用于缓解肾炎的菌株组合物及其应用的制作方法

no：m2021725。
12.第五方面，本技术实施例提供了第四方面所述的菌株组合物在制备用于缓解肾炎药物中的应用。
13.第六方面，本技术实施例提供了一种用于缓解肾炎的制剂，所述制剂包括：
14.(a)第四方面所述的菌株组合物或第四方面所述的菌株组合物的菌粉；以及
15.(b)药物辅料。
16.进一步地，以重量份数计，所述制剂包括：第一方面所述菌株的菌粉20～60份、第二方面所述菌株的菌粉20～60份、第三方面所述菌株的菌粉20～60份和所述瑞士乳杆菌hh-lph17的菌粉10～50份。
17.进一步地，以重量份数计，所述制剂包括：第一方面所述菌株的菌粉35～50份、第二方面所述菌株的菌粉35～50份、第三方面所述菌株的菌粉35～50份和所述瑞士乳杆菌hh-lph17的菌粉20～30份。
18.进一步地，第一方面所述菌株、第二方面所述菌株、第三方面所述菌株和所述瑞士乳杆菌hh-lph17的菌粉中活菌数均为1.0
×
109ꢀ‑
1.0
×
10
12
cfu/g。
19.进一步地，所述制剂的剂型包括注射制剂、口服制剂、喷雾制剂或冲洗制剂。
20.相较于现有技术，本技术实施例提供的上述方案至少具有以下有益效果：
21.本技术实施例首次提供了一种用于缓解肾炎的菌株组合物，该菌株组合物能够有效改善肾炎生化指标、提高免疫力、减轻炎症反应等，并且可用于改善肾功能以及缓解肾炎疾病，为肾炎疾病提供了新的治疗手段和思路。
附图说明
22.为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
23.图1为本发明实施例提供的长双歧杆菌hh-bl18菌株、嗜酸乳杆菌hh-la26菌株、植物乳杆菌hh-lp56菌株的鉴定流程图；
24.图2为本发明实施例提供的长双歧杆菌hh-bl18菌株的电泳检测结果图；
25.图3为本发明实施例提供的嗜酸乳杆菌hh-la26菌株的电泳检测结果图；
26.图4为本发明实施例提供的植物乳杆菌hh-lp56菌株的电泳检测结果图。
具体实施方式
27.为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
28.需要说明的是，在不冲突的情况下，本技术中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考具体实施例来详细说明本发明。
29.本发明实施例提供的技术方案的总体思路如下：
30.第一方面，本技术实施例提供了一种菌株，所述菌株为长双歧杆菌(bifidobacterium longum)菌株，其命名为长双歧杆菌hh-bl18bifidobacterium longum hh-bl18，于2022年03月24日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，保藏号为cctcc no:m 2022306。
31.本技术实施例提供的长双歧杆菌hh-bl18分离自成人肠道，发酵温度为36～38℃，发酵时间为6～36h，所用培养基为mrs培养基或包含mrs培养基的改良培养基。经分离、纯化菌种，经16srrna基因作为marker片段，通用引物扩增出基因中16srrna序列，再进行电泳检测，与nt数据库进行比对，获得相似序列的物种信息，借助同源比对的方法辅助判断物种信息，分类命名为bifidobacterium longum，菌株编号为hh-bl18，其16s rrna特征序列如seq id no.1所示。
32.第二方面，本技术实施例提供了一种菌株，所述菌株为嗜酸乳杆菌(lactobacillus acidophilus)菌株，其命名为嗜酸乳杆菌hh-la26lactobacillus acidophilus hh-la26，于2022年03月24日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，保藏号为cctcc no:m 2022305。
33.本技术实施例提供的嗜酸乳杆菌hh-la26分离自成人肠道，发酵温度为36～38℃，发酵时间为6～36h，所用培养基为mrs培养基或包含mrs培养基的改良培养基。经分离、纯化菌种，经16srrna基因作为marker片段，通用引物扩增出基因中16srrna序列，再进行电泳检测，与nt数据库进行比对，获得相似序列的物种信息，借助同源比对的方法辅助判断物种信息，分类命名为lactobacillus acidophilus，菌株编号为hh-la26，其16s rrna特征序列如seq id no.2所示。
34.第三方面，本技术实施例提供了一种菌株，所述菌株为植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)菌株，其命名为植物乳杆菌hh-lp56lactobacillus plantarum hh-lp56，于2019年06月26日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，保藏号为cctcc no:m 2019497。
35.本技术实施例提供的植物乳杆菌hh-lp56分离自四川传统发酵泡菜，发酵温度为36～38℃，发酵时间为6～36h，所用培养基为mrs培养基或包含mrs培养基的改良培养基。经分离、纯化菌种，经16srrna基因作为marker片段，通用引物扩增出基因中16srrna序列，再进行电泳检测，与nt数据库进行比对，获得相似序列的物种信息，借助同源比对的方法辅助判断物种信息，分类命名为lactobacillus plantarum，菌株编号为hh-lp56，其16s rrna特征序列如seq id no.3所示。
36.第四方面，本技术实施例提供了一种菌株组合物，所述菌株组合物包括以下菌株：
37.第一方面所述菌株、第二方面所述菌株、第三方面所述菌株和瑞士乳杆菌hh-lph17；
38.其中，所述瑞士乳杆菌hh-lph17保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为cctcc no：m2021725。
39.所述瑞士乳杆菌hh-lph17为现有公开且公众可得到的生物材料，申请人已在中国专利cn114262671a中进行公布。
40.第五方面，本技术实施例提供了第四方面所述的菌株组合物在制备用于缓解肾炎药物中的应用。
41.本技术实施例提供的菌株组合物能够有效改善肾炎生化指标、提高免疫力、减轻炎症反应等，并且可用于改善肾功能以及缓解肾炎疾病，为肾炎疾病提供了新的治疗手段和思路。
42.第六方面，本技术实施例提供了一种用于缓解肾炎的制剂，所述制剂包括：
43.(a)第四方面所述的菌株组合物或第四方面所述的菌株组合物的菌粉；以及
44.(b)药物辅料。
45.本技术实施例提供了一种用于缓解肾炎的制剂，该制剂是基于上述第四方面所述的菌株组合物或第四方面所述的菌株组合物的菌粉来实现，由于该制剂采用了上述第四方面所述的菌株组合物的部分或全部技术方案，因此至少具有上述实施例的技术方案所带来的所有有益效果，在此不再一一赘述。
46.第四方面所述的菌株组合物或第四方面所述的菌株组合物的菌粉作为制剂的有效成分(又称为活性成分)，其加入量可根据现有技术公开的技术内容及实际需要进行选择，达到“治疗有效量”便可。“治疗有效量”是指足以提供希望的生物结果的试剂的量。该结果可为疾病的征兆、症状或原因的减少和/或减轻，或任何其它希望的生物系统的变化。例如，“治疗有效量”可具体指包含作为本发明活性成分的制剂的临床上显著减少肾炎疾病所需要的菌株组合物的量。在任何个案中，适当的“有效”量可由本领域普通技术人员使用常规实验来测定。
47.在一些具体实施例中，将中国专利cn111500483a中菌粉的制备相关内容全部引入本技术，上述菌粉的制备可参照申请人先前申请的中国专利cn111500483a中公开的内容进行，在此不再一一赘述。
48.药物辅料是指在药物制剂中除主药以外的可药用添加剂，其种类和用量可根据现有技术公开的技术内容及实际需要进行选择。具体地，如片剂中的黏合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂；如半固体制剂软膏剂、霜剂中的基质部分等；如液体制剂中的防腐剂、抗氧剂、矫味剂、芳香剂、助溶剂、乳化剂、增溶剂、渗透压调节剂、着色剂等。
49.作为本技术实施例的一种实施方式，以重量份数计，所述制剂包括：第一方面所述菌株的菌粉20～60份、第二方面所述菌株的菌粉20～60份、第三方面所述菌株的菌粉20～60份和所述瑞士乳杆菌hh-lph17的菌粉10～50份。
50.本技术通过研究发现，通过将长双歧杆菌hh-bl18菌株、嗜酸乳杆菌hh-la26菌株、植物乳杆菌hh-lp56菌株以上述配比进行组合使用时，对肾炎的疗效佳。
51.优选地，以重量份数计，所述制剂包括：第一方面所述菌株的菌粉35～50份、第二方面所述菌株的菌粉35～50份、第三方面所述菌株的菌粉35～50份和所述瑞士乳杆菌hh-lph17的菌粉20～30份。
52.作为本技术实施例的一种实施方式，第一方面所述菌株、第二方面所述菌株、第三方面所述菌株和所述瑞士乳杆菌hh-lph17的菌粉中活菌数均为1.0
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109ꢀ‑
1.0
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10
12
cfu/g。
53.在一些具体实施例中，第一方面所述菌株、第二方面所述菌株、第三方面所述菌株和所述瑞士乳杆菌hh-lph17均可为1.0
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109cfu/g、1.0
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cfu/g、1.0
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10
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cfu/g等。
54.作为本技术实施例的一种实施方式，所述制剂的剂型包括注射制剂、口服制剂、喷
雾制剂或冲洗制剂。
55.本技术中制剂的剂型可根据现有技术公开的技术内容及实际需要进行选择和制备。注射制剂包括冻干粉针剂等；口服制剂包括片剂、胶囊剂或颗粒剂等；喷雾制剂包括雾化剂、喷剂、混悬剂等；冲洗制剂包括冲洗液等。
56.在一些具体实施例中，用于口服给药的固体制剂包括片剂、丸剂、散剂、颗粒剂或胶囊剂等，并且此类固体制剂在制备时，可以掺入至少一种以上的赋形剂，例如，淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖或明胶等。此外，例如，除了简单的赋形剂以外，还可以使用如硬脂酸镁、滑石粉等润滑剂，但不限于此。
57.在一些具体实施例中，用于口服给药的液体剂型对应于悬浊剂、内服溶液、乳剂、糖浆剂等，除了常用的作为常规稀释剂的水、液体石蜡外，还可以包括各种赋形剂，例如润湿剂、甜味剂、芳香剂、保存剂等，但不限于此。
58.以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
59.实施例1
60.本实施例的目的在于提供长双歧杆菌hh-bl18菌株。
61.1.1菌株来源
62.分离自成人肠道，发酵温度为36～38℃，发酵时间为6～36h，所用培养基为mrs培养基或包含mrs培养基的改良培养基。
63.1.2菌株鉴定
64.分离、纯化菌种，经16srrna基因作为marker片段，通用引物扩增出基因中16srrna序列，再进行电泳检测，与nt数据库进行比对，获得相似序列的物种信息，借助同源比对的方法辅助判断物种信息，分类命名为bifidobacterium longum，菌株编号为hh-bl18，其16srrna特征序列如seq id no.1所示，鉴定整体流程如图1所示。
65.(1)测序引物和pcr操作
66.引物序列：
67.27f：5'-agagtttgatcctggctcag-3'；记为seq id no.4。
68.1492r：5'-ggttaccttgttacgactt-3'；记为seq id no.5。
69.pcr反应体系如表1所示。
70.表1
[0071][0072]
pcr反应条件如表2所示。
[0073]
表2
[0074][0075]
(2)长双歧杆菌hh-bl18的16s rrna特征序列如seq id no.1所示：
[0076]
ggacactcgagcctcacttagacggctcctcccacaaggggttaggccaccggcttcgggtgctgcccactttcatgacttgacgggcggtgtgtacaaggcccgggaacgcattcaccgcgacgttgctgattcgcgattactagcgactccgccttcacgcagtcgagttgcagactgcgatccgaactgagaccggttttcagggatccgctccgcgtcgccgcgtcgcatcccgttgtaccggccattgtagcatgcgtgaagccctggacgtaaggggcatgatgatctgacgtcatccccaccttcctccgagttaaccccggcggtcccccgtgagttcccggcataatccgctggcaacacggggcgagggttgcgctcgttgcgggacttaacccaacatctcacgacacgagctgacgacgaccatgcaccacctgtgaacccgccccgaagggaagccgtatctctacgaccgtcgggaacatgtcaagcccaggtaaggttcttcgcgttgc
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[0077]
使用16s rrna通用引物扩增后，进行电泳检测。电泳条件是1％琼脂糖凝胶，120v电压电泳30min。电泳检测结果如图2所示，dl2000条带分布：2000、1000、750、500、250、100bp。
[0078]
1.3菌株保藏
[0079]
长双歧杆菌hh-bl18(bifidobacterium longum hh-bl18)菌株已于2022年03月24日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，保藏号为cctcc no:m 2022306，分类命名是bifidobacterium longum。
[0080]
实施例2
[0081]
本实施例的目的在于提供嗜酸乳杆菌hh-la26菌株。
[0082]
2.1菌株来源
[0083]
分离自成人肠道，发酵温度为36～38℃，发酵时间为6～36h，所用培养基为mrs培养基或包含mrs培养基的改良培养基。
[0084]
2.2菌株鉴定
[0085]
经分离、纯化菌种，经16srrna基因作为marker片段，通用引物扩增出基因中16srrna序列，再进行电泳检测，与nt数据库进行比对，获得相似序列的物种信息，借助同源比对的方法辅助判断物种信息，分类命名为lactobacillus acidophilus，菌株编号为hh-la26，其16s rrna特征序列如seq id no.2所示，鉴定整体流程如图1所示。
[0086]
(1)测序引物和pcr操作与实施例1相同。
[0087]
(2)嗜酸乳杆菌hh-la26菌株的16s rrna特征序列如seq id no.2所示：
[0088]
tggcttagacggctccttcccgaaggttaggccaccggctttgggcattgcagactcccatggtgtgacgggcggtgtgtacaaggcccgggaacgtattcaccgcggcgtgctgatccgcgattactagcgattccagcttcgtgcagtcgagttgcagactgcagtccgaactgagaacagctttaagagattcgcttgccttcgcaggcttgctcctcgttgtactgtccattgtagcacgtgtgtagcccaggtcataaggggcatgatgacttgacgtcatccccaccttcctccggtttgtcaccggcagtctcattagagtgcccaacttaatgctggcaactaatgacaagggttgcgctcgttgcgggacttaacccaacatctcacgacacgagctgacgacagccatgcaccacctgtcttagtgtccccgaagggaactccgtatctctacggattgcactagatgtcaagacctggtaaggttcttcgcgttgcttcgaattaaaccacatgctccaccgcttgtgcgggcccccgtcaattcctttgagtttcaaccttgcggtcgtactccccaggcggagtgct
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[0089]
使用16s rrna通用引物扩增后，进行电泳检测。电泳条件是1％琼脂糖凝胶，120v电压电泳30min。电泳检测结果如图3所示，dl2000条带分布：2000、1000、750、500、250、100bp。
[0090]
2.3菌株保藏
[0091]
嗜酸乳杆菌hh-la26菌株已于2022年03月24日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，保藏号为cctcc no:m 2022305，分类命名是lactobacillus acidophilus。
[0092]
实施例3
[0093]
本实施例的目的在于提供植物乳杆菌hh-lp56菌株。
[0094]
3.1菌株来源
[0095]
分离自四川传统发酵泡菜，发酵温度为36～38℃，发酵时间为6～36h，所用培养基为mrs培养基或包含mrs培养基的改良培养基。
[0096]
3.2菌株鉴定
[0097]
经分离、纯化菌种，经16srrna基因作为marker片段，通用引物扩增出基因中16srrna序列，再进行电泳检测，与nt数据库进行比对，获得相似序列的物种信息，借助同源比对的方法辅助判断物种信息，分类命名为lactobacillus plantarum，菌株编号为hh-lp56，其16s rrna特征序列如seq id no.3所示，鉴定整体流程如图1所示。
[0098]
(1)测序引物和pcr操作与实施例1相同。
[0099]
(2)植物乳杆菌hh-lp56菌株的16s rrna特征序列如seq id no.3所示：
[0100]
gggggccttctctgtcaccttaggcggctggttcctaaaggttaccccaccgactttgggtgttacaaactctcatggtgtgacgggcggtgtgtacaaggcccgggaacgtattcaccgcggcatgctgatccgcgattactagcgattccgacttcatgtaggcgagttgcagcctacaatccgaactgagaatggctttaagagattagcttactctcgcgagttcgcaactcgttgtaccatccattgtagcacgtgtgtagcccaggtcataaggggcatgatgatttgacgtcatccccaccttcctccggtttgtcaccggcagtctcaccagagtgcccaacttaatgctggcaactgataataagggttgcgctcgttgcgggacttaacccaacatctcacgacacgagctgacgacaaccatgcaccacctgtatccatgtccccgaagggaacgtctaatctcttagatttgcatagtatgtcaagacctggtaaggttcttcgcgtagcttcgaattaaaccacatgctccaccgcttgtgcgggcccccgtcaattcctttgagtttcagccttgcggccgtactc
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[0101]
使用16s rrna通用引物扩增后，进行电泳检测。电泳条件是1％琼脂糖凝胶，120v电压电泳30min。电泳检测结果如图4所示，dl2000条带分布：2000、1000、750、500、250、100bp。
[0102]
3.3菌株保藏
[0103]
植物乳杆菌hh-lp56已于2019年06月26日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，保藏号为cctccno:m 2019497，分类命名是lactobacillus plantarum。
[0104]
实施例4
[0105]
本实施例的目的在于根据中国专利cn111500483a中菌粉的制备工艺提供本发明所述菌株组合物的菌粉，包括以下步骤：
[0106]
1)将长双歧杆菌hh-bl18、嗜酸乳杆菌hh-la26、植物乳杆菌hh-lp56和瑞士乳杆菌hh-lph17分别接种在mrs液体培养基中，在36～38℃下分别发酵17.5h、18h、16h和15h，得到长双歧杆菌hh-bl18发酵菌液、嗜酸乳杆菌hh-la26发酵菌液、植物乳杆菌hh-lp56发酵菌液和瑞士乳杆菌hh-lph17发酵菌液。
[0107]
2)将上述步骤1)中的长双歧杆菌hh-bl18发酵菌液、嗜酸乳杆菌hh-la26发酵菌液、植物乳杆菌hh-lp56发酵菌液和瑞士乳杆菌hh-lph17发酵菌液分别以14500rpm、14000rpm、15000rpm、13000rpm离心，收集沉淀物，得到长双歧杆菌hh-bl18菌泥、嗜酸乳杆菌hh-la26菌泥、植物乳杆菌hh-lp56菌泥和瑞士乳杆菌hh-lph17菌泥。
[0108]
3)将上述步骤2)中的长双歧杆菌hh-bl18菌泥添加冻干保护剂(按照固含量百分比即脱脂奶粉50％、麦芽糊精25％、乳糖20％、甘油5％)、嗜酸乳杆菌hh-la26菌泥添加冻干保护剂(按照固含量百分比即脱脂奶粉45％、麦芽糊精30％、乳糖20％、甘油5％)、植物乳杆菌hh-lp56菌泥添加冻干保护剂(按照固含量百分比即脱脂奶粉60％、麦芽糊精20％、蔗糖10％、10％吐温-80)、瑞士乳杆菌hh-lph17菌泥添加冻干保护剂(按照固含量百分比即脱脂奶粉40％、麦芽糊精20％、海藻糖20％、葡萄糖10％、10％吐温-80)，120rpm搅拌10min乳化，并进行真空冷冻干燥处理38h(冷冻干燥条件：预冻温度-45℃、冷阱温度-60℃开始抽真空，控制解析温度28℃～30℃)，得到长双歧杆菌hh-bl18菌粉、嗜酸乳杆菌hh-la26菌粉、植物乳杆菌hh-lp56菌粉和瑞士乳杆菌hh-lph17菌粉。
[0109]
实施例5
[0110]
本实施例的目的在于考察不同配比的长双歧杆菌hh-bl18菌粉、嗜酸乳杆菌hh-la26菌粉、植物乳杆菌hh-lp56菌粉和瑞士乳杆菌hh-lph17菌粉对肾炎的治疗效果。
[0111]
1、实验对象及实验模型制备
[0112]
实验对象：sd雌性大鼠160只，随机分成16组，每组10只，体重185-230g，其饲养条件：温度为恒温25℃，相对湿度70～75％，光照、黑暗12h交替。
[0113]
模型制备方法：不开腹状态下经尿道直接膀胱内注射大肠杆菌菌液制备急性肾盂肾炎大鼠模型。具体过程：造模前一天，称重，测肛温，大鼠禁水24h，20％乌拉坦麻醉后，经尿道插入外膜硬导管至4cm处，可见清亮液体经导管外侧孔中排出，表明导尿成功。随后，用1ml注射器吸取大肠杆菌溶液(107cfu)0.6ml转接外膜硬导管，轻推注射器，将菌液注入膀胱内。用动脉夹夹住大鼠尿道口，8h后松开动脉夹出现血尿，体温明显升高即为造模成功。
[0114]
2、实验组别
[0115]
空白对照组：健康sd雌性大鼠，不给药；
[0116]
模型对照组：实验模型sd雌性大鼠，不给药；
[0117]
阴性对照组：实验模型sd雌性大鼠灌胃不含活性成分的冻干保护剂；
[0118]
实验组：实施例组1-8，对比例组1-5；其中，实施例组1-8和对比例组1-4的具体给药成分如表3所示，以重量份数计(单位为g)；对比例组5为盐酸左氧氟沙星。
[0119]
表3
[0120][0121][0122]
注：表3中长双歧杆菌hh-bl18菌粉、嗜酸乳杆菌hh-la26菌粉、植物乳杆菌hh-lp56菌粉和瑞士乳杆菌hh-lph17菌粉均按照实施例4所述方法制备。
[0123]
3、实验方法
[0124]
于造模后第一天开始给药，每天给大鼠灌胃(上午10点，晚上10点各一次)，空白对照组、阴性对照组及实验组灌胃相应的药物30mg/kg，连续给药15天。每天测量并记录大鼠肛温，每两天称一次体重。于给药后的第12天收集大鼠24h尿液，3000rpm/min，离心15min，
取上清，-80℃冻存。给药后第14天禁食24h，并记录该天的体温，体重。第15天，处死大鼠后，取其肾脏，其中将一个肾脏纵切，一半用于肾组织细菌培养，另一半用10％甲醛固定。腹主动脉取血，3000r/min离心15min，制备血清。
[0125]
指标测定：肾组织培养；肌酐浓度的测定(分别取所对应的第12天贮存尿液，采用肌氨酸氧化酶法，购买市售检测试剂盒按照试剂盒说明书的要求测定尿肌酐浓度)；血清il-2的测定(取大鼠血清，采用elisa法，购买市售检测试剂盒按照试剂盒说明书的要求测定il-2含量)。
[0126]
4、检测结果
[0127]
4.1取感染的大鼠肾组织，在无菌操作台中进行实验过程，剪取相同部位组织，配制成10％的组织菌液，经肾脏匀浆后取0.1ml涂布于固体培养基中在37℃恒温培养箱中培养，24h后进行单菌落计数，结果如表4所示。
[0128]
表4
[0129][0130]
注：表4中检测结果为每组检测结果的平均值。
[0131]
通过表4可以看出：在大鼠连续给药15天以后，实施例组1-8对肾组织均有明显的
抑菌效果。相较于左氧氟沙星(对比例组5)，实施例组1-4对肾组织的抑菌效果略显不佳，实施例组5和实施例组7对肾组织的抑菌效果与左氧氟沙星的抑菌效果相似，实施例组6对肾组织的抑菌效果较优于左氧氟沙星，实施例组8对肾组织的抑菌效果最佳且显著优于左氧氟沙星。
[0132]
4.2尿肌酐浓度的测定结果如表5所示。相较于空白对照组，模型对照组和阴性对照组中尿肌酐浓度具有明显升高。与模型对照组相比，实施例组1-8的尿肌酐浓度均有明显下降，实施例组8的效果最佳。
[0133]
表5
[0134]
[0135][0136]
注：表5中检测结果为每组检测结果的平均值。
[0137]
4.3血清il-2的测定结果如表6所示。相较于空白对照组，模型对照组和阴性对照组中血清il-2浓度具有明显升高。与模型对照组相比，实施例组1-8的血清il-2浓度均有明显下降，实施例组8的效果最佳。
[0138]
表6
[0139]
[0140][0141]
注：表6中检测结果为每组检测结果的平均值。
[0142]
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

技术特征：
1.一种菌株，其特征在于，所述菌株为长双歧杆菌(bifidobacterium longum)菌株，其命名为bifidobacterium longum hh-bl18，于2022年03月24日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，保藏号为cctcc no:m 2022306。2.一种菌株，其特征在于，所述菌株为嗜酸乳杆菌(lactobacillus acidophilus)菌株，其命名为lactobacillus acidophilus hh-la26，于2022年03月24日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，保藏号为cctcc no:m 2022305。3.一种菌株，其特征在于，所述菌株为植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)菌株，其命名为lactobacillus plantarum hh-lp56，于2019年06月26日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，保藏号为cctcc no:m 2019497。4.一种菌株组合物，其特征在于，所述菌株组合物包括以下菌株：权利要求1所述菌株、权利要求2所述菌株、权利要求3所述菌株和瑞士乳杆菌hh-lph17；其中，所述瑞士乳杆菌hh-lph17保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为cctcc no：m2021725。5.权利要求4所述的菌株组合物在制备用于缓解肾炎药物中的应用。6.一种用于缓解肾炎的制剂，其特征在于，所述制剂包括：(a)权利要求4所述的菌株组合物或权利要求4所述的菌株组合物的菌粉；以及(b)药物辅料。7.根据权利要求6所述的制剂，其特征在于，以重量份数计，所述制剂包括：权利要求1所述菌株的菌粉20～60份、权利要求2所述菌株的菌粉20～60份、权利要求3所述菌株的菌粉20～60份和所述瑞士乳杆菌hh-lph17的菌粉10～50份。8.根据权利要求6所述的制剂，其特征在于，以重量份数计，所述制剂包括：权利要求1所述菌株的菌粉35～50份、权利要求2所述菌株的菌粉35～50份、权利要求3所述菌株的菌粉35～50份和所述瑞士乳杆菌hh-lph17的菌粉20～30份。9.根据权利要求7或8所述的制剂，其特征在于，权利要求1所述菌株、权利要求2所述菌株、权利要求3所述菌株和所述瑞士乳杆菌hh-lph17的菌粉中活菌数均为1.0
×
10
9-1.0
×
10
12
cfu/g。10.根据权利要求6所述的制剂，其特征在于，所述制剂的剂型包括注射制剂、口服制剂、喷雾制剂或冲洗制剂。

技术总结
本发明公开了用于缓解肾炎的菌株组合物及其应用，属于生物医药技术领域，所述菌株组合物包括以下菌株：Bifidobacterium longum HH-BL18、Lactobacillus acidophilus HH-LA26、Lactobacillus plantarum HH-LP56和瑞士乳杆菌HH-LPH17。本发明提供的菌株组合物能够有效改善肾炎生化指标、提高免疫力、减轻炎症反应等，并且可用于改善肾功能以及缓解肾炎疾病，为肾炎疾病提供了新的治疗手段和思路。为肾炎疾病提供了新的治疗手段和思路。为肾炎疾病提供了新的治疗手段和思路。


技术研发人员：丁一 丁沛昊 杨晓畅 刘磊 孙群 代巍
受保护的技术使用者：郑州和合生物工程技术有限公司
技术研发日：2022.12.29
技术公布日：2023/9/23