤代烷基中的任意一种；
[0009]
所述r2和r3各自独立的选自h、卤素、-cn、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基和c1-c6卤代烷
基中的任意一种；
[0010]
所述x选自-c(o)-和-ch
2-中的任意一种；
[0011]
所述r4选自h、卤素、-cn、c1-c3烷基、c1-c3卤代烷基和c1-c3烷氧基中的任意一种。
[0012]
结合第一方面，所述连接子l连接子l具有以下通式(ⅱ)：
[0013][0014]
所述l1通过与r1所连接的苯环共价连接，所述l4通过与r4所连接的苯环共价连接；
[0015]
所述l1不存在或者选自-nr
d-、-o-、-s-、-nhch
2-、-nh(ch2)qc(o)-和-oc(o)-中的任意一种，其中，所述q为0～6的整数，所述rd选自h、c1-c3烷基和c1-c3卤代烷基中的任意一种；
[0016]
所述l2和/或l3不存在或者选自-(ch2)
m-、-nr
e-、-(ch2ch2o)
n-、-(nh)o(ch2)
p
c(o)-和-c(o)(ch2)
p
(nh)o‑ꢀ
中的任意一种，其中，所述m为0～12的整数，所述n为0～6的整数，所述o为0或1，所述p为0～6的整数，所述re选自h、c1-c3烷基和c1-c3卤代烷基中的任意一种；
[0017]
所述l4不存在或者选自-o-、-s-和-nr
f-中的任意一种，所述rf选自h、卤素、-cn、c1-c3烷基、c1
‑ꢀ
c3卤代烷基，c1-c3烷氧基和c1-c3卤代烷氧基中的任意一种；
[0018]
所述a、b和c各自独立的选自不存在、c3-c7环烷基、包含1～3个独立选自o、n和s原子的5元～7元杂环基、c5-c10芳基及包含1-3个独立选自o、n和s原子的5元～10元杂芳基中的任意一种。
[0019]
第二方面，本技术公开了一种药物组合物，所述药物组合物包括第一方面所述的双功能化合物或其药学上可接受的盐、对映异构体、非对映异构体、前药或溶剂化物，以及至少一种的药学上可接受的载体、添加剂、助剂或赋形剂。
[0020]
第三方面，本技术公开了第一方面或第二方面所述的双功能化合物在制备肿瘤或癌症药物中的用途。
[0021]
本技术方案与现有技术相比，至少具有以下技术效果：
[0022]
本发明的化合物包括通过连接子l偶联或连接结合hif-2α蛋白的部分以及结合e3泛素连接酶crbn 的部分，其中，l左边部分为结合hif-2α蛋白的小分子部分，l右边部分为结合泛素连接酶的小分子配体，本技术的双功能化合物能够利用机体细胞内的泛素-蛋白酶体系统，将缺氧诱导因子hif-2α招募到泛素连接酶处，该化合物可以结合hif-2α并将hif-2α泛素化，进而hif-2α被机体细胞内的蛋白酶体降解，从而降低肿瘤细胞内hif-2α的表达量，进而可以调节机体细胞内hif-2α的含量，因此，本技术的双功能化合物可以解决hif-2α难成药的问题，同时本技术的双功能化合物可以用于治疗hif-2α高表达相关的疾病。
[0023]
应当理解的是，以上的一般描述和后文的细节描述仅是示例性的，并不能限制本技术。
具体实施方式
[0024]
为了更好的理解本发明的技术方案，下面结合具体实施方式对本发明实施例进行详细描述。
[0025]
应当明确，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
[0026]
在本发明实施例中使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本发明。在本发明实施例和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”、“所述”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其它含义。
[0027]
应当理解，本文中使用的术语“和/或”仅仅是一种描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如，a和/或b，可以表示：单独存在a，同时存在a和b，单独存在b这三种情况。另外，本文中字符“/”，一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。
[0028]
需要注意的是，本发明实施例所描述的“卤素”是指f、cl、br、i、at。
[0029]“c1-c6烷基”是指具有1-6个碳原子的烷基链，可以是直链，也可以带支链，例如：甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基等等。其中，c1-6烷基碳上的氢原子可以进一步被规定的取代基取代。
[0030]“c1-c6卤代烷基”是指具有1-6个碳原子的烷基链，可以是直链，也可以带支链，例如：甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基等等，其中烷基碳上的氢原子被至少一个卤素原子取代。
[0031]“c1-c6烷氧基”是指具有1-6个碳原子的烷基链，可以是直链，也可以带支链，通过氧原子与所述位置进行连接。
[0032]“c3-c7环烷基”是指具有3-7个碳原子的环烷基链，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基。环烷基中的碳原子上的氢原子可被规定的取代基取代。
[0033]“杂环基”是指具有1-3个独立选自氧原子、氮原子和硫原子且至少含有一根碳-碳单键的单环或者双环基；碳上氢原子可以被卤素，c1-c3烷基，c1-c3烷氧基等取代。
[0034]“芳基”是指具有全碳原子的芳香单环或双环，例如苯环，萘环，其中氢原子可以被卤素，氰基，c1
‑ꢀ
c3烷基，c1-c3卤代烷基，c1-c3烷氧基等取代。
[0035]“杂芳基”是指具有至少一个杂原子的芳香单环或双环，例如喹啉基、异喹啉基、吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基等等；环上的氢原子可以被卤素，氰基，c1-c3烷基，c1-c3卤代烷基，c1-c3烷氧基等取代；
[0036]“卤代烷氧基”是指具有1-3个碳原子的卤代烷基链，可以是直链，也可以带支链，通过氧原子与所述位置进行连接；
[0037]“c1-c3烷酰基”是指mec(o)-，etc(o)-，ch3ch2ch2c(o)-，(ch3)2chc(o)-；
[0038]“c1-c3烷基磺酰基”是指mes(o)
2-，ets(o)
2-，ch3ch2ch2s(o)
2-，(ch3)2chs(o)
2-；
[0039]
术语“前药”是指在生理条件下，在活体内通过酶催化进行的氧化、还原、水解等反应而转化为本发明化合物的衍生物。
[0040]
术语“同位素衍生物”是指构成本发明化合物的结构中，含有一个或多个以非天然比例存在的同位素原子。例如氘(2h或d)、碳-13(13c)和氮-15(15n)。
[0041]
术语“溶剂化物”是指本技术化合物与溶剂分子通过物理结合的形式形成溶剂络
合物。该物理结合包含氢键结合。常规溶剂包含水、甲醇、乙醇、乙酸、四氢呋喃、乙酸乙酯、乙腈等。本技术化合物可以结晶形式制备且可呈溶剂化物形式(包括水合物形式)。
[0042]
术语“药学上可接受的盐”，包含一个或多个碱性或酸性基团，特别是其药学上可以利用的盐。例如碱金属盐、碱土金属盐、铵盐。更精确的可以是钠盐、钾盐、钙盐、镁盐或有机胺如乙胺、乙醇胺、三乙胺或氨基酸盐。本发明化合物可以与无机酸或有机酸形成被质子化的式(i)化合物，酸的实例包括盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、甲磺酸、乳酸、苹果酸、马来酸、酒石酸等以及本领域人员已知的其他酸。
[0043]
hif-2α是一种转录因子，没有与其结合的内源性小分子配体，因此，hif-2α被认为是难以成药的靶点。目前还没有构建双功能化合物降解hif-2α蛋白的药物上市。
[0044]
因此，本技术提供一种双功能化合物，该化合物具有以下通式(ⅰ)：
[0045][0046]
上式中：l为连接子。
[0047]
r1选自卤素、-no2、-cn、-s(o)2ra、-s(o)ra和-p(o)rbrc中的任意一种，其中，ra,rb和rc各自独立的选自c1-c6烷基和c1-c6卤代烷基中的任意一种。
[0048]
r2和r3各自独立的选自h、卤素、-cn、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基和c1-c6卤代烷基中的任意一种。
[0049]
x选自-c(o)-和-ch
2-中的任意一种。
[0050]
r4选自h、卤素、-cn、c1-c3烷基、c1-c3卤代烷基和c1-c3烷氧基中的任意一种。
[0051]
在上述技术方案中，本发明的化合物包括通过连接子l偶联或连接的结合hif-2α蛋白的部分以及结合e3泛素连接酶crbn的部分，其中，l左边部分为结合hif-2α蛋白的小分子部分，l右边部分为结合泛素连接酶的小分子配体，本技术的双功能化合物能够利用机体细胞内的泛素-蛋白酶体系统，将缺氧诱导因子 hif-2α招募到泛素连接酶处，该化合物可以结合hif-2α并将hif-2α泛素化，进而hif-2α被机体细胞内的蛋白酶体降解，从而降低机体肿瘤细胞内hif-2α的表达量，进而可以调节机体细胞内hif-2α的含量，因此，本技术的双功能化合物解决了hif-2α难成药的问题，可以用于治疗hif-2α高表达相关的疾病。
[0052]
蛋白质的泛素化过程是在泛素激活酶(ubiquitin activating enzyme)e1、泛素结合酶(ubiquitin conjugatingenzyme)e2和e3泛素连接酶(ubiquitin ligase)的协同作用下进行。首先，泛素通过其c末端甘氨酸上的羧基和泛素活化酶e1上的必需半胱氨酸巯基形成高能硫酯键而连接到e1上成为活化状态的泛素；其次，活化的泛素从泛素活化酶e1转移到泛素结合酶e2上；最后，在e3泛素连接酶的作用下，将连接在泛素结合酶e2上的泛素分子通过异构肽键的共价连接方式连接到hif-2α蛋白上，hif-2α蛋白被泛素化后，在蛋白酶体中被降解。
[0053]
式ⅰ中l右边部分为与e3泛素连接酶crbn连接的部分，具体地，式ⅰ中l右边部分为可以结合crbn 基因的配体，crbn是e3泛素连接酶的一部分，作为底物受体(substrate receptor,srs)识别底物蛋白，从而启动降解过程，式ⅰ中l右边部分具有六元环哌啶二酮结
构，其能够与e3泛素连接酶结合，其结合的方式通常为非共价键连接，同时l左边部分含有hif-2α小分子抑制剂的结构片段，其能够识别hif-2α蛋白，并且该部分与hif-2α蛋白相互进行作用使得hif-2α蛋白接近e3泛素连接酶蛋白质从而促使hif-2α蛋白的降解。
[0054]
在一些实施方式中，优选地，ra选甲基和卤代甲基中的任意一种。卤代甲基例如可以是ch3f、ch3cl、 ch3br、ch3i和ch3at等。
[0055]
在一些实施方式中，优选地，r2和/或r3各自独立的选自h和卤素中的任意一种。
[0056]
在一些实施方式中，l连接子具有以下通式ii：
[0057][0058]
式中：l1通过与式i中r1所连接的苯环共价连接，l4通过与式i中r4所连接的苯环共价连接。具体地，连接子l通过邻近l1的与r1的对位进行共价结合，连接子l通过邻近l4的与x所连接的 c原子的邻位或间位进行共价结合。
[0059]
l1不存在或者选自：-nr
d-、-o-、-s-、-nhch
2-、-nh(ch2)qc(o)-、-oc(o)-、其中，q为0～6的整数， rd选自h、c1-c3烷基、c1-c3卤代烷基中的任意一种。
[0060]
l2和/或l3不存在或者选自-(ch2)
m-、-nr
e-、-(ch2ch2o)
n-、-(nh)o(ch2)
p
c(o)-和-c(o)(ch2)
p
(nh)
o-中的任意一种；其中，m为0～12的整数，n为0～6的整数，o为0或1，p为0～6的整数，re选自h、c1-c3 烷基和c1-c3卤代烷基中的任意一种。
[0061]
l4不存在或者选自-o-、-s-和-nr
f-中的任意一种；其中，rf选自h、卤素、-cn、c1-c3烷基、c1-c3 卤代烷基、c1-c3烷氧基和c1-c3卤代烷氧基中的任意一种。
[0062]
a、b和c各自独立的选自不存在、c3-c7环烷基、包含1-3个独立选自o、n和s原子的5至7元杂环基、c5-c10芳基和包含1-3个独立选自o、n和s原子的5至10元杂芳基中的任意一种。优选地：
[0063]
a不存在或者选自以下基团中的任意一种：
[0064][0065]
其中，z选自-n-和-ch
2-中的任意一种，α表示与其在式(ⅱ)中a基团左边相邻的基团连接，β表示与其在式(ⅱ)中a基团右边相邻的基团连接，若l1和l2均存在，则α表示与l1共价键连接，β表示与l2共价键连接。
[0066]
b不存在或者选自以下基团中的任意一种：
[0067][0068]
其中，γ表示与其在式(ⅱ)中b基团左边相邻的基团连接，δ表示与其在式(ⅱ)中b基团右边相邻的基团连接，若l2和l3均存在，γ表示与l2通过共价键连接，δ表示与l3通过共价键连接。
[0069]
c不存在或者选自以下基团中的任意一种：
[0070][0071]
其中，l5不存在或者选自-ch
2-、-o-、-nr
g-、-c(o)-和-o(ch2)rc(o)-中的任意一种，其中，r为0～6的整数；rg选自h、c1-c3烷基、c1-c3烷酰基和c1-c3烷基磺酰基中的任意一种。
[0072]
r5选自h、氘、卤素、-oh、c1-c3烷基、c1-c3卤代烷基和c1-c3烷氧基中的任意一种。
[0073]
r6选自h、-cn、卤素、-oh、c1-c3烷基、c1-c3卤代烷基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基和-nrh‑ꢀ
中的任意一种。其中，rh选自h和c1-c3烷基中的任意一种。
[0074]
π表示与其在式(ⅱ)中c基团左边相邻的基团连接，θ表示与其在式(ⅱ)中c基团右边相邻的基团连接，具体地，若l3和l4均存在，则π表示与l3通过共价键连接，θ表示与l4通过共价键连接。
[0075]
连接子l将双功能分子的两个部分连接，可以形成hif-2α蛋白、小分子以及e3泛素连接酶三元复合物，同时，由于本技术的连接子l具有一定的柔性，能够调节三元复合物的构象，使得e3泛素连接酶能够催化底物蛋白的泛素化，此外，连接子l能够影响整体分子的理化性质，使具有更好的成药性。连接子l能够拉近hif-2α蛋白与e3泛素连接酶之间的距离，促进蛋白的泛素化，对于降解靶蛋白具有不可替代的作用。
[0076]
本技术还提供了上述双功能化合物的制备方法，该方法包括以下反应路线中的任意一种：
[0077]
路线a:
[0078][0079]
步骤1：提供反应底物a1，a-1与反应底物a1在氢化钠的作用下，于溶剂中反应得到a-2。
[0080]
步骤2：a-2在对甲苯磺酸的作用下，于溶剂中升温反应得到中间体a-3。
[0081]
步骤3：a-3与反应底物a2于溶剂中升温反应得到a-4。
[0082]
步骤4：在一价铜的催化下，a-4与反应底物a3于溶剂中升温反应得到中间体a-5；
[0083]
步骤5：a-5在手性钌催化剂的催化下，加入甲酸和三乙胺，其中，甲酸和三乙胺作为氢的来源，在保护氛围下于溶剂中反应得到目标产物a-6。
[0084]
在上述制备工艺中，反应的溶剂均选自n,n-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、乙酸乙酯、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、甲醇、乙醇、水、丙酮和乙腈的至少一种。
[0085]
一价铜选自碘化亚铜、溴化亚铜、氯化亚铜和由硫酸铜与维生素c钠原位生成的化合物中的任意一种。
[0086]
手性钌试剂选自[(r,r)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)和[(s,s)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)中的任意一种。
[0087]
保护氛围的气体包括氩气和氮气中的至少一种。
[0088]
上述升温反应的温度为60℃～100℃，示例性地，升温反应的温度可以是60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、 85℃、90℃、95℃和100℃等，当然还可以是上述范围内的其他数值，本技术在此不做限制。
[0089]
路线b：
[0090][0091]
步骤1：提供反应底物b1，b-1与反应底物b1在氢化钠的作用下，于溶剂中反应得到b-2。
[0092]
步骤2：b-2在对甲苯磺酸的作用下，于溶剂中升温反应得到中间体b-3。
[0093]
步骤3：b-3与反应底物b2于溶剂中升温反应得到b-4。
[0094]
步骤4：b-4在三苯基膦的作用下，于溶剂中得到中间体b-5；
[0095]
步骤5：b-5与反应底物b3在碱的作用下，于溶剂中升温反应得到中间体b-6；
[0096]
步骤6：b-6在手性钌催化剂的催化下，加入甲酸和三乙胺，甲酸和三乙胺作为氢的来源，在保护氛围下于溶剂中反应，得到目标产物b-7。
[0097]
在上述制备工艺中，反应的溶剂均选自n,n-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、乙酸乙酯、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、甲醇、乙醇、水、丙酮和乙腈的至少一种。
[0098]
碱选自氢化钠、叔丁醇钾、叔丁醇钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸钠、三乙胺和二异丙基乙胺其中的任意一种。
[0099]
手性钌试剂选自[(r,r)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)和[(s,s)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)中的任意一种。
[0100]
保护氛围的气体包括氩气和氮气中的至少一种。
[0101]
上述升温反应的温度为60℃～100℃，示例性地，升温反应的温度可以是60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、 85℃、90℃、95℃和100℃等，当然还可以是上述范围内的其他数值，本技术在此不做限制。
[0102]
路线c：
[0103][0104]
步骤1：c-1与氰基二苯酚于溶剂中，在碱的作用下得到中间体c-2；
[0105]
步骤2：c-2与反应底物c1于溶剂中，在碱的作用下得到中间体c-3；
[0106]
步骤3：c-3于溶剂中，在酸的条件下，升温反应得到中间体c-4；
[0107]
步骤4：c-4与反应底物c2于溶剂中反应得到c-5；
[0108]
步骤5：在一价铜的催化下，c-5与反应底物c3于溶剂中升温反应得到中间体c-6；
[0109]
步骤6：c-6在手性钌催化剂的催化下，加入甲酸和三乙胺，甲酸和三乙胺作为氢的来源，在保护氛围下于溶剂中反应，得到目标产物c-7。
[0110]
在上述制备工艺中，反应的溶剂均选自n,n-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、乙酸乙酯、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、甲醇、乙醇、水、丙酮、乙腈的至少一种。
[0111]
酸选自盐酸、硫酸、对甲苯磺酸、对甲苯磺酸吡啶盐和三氟乙酸中的任意一种。
[0112]
碱选自氢化钠、叔丁醇钾、叔丁醇钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸钠、三乙胺和二异丙基乙胺中的任意一种。
[0113]
手性钌试剂选自[(r,r)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞
花烃)钌(ii)和[(s,s)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)中的任意一种。
[0114]
保护氛围的气体包括氩气和氮气中的至少一种。
[0115]
上述升温反应的温度为60℃～100℃，示例性地，升温反应的温度可以是60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、 85℃、90℃、95℃和100℃等，当然还可以是上述范围内的其他数值，本技术在此不做限制。
[0116]
路线d：
[0117][0118]
步骤1：d-1、反应底物d1与氢化钠于溶剂中反应得到中间体d-2；
[0119]
步骤2：酸性条件下，d-2于溶剂中升温反应得到中间体d-3；
[0120]
步骤3：中间体d-3与反应底物d2于溶剂中反应得到d-4；
[0121]
步骤4：在一价铜的催化下，d-5与反应底物d3于溶剂中升温反应得到中间体d-6；
[0122]
步骤5：中间体d-6与d-4溶于溶剂中，加入碱进行升温反应得到中间体d-7；
[0123]
步骤6：d-7在手性钌催化剂的催化下，加入甲酸和三乙胺，甲酸和三乙胺作为氢的来源，在保护氛围下于溶剂中反应，得到目标产物d-8。
[0124]
在上述制备工艺中，反应的溶剂均选自n,n-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、乙酸乙酯、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、甲醇、乙醇、水、丙酮、乙腈的至少一种。
[0125]
酸选自盐酸、硫酸、对甲苯磺酸、对甲苯磺酸吡啶盐和三氟乙酸中的任意一种。
[0126]
碱选自氢化钠、叔丁醇钾、叔丁醇钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸钠、三乙胺和二异丙基乙胺中的任意一种。
[0127]
手性钌试剂选自[(r,r)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)和[(s,s)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)中的任意一种。
[0128]
保护氛围的气体包括氩气和氮气中的至少一种。
[0129]
上述升温反应的温度为60℃～100℃，示例性地，升温反应的温度可以是60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、 85℃、90℃、95℃和100℃等，当然还可以是上述范围内的其他数值，本技术在此不做限制。
[0130]
路线e：
[0131][0132]
步骤1：e-1与反应底物e1溶于溶剂中，再加入碱进行升温反应得到中间体e-2；
[0133]
步骤2：在酸性条件下，e-2于溶剂中升温反应得到中间体e-3；
[0134]
步骤3：e-3溶于溶剂中，再加入三氟乙酸得到中间体e-4；
[0135]
步骤4：中间体e-4与反应底物e2，溶于溶剂，加入碱进行升温反应得到中间体e-5；
[0136]
步骤5：e-5在手性钌催化剂的催化下，加入甲酸和三乙胺作为氢的来源，在保护氛围下于溶剂中反应，得到目标产物e-6。
[0137]
在上述制备工艺中，反应的溶剂均选自n,n-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、乙酸乙酯、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、甲醇、乙醇、水、丙酮、乙腈的至少一种。
[0138]
酸选自盐酸、硫酸、对甲苯磺酸、对甲苯磺酸吡啶盐和三氟乙酸中的任意一种。
[0139]
碱选自氢化钠、叔丁醇钾、叔丁醇钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸钠、三乙胺和二异丙基乙胺中的任意一种。
[0140]
手性钌试剂选自[(r,r)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)和[(s,s)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)中的任意一种。
[0141]
保护氛围的气体包括氩气和氮气中的至少一种。
[0142]
上述升温反应的温度为60℃～100℃，示例性地，升温反应的温度可以是60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、 85℃、90℃、95℃和100℃等，当然还可以是上述范围内的其他数值，本技术在此不做限制。
[0143]
路线f：
[0144][0145]
步骤1：f-1与反应底物f1溶于溶剂，加入碱进行升温反应得到中间体f-2；
[0146]
步骤2：中间体f-2溶于溶剂，加入三氟乙酸进行反应得到中间体f-3；
[0147]
步骤3：中间体f-3与反应底物f2溶于溶剂中，加入缩合剂和碱反应得到中间体f-4；
[0148]
步骤4：f-4在手性钌催化剂的催化下，加入甲酸和三乙胺，甲酸和三乙胺作为氢的来源，在保护氛围下于溶剂中反应，得到目标产物f-5。
[0149]
在上述制备工艺中，反应的溶剂均选自n,n-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、乙酸乙酯、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、甲醇、乙醇、水、丙酮、乙腈的至少一种。
[0150]
酸选自盐酸、硫酸、对甲苯磺酸、对甲苯磺酸吡啶盐和三氟乙酸中的任意一种。
[0151]
碱选自氢化钠、叔丁醇钾、叔丁醇钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸钠、三乙胺和二异丙基乙胺中的任意一种。
[0152]
手性钌试剂选自[(r,r)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)和[(s,s)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)中的任意一种。
[0153]
保护氛围的气体包括氩气和氮气中的至少一种。
[0154]
上述升温反应的温度为60℃～100℃，示例性地，升温反应的温度可以是60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、 85℃、90℃、95℃和100℃等，当然还可以是上述范围内的其他数值，本技术在此不做限制。
[0155]
缩合剂包括1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(edci)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯(hatu)或(1-丙基磷酸环酐)t3p中的任意一种。
[0156]
本技术还提供了一种药物组合物，该药物组合物包含有效量的上述双功能化合物或其药学上可接受的盐、对映异构体、非对映异构体、前药、溶剂化物以及至少一种药学上可接受的载体、添加剂、助剂或赋形剂。上述药物为用于调节hif-2α含量与功能的的药物，优选为hif-2α的降解剂。可以理解的是，以本技术的双功能化合物为核心骨架为基础，本领域技术人员可进行适当的变形，使其适用于上述各种形式或类型的作用靶点，从而更好的发挥治疗作用，其也能够起到募集靶蛋白(hif-2α)的作用，从而可以促进靶蛋白的降解。
[0157]
本技术的药物组合物在用作药物时，是指本发明式(i)化合物以及其盐、同位素衍生物、前药、溶剂化物与其他具有或不具有生物活性物质组成的组合物，可以用于治疗或预防与hif-2α相关的疾病。
[0158]
为了适应不同的给药方式，本发明的药物组合物可以制成多种剂型。具体地，本发明所述药物组合物的制剂形式可以是口服制剂或注射剂。
[0159]
本技术的双功能化合物或药物组合物用于治疗靶蛋白(hif-2α)增殖引起的癌症或肿瘤，上述癌症包括肾细胞癌、肺癌、皮肤癌、头颈癌和乳腺癌中的任意一种。上述肿瘤包括血液肿瘤、胶质瘤、消化系统肿瘤、生殖系统肿瘤、淋巴瘤和神经系统肿瘤中的任意一种，示例性地，血液肿瘤包括急性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病和套细胞淋巴瘤中的任意一种，消化系统肿瘤包括食管癌、胃癌和结直肠癌中的任意一种，生殖系统肿瘤包括卵巢癌和子宫内膜癌中的任意一种，神经系统肿瘤包括脑胶质瘤和视神经母细胞瘤中的任意一种，可以理解，上述的癌症和肿瘤均可以通过hif-2α表达上调所引发。
[0160]
下面分多个实施例对本技术实施例进行进一步的说明。其中，本技术实施例不限定于以下的具体实施例。在不变主权利的范围内，可以适当的进行变更实施。
[0161]
实施例1
[0162]
化合物1-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-((1-(2-(2-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
‑ꢀ
4-基)氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮
[0163][0164]
化合物1-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-((1-(2-(2-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
‑ꢀ
4-基)氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0165][0166]
step a：中间体1-a的制备：
[0167]
2-(2-叠氮氧基)乙基-1-醇(2mmol)溶解于5ml无水dmf，冰水浴下加入氢化钠
(2.4mmol)，保持冰水浴搅拌30min，加入4-氟-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢螺环[茚-1,2
’‑
[1,3]二氧戊环](2mmol)，室温反应1h。反应结束后，饱和氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干得中间体1-a；
[0168]
step b：中间体1-b的制备：
[0169]
将1-a溶于8ml丙酮和2ml水的混合溶剂中，加入对甲苯磺酸吡啶盐(ppts，1mmol)，回流反应1h。反应结束后，冷却至室温，旋蒸除去丙酮，加入20ml饱和碳酸钠溶液，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干得中间体1-b；
[0170]
step c：中间体1-c的制备：
[0171]
将1-b溶于10ml甲醇，加入selectfluoro试剂(3mmol)，至于密封瓶中，70℃反应2h。反应结束后，冷却至室温，旋蒸除去甲醇，固体残渣溶于二氯甲烷，过滤，滤液旋干，溶于5ml乙腈，加入2ml稀盐酸 (2m)，室温搅拌1h，反应结束后，旋蒸除去乙腈，加入20ml饱和碳酸钠溶液，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析得中间体1-c(300mg，三步总收率42％)。
[0172]
step d：中间体1-d的制备：
[0173]
将1-c(0.1mmol)，2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(丙-2-炔-1-基氨基)异吲哚啉-1,3-二酮(0.1mmol)，无水硫酸铜(0.05mmol)，维生素c钠(0.2mmol)溶于4ml dmf和0.5ml水的混合溶剂中，氩气保护，70℃反应6h。反应完成后，冷却至室温，加入20ml饱和氯化溶液，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析得中间体1-d(40mg，收率59.8％)。
[0174]
step e：1-1和1-2的合成：
[0175]
甲酸(20μl)溶于1ml二氯甲烷，冰水浴下，加入三乙胺(30μl)，搅拌10min。将上述溶液加入到1
‑ꢀ
d的二氯甲烷溶液中，加入催化剂[(r,r)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii) (5％mol)，氩气保护，室温反应8h。反应完成后，加入20ml二氯甲烷，饱和碳酸氢钠洗涤，干燥，高效液相制备色谱纯化，冷冻干燥，得目标产物1-1(10mg)和1-2(6mg)。
[0176]1h-nmr(1-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),8.00(s,1h),7.73(d,j＝8.7hz,1h),7.56(dd,j＝8.5, 7.1hz,1h),7.16(d,j＝8.6hz,1h),7.10(d,j＝8.7hz,1h),7.01-7.06(m,2h),5.42(dd,j＝7.0,5.0hz,1h), 5.22(dq,j＝52.1,5.6hz,1h),5.05(dd,j＝12.8,5.4hz,1h),4.49-4.58(m,4h),4.13-4.18(m,2h),3.88(t,j＝ 5.2hz,2h),3.70-3.77(m,2h),3.27(s,3h),2.81-3.14(m,4h),2.55-2.58(m,2h),1.98-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
: 671.2。
[0177]1h-nmr(1-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),8.00(s,1h),7.75(d,j＝8.6hz,1h),7.55(dd,j＝8.5, 7.1hz,1h),7.15(dd,j＝10.6,8.6hz,2h),7.00-7.06(m,2h),5.50(d,j＝16.5hz,1h),5.18(dd,j＝50.5,4.7hz, 1h),5.05(dd,j＝12.8,5.4hz,1h),4.49-4.58(m,4h),4.16-4.22(m,2h),3.88(t,j＝5.2hz,2h),3.72-3.79(m, 2h),3.23(s,3h),2.80-2.95(m,2h),2.52-2.62(m,2h),1.96-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:671.2。
[0178]
实施例2
[0179]
化合物2-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-((1-(2-(2-(2-(2-((((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0180][0181]
化合物2-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-((1-(2-(2-(2-(2-((((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0182][0183]
如实施例1-1中所示，以与合成化合物1-1类似的方式合成化合物2-1和2-2。
[0184]1h-nmr(2-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),7.99(s,1h),7.73(d,j＝8.7hz,1h),7.56(dd,j＝8.6, 7.1hz,1h),7.16(d,j＝8.6hz,1h),7.12(d,j＝8.8hz,1h),7.02-7.07(m,2h),5.78(d,j＝7.0hz,1h),5.42(q, j＝6.3hz,1h),5.12-5.29(m,1h),5.05(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.57(d,j＝6.0hz,2h),4.48(t,j＝5.2hz,2h), 4.15-4.21(m,2h),3.79(t,j＝5.2hz,2h),3.70(t,j＝4.5hz,2h),3.47-3.57(m,3h),3.27(s,3h),2.82-3.12(m, 4h),2.53-2.62(m,2h),1.95-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:715.2。
[0185]1h-nmr(2-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),7.98(s,1h),7.75(d,j＝8.6hz,1h),7.56(dd,j＝8.6, 7.1hz,1h),7.12-7.22(m,2h),7.02-7.08(m,2h),6.02(d,j＝6.3hz,1h),5.49(dd,j＝16.6,6.1hz,1h),5.18 (dd,j＝50.5,4.6hz,1h),5.05(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.57(d,j＝6.1hz,2h),4.48(t,j＝5.2hz,2h),4.17
‑ꢀ
4.24(m,2h),4.09(q,j＝5.3hz,2h),3.79(t,j＝5.2hz,2h),3.67-3.74(m,2h),3.48-3.56(m,2h),3.22(s,3h), 2.81-2.97(m,3h),2.53-2.62(m,2h),1.95-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:715.2。
[0186]
实施例3
[0187]
化合物3-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(1-(2-(2-(2-(2-(2-((((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢
ꢀ‑
1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0188][0189]
化合物3-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(1-(2-(2-(2-(2-(2-((((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢
ꢀ‑
1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0190][0191]
如实施例1-1中所示，以与合成化合物1-1类似的方式合成化合物3-1和3-2。
[0192]1h-nmr(3-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),7.99(s,1h),7.73(d,j＝8.6hz,1h),7.57(dd,j＝8.6, 7.1hz,1h),7.02-7.18(m,2h),7.03-7.07(d,j＝7.0hz,2h),5.76-5.80(m,1h),5.42(td,j＝7.0,5.0hz,1h),5.21 (dq,j＝52.1,5.6hz,1h),5.05(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.58(d,j＝6.0hz,2h),4.47(t,j＝5.2hz,2h),4.18
‑ꢀ
4.24(m,2h),3.72-3.80(m,4h),3.52-3.58(m,2h),3.43-3.50(m,5h),3.27(s,3h),2.82-3.14(m,4h),2.52-2.62 (m,2h),1.97-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:759.2。
[0193]1h-nmr(3-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),7.98(s,1h),7.75(d,j＝8.6hz,1h),7.57(dd,j＝8.5, 7.1hz,1h),7.15-7.20(m 2h),7.02-7.07(m,2h),6.02(d,j＝6.4hz,1h),5.49(dd,j＝16.5,6.4hz,1h),5.18(dd, j＝50.6,4.8hz,1h),5.02-5.09(m,1h),4.59(d,j＝6.0hz,2h),4.47(t,j＝5.2hz,2h),4.24(t,j＝4.6hz,2h), 3.76(q,j＝5.5hz,4h),3.52-3.57(m,2h),3.42-3.48(m,5h),3.23(s,3h),2.81-2.95(m,3h),2.54-2.69(m,3h), 1.97-2.06(m,1h)；ms:[m+1]
+
:759.2。
[0194]
实施例4
[0195]
化合物4-1：顺式-2-(2,6-二氧杂环戊二烯-3-基)-4-((2-(2-(2-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢
ꢀ‑
1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0196][0197]
化合物4-2：反式-2-(2,6-二氧杂环戊二烯-3-基)-4-((2-(2-(2-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢
ꢀ‑
1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0198][0199]
step a：中间体4-a的制备：
[0200]
将4-(2-(2-(2-叠氮基乙氧基)乙氧基)-2-氟-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-1-酮(1mmol)，三苯基膦 (1.5mmol)溶于5ml四氢呋喃和1ml水的混合溶剂中，室温反应过夜。反应结束后，旋蒸除去四氢呋喃，加入20ml饱和氯化钠溶液，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析得中间体4-a(200mg，收率53％)。
[0201]
step b：中间体4-b的制备：
[0202]
将4-a(100mg)，2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-氟异吲哚啉-1,3-二酮(74mg)，dipea(34mg)溶于3mldmf中，90℃反应2h。反应结束后，冷却至室温，加入20ml饱和氯化钠溶液，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析得中间体4-b(45mg，收率27％)。
[0203]
step c：4-1和4-2的合成：
[0204]
与1-1合成方法中的step e方法类似，合成目标化合物4-1和4-2。
[0205]1h nmr(4-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),8.27(t,j＝4.9hz,1h),7.73(d,j＝9.3hz,1h),7.54 (dd,j＝7.9,7.0hz,1h),7.39(dd,j＝6.9,1.2hz,1h),7.18(dd,j＝7.9,1.1hz,1h),6.87(d,j＝9.3hz,1h),5.48 (m,1h),5.23(dt,j＝25.3,5.2hz,1h),5.00-5.15(m,1h),4.30(m,1h),4.16(m,3h),3.75(m,3h),3.59
–
3.69 (m,8h),3.20(s,3h),3.16(d,j＝5.4hz,1h),3.11(d,j＝5.3hz,1h),2.51-2.66(m,2h),2.10-2.20(m,1h),1.73
‑ꢀ
1.81(m,1h).ms:[m+1]
+
:634.5.
[0206]1h nmr(4-2)：(400mhz,dmso-d6)11.09(s,1h),δ8.29(t,j＝4.9hz,1h),7.70(d,j＝9.3hz,1h),7.52 (dd,j＝7.9,7.0hz,1h),7.38(dd,j＝6.9,1.2hz,1h),7.13(dd,j＝7.9,1.1hz,1h),6.82(d,j＝9.3hz,1h),5.40 (m,1h),5.17-5,27(m),4.87-5.02(m,1h),4.46(d,j＝5.5hz,1h),4.16(t,j＝4.9hz,2h),3.72-3.78(m,2h),3.45
ꢀ–
3.65(m,8h),3.16
–
3.26(m,4h),3.00-3.10(m,1h),2.51-2.66(m,2h),2.14-2.22(m,1h),1.75-1.80(m,
1h). ms:[m+1]
+
:634.5.
[0207]
实施例5
[0208]
化合物5-1：顺式-2-((2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-4-基)氨基)-n-(2-(2-(2-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)乙酰胺。
[0209][0210]
化合物5-2：反式-2-((2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-4-基)氨基)-n-(2-(2-(2-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)乙酰胺。
[0211][0212][0213]
step a：中间体5-a的制备：
[0214]
2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-氟异吲哚啉-1,3-二酮(2mmol)，甘氨酸叔丁酯(2.2mmol)，dipea(4mmol) 溶解于dmf中，90℃反应2h。反应完成后，冷却至室温，加入20ml饱和氯化钠溶液，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析得中间体5-a(600mg，77.5％)。
[0215]
step b：中间体5-b的制备：
[0216]
将中间体5-a(600mg)溶于10ml二氯甲烷中，加入5ml三氟乙酸，室温反应4h。反应完成后，旋干得中间体5-b，直接用于后续合成。
[0217]
step c：中间体5-c的制备：
[0218]
将中间体5-b(100mg)，edci(116mg)，hobt(82mg)，dipea(78mg)溶于dmf(5ml)，室温搅拌20min后，加入中间体4-a(113mg)，室温反应8h。反应完成后，加入20ml饱和氯化钠溶液，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，反相柱层析得中间体5-c(40mg，收率19％)。
[0219]
step d：5-1和5-2的合成：与1-1合成方法中的step e方法类似，合成目标化合物5-1和5-2。
[0220]1h-nmr(5-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),8.16(t,j＝5.6hz,1h),7.74(d,j＝8.6hz,1h),7.54
‑ꢀ
7.62(m,1h),7.15(d,j＝8.7hz,1h),7.06(d,j＝7.1hz,1h),6.94(t,j＝5.6hz,1h),6.85(d,j＝8.5hz,1h), 5.78(d,j＝6.9hz,1h),5.37-5.47(m,1h),5.13-5.31(m,1h),5.07(dd,j＝13.0,5.4hz,1h),4.21-4.26(m,2h), 3.93(d,j＝5.6hz,2h),3.74-3.81(m,2h),3.57-3.65(m,2h),3.48-3.55(m,2h),3.43-3.46(m,2h),3.22-3.27(m, 5h),2.83-3.15(m,4h),2.54-2.63(m,1h),1.95-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:691.2.
[0221]1h-nmr(5-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.15(s,1h),8.19(t,j＝5.6hz,1h),7.69(d,j＝8.6hz,1h),7.50
‑ꢀ
7.58(m,1h),7.09(d,j＝8.7hz,1h),7.03(d,j＝7.1hz,1h),6.94(t,j＝5.6hz,1h),6.80(d,j＝8.5hz,1h), 5.68(d,j＝6.9hz,1h),5.30-5.44(m,1h),5.25-5.31(m,1h),4.95(dd,j＝13.0,5.4hz,1h),4.18-4.27(m,2h), 3.89(d,j＝5.6hz,2h),3.76-3.84(m,2h),3.54-3.68(m,2h),3.48-3.55(m,2h),3.43-3.46(m,2h),3.28-3.34(m, 5h),2.90-3.15(m,4h),2.46-2.58(m,1h),1.95-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:691.2.
[0222]
实施例6
[0223]
化合物6-1：顺式-2-((2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-4-基)氨基)-n-(2-(2-(2-(2-((1s)-2-氟-1
‑ꢀ
羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)乙酰胺。
[0224][0225]
化合物6-2：反式-2-((2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-4-基)氨基)-n-(2-(2-(2-(2-((1s)-2-氟-1
‑ꢀ
羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)乙酰胺。
[0226][0227]
如实施例5-1中所示，用合成5-1类似的方法合成化合物6-1和6-2。
[0228]1h-nmr(6-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),8.16(t,j＝5.6hz,1h),7.70-7.78(m,1h),7.59(t,j＝ 7.8hz,1h),7.15(d,j＝8.7hz,1h),7.07(d,j＝7.1hz,1h),6.94(t,j＝5.7hz,1h),6.86(d,j＝8.5hz,1h),5.78 (d,j＝6.9hz,1h),5.42(q,j＝6.4hz,1h),5.22(dq,j＝51.9,5.7hz,1h),5.07(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.18
‑ꢀ
4.28(m,2h),3.93(d,j＝5.6hz,2h),3.77(t,j＝4.4hz,2h),3.56-3.65(m,2h),3.47-3.56(m,6h),3.42(t,j＝5.8 hz,2h),3.22-3.30(m,5h),2.82-3.18(m,4h),2.52-2.64(m,1h),1.99-2.08(m,1h)；ms:[m+1]
+
:735.2。
[0229]1h-nmr(6-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),8.16(t,j＝5.7hz,1h),7.75(d,j
＝8.6hz,1h),7.59 (t,j＝7.8hz,1h),7.19(d,j＝8.6hz,1h),7.07(d,j＝7.1hz,1h),6.94(t,j＝5.6hz,1h),6.86(d,j＝8.6hz, 1h),6.03(d,j＝6.4hz,1h),5.50(dd,j＝16.5,6.4hz,1h),5.19(dd,j＝50.4,4.6hz,1h),5.07(dd,j＝12.9,5.4 hz,1h),4.25(t,j＝4.7hz,2h),3.93(d,j＝5.6hz,2h),3.78(t,j＝4.6hz,2h),3.56-3.63(m,2h),3.45-3.55(m, 6h),3.42(t,j＝5.7hz,2h),3.20-3.27(m,5h),2.82-2.97(m,2h),2.52-2.63(m,3h),1.97-2.06(m,1h)；ms: [m+1]
+
:735.2。
[0230]
实施例7
[0231]
化合物7-1：顺式-4-((1-(2-(2-(2-(2-((1s)-7-((二氟甲基)磺酰基)-2-氟-1-羟基-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基) 乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0232][0233]
化合物7-2：反式-4-((1-(2-(2-(2-(2-((1s)-7-((二氟甲基)磺酰基)-2-氟-1-羟基-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基) 乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0234][0235][0236]
step a：中间体7-a的制备：
[0237]
将4-氟-7-巯基-2,3-二氢-1h-茚-1-酮(10mmol)溶于50ml丙酮，加入氢氧化钾
(200mmol)的水溶液 (50ml)，降温至-78℃，加入溴二氟甲基膦酸二乙酯(20mmol)，缓慢升至室温，室温反应2h。反应结束后，加入100ml水，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析，得中间体7-a(8mmol，收率80％)。
[0238]
step b：中间体7-b的制备：
[0239]
将7-a(8mmol)、高碘酸钠(20mmol)和三氯化钌(0.2mmol)溶于乙腈(30ml)、四氯化碳(30ml) 和水(30ml)的混合溶剂中，室温反应5h。反应结束后，过滤除去固体，旋蒸除去部分溶剂，加入100ml 水，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，旋干得中间体7-b(粗品7.2mmol，收率90％)，直接用于后续合成。
[0240]
step c：中间体7-c的制备：
[0241]
将7-b(1mmol)溶于5ml甲苯，加入2ml乙二醇，回流反应12h。反应完成后，冷却至室温，旋蒸除去部分溶剂，加入20ml水，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析得中间体7-c(0.4mmol，收率40％)。
[0242]
step d-h与1-1合成方法类似，得目标化合物7-1和7-2。
[0243]1h-nmr(7-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),7.99(s,1h),7.84(d,j＝8.8hz,1h),7.56(dd,j＝8.6, 7.1hz,1h),7.24(d,j＝8.8hz,1h),7.13-7.19(m,1h),7.16(t,j＝53.6hz,1h),7.02-7.07(m,2h),5.15-5.39(m, 2h),5.05(dd,j＝12.8,5.4hz,1h),4.57(d,j＝6.0hz,2h),4.48(t,j＝5.2hz,2h),4.18-4.27(m,2h),3.79(t,j ＝5.2hz,2h),3.71(dd,j＝5.7,3.4hz,2h),3.47-3.55(m,4h),2.81-3.16(m,4h),2.52-2.62(m,2h),1.97-2.05(m, 1h)；ms:[m+1]
+
:751.2。
[0244]1h-nmr(7-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),7.99(s,1h),7.85(d,j＝8.7hz,1h),7.52-7.60(m, 1h),7.28(d,j＝8.8hz,1h),7.16(d,j＝8.6hz,1h),7.07(t,j＝53.1hz,1h),7.01-7.09(m,2h),5.38(d,j＝16.6 hz,1h),5.20(dd,j＝50.6,4.8hz,1h),5.05(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.58(d,j＝6.1hz,2h),4.48(t,j＝5.2hz, 2h),4.20-4.30(m,2h),3.79(t,j＝5.2hz,2h),3.72(t,j＝4.5hz,2h),3.48-3.56(m,4h),3.22-3.25(m,1h),2.83
‑ꢀ
2.94(m,3h),2.55-2.62(m,2h),1.97-2.10(m,1h)；ms:[m+1]
+
:751.2。
[0245]
实施例8
[0246]
化合物8-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-((1-(2-(2-(2-(2-((((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0247][0248]
化合物8-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-((1-(2-(2-(2-(2-((((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢
‑ꢀ
1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0249]
[0250]
如实施例1-1中所示，以与合成化合物1-1类似的方式合成化合物8-1和8-2。
[0251]1h-nmr(8-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.05(s,1h),7.99(s,1h),7.73(d,j＝8.7hz,1h),7.52-7.58(m, 2h),7.12(d,j＝8.8hz,1h),7.05(d,j＝2.1hz,1h),6.94(dd,j＝8.4,2.1hz,1h),5.38-5.45(m,1h),5.21(dq,j ＝52.1,5.6hz,1h),5.02(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.42-4.53(m,4h),4.12-4.22(m,2h),3.79(t,j＝5.2hz,2h), 3.70(t,j＝4.6hz,2h),3.48-3.57(m,4h),3.27(s,3h),2.80-3.16(m,4h),2.52-2.61(m,2h),1.94-2.01(m,1h)； ms:[m+1]
+
:715.2。
[0252]1h-nmr(8-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.05(s,1h),7.99(s,1h),7.75(d,j＝8.6hz,1h),7.52-7.60(m, 2h),7.16(d,j＝8.7hz,1h),7.06(d,j＝2.1hz,1h),6.94(dd,j＝8.4,2.2hz,1h),5.49(d,j＝16.5hz,1h),5.18 (dd,j＝50.4,4.6hz,1h),5.03(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.43-4.52(m,4h),4.21(t,j＝4.7hz,2h),3.79(t,j＝ 5.2hz,2h),3.68-3.74(m,2h),3.49-3.56(m,4h),3.18-3.27(m,5h),2.80-2.96(m,2h),2.52-2.61(m,2h),1.94
‑ꢀ
2.02(m,1h)；ms:[m+1]
+
:715.2。
[0253]
实施例9
[0254]
化合物9-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-((1-(2-(2-(2-(((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0255][0256]
化合物9-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-((1-(2-(2-(2-(((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0257][0258]
如实施例1-1中所示，以与合成化合物1-1类似的方式合成化合物9-1和9-2。
[0259]1h-nmr(9-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.06(s,1h),7.96(s,1h),7.73(d,j＝8.6hz,1h),7.57(d,j＝10.1 hz,1h),7.42(m,1h),7.22(d,j＝7.2hz,1h),7.12(d,j＝8.7hz,1h),5.78(d,j＝6.9hz,1h),5.37-5.45(m,1h), 5.22(dq,j＝52.1,5.6hz,1h),5.04(dd,j＝12.7,5.4hz,1h),4.55(d,j＝6.0hz,2h),4.48(t,j＝5.2hz,2h), 4.10-4.22(m,2h),3.78(t,j＝5.2hz,2h),3.69(t,j＝4.6hz,2h),3.45-3.55(m,4h),3.28(s,3h),2.80-3.13(m, 4h),2.50-2.60(m,1h),1.95-2.02(m,1h)；ms:[m+1]
+
:733.2。
[0260]1h-nmr(9-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.06(s,1h),7.95(s,1h),7.75(d,j＝8.6hz,1h),7.58(d,j＝10.2 hz,1h),7.37-7.45(m,1h),7.22(d,j＝7.2hz,1h),7.16(d,j＝8.7hz,1h),6.03(d,j＝6.2hz,1h),5.50(dd,j ＝16.6,4.7hz,1h),5.18(dd,j＝50.5,4.6hz,1h),5.04(dd,j＝12.7,5.4hz,1h),4.56(d,j＝6.1hz,2h),4.48(t, j＝5.2hz,3h),
4.21(t,j＝4.6hz,2h),3.78(t,j＝5.2hz,2h),3.70(dd,j＝5.7,3.5hz,2h),3.45-3.55(m,4h), 3.18-3.27(m,5h),2.80-2.96(m,2h),2.52-2.60(m,1h),1.95-2.02(m,1h)；ms:[m+1]
+
:733.2。
[0261]
实施例10
[0262]
化合物10-1：顺式-3-(4-((1-(2-(2-(2-(2-(((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮。
[0263][0264]
化合物10-2：反式-3-(4-((1-(2-(2-(2-(2-(((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮
[0265][0266]
如实施例1-1中所示，以与合成化合物1-1类似的方式合成化合物10-1和10-2。
[0267]1h-nmr(10-1)：(400mhz,dmso-d6)δ10.98(s,1h),7.93(s,1h),7.74(d,j＝8.6hz,1h),7.25(t,j＝7.7 hz,1h),7.12(d,j＝8.7hz,1h),6.95(d,j＝7.4hz,1h),6.82(d,j＝8.1hz,1h),6.19(t,j＝5.9hz,1h),5.79(d, j＝7.0hz,1h),5.42(q,j＝6.5hz,1h),5.05-5.30(m,2h),4.46(t,j＝5.2hz,2h),4.40(d,j＝5.8hz,2h),4.10
‑ꢀ
4.27(m,4h),3.78(t,j＝5.2hz,2h),3.69(t,j＝4.5hz,2h),3.50(m,4h),3.28(s,3h),2.85-3.16(m,3h),2.54
‑ꢀ
2.67(m,1h),2.20-2.35(m,1h),1.95-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:701.2。
[0268]1h-nmr(10-2)：(400mhz,dmso-d6)δ10.99(s,1h),7.93(s,1h),7.75(d,j＝8.6hz,1h),7.25(t,j＝7.7 hz,1h),7.15(d,j＝8.7hz,1h),6.95(d,j＝7.4hz,1h),6.82(d,j＝8.1hz,1h),6.20(t,j＝5.9hz,1h),6.00
‑ꢀ
6.08(m,1h),5.45-5.55(m,1h),5.06-5.26(m,2h),4.46(t,j＝5.2hz,2h),4.41(d,j＝5.9hz,2h),4.10-4.30(m, 4h),3.78(t,j＝5.2hz,2h),3.70(t,j＝4.6hz,2h),3.51(m,4h),3.24-3.28(m,1h),3.23(s,3h),2.81-2.97(m, 2h),2.52-2.65(m,1h),2.22-2.33(m,1h),2.01(m,1h)；ms:[m+1]
+
:701.2。
[0269]
实施例11
[0270]
化合物11-1：顺式-3-(2-(2-(4-((2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-4-基)氨基)甲基)-1h-1,2,3
‑ꢀ
三唑-1-基)乙氧基)乙氧基)-5-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)苄腈。
[0271][0272]
化合物11-2：反式-3-(2-(2-(4-((2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-4-基)氨基)甲基)-1h-1,2,3
‑ꢀ
三唑-1-基)乙氧基)乙氧基)-5-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)苄腈。
[0273][0274]
step a：中间体11-a的制备
[0275]
将4-氟-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢螺环[茚-1,2
’‑
[1,3]二氧戊环](2mmol)、3,5-二羟基苯腈(4mmol)和碳酸钾(4mmol)溶于dmf(8ml)中，100℃下微波反应2h。反应完成后，冷却至室温，加入50ml饱和氯化钠溶液，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析得中间体11-a(1.54mmol，收率77％)。
[0276]
step b：中间体11-b的制备
[0277]
将11-a(1.54mmol)溶于无水dmf(8ml)，冰水浴下加入氢化钠(2mmol)，保持冰水浴搅拌30min，加入2-(2-叠氮乙氧基)乙基4-甲基苯磺酸盐(1.54mmol)，室温反应4h。反应完成后，加入40ml冰水，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干得到中间体11-b。
[0278]
step c-f的合成方法与1-1合成方法中相关的反应类似，得到化合物11-1和11-2。
[0279]1h-nmr(11-1)：(400mhz,dmso-d6)δ8.00(s,1h),7.78(d,j＝8.6hz,1h),7.55(dd,j＝8.8,6.9hz,1h), 7.28-7.33(m,1h),7.13-7.19(m,2h),7.00-7.08(m,4h),5.45-5.52(m,1h),5.17-5.36(m,1h),5.05(dd,j＝12.9, 5.4hz,1h),4.47-4.59(m,4h),4.10-4.15(m,2h),3.84(t,j＝5.2hz,2h),3.68-3.72(m,2h),2.82-3.30(m,7h), 2.54-2.66(m,2h),1.95-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:788.2。
[0280]1h-nmr(11-2)：(400mhz,dmso-d6)δ8.00(s,1h),7.79(d,j＝8.6hz,1h),7.55(dd,j＝8.5,7.1hz,1h), 7.30-7.34(m,1h),7.20-7.24(m,1h),7.16(d,j＝8.6hz,2h),7.00-7.10(m,4h),5.56(d,j＝16.3hz,1h),5.23 (dd,j＝50.4,4.7hz,1h),5.05(dd,j＝12.8,5.4hz,1h),4.47-4.60(m,4h),4.08-4.16(m,2h),3.85(t,j＝5.2hz, 2h),3.67-3.73(m,2h),3.40-3.50(m,2h),3.29(s,3h),2.82-3.06(m,2h),2.54-2.66(m,2h),1.97-2.10(m,1h)； ms:[m+1]
+
:788.2。
[0281]
实施例12
[0282]
化合物12-1：顺式-3-(2-(2-(2-(4-((2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-4-基)氨基)甲基)-1h-1,2, 3-三唑-1-基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲磺酰基)-2，3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)苄腈。
[0283][0284]
化合物12-2：反式-3-(2-(2-(2-(4-((2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-4-基)氨基)甲基)-1h-1,2, 3-三唑-1-基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲磺酰基)-2，3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)苄腈。
[0285][0286]
如实施例11-1合成方法所述，采用与11-1类似的方法合成12-1和12-2。
[0287]1h-nmr(12-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.06(s,1h),7.99(s,1h),7.78(d,j＝8.7hz,1h),7.56(dd,j＝ 8.6,7.1hz,1h),7.31(dd,j＝2.3,1.3hz,1h),7.12-7.19(m,2h),7.01-7.08(m,4h),5.95(d,j＝6.7hz,1h),5.49 (q,j＝6.8hz,1h),5.27(dq,j＝52.1,5.4hz,1h),5.05(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.57(d,j＝6.1hz,2h),4.48(t, j＝5.2hz,2h),4.12(dd,j＝5.7,3.3hz,2h),3.78(t,j＝5.2hz,2h),3.65(dd,j＝5.3,3.3hz,2h),3.49(s,3h), 3.33-3.35(m,3h),2.82-3.21(m,4h),2.52-2.62(m,2h),1.98-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:832.2。
[0288]1h-nmr(12-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.07(s,1h),7.99(s,1h),7.78(d,j＝8.6hz,1h),7.52-7.60(m, 1h),7.32-7.34(m,1h),7.20-7.22(m,1h),7.16(d,j＝8.6hz,1h),7.01-7.10(m,3h),6.18(d,j＝5.7hz,1h), 5.56(dd,j＝16.3,5.3hz,1h),5.23(dd,j＝
50.4,4.7hz,1h),5.05(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.57(d,j＝6.0hz, 2h),4.48(t,j＝5.2hz,2h),4.10-4.15(m,2h),3.78(t,j＝5.2hz,2h),3.63-3.69(m,2h),3.49(s,3h),3.34-3.46 (m,2h),3.29(m,3h),2.81-3.05(m,2h),2.54-2.65(m,2h),1.95-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:832.2。
[0289]
实施例13
[0290]
化合物13-1：顺式-3-(2-(2-(2-(2-(4-((2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-4-基)氨基)甲基)-1h-1, 2,3-三唑-1-基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)苄腈。
[0291][0292]
化合物13-2：反式-3-(2-(2-(2-(2-(4-((2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-4-基)氨基)甲基)-1h-1, 2,3-三唑-1-基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)苄腈。
[0293][0294]
如实施例11-1合成方法所述，采用与11-1类似的方法合成12-1和12-2。
[0295]1h-nmr(13-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),7.99(s,1h),7.78(d,j＝8.6hz,1h),7.52-7.60(m, 1h),7.30-7.34(m,1h),7.13-7.20(m,2h),7.01-7.08(m,4h),5.90-6.00(m,1h),5.45-5.55(m,1h),5.27(dq,j＝ 51.9,5.4hz,1h),5.05(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.58(d,j＝6.0hz,2h),4.47(t,j＝5.2hz,2h),4.12-4.17(m, 2h),3.77(t,j＝5.2hz,2h),3.65-370(m,2h),3.41-3.55(m,7h),3.30(s,3h),2.81-3.23(m,4h),2.52-2.62(m, 2h),1.96-2.06(m,1h)；ms:[m+1]
+
:876.2。
[0296]1h-nmr(13-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),7.99(s,1h),7.79(d,j＝8.5hz,1h),7.56(dd,j＝ 8.6,7.1hz,1h),7.32-7.36(m,1h),7.20-7.23(m,1h),7.16(d,j＝8.6hz,1h),7.01-7.11(m,4h),6.15-6.25(m, 1h),5.56(d,j＝15.9hz,1h),5.23(dd,j＝50.3,4.6hz,1h),5.05(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.58(d,j＝6.1hz, 2h),4.47(t,j＝5.2hz,2h),4.10-4.17(m,2h),3.77(t,j＝5.2hz,2h),3.65-3.72(m,2h),3.41-3.55(m,9h),3.29 (s,3h),2.83.05(m,2h),2.52-2.62(m,2h),1.97-2.04(m,1h)；ms:[m+1]
+
:876.2。
[0297]
实施例14
[0298]
化合物14-1：顺式2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(4-(4-(3-氟-5-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲磺酰基)-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
茚-4-基)氧基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)哌啶-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0299][0300]
化合物14-2：反式2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(4-(4-(3-氟-5-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲磺酰基)-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
茚-4-基)氧基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)哌啶-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0301][0302]
step a：中间体14-a的制备
[0303]
将4-氟-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢螺环[茚-1,2
’‑
[1,3]二氧戊环](2mmol)、3-氟-5-羟基苯甲酸甲酯(2mmol) 和碳酸铯(4mmol)溶于dmf(8ml)，100℃微波反应2h。反应完成后，冷却至室温中间体14-a(1mmol，收率50％)。
[0304]
step b：中间体14-b的制备
[0305]
将14-a(1mmol)溶于8ml丙酮和2ml水的混合溶剂，加入对甲苯磺酸吡啶盐(0.5mmol)，回流反应 2h。反应完成后，冷却至室温，旋蒸除去部分溶剂，加入20ml饱和碳酸氢钠溶液，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干得中间体14-b。
[0306]
step c：中间体14-c的制备
[0307]
将step b中得到的粗产物溶于8ml无水甲醇，加入selectfluoro试剂(1.5mmol)，回流反应4h。反应完成后，冷却至室温，旋干，残渣用二氯甲烷溶解，过滤。滤液旋干，溶于
5ml乙腈，加入1ml稀盐酸 (2m)，室温搅拌1h。反应完成后，加入20ml饱和碳酸氢钠溶液，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析得中间体14-c(0.4mmol，两步收率40％)。
[0308]
step d：中间体14-d的制备
[0309]
将14-c(0.4mmol)溶于4ml四氢呋喃和1ml水的混合溶剂，加入氢氧化锂(1mmol)，室温反应2h。反应结束后，稀盐酸调节ph至4-5，加入10ml水，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干得中间体14-d。
[0310]
step e：中间体14-e的制备
[0311]
将2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(2mmol)，4-(哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2mmol)， dipea(3mmol)溶于dmso(8ml)，90℃反应2h。反应完成后，冷却至室温，加入饱和氯化钠溶液30ml，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干得中间体14-f。
[0312]
step f：中间体14-f的合成
[0313]
将step e得到的中间体14-e溶于10ml二氯甲烷，加入5ml三氟乙酸，室温反应3h。反应完成后，旋干溶剂，得中间体14-f。
[0314]
step g：中间体14-g的合成
[0315]
将14-d(0.1mmol)、edci(0.2mmol)、hobt(0.2mmol)和三乙胺(0.2mmol)溶于dmf(4ml)，室温搅拌30min后，加入14-g(0.11mmol)，室温反应8h。反应完成后，加入饱和氯化钠溶液20ml，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析得中间体14-g(0.05mmol，收率50％)。
[0316]
step h：14-1和14-2的合成
[0317]
将甲酸(20μl)溶于1ml二氯甲烷，冰水浴下加入三乙胺(30μl)，搅拌10min。将上述溶液加入到1
‑ꢀ
h(0.05mmol)的二氯甲烷溶液中，加入催化剂[(r,r)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)(5％mol)，氩气保护，室温反应8h。反应完成后，加入20ml二氯甲烷，饱和碳酸氢钠洗涤，干燥，高效液相制备色谱纯化，冷冻干燥，得目标产物1-1(15mg)和1-2(10mg)。
[0318]1h-nmr(14-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.07(s,1h),7.80(d,j＝8.6hz,1h),7.65(d,j＝8.5hz,1h),7.32 (d,j＝2.2hz,1h),7.24(dd,j＝8.7,2.3hz,1h),7.07-7.18(m,3h),6.91(t,j＝1.8hz,1h),5.46-5.56(m,1h), 5.27(dq,j＝52.2,5.5hz,1h),5.06(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.07(d,j＝12.9hz,2h),3.56(m,2h),3.33(s,3h), 2.82-3.22(m,8h),2.54-2.68(m,7h),1.95-2.05(m,1h),1.82(d,j＝12.4hz,2h),1.37-1.50(m,2h)；ms:[m+1]
+
: 792.2.
[0319]1h-nmr(14-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.07(s,1h),7.81(d,j＝8.5hz,1h),7.65(d,j＝8.6hz,1h),7.32 (d,j＝2.3hz,1h),7.10-7.26(m,4h),6.92-6.95(m,1h),5.57(d,j＝16.3hz,1h),5.23(dd,j＝50.3,4.6hz,1h), 5.06(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.07(d,j＝13.0hz,2h),3.50-3.60(m,2h),3.30(s,3h),2.82-3.06(m,6h),2.50
‑ꢀ
2.65(m,9h),1.97-2.05(m,1h),1.82(d,j＝12.3hz,2h),1.45(q,j＝11.3hz,2h)；ms:[m+1]
+
:792.2.
[0320]
实施例15
[0321]
化合物15-1：顺式2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(6-(3-氟-5-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
ꢀ‑
4-基)氧基)苯甲酰基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0322][0323]
化合物15-2：反式2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(6-(3-氟-5-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
ꢀ‑
4-基)氧基)苯甲酰基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0324][0325]
如实施例14-1所示，采用与14-1类似的方法合成15-1和15-2。
[0326]1h-nmr(15-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.06(s,1h),7.81(d,j＝8.6hz,1h),7.65(d,j＝8.3hz,1h),7.29
‑ꢀ
7.34(m,1h),7.22-7.27(m,1h),7.14(s,1h),7.09(d,j＝8.6hz,1h),6.81(d,j＝2.1hz,1h),6.67(dd,j＝8.3, 2.1hz,1h),5.45-5.55(m,1h),5.28(dq,j＝51.9,5.5hz,1h),5.06(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.54(s,2h),4.13
‑ꢀ
4.30(m,6h),3.33(s,3h),2.80-3.25(m,4h),2.53-2.63(m,2h),1.95-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:721.2.
[0327]1h-nmr(15-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.06(s,1h),7.82(d,j＝8.6hz,1h),7.65(d,j＝8.3hz,1h),7.27
‑ꢀ
7.35(m,2h),7.16(t,j＝1.7hz,1h),7.11(d,j＝8.5hz,1h),6.80(d,j＝2.1hz,1h),6.67(dd,j＝8.3,2.2hz, 1h),5.57(d,j＝16.3hz,1h),5.24(dd,j＝50.3,4.7hz,1h),5.06(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.54(s,2h),4.14
‑ꢀ
4.29(m,6h),3.44(dd,j＝18.4,4.9hz,2h),3.30(s,3h),2.82-3.07(m,2h),2.52-2.62(m,2h),1.95-2.05(m,1h)； ms:[m+1]
+
:721.2.
[0328]
实施例16
[0329]
化合物16-1：顺式-n-(2-(4-(1-(2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-5-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)-2
‑ꢀ
氧代乙基)-3-氟-5-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)苯甲酰胺；
[0330]
[0331]
化合物16-2：反式-n-(2-(4-(1-(2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-5-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)-2
‑ꢀ
氧代乙基)-3-氟-5-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)苯甲酰胺；
[0332][0333]
step a：中间体16-a的制备
[0334]
将14-d(1mmol)、甘氨酸叔丁酯(1.1mmol)、edci(2mmol)、hobt(2mmol)和三乙胺(2mmol) 溶于dmf(5ml)，室温反应8h。反应完成后，加入饱和氯化钠溶液30ml，再依次采用乙酸乙酯萃取、无水硫酸钠干燥、旋干，柱层析得中间体16-a(0.6mmol，收率60％)。
[0335]
step b：中间体16-b的制备
[0336]
将step a中得到的16-a粗品溶于二氯甲烷(5ml)，加入3ml三氟乙酸，室温反应6h。反应完成后，旋干除去溶剂，得中间体16-b。
[0337]
step c和step d：如实施例14-1所述，采用类似的方法合成目标化合物16-1和16-2。
[0338][0339]1h-nmr(16-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.07(s,1h),8.77(t,j＝5.7hz,1h),7.79(d,j＝8.6hz,1h),7.66 (d,j＝8.5hz,1h),7.53-7.60(m,1h),7.42-7.44(m,1h),7.22-7.35(m,3h),7.08(d,j＝8.6hz,1h),5.45-5.55(m, 1h),5.29(dq,j＝51.9,5.4hz,1h),5.06(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.00-4.15(m,4h),2.82-3.50(m,14h),2.46
‑ꢀ
2.62(m,6h),1.97-2.05(m,1h),1.83(d,j＝12.4hz,2h),1.40-1.52(m,2h)；ms:[m+1]
+
:849.2.
[0340]1h-nmr(16-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.07(s,1h),8.78(t,j＝5.7hz,1h),7.80(d,j＝8.6hz,1h),7.66 (d,j＝8.6hz,1h),7.55-7.60(m,1h),7.45-7.49(m,1h),7.32-7.37(m,2h),7.25(dd,j＝8.6,2.3hz,1h),7.09(d, j＝8.6hz,1h),5.57(d,j＝16.3hz,1h),5.24(dd,j＝50.4,4.7hz,1h),5.06(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.02-4.15 (m,4h),3.40-3.50(m,6h),3.30(s,3h),2.82-3.08(m,5h),2.45-2.61(m,6h),1.97-2.05(m,1h),1.83(d,j＝12.3 hz,2h),1.40-1.52(m,2h)；ms:[m+1]
+
:849.2.
[0341]
实施例17
[0342]
化合物17-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(1-(2-(2-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
ꢀ‑
4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0343][0344]
化合物17-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(1-(2-(2-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0345][0346]
step a：中间体17-a的制备
[0347]
将3-羟基氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(5mmol)溶于无水dmf(10ml)，冰水浴下加入氢化钠(6mmol) 反应30min，加入4-氟-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢螺环[茚-1,2
’‑
[1,3]二氧戊环](5mmol)，室温反应4h。反应完成后，加入饱和氯化铵溶液(50ml)后依次进行乙酸乙酯萃取、无水硫酸钠干燥和旋干得中间体17-a。
[0348]
step b：中间体17-b的制备
[0349]
将step a得到的17-a粗品溶于15ml丙酮和3ml水的混合溶剂，加入对甲苯磺酸吡啶盐(ppts， 2mmol)进行回流反应。反应完成后，旋蒸除去部分溶剂，加入40ml饱和碳酸氢钠溶液后依次进行乙酸乙酯萃取、无水硫酸钠干燥和旋干得中间体17-b。
[0350]
step c：中间体17-c的制备
[0351]
将step b中得到的17-b的粗品溶于15ml甲醇，加入selectfluoro试剂(7.5mmol)，回流反应4h。反应完成后，冷却至室温，旋蒸除去溶剂，残渣溶于二氯甲烷，过滤，滤液旋干，溶于15ml乙腈，加入3ml 稀盐酸(2m)，室温反应3h，反应完成后，旋干。残渣溶于20ml二氯甲烷，分别用饱和盐酸氢钠溶液，饱和氯化钠溶液洗有机相，无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析得中间体17-c(2.5mmol，综合收率50％)。
[0352]
step d：中间体17-d的制备
[0353]
将2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(丙-2-炔-1-基氨基)异吲哚啉-1,3-二酮(0.5mmol)、2-(2-叠氮乙氧基)乙基4
‑ꢀ
甲基苯磺酸盐(0.5mmol)、硫酸铜(0.25mmol)和维生素c钠(1.5mmol)溶于dmf(5ml)和水(1ml) 的混合溶剂，氩气保护，70℃反应4h。反应完成后，冷却至室温，加入饱和氯化钠溶液30ml，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析得中间体17-d(0.3mmol，收率60％)。
[0354]
step e：中间体17-e的制备
[0355]
将中间体17-c(0.05mmol)、中间体17-d(0.05mmol)和n，n-二异丙基乙胺dipea(0.1mmol)溶于 dmso(3ml)，80℃反应2h。反应完成后，加入饱和氯化钠溶液(20ml)，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析得中间体17-e(20mg，收率55％)。
[0356]
step f：17-1和17-2的制备
[0357]
将甲酸(10μl)溶于1ml二氯甲烷，冰水浴下，加入三乙胺(15μl)，搅拌10min。将上述溶液加入到17-e(20mg)的二氯甲烷溶液中，加入催化剂[(r,r)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)(5％mol)，氩气保护，室温反应8h。反应完成后，加入20ml二氯甲烷，饱和碳酸氢钠洗涤，干燥，高效液相制备色谱纯化，冷冻干燥，得目标产物17-1(5mg)和17-2(4mg)。
[0358]1h-nmr(17-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),8.23(s,1h),8.00(s,1h),7.70(d,j＝8.6hz,1h), 7.56(dd,j＝8.5,7.1hz,1h),7.17(d,j＝8.6hz,1h),7.00-7.10(m,2h),6.86(d,j＝8.7hz,1h),5.42(dd,j＝7.3, 5.0hz,1h),5.22(dq,j＝52.0,5.6hz,1h),5.04(ddd,j＝12.8,5.4,2.0hz,1h),4.77-4.87(m,1h),4.58(d,j＝6.1 hz,2h),4.48(t,j＝5.1hz,2h),3.74(t,j＝5.1hz,2h),3.60-3.68(m,3h),3.33-3.37(m,2h),3.28(s,3h),2.79
‑ꢀ
3.17(m,7h),2.53-2.60(m,1h),1.94-2.04(m,1h)；ms:[m+1]
+
:726.2.
[0359]1h-nmr(17-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),8.29(s,1h),8.00(s,1h),7.72(d,j＝8.6hz,1h), 7.56(dd,j＝8.6,7.1hz,1h),7.17(d,j＝8.6hz,1h),7.00-7.10(m,2h),6.89(d,j＝8.6hz,1h),5.50(d,j＝16.5 hz,1h),5.19(dd,j＝50.4,4.7hz,1h),5.04(dd,j＝12.8,5.4hz,1h),4.82-4.87(m,1h),4.58(d,j＝6.0hz,2h), 4.48(t,j＝5.1hz,2h),3.74(t,j＝5.2hz,2h),3.60-3.68(m,3h),3.25-3.33(m,2h),3.23(s,3h),2.82-3.01(m, 5h),2.52-2.61(m,3h),1.95-2.02(m,1h)；ms:[m+1]
+
:726.2.
[0360]
实施例18
[0361]
化合物18-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-((1-(2-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
‑ꢀ
4-基)氧基)氮杂环丁烷-1-基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0362][0363]
化合物18-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-((1-(2-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
ꢀ‑
4-基)氧基)氮杂环丁烷-1-基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0364][0365]
如实施例17-1所示，采用与17-1类似的方法合成目标化合物18-1和18-2。
[0366]1h-nmr(18-1)：(400mhz,dmso-d6)δ8.02(s,1h),7.70(d,j＝8.6hz,1h),7.50-7.58(m,1h),7.16(d,j ＝8.6hz,1h),7.01-7.11(m,2h),6.87(d,j＝8.7hz,1h),5.81(s,1h),5.42(t,j＝6.0hz,1h),5.22(dq,j＝52.1, 5.6hz,1h),5.06(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.88(p,j＝5.6hz,1h),4.60(d,j＝6.0hz,2h),4.32(t,j＝5.9hz, 2h),3.65-3.72(m,2h),3.28(s,3h),2.97-3.18(m,5h),2.85-2.95(m,3h),2.52-2.57(m,1h),1.97-2.06(m,1h)； ms:[m+1]
+
:682.2.
[0367]1h-nmr(18-2)：(400mhz,dmso-d6)δ8.02(s,1h),7.72(d,j＝8.5hz,1h),7.54(t,j＝7.8hz,1h),7.16 (d,j＝8.6hz,1h),7.01-7.11(m,2h),6.91(d,j＝8.6hz,1h),6.07(s,1h),5.50(d,j＝16.5hz,1h),5.19(dd,j ＝50.4,4.6hz,1h),5.06(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.90(p,j＝5.6hz,1h),4.60(d,j＝6.1hz,2h),4.33(t,j＝ 5.9hz,2h),3.65-3.75(m,2h),3.23(s,3h),2.95-3.07(m,3h),2.82-2.94(m,4h),2.52-2.63(m,2h),1.97-2.07(m, 1h)；ms:[m+1]
+
:682.2.
[0368]
实施例19
[0369]
化合物19-1：2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(1-(2-(2-(4-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4
‑ꢀ
基)氧基)哌啶-1-基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0370][0371][0372]
如实施例17-1所示，采用与17-1类似的合成方法合成19。
[0373]1h nmr(19-1)：(400mhz,dmso-d6)δ9.80(s,1h),8.38(t,j＝5.4hz,1h),7.74(d,j＝9.7hz,1h),7.63 (s,1h),7.54(dd,j＝7.9,7.0hz,1h),7.39(dd,j＝6.9,1.2hz,1h),7.20(dd,j＝7.9,1.1hz,1h),6.94(d,j＝9.7 hz,1h),5.48(t,j＝3.6hz,1h),5.18-5.28(m,1h),5.00-5.15(m,1h),4.62(dd,j＝5.4,1.9hz,2h),4.44-4.50(m, 1h),4.30(d,j＝5.7hz,1h),4.21(t,j＝4.2hz,2h),3.79(m,2h),3.55(m,2h),3.20(s,3h),3.14-3.18(m,1h), 3.09-3.12(m,1h),2.80-2.90(m,2h),2.67-2.75(m,2h),2.51-2.66(m,4h),2.14-2.22(m,1h),1.92-1.98(m,2h), 1.83-1.91(m,2h),1.74-1.80(m,1h).ms:[m+1]
+
:754.3。
[0374]
实施例20
[0375]
化合物20-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-氟-7-((1-(2-(2-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢
ꢀ‑
1h-茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0376][0377]
化合物20-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-氟-7-((1-(2-(2-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢
ꢀ‑
1h-茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0378][0379][0380]
step a：中间体20-a的制备
[0381]
将2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4,7-二氟异吲哚啉-1,3-二酮(3mmol)、炔丙胺(1.5mmol)和dipea(3mmol) 溶于dmso(5ml)，90℃反应2h。反应完成后，冷却至室温，加入40ml饱和氯化钠溶液后依次进行乙酸乙酯萃取、无水硫酸钠干燥和柱层析得中间体20-a(1.3mmol，收率86.7％)。
[0382]
step b-d：如实施例17-1所示，采用与17-1类似的合成方法合成目标化合物20-1和20-2。
[0383]1h-nmr(20-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),8.00(s,1h),7.70(d,j＝8.6hz,1h),7.47(t,j＝9.0 hz,1h),7.23(dd,j＝9.4,3.3hz,1h),7.03(t,j＝6.1hz,1h),6.86(d,j＝8.7hz,1h),5.42(dd,j＝7.3,5.0hz, 1h),5.22(dq,j＝52.2,5.6hz,1h),5.05(ddd,j＝12.8,5.4,1.9hz,1h),4.83(p,j＝5.5hz,1h),4.57(d,j＝6.0 hz,2h),4.48(t,j＝5.1hz,2h),3.74(t,j＝5.2hz,2h),3.60-3.65(m,2h),3.36(t,j＝5.4hz,2h),3.28(s,3h), 3.12(ddd,j＝16.1,14.0,6.4hz,1h),2.80-3.05(m,5h),2.52-2.60(m,3h),1.95-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:744.2。
[0384]1h-nmr(20-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),8.00(s,1h),7.72(d,j＝8.5hz,1h),7.46(t,j＝9.0 hz,1h),7.23(dd,j＝9.3,3.3hz,1h),7.03(t,j＝6.1hz,1h),6.90(d,j＝8.6hz,1h),5.49(d,j＝16.6hz,1h), 5.19(dd,j＝50.5,4.6hz,1h),5.05(dd,j＝12.8,5.4hz,1h),4.86(p,j＝6.0hz,1h),4.57(d,j＝6.1hz,2h), 4.48(t,j＝5.1hz,2h),3.74(t,j＝5.2hz,2h),3.62-3.70(m,2h),3.25-3.30(m,2h),3.23(s,3h),2.81-3.03(m, 4h),2.51-2.60(m,5h),1.96-2.03(m,1h)；ms:[m+1]
+
:744.2。
[0385]
实施例21
[0386]
化合物21-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(1-(1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲
基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基) 氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0387][0388]
化合物21-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(1-(1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基) 氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0389][0390]
step a：中间体21-a的制备
[0391]
将2,4-二氟-1,1-二甲氧基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚(1mmol)，4-(氮杂环丁烷-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1mmol)和碳酸氢铯(2mmol)溶于dmso(3ml)，90℃微波反应2h。反应结束后，冷却至室温，加入饱和氯化钠溶液(30ml)，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析得中间体21-a(0.31mmol，收率 31％)。
[0392]
step b：中间体21-b的制备
[0393]
中间体21-a(0.31mmol)，对甲苯磺酸吡啶盐(0.1mmol)溶于丙酮(5ml)和水(1ml)的混合溶剂，回流反应1h。反应结束后，冷却至室温，旋干溶剂，二氯甲烷(20ml)溶解，有机相分别用饱和碳酸氢钠，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干得到中间体21-b，直接用于后续合成。
[0394]
step c：中间体21-c的制备
[0395]
甲酸(40μl)溶于1ml二氯甲烷，冰水浴下，加入三乙胺(85μl)，搅拌10min。将上述溶液加入上述 21-b的二氯甲烷溶液中，加入催化剂[(r,r)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii) (5％mol)，氩气保护，室温反应8h。反应完成后，加入20ml二氯甲烷，饱和碳酸氢钠洗涤，干燥，高效液相制备色谱纯化，冷冻干燥，得中间体21-c(0.17mmol，综合收率55％)。
[0396]
step d：中间体21-d的制备
二酮。
[0412][0413]
化合物23-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4
‑ꢀ
基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0414][0415]
step a：中间体23-a的制备
[0416]
将2,4-二氟-1,1-二甲氧基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚(250mg)、4-(氮杂环丁烷-3-基甲基)哌嗪-1
‑ꢀ
羧酸叔丁酯(218mg)和碳酸钾(236mg)溶于dmf(5ml)，90℃反应2h。反应结束后，冷却至室温，加入饱和氯化钠溶液(30ml)，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析得中间体23-a(400mg，收率88％)。
[0417]
step b：中间体23-b的制备
[0418]
将中间体23-a(400mg)溶于丙酮(8ml)和水(2ml)的混合溶剂，回流反应1h。反应结束后，冷却至室温，旋蒸除去部分溶剂，加入饱和碳酸氢钠溶液(20ml)，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干得中间体23-b，直接用于后续合成。
[0419]
step c：中间体23-c的制备
[0420]
将step b中得到的中间体23-b溶于二氯甲烷(10ml)，加入三氟乙酸(5ml)，室温反应2h。反应结束后，旋干得中间体23-c，直接用于后续合成。
[0421]
step d：中间体23-d的合成
[0422]
将中间体23-c(50mg)，2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-氟异吲哚啉-1,3-二酮(37mg)，dipea(34mg)溶于 dmso(2ml)，90℃反应2h。反应结束后，冷却至室温，加入饱和氯化钠溶液(20ml)，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，制备薄层色谱分离得中间体23-d(23mg，收率28％)。
[0423]
step e：23-1和23-2的制备
[0424]
将甲酸(10μl)溶于1ml二氯甲烷，冰水浴下，加入三乙胺(15μl)，搅拌10min。将上
述溶液加入到 23-d(23mg)的二氯甲烷溶液中，加入催化剂[(r,r)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)(5％mol)，氩气保护，室温反应8h。反应完成后，加入20ml二氯甲烷，饱和碳酸氢钠洗涤，干燥，高效液相制备色谱纯化，冷冻干燥，得目标产物23-1(7mg)和23-2(5mg)。
[0425]1h-nmr(23-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),7.67-7.75(m,1h),7.54(d,j＝8.6hz,1h),7.30-7.40 (m,2h),6.40(d,j＝8.7hz,1h),5.35(t,j＝5.0hz,1h),5.02-5.22(m,2h),4.21(q,j＝7.6hz,2h),3.77(t,j＝ 6.7hz,2h),2.80-3.40(m,13h),2.54-2.68(m,7h),1.97-2.06(m,1h)；ms:[m+1]
+
:640.2。
[0426]1h-nmr(23-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),7.71(dd,j＝8.4,7.2hz,1h),7.55(d,j＝8.5hz,1h), 7.35(m,2h),6.41(d,j＝8.6hz,1h),5.44(d,j＝16.5hz,1h),5.02-5.20(m,2h),4.23(q,j＝8.1hz,2h),3.78 (m,2h),3.26-3.56(m,6h),3.16(s,3h),2.82-3.07(m,4h),2.53-2.69(m,7h),1.99-2.06(m,1h)；ms:[m+1]
+
: 640.2。
[0427]
实施例24
[0428]
化合物24-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4
‑ꢀ
基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0429][0430]
化合物24-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4
‑ꢀ
基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0431][0432]
如实施例23-1所述，采用与23-1类似的方法合成目标化合物24-1和24-2。
[0433]1h-nmr(24-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),7.69(d,j＝8.5hz,1h),7.37(m,1h),7.28(d,j＝8.3 hz,1h),6.39(d,j＝8.6hz,1h),5.60(d,j＝6.4hz,1h),5.35(q,j＝
5.3hz,1h),5.01-5.23(m,2h),4.22(q,j＝ 7.8hz,2h),3.72-3.82(m,2h),3.40-3.52(m,4h),3.07-3.23(m,6h),2.82-2.92(m,2h),2.55-2.70(m,7h),1.97
‑ꢀ
2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:640.2。
[0434]1h-nmr(24-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),7.68(d,j＝8.5hz,1h),7.55(d,j＝8.5hz,1h),7.35 (d,j＝2.3hz,1h),7.27(dd,j＝8.7,2.4hz,1h),6.41(d,j＝8.6hz,1h),5.44(d,j＝16.5hz,1h),5.02-5.20(m, 2h),4.22(q,j＝7.8hz,2h),3.74-3.82(m,2h),3.42-3.53(m,6h),3.16(s,3h),2.82-3.08(m,3h),2.55-2.70(m, 8h),1.97-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:640.2。
[0435]
实施例25
[0436]
化合物25-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0437][0438]
化合物25-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0439][0440]
如实施例23-1所述，采用与23-1类似的方法合成目标化合物25-1和25-2。
[0441]1h-nmr(25-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),7.73(d,j＝11.4hz,1h),7.54(d,j＝8.6hz,1h), 7.46(d,j＝7.4hz,1h),6.39(d,j＝8.7hz,1h),5.59(d,j＝6.4hz,1h),5.31-5.37(m,1h),5.02-5.22(m,2h), 4.21(q,j＝7.7hz,2h),3.76(t,j＝6.7hz,2h),3.22-3.27(m,4h),3.05-3.21(m,5h),2.82-3.00(m,2h),2.52-2.68 (m,8h),1.98-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:658.2。
[0442]1h-nmr(25-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),7.73(d,j＝11.4hz,1h),7.55(d,j＝8.5hz,1h), 7.46(d,j＝7.4hz,1h),6.41(d,j＝8.6hz,1h),5.85(m,1h),5.44(d,j＝
16.5hz,1h),5.02-5.20(m,2h),4.22 (q,j＝7.9hz,2h),3.75-3.82(m,2h),3.38-3.52(m,1h),3.25(m,4h),3.16(s,3h),2.82-3.07(m,3h),2.52-2.69 (m,8h),1.97-2.06(m,1h)；ms:[m+1]
+
:658.2。
[0443]
实施例26
[0444]
化合物26-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4
‑ꢀ
基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0445][0446]
化合物26-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4
‑ꢀ
基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0447][0448]
如实施例23-1所述，采用与23-1类似的方法合成目标化合物26-1和26-2。
[0449]1h-nmr(26-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),7.63-7.75(m,2h),7.30-7.40(m,2h),7.00(d,j＝8.7 hz,1h),5.63-5.75(m,1h),5.42(t,j＝4.8hz,1h),5.03-5.24(m,2h),3.45-3.52(m,2h),3.30-3.35(m,2h),3.25 (s,3h),3.02-3.19(m,2h),2.77-2.92(m,2h),2.52-2.71(m,8h),2.27(d,j＝7.1hz,2h),1.99-2.06(m,1h),1.70
‑ꢀ
1.90(m,3h),1.16-1.37(m,3h)；ms:[m+1]
+
:668.2。
[0450]1h-nmr(26-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),7.64-7.75(m,2h),7.30-7.40(m,2h),7.03(d,j＝8.6 hz,1h),5.85-6.00(m,1h),5.49(d,j＝15.4hz,1h),5.05-5.25(m,2h),3.44-3.54(m,2h),3.30-3.40(m,3h),3.22 (s,3h),2.77-2.93(m,3h),2.52-2.69(m,8h),2.27(d,j＝7.1hz,2h),1.99-2.06(m,1h),1.71-1.92(m,3h),1.18
‑ꢀ
1.40(m,3h)；ms:
[m+1]
+
:668.2。
[0451]
实施例27
[0452]
化合物27-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-氟-7-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0453][0454]
化合物27-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-氟-7-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0455][0456]
如实施例23-1所述，采用与23-1类似的方法合成目标化合物27-1和27-2。
[0457]1h-nmr(27-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),7.60(t,j＝8.8hz,1h),7.54(d,j＝8.6hz,1h),7.40 (dd,j＝9.2,3.6hz,1h),6.39(d,j＝8.6hz,1h),5.36(m,1h),5.03-5.22(m,2h),4.21(q,j＝7.6hz,2h),3.76(t, j＝6.7hz,2h),3.21-3.23(m,4h),3.20(s,3h),2.81-3.12(m,5h),2.53-2.69(m,7h),1.96-2.06(m,1h)；ms: [m+1]
+
:658.2。
[0458]1h-nmr(27-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),7.60(t,j＝8.9hz,1h),7.55(d,j＝8.5hz,1h),7.40 (dd,j＝9.3,3.7hz,1h),6.41(d,j＝8.6hz,1h),5.44(d,j＝16.6hz,1h),5.12(dd,j＝50.7,4.5hz,1h),5.09 (dd,j＝12.8,5.5hz,1h),4.23(q,j＝8.1hz,2h),3.75-3.83(m,2h),3.20-3.25(m,4h),3.16(s,3h),2.82-3.06 (m,5h),2.66(d,j＝7.5hz,2h),2.53-2.62(m,5h),1.98-2.07(m,1h)；ms:[m+1]
+
:658.2。
[0459]
实施例28
[0460]
化合物28-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4
‑ꢀ
基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
二酮。
[0472][0473][0474]
如实施例23-1所述，采用与23-1类似的方法合成目标化合物29-1和29-2。
[0475]1h-nmr(29-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),7.73(d,j＝11.4hz,1h),7.66(d,j＝8.5hz,1h), 7.46(d,j＝7.4hz,1h),7.00(d,j＝8.7hz,1h),5.71(s,1h),5.37-5.46(m,1h),5.04-5.24(m,2h),3.18-3.30(m, 8h),3.00-3.14(m,2h),2.77-2.95(m,2h),2.53-2.73(m,8h),2.27(d,j＝7.1hz,2h),2.00-2.07(m,1h),1.7-1.90 (m,3h),1.15-1.35(m,2h)；ms:[m+1]
+
:686.2。
[0476]1h-nmr(29-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),7.73(d,j＝11.4hz,1h),7.68(d,j＝8.5hz,1h), 7.46(d,j＝7.4hz,1h),7.03(d,j＝8.6hz,1h),5.94(d,j＝6.2hz,1h),5.49(dd,j＝15.2,4.6hz,1h),5.04-5.26 (m,2h),3.44-3.54(m,2h),3.25-3.30(m,5h),3.22(s,3h),2.77-2.96(m,3h),2.53-2.67(m,8h),2.28(d,j＝7.1 hz,2h),2.00-2.08(m,1h),1.70-1.90(m,3h),1.18-1.41(m,2h)；ms:[m+1]
+
:686.2。
[0477]
实施例30
[0478]
化合物30-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(2-(1-(2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基) 哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0479][0480]
化合物30-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(2-(1-(2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基) 哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0481][0482][0483]
如实施例23-1所述，采用与23-1类似的方法合成目标化合物30-1和30-2。
[0484]1h-nmr(30-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),7.63-7.75(m,2h),7.30-7.40(m,2h),7.00(d,j＝8.6 hz,1h),5.42(t,j＝4.8hz,1h),5.02-5.22(m,2h),3.26-3.35(m,4h),3.25(s,3h),3.00-3.16(m,3h),2.75-2.92 (m,3h),2.53-2.69(m,7h),2.42(t,j＝6.9hz,2h),1.98-2.07(m,1h),1.75-1.85(m,2h),1.20-1.55(m,6h)；ms: [m+1]
+
:682.2。
[0485]1h-nmr(30-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),7.64-7.75(m,2h),7.30-7.37(m,2h),7.03(d,j＝8.6 hz,1h),5.49(d,j＝15.4hz,1h),5.06-5.25(m,2h),3.26-3.35(m,4h),3.22(s,3h),2.77-2.94(m,4h),2.52-2.67 (m,7h),2.39-2.45(m,2h),1.97-2.07(m,1h),1.81(t,j＝13.6hz,2h),1.21-1.59(m,6h)；ms:[m+1]
+
:682.2。
[0486]
实施例31
[0487]
化合物31-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(2-(1-(2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
‑ꢀ
4-基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0488][0489]
化合物31-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(2-(1-(2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
‑ꢀ
4-基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0490][0491][0492]
如实施例23-1所述，采用与23-1类似的方法合成目标化合物31-1和31-2。
[0493]1h-nmr(31-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),7.73(d,j＝11.4hz,1h),7.66(d,j＝8.5hz,1h), 7.46(d,j＝7.4hz,1h),7.00(d,j＝8.6hz,1h),5.42(t,j＝4.8hz,1h),5.03-5.22(m,2h),3.47(d,j＝12.3hz, 2h),3.34(d,j＝11.8hz,2h),3.25(s,3h),2.98-3.18(m,3h),2.74-2.95(m,3h),2.53-2.68(m,7h),2.37-2.45(m, 2h),2.00-2.08(m,1h),1.81(d,j＝12.4hz,2h),1.20-1.53(m,6h)；ms:[m+1]
+
:700.2。
[0494]1h-nmr(31-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),7.73(d,j＝11.4hz,1h),7.67(d,j＝8.5hz,1h), 7.46(d,j＝7.4hz,1h),7.03(d,j＝8.6hz,1h),5.49(d,j＝15.4hz,1h),5.06-5.26(m,2h),3.33-3.51(m,7h), 3.22(s,3h),2.77-2.95(m,3h),2.53-2.67(m,7h),2.41(t,j＝7.2hz,2h),2.00-2.07(m,1h),1.81(t,j＝12.9hz, 2h),1.21-1.58(m,6h)；ms:[m+1]
+
:700.2。
[0495]
实施例32
[0496]
化合物32-1：顺式-5-(4-((1-((1s)-7-(二氟甲基)磺酰基)-2-氟-1-羟基-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基) 甲基)哌嗪-1-基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-6-氟异吲哚啉-1,3-二酮。
[0497][0498]
化合物32-2：反式-5-(4-((1-((1s)-7-(二氟甲基)磺酰基)-2-氟-1-羟基-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基) 甲基)哌嗪-1-基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-6-氟异吲哚啉-1,3-二酮。
[0499][0500][0501]
step a：中间体32-a的制备
[0502]
将7-(二氟甲基)磺酰基)-4-氟-2,3-二氢-1h-茚-1-酮(1mmol)和selectfluoro试剂(1.5mmol)溶于甲醇 (10ml)，回流反应6h。反应结束后。冷却至室温，旋蒸除去溶剂，残渣溶于二氯甲烷，过滤，滤液旋干得中间体32-a，直接用于后续合成(0.89mmol，收率89％)。
[0503]
step b：中间体32-b的制备
[0504]
将中间体32-a(100mg)，4-(氮杂环丁烷-3-基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(90mg)，三乙胺(72mg)溶于 dmso(3ml)，90℃反应。反应结束后，冷却至室温，加入饱和氯化钠溶液(20ml)，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析得中间体32-b(120mg，收率65.6％)。
[0505]
step c：中间体32-c的制备
[0506]
将中间体32-b(120mg)溶于二氯甲烷(5ml)，加入三氟乙酸(2ml)，室温反应。完成结束后，旋干得到中间体32-c，直接用于后续合成。
[0507]
step d：中间体32-d的制备
[0508]
将中间体32-c(80mg)，2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5,6-二氟异吲哚啉-1,3-二酮(113mg)，dipea(50mg) 溶于dmso(3ml)，90℃反应2h。反应结束后，加入饱和氯化钠溶液(20ml)，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析得中间体32-d(25mg，收率18.8％)。
[0509]
step e：化合物32-1和32-2的制备
[0510]
将甲酸(10μl)溶于1ml二氯甲烷，冰水浴下，加入三乙胺(15μl)，搅拌10min。将上述溶液加入到 32-d(25mg)的二氯甲烷溶液中，加入催化剂[(r,r)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)(5％mol)，氩气保护，室温反应8h。反应完成后，加入20ml二氯甲烷，饱和碳酸氢钠洗涤，干燥，高效液相制备色谱纯化，冷冻干燥，得目标产物32-1(7mg)和32-2(5mg)。
[0511]1h-nmr(32-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),7.73(d,j＝11.3hz,1h),7.57(d,
j＝8.7hz,1h), 7.46(d,j＝7.4hz,1h),7.03(t,j＝53.9hz,1h),6.42(d,j＝8.8hz,1h),5.07-5.28(m,3h),4.30(t,j＝8.1hz, 2h),3.87(t,j＝6.8hz,2h),3.22-3.30(m,5h),2.83-3.19(m,4h),2.53-2.70(m,8h),1.98-2.08(m,1h)；ms: [m+1]
+
:694.2。
[0512]1h-nmr(32-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),7.73(d,j＝11.4hz,1h),7.57(d,j＝8.6hz,1h), 7.46(d,j＝7.4hz,1h),6.94(t,j＝53.7hz,1h),6.44(d,j＝8.8hz,1h),5.29(d,j＝16.9hz,1h),5.03-5.20(m, 2h),4.25-4.39(m,2h),3.85-3.93(m,2h),3.50-3.60(m,1h),3.20-3.30(m,4h),2.81-3.14(m,4h),2.52-2.75(m, 8h),1.98-2.08(m,1h)；ms:[m+1]
+
:694.2。
[0513]
实施例33
[0514]
化合物33-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(1-(1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4
‑ꢀ
基)氮杂环丁烷-3-羰基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0515][0516]
化合物33-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(1-(1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4
‑ꢀ
基)氮杂环丁烷-3-羰基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0517][0518]
如实施例23-1所述，采用与23-1类似的方法合成化合物33-1和33-2。
[0519]1h-nmr(33-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),7.74(dd,j＝8.4,7.2hz,1h),7.56(d,j＝8.6hz,1h), 7.41(d,j＝7.1hz,1h),7.36(d,j＝8.4hz,1h),6.45(d,j＝8.6hz,1h),5.61(d,j＝6.5hz,1h),5.35(q,j＝5.4 hz,1h),5.04-5.23(m,2h),4.31(q,j＝8.1hz,2h),4.21(t,j＝6.9hz,2h),3.85-3.95(m,1h),3.65-3.73(m,2h), 3.50-3.58(m,2h),
3.25-3.28(m,2h),3.05-3.24(m,5h),2.82-2.96(m,1h),2.53-2.65(m,3h),2.00-2.07(m,1h)； ms:[m+1]
+
:654.2。
[0520]1h-nmr(33-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),7.74(dd,j＝8.4,7.2hz,1h),7.57(d,j＝8.5hz,1h), 7.41(d,j＝7.1hz,1h),7.37(d,j＝8.4hz,1h),6.47(d,j＝8.6hz,1h),5.85-5.91(m,1h),5.44(dd,j＝16.5,4.4 hz,1h),5.04-5.21(m,2h),4.33(dt,j＝15.4,8.1hz,2h),4.23(q,j＝7.5hz,2h),3.85-3.95(m,1h),3.65-3.75 (m,2h),3.52-3.58(m,2h),3.42-3.51(m,2h),3.17(s,3h),2.83-3.08(m,3h),2.52-2.65(m,3h),2.00-2.07(m, 1h)；ms:[m+1]
+
:654.2。
[0521]
实施例34
[0522]
化合物34-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
ꢀ‑
4-基)氮杂环丁烷-3-羰基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0523][0524]
化合物34-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
ꢀ‑
4-基)氮杂环丁烷-3-羰基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0525][0526]
如实施例23-1所述，采用与23-1类似的方法合成化合物34-1和34-2。
[0527]1h-nmr(34-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),7.78(d,j＝11.2hz,1h),7.56(d,j＝8.6hz,1h), 7.50(d,j＝7.3hz,1h),6.46(d,j＝8.6hz,1h),5.62(d,j＝6.6hz,1h),5.36(q,j＝5.4hz,1h),5.05-5.24(m, 2h),4.31(q,j＝8.1hz,2h),4.21(t,j＝6.9hz,2h),3.84-3.96(m,1h),3.65-3.70(m,2h),3.50-3.56(m,2h), 3.18-3.28(m,5h),2.82-3.13(m,3h),2.52-2.65(m,3h),2.00-2.10(m,1h)；ms:[m+1]
+
:672.2。
[0528]1h-nmr(34-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),7.78(d,j＝11.2hz,1h),7.57(d,j＝8.5hz,1h), 7.50(d,j＝7.3hz,1h),6.47(d,j＝8.6hz,1h),5.83-5.90(m,1h),5.44(d,j＝16.4hz,1h),5.05-5.21(m,2h), 4.33(dt,j＝13.8,8.1hz,2h),4.23(q,j＝7.6hz,2h),3.88-3.97(m,1h),3.63-3.70(m,2h),3.49-3.59(m,2h), 2.82-3.21(m,8h),2.53-2.62(m,2h),2.00-2.08(m,1h)；ms:[m+1]
+
:672.2。
[0529]
实施例35
[0530]
化合物35-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(4-(2-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
‑ꢀ
4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)-2-氧乙基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0531][0532]
化合物35-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(4-(2-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
‑ꢀ
4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)-2-氧乙基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0533][0534]
step a：中间体35-a的制备
[0535]
将2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(1mmol)、2-(哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯(1mmol)和dipea (2mmol)溶于dmso(6ml)，90℃反应2h，反应结束后，冷却至室温，加入饱和氯化钠溶液(40ml)，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干得中间体35-a，直接用于后续合成。
[0536]
step b：中间体35-b的制备
[0537]
将step a得到的产物溶于二氯甲烷(10ml)，加入三氟乙酸(5ml)，室温反应。反应结束后，旋干溶剂得中间体35-b，直接用于后续合成。
[0538]
step c：中间体35-c的制备
[0539]
将中间体35-b(30mg)、中间体17-c(22.5mg)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二
亚胺盐酸盐edci (29mg)和1-羟基苯并三唑hobt(20mg)溶于dmf(3ml)中室温反应。反应结束后，加入饱和氯化钠溶液(20ml)后依次进行乙酸乙酯萃取、无水硫酸钠干燥、柱层析得中间体35-c(37mg，收率71％)。
[0540]
step d：化合物35-1和35-2的制备
[0541]
将甲酸(20μl)溶于1ml二氯甲烷，冰水浴下，加入三乙胺(30μl)搅拌10min。将上述溶液加入到 35-c(37mg)的二氯甲烷溶液中，加入催化剂[(r,r)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)(5％mol)，在氩气保护下进行室温反应8h。反应完成后，加入20ml二氯甲烷后依次进行饱和碳酸氢钠洗涤、干燥、高效液相制备色谱纯化、冷冻干燥，得目标产物35-1(13mg)和35-2(8mg)。
[0542]1h-nmr(35-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),7.74(d,j＝8.6hz,1h),7.68(d,j＝8.4hz,1h),7.35 (d,j＝2.3hz,1h),7.25(dd,j＝8.8,2.3hz,1h),6.92(d,j＝8.6hz,1h),5.85(d,j＝6.9hz,1h),5.40-5.48(m, 1h),5.14-5.35(m,2h),5.07(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.68-4.76(m,1h),4.35-4.44(m,1h),4.18-4.25(m,1h), 3.80-3.90(m,1h),3.40-3.50(m,4h),3.29(s,3h),2.82-3.20(m,6h),2.54-2.65(m,5h),1.96-2.06(m,1h)；ms: [m+1]
+
:684.2。
[0543]1h-nmr(35-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.08(s,1h),7.76(d,j＝8.6hz,1h),7.68(d,j＝8.5hz,1h),7.35 (d,j＝2.3hz,1h),7.25(d,j＝8.7hz,1h),6.92-6.99(m,1h),6.09(t,j＝5.5hz,1h),5.51(dd,j＝16.5,5.7hz, 1h),5.14-5.29(m,2h),5.07(dd,j＝12.9,5.4hz,1h),4.70-4.78(m,1h),4.36-4.43(m,1h),4.20-4.30(m,1h), 3.88(d,j＝10.9hz,1h),3.40-3.50(m,4h),3.25(s,3h),2.81-3.12(m,6h),2.52-2.68(m,5h),1.97-2.05(m,1h)； ms:[m+1]
+
:684.2。
[0544]
实施例36
[0545]
化合物36-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(2-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
‑ꢀ
4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)乙基)哌啶-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0546][0547]
化合物36-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(2-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚
‑ꢀ
4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)乙基)哌啶-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
a，直接用于后续合成。
[0557]
step b：中间体37-b的制备
[0558]
将step a中得到的中间体37-a溶于甲醇(8ml)后加入氢氧化钯(50mg)，再氢气条件下反应过夜。反应结束后，过滤，滤液旋干得中间体37-b，直接用于后续合成。
[0559]
step c：中间体37-c的制备
[0560]
将step b中得到的中间体37-b(40mg)、2,4-二氟-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-1-酮(46mg)和碳酸钾(53mg)溶于dmf(2ml)，80℃反应。反应结束后，冷却至室温，加入饱和氯化钠溶液(20ml)后依次进行乙酸乙酯萃取、无水硫酸钠干燥、柱层析得中间体37-c(15mg，收率18.2％)。
[0561]
step d：中间体37-d的制备
[0562]
将中间体37-c(15mg)溶于二氯甲烷(5ml)，加入三氟乙酸(2ml)在室温条件下反应。反应结束后，旋干溶剂得到中间体37-d，直接用于后续合成。
[0563]
step e：中间体37-e的合成
[0564]
将2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5,6-二氟异吲哚啉-1,3-二酮(50mg)、叔丁基哌嗪-1-羧酸酯(22mg)和dipea (22mg)溶于dmso(2ml)，90℃反应1h。反应结束后，冷却至室温，加入饱和氯化钠溶液(20ml)后依次进行乙酸乙酯萃取、无水硫酸钠干燥、旋干得中间体37-e，直接用于后续合成。
[0565]
step f：中间体37-f的合成
[0566]
将step e中得到的37-e溶于二氯甲烷(3ml)，加入三氟乙酸(1ml)在室温条件下反应，反应完成后，旋干得到中间体37-f，直接用于后续合成。
[0567]
step g：中间体37-g的合成
[0568]
将step d得到的中间体37-d、step g得到的中间体37-g、edci(15mg)和hobt(10mg)溶于dmf (2ml)，在室温条件下反应，反应结束后，加入饱和氯化钠溶液后依次进行乙酸乙酯萃取、无水硫酸钠干燥、柱层析得中间体37-g(15mg)。
[0569]
step h：化合物37-1的合成
[0570]
将甲酸(10μl)溶于1ml二氯甲烷，冰水浴下，加入三乙胺(15μl)，搅拌10min。将上述溶液加入到 37-g(15mg)的二氯甲烷溶液中，加入催化剂[(r,r)-n-(2-氨基-1,2-二苯乙基)-对甲基苯磺酰胺]氯化(对伞花烃)钌(ii)(5％mol)，氩气保护，室温反应8h。反应完成后，加入20ml二氯甲烷，饱和碳酸氢钠洗涤，干燥，高效液相制备色谱纯化，冷冻干燥，得目标产物37-1(3mg)。
[0571][0572]1h-nmr(37-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),8.24(t,j＝5.3hz,1h),7.77(d,j＝11.3hz,1h),7.56 (d,j＝8.5hz,1h),7.50(d,j＝7.3hz,1h),6.43(d,j＝8.6hz,1h),5.61(d,j＝6.8hz,1h),5.31-5.39(m,1h), 5.03-5.23(m,2h),4.18-4.30(m,2h),4.03-4.14(m,3h),3.58-3.67(m,4h),3.03-3.26(m,7h),2.83-2.94(m,2h), 2.56-2.69(m,4h),2.32-2.37(m,1h),1.95-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:729.2。
[0573]
实施例38
[0574]
化合物38-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(4-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)-4-氧代丁基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0575][0576]
化合物38-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(4-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)-4-氧代丁基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0577][0578]1h-nmr(38-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),8.32(s,1h),7.68-7.77(m,2h),7.44(d,j＝7.4hz, 1h),6.92(d,j＝8.7hz,1h),5.40-5.44(m,1h),5.05-5.31(m,3h),4.55-4.65(m,1h),4.30-4.40(m,1h),4.10-4.20 (m,1h),3.78-3.84(m,1h),3.20-3.30(m,7h),2.81-3.15(m,5h),2.55-2.64(m,3h),2.29-2.35(m,2h),2.12(t,j ＝7.2hz,2h),2.00-2.07(m,1h),1.63-1.75(m,2h)；ms:[m+1]
+
:730.2。
[0579]1h-nmr(38-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),8.41(s,2h),7.67-7.78(m,2h),7.44(dd,j＝7.5,1.9 hz,1h),6.95(d,j＝8.6hz,1h),5.45-5.55(m,1h),5.06-5.28(m,3h),4.63(t,j＝8.0hz,1h),4.30-4.40(m,1h), 4.18(dt,j＝10.7,5.5hz,1h),3.84(dd,j＝10.5,3.8hz,1h),3.20-3.25(m,7h),2.82-3.03(m,5h),2.67(m,1h), 2.54-2.63(m,3h),2.28-2.36(m,2h),2.08-2.15(m,2h),2.00-2.07(m,1h),1.65-1.73(m,2h)；ms:[m+1]
+
:730.2。
[0580]
实施例39
[0581]
化合物39-1：顺式-5-(4-(4-(4-((1-((1s)-7-((二氟甲基)磺酰基)-2-氟-1-羟基-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁
ꢀ‑
3-基)甲基)哌嗪-1-基)-4-氧代丁基)哌嗪-1-基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-氟异吲哚啉-1,3-二酮。
[0582]
[0583][0584]1h-nmr(39-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),7.72(d,j＝11.5hz,1h),7.57(d,j＝8.8hz,1h), 7.45(d,j＝7.4hz,1h),7.03(t,j＝54.0hz,1h),6.41(d,j＝8.8hz,1h),5.06-5.26(m,3h),4.28(t,j＝7.8hz, 2h),3.84(t,j＝7.0hz,2h),3.10-3.60(m,10h),2.83-2.97(m,3h),2.52-2.63(m,8h),2.25-2.40(m,8h),1.98
‑ꢀ
2.04(m,1h),1.62-1.76(m,2h)；ms:[m+1]
+
:849.3。
[0585]
实施例40
[0586]
化合物40-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-((2-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4
‑ꢀ
基)氮杂环丁-3-基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0587][0588]
化合物40-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-((2-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4
‑ꢀ
基)氮杂环丁-3-基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0589][0590]
step a：中间体40-a的制备
[0591]
将叔丁基甲基(2-(甲氨基)乙基)氨基甲酸酯(1g)和3-氧代氮杂环丁烷-1-羧酸苄酯(1.09g)溶于二氯甲烷(20ml)，室温搅拌1h后，加入乙酰氧基硼氢化钠(1.13g)，室温搅拌过夜。反应完成后，加入饱和碳酸氢钠溶液(40ml)和二氯甲烷(20ml)，有机相用饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干得到中间体40
‑ꢀ
a，直接用于后续合成。
[0592]
step b：中间体40-b的制备
[0593]
将中间体40-a溶于甲醇(20ml)，加入氢氧化钯(200mg)，氢气条件下室温反应。反应结束后，过滤，旋干得中间体40-b，直接用于后续合成。
[0594]
step c-g：
[0595]
如实施例23-1所述，采用与23-1类似的方法合成目标化合物40-1和40-2。
[0596][0597]1h-nmr(40-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.07(s,1h),7.51-7.61(m,2h),7.28(d,j＝8.7hz,1h),7.21(d, j＝7.0hz,1h),6.34(d,j＝8.6hz,1h),5.60(d,j＝6.3hz,1h),5.30-5.38(m,1h),5.02-5.22(m,2h),4.02-4.15 (m,2h),3.60-3.75(m,4h),3.21(s,3h),3.08-3.18(m,2h),3.05(s,3h),2.80-2.92(m,2h),2.53-2.69(m,4h),2.10 (s,3h),1.94-2.04(m,1h)；ms:[m+1]
+
:628.2。
[0598]1h-nmr(40-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.07(s,1h),7.51-7.61(m,2h),7.28(d,j＝8.6hz,1h),7.21(d, j＝7.0hz,1h),6.34(d,j＝8.6hz,1h),5.60(d,j＝6.5hz,1h),5.35(q,j＝5.2hz,1h),5.02-5.23(m,2h),4.04
‑ꢀ
4.15(m,2h),3.62-3.75(m,4h),3.21(s,3h),3.05-3.18(m,2h),3.05(s,3h),2.82-2.92(m,2h),2.52-2.68(m,4h), 2.10(s,3h),1.96-2.03(m,1h)；ms:[m+1]
+
:628.2。
[0599]
实施例41
[0600]
化合物41-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-((2-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
茚-4-基)氮杂环丁-3-基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0601][0602]
化合物41-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-((2-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
茚-4-基)氮杂环丁-3-基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0603]
[0604][0605]
如实施例40-1所述，采用与40-1类似的方法合成化合物41-1和41-2。
[0606]1h-nmr(41-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),7.65(d,j＝12.6hz,1h),7.52(d,j＝8.5hz,1h), 7.29(d,j＝7.8hz,1h),6.34(d,j＝8.6hz,1h),5.59(m,1h),5.34(t,j＝5.0hz,1h),5.00-5.22(m,2h),4.07
‑ꢀ
4.16(m,2h),3.69-3.76(m,2h),3.52(t,j＝6.9hz,2h),3.35-3.45(m,2h),3.01-3.24(m,9h),2.82-2.92(m,1h), 2.54-2.65(m,2h),2.17(s,3h),1.97-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:646.2。
[0607]1h-nmr(41-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.09(s,1h),7.65(d,j＝12.7hz,1h),7.54(d,j＝8.5hz,1h), 7.30(d,j＝7.7hz,1h),6.36(d,j＝8.6hz,1h),5.85(m,1h),5.43(d,j＝16.6hz,1h),4.98-5.18(m,2h),4.05
‑ꢀ
4.18(m,2h),3.68-3.83(m,2h),3.38-3.56(m,5h),3.17(s,3h),3.08(s,3h),2.82-3.02(m,3h),2.52-2.63(m,2h), 2.18(s,3h),1.96-2.05(m,1h)；ms:[m+1]
+
:646.2。
[0608]
实施例42
[0609]
化合物42-1：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(6-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)-6-氧代己基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0610][0611]
化合物42-2：反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(6-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h
‑ꢀ
茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)-6-氧代己基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮。
[0612][0613]
如实施例38-1所述，采用与38-1类似的方法合成化合物42-1和42-2。
[0614]1h-nmr(42-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),7.67-7.76(m,2h),7.45(d,j＝7.4hz,1h),6.91(d, j＝8.7hz,1h),5.44(dd,j＝7.6,5.0hz,1h),5.07-5.34(m,3h),4.60(m,1h),4.34(m,1h),4.12(m,1h),3.80 (m,1h),3.29(s,3h),3.20-3.28(m,5h),2.82-3.18(m,5h),2.52-2.68(m,4h),2.31(t,j＝7.5hz,2h),2.00-2.13 (m,3h),1.40-1.55(m,4h),1.20-1.35(m,2h)；ms:[m+1]
+
:758.2。
[0615]1h-nmr(42-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),7.68-7.77(m,2h),7.45(d,j＝7.4hz,1h),6.95(d, j＝8.6hz,1h),5.51(d,j＝16.5hz,1h),5.06-5.29(m,3h),4.59-4.63(m,1h),4.30-4.38(m,1h),4.10-4.18(m, 1h),3.78-3.86(m,1h),3.18-3.31(m,10h),2.82-3.04(m,3h),2.52-2.68(m,4h),2.31(t,j＝7.1hz,2h),1.97
‑ꢀ
2.13(m,3h),1.40-1.55(m,4h),1.22-1.35(m,2h)；ms:[m+1]
+
:758.2。
[0616]
实施例43
[0617]
化合物43：5-(4-((1-((s)-2,2-二氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪
ꢀ‑
1-基)-2-(2,6-二氧哌嗪-3-基)-6-氟异吲哚啉-1,3-二酮。
[0618][0619]
step a：中间体43-a的制备
[0620]
将2,2,4-三氟-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-1-酮(100mg)、4-(氮杂环丁烷-3-基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(997mg)和三乙胺(57mg)溶于dmso(3ml)，90℃反应。反应结束后，冷却至室温，加入饱和氯化钠溶液(30ml)，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析得目标化合物(130mg，收率69％)。
[0621]
step b-d：
[0622]
如实施例23-1所述，采用与23-1类似的方法合成化合物43。
[0623]1h-nmr(43)：(400mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),7.73(d,j＝11.4hz,1h),7.58(d,j＝8.6hz,1h),7.46 (d,j＝7.4hz,1h),6.43(d,j＝8.7hz,1h),5.25(d,j＝13.4hz,1h),5.11(dd,j＝12.8,5.4hz,1h),4.23(q,j＝7.8hz,2h),3.79(t,j＝6.4hz,2h),3.32-3.62(m,6h),3.17(s,3h),2.82-3.01(m,2h),2.52-2.70(m,8h),1.98
‑ꢀ
2.08(m,1h)；ms:[m+1]
+
:676.2。
[0624]
实施例44
[0625]
化合物44-1：顺式-5-(4-(1-((1s)-7-(二氟甲基)磺酰基)-2-氟-1-羟基-2,3-二氢-1h-茚-4-基)-3-氟氮杂环丁烷
ꢀ‑
3-羰基)哌嗪-1-基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-6-氟异吲哚啉-1,3-二酮。
[0626][0627]
化合物44-2：反式-5-(4-(1-((1s)-7-(二氟甲基)磺酰基)-2-氟-1-羟基-2,3-二氢-1h-茚-4-基)-3-氟氮杂环丁烷
ꢀ‑
3-羰基)哌嗪-1-基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-6-氟异吲哚啉-1,3-二酮。
[0628][0629]
step a：中间体44-a的制备
[0630]
将1-((苄氧基)羰基)-3-羟基氮杂环丁烷-3-羧酸(200mg)、叔丁基哌嗪-1-羧酸酯(148mg)，edci(300mg)、 hobt(215mg)和三乙胺(160mg)溶于dmf(5ml)在室温条件下反应，反应结束后，加入饱和氯化钠溶液(35ml)后依次进行乙酸乙酯萃取、无水硫酸钠干燥、柱层析得中间体44-a(180mg，收率54％)。
[0631]
step b：中间体44-b的制备
[0632]
将中间体44-a(180mg)溶于超干二氯甲烷，加入二乙胺基三氟化硫dast(103mg)在室温条件下反应。反应结束后，加入二氯甲烷(20ml)后分别用饱和碳酸氢钠溶液，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，柱层析得中间体44-b(130mg，收率72％)。
[0633]
step c-f：
[0634]
如实施例32-1所述，采用与32-1类似的方法合成化合物44-1和44-2。
[0635]1h-nmr(44-1)：(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),7.79(d,j＝11.2hz,1h),7.65(d,j＝8.7hz,1h), 7.52(d,j＝7.3hz,1h),7.08(t,j＝53.9hz,1h),6.60(d,j＝8.8hz,1h),5.88(m,1h),5.24-5.30(m,1h),5.07
‑ꢀ
5.15(m,1h),4.79-4.89(m,2h),4.49-4.63(m,2h),
3.71(m,2h),3.58(m,2h),3.13-3.26(m,5h),2.82-2.95(m, 1h),2.53-2.64(m,4h),2.01-2.10(m,1h)；ms:[m+1]
+
:726.2.
[0636]1h-nmr(44-2)：(400mhz,dmso-d6)δ11.10(s,1h),7.90(d,j＝11.2hz,1h),7.68(d,j＝8.7hz,1h), 7.47(d,j＝7.3hz,1h),6.90(d,j＝8.8hz,1h),6.65(t,j＝53.9hz,1h),5.92(m,1h),5.20-5.30(m,1h),4.90
‑ꢀ
5.10(m,1h),4.60(m,1h),4.10-4.25(m,4h),3.76(m,2h),3.65(m,2h),3.45-3.55(m,4h),3.00-3.18(m,2h), 2.15-2.20(m,1h),2.50-2.65(m,2h),1.75-1.80(m,1h)；ms:[m+1]
+
:726.2.
[0637]
性能测定：
[0638]
(一)hif-2α降解率测定
[0639]
采用免疫蛋白印迹法测定hif-2α降解率，包括如下步骤：
[0640]
1)将768-o细胞铺在t25培养瓶中，每瓶约6ml培养基，细胞量约为1.2*106。加药当天保证汇合率约80％-90％。
[0641]
2)过夜培养于37℃、5％co2培养箱中。
[0642]
3)将实施例2、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、16、17、19、20、21、23、24、25、26、27、28、 29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41和44制备的化合物溶解于dmso中得到化合物溶液。
[0643]
4)取6μl步骤3)的化合物溶液(或dmso)加入到培养瓶中，培养于37℃、5％co2培养箱中6小时。
[0644]
5)加药6小时后收集细胞(裂解方法参照thermofisher提供的ripa使用说明书)。
[0645]
6)准备细胞裂解液，每10ml ripa buffer中分别加入1片蛋白酶抑制剂和1片磷酸酶抑制剂，混匀待用。
[0646]
7)弃掉培养瓶中上清液，pbs清洗2次。
[0647]
8)每瓶细胞中加入预冷的ripa 100μl，旋转培养瓶使其均匀平铺在瓶中，培养瓶放置冰上裂解15分钟。
[0648]
9)细胞刮刀收集蛋白裂解液并转移至1.5ml离心管中，14000r/min下离心15分钟。
[0649]
10)将上清转移到干净的预冷的1.5ml离心管中备用。
[0650]
11)蛋白定量实验步骤参照bca蛋白定量试剂盒说明书。
[0651]
12)上样：30ug/孔(预制胶，bio-rad，26孔，4-15％)。
[0652]
13)电泳：在70伏条件下电泳，直至溴酚蓝染料至胶底结束，电泳时间约为2.5h。
[0653]
14)转膜：先用甲醇预活化pvdf膜，组装成“三明治”结构，从下到上依次为：滤纸-胶-膜-滤纸。湿转，60分钟，280ma。
[0654]
15)封闭：5％脱脂牛奶/tbs/0.1％t溶液，室温孵育1小时。
[0655]
16)洗膜：tbs/0.1％t溶液，5分钟，3次。
[0656]
17)一抗：用5％脱脂牛奶/tbs/0.1％t溶液稀释一抗抗体，4℃过夜孵育。
[0657]
18)洗膜：tbs/0.1％t溶液，5分钟，3次。
[0658]
19)二抗：用5％脱脂牛奶/tbs/0.1％t溶液稀释各对应二抗抗体，1:250稀释，室温孵育1小时，避光。
[0659]
20)洗膜：tbs/0.1％t溶液，5分钟，3次。
[0660]
21)检测：用odyssey分别在700nm或800nm波长下扫描检测或tanon5200成像，检测
结果见表1。
[0661]
表1.各实施例化合物浓度1μm条件下降解hif-2α比率
[0662][0663][0664]
上表中：a、b和c表示降解率，其中，a≧50％，30％≤b＜50％；10％≤c＜30％。
[0665]
由表1可知：本技术的双功能化合物具有较高的降解hif-2α比率，表明本技术涉及的双功能化合物能够很好的降低肿瘤细胞内hif-2α的表达量，可以用于治疗hif-2α高表达相关的肿瘤或癌症疾病，具有良好的应用前景。
[0666]
以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明保护的范围之内。

技术特征：
1.双功能化合物，其特征在于，所述化合物具有以下通式(ⅰ)：上式中：所述l为连接子；所述r1选自卤素、-no2、-cn、-s(o)2r
a
、-s(o)r
a
和-p(o)r
b
r
c
中的任意一种，其中，r
a
、r
b
和r
c
各自独立的选自c1-c6烷基和c1-c6卤代烷基中的任意一种；所述r2和r3各自独立的选自h、卤素、-cn、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基和c1-c6卤代烷基中的任意一种；所述x选自-c(o)-和-ch
2-中的任意一种；所述r4选自h、卤素、-cn、c1-c3烷基、c1-c3卤代烷基和c1-c3烷氧基中的任意一种。2.根据权利要求1所述的双功能化合物，其特征在于，所述连接子l具有以下通式(ⅱ)：上式中：所述l1通过与r1所连接的苯环共价连接，所述l4通过与r4所连接的苯环共价连接；所述l1不存在或者选自-nr
d-、-o-、-s-、-nhch
2-、-nh(ch2)
q
c(o)-和-oc(o)-中的任意一种，其中，所述q为0～6的整数，所述r
d
选自h、c1-c3烷基和c1-c3卤代烷基中的任意一种；所述l2和/或l3不存在或者选自-(ch2)
m-、-nr
e-、-(ch2ch2o)
n-、-(nh)
o
(ch2)
p
c(o)-和-c(o)(ch2)
p
(nh)
o-中的任意一种，其中，所述m为0～12的整数，所述n为0～6的整数，所述o为0或1，所述p为0～6的整数，所述r
e
选自h、c1-c3烷基和c1-c3卤代烷基中的任意一种；所述l4不存在或者选自-o-、-s-和-nr
f-中的任意一种，所述r
f
选自h、卤素、-cn、c1-c3烷基、c1-c3卤代烷基，c1-c3烷氧基和c1-c3卤代烷氧基中的任意一种；所述a、b和c各自独立的选自不存在、c3-c7环烷基、包含1～3个独立选自o、n和s原子的5元～7元杂环基、c5-c10芳基及包含1-3个独立选自o、n和s原子的5元～10元杂芳基中的任意一种。3.根据权利要求2所述的双功能化合物，其特征在于，所述a选自以下基团的任意一种：其中，所述z选自-n-和-ch
2-中的任意一种，所述α表示与其在式(ⅱ)中a基团左边相邻的基团连接，所述β表示与其在式(ⅱ)中a基团右边相邻的基团连接。4.根据权利要求2或3所述的双功能化合物，所述b选自以下基团的至少一种：
其中，所述γ表示与其在式(ⅱ)中b基团左边相邻的基团连接，所述δ表示与其在式(ⅱ)中b基团右边相邻的基团连接。5.根据权利要2～4任一项所述的双功能化合物，其特征在于，所述c基团选自以下基团的任意一种：其中，所述l5不存在或者选自-ch
2-、-o-、-nr
g-、-c(o)-、-o(ch2)
r
c(o)-中的任意一种，其中，所述r为0～6的整数，所述r
g
选自h、c1-c3烷基、c1-c3烷酰基和c1-c3烷基磺酰基中的任意一种；所述r5选自h、氘、卤素、-oh、c1-c3烷基、c1-c3卤代烷基和c1-c3烷氧基中的任意一种；所述r6选自h、-cn、卤素、-oh、c1-c3烷基、c1-c3卤代烷基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基和-nr
h-中的任意一种，其中，所述r
h
选自h或c1-c3烷基；所述π表示与其在式(ⅱ)中c基团左边相邻的基团连接，所述θ表示与其在式(ⅱ)中c基团右边相邻的基团连接。6.根据权利要求1～5任一项所述的双功能化合物，其特征在于，所述双功能化合物选自下列化合物的任意一种：顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-((1-(2-(2-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-((1-(2-(2-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-((1-(2-(2-(2-(2-((((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-((1-(2-(2-(2-(2-((((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(1-(2-(2-(2-(2-(2-((((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲
基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(1-(2-(2-(2-(2-(2-((((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧杂环戊二烯-3-基)-4-((2-(2-(2-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧杂环戊二烯-3-基)-4-((2-(2-(2-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-((2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-4-基)氨基)-n-(2-(2-(2-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)乙酰胺；反式-2-((2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-4-基)氨基)-n-(2-(2-(2-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)乙酰胺；顺式-2-((2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-4-基)氨基)-n-(2-(2-(2-(2-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)乙酰胺；反式-2-((2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-1,3-二氧杂吲哚啉-4-基)氨基)-n-(2-(2-(2-(2-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)乙酰胺；顺式-4-((1-(2-(2-(2-(2-((1s)-7-((二氟甲基)磺酰基)-2-氟-1-羟基-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-4-((1-(2-(2-(2-(2-((1s)-7-((二氟甲基)磺酰基)-2-氟-1-羟基-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-((1-(2-(2-(2-(2-((((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-((1-(2-(2-(2-(2-((((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-((1-(2-(2-(2-(((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-((1-(2-(2-(2-(((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；
二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-氟-7-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-氟-7-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(2-(1-(2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(2-(1-(2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(2-(1-(2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(2-(1-(2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-5-(4-((1-((1s)-7-(二氟甲基)磺酰基)-2-氟-1-羟基-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-6-氟异吲哚啉-1,3-二酮；反式-5-(4-((1-((1s)-7-(二氟甲基)磺酰基)-2-氟-1-羟基-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-6-氟异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(1-(1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁烷-3-羰基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(1-(1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁烷-3-羰基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；
顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁烷-3-羰基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁烷-3-羰基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(4-(2-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)-2-氧乙基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(4-(2-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)-2-氧乙基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(2-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)乙基)哌啶-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(2-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)乙基)哌啶-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；n-(2-(4-(2-(2,6-二氧杂哌啶-3-基)-6-氟-1,3-二氧杂吲哚啉-5-基)哌嗪-1-基)-2-氧代乙基)-1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁烷-3-甲酰胺；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(4-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)-4-氧代丁基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(4-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)-4-氧代丁基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；5-(4-(4-(4-((1-((1s)-7-((二氟甲基)磺酰基)-2-氟-1-羟基-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)-4-氧代丁基)哌嗪-1-基)-2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-氟异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-((2-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-((2-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-((2-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-((2-((1-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基)异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(6-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)-6-氧代己基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮；反式-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-6-(4-(6-(3-((1s)-2-氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氧基)氮杂环丁-1-基)-6-氧代己基)哌嗪-1-基)异吲哚啉-1,
3-二酮；5-(4-((1-((s)-2,2-二氟-1-羟基-7-(甲基磺酰基)-2,3-二氢-1h-茚-4-基)氮杂环丁-3-基)甲基)哌嗪-1-基)-2-(2,6-二氧哌嗪-3-基)-6-氟异吲哚啉-1,3-二酮；顺式-5-(4-(1-((1s)-7-(二氟甲基)磺酰基)-2-氟-1-羟基-2,3-二氢-1h-茚-4-基)-3-氟氮杂环丁烷-3-羰基)哌嗪-1-基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-6-氟异吲哚啉-1,3-二酮；反式-5-(4-(1-((1s)-7-(二氟甲基)磺酰基)-2-氟-1-羟基-2,3-二氢-1h-茚-4-基)-3-氟氮杂环丁烷-3-羰基)哌嗪-1-基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-6-氟异吲哚啉-1,3-二酮。7.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括权利要求1～6任一项所述的双功能化合物或其药学上可接受的盐、对映异构体、非对映异构体、前药或溶剂化物、以及至少一种的药学上可接受的载体、添加剂、助剂或赋形剂。8.根据权利要求7所述的药物组合物在治疗肿瘤或癌症中的用途。9.根据权利要求8所述的药物组合物在治疗肿瘤或癌症中的用途，其特征在于，所述癌症包括肾细胞癌、皮肤癌、肺癌和乳腺癌中的至少一种。10.根据权利要求8所述的药物组合物在治疗肿瘤或癌症中的用途，其特征在于，所述肿瘤包括血液肿瘤、胶质瘤、消化系统肿瘤、生殖系统肿瘤、淋巴瘤和神经系统肿瘤中的至少一种。

技术总结
本申请涉及双功能化合物及其制备方法、药物组合物和用途，所述化合物具有以下通式：本申请设计的化合物包括通过连接子L偶联或连接的结合HIF-2α蛋白的部分以及结合E3泛素连接酶CRBN的部分，本申请的化合物能够利用机体细胞内的泛素-蛋白酶体系统将HIF-2α招募到泛素连接酶处，将HIF-2α泛素化，进而被机体细胞内的蛋白酶体降解，降低肿瘤细胞内HIF-2α的表达量，从而用于治疗与HIF-2α高表达相关的疾病。2α高表达相关的疾病。


技术研发人员：尹大伟 孙效华 杨阳 邹方亮 赵宋强 周小军 米桢 杨津兰 吴俊燏 陈平运
受保护的技术使用者：北京康辰药业股份有限公司
技术研发日：2022.03.14
技术公布日：2023/9/23