一种鲢人工繁殖的方法

1.本发明属于水生野生动物种质资源保护技术领域，更具体涉及一种鲢人工繁殖的方法，尤其适用于鲢自然种群恢复及人工保种。


背景技术：

2.鲢(hypophthalmichthys molitrix valenciennes,1844)属鲤形目，鲤科，鲢亚科，鲢属。俗称:鲢子，白鲢。体侧扁，较高，体长达1m余。银灰色。口中大，眼下侧位。腹面腹鳍前后均具肉棱。胸鳍末端伸达腹鳍基底。咽齿齿冠有羽状细纹。栖息水的中上层，以海绵状的鳃耙滤食浮游植物。性活泼，善跳跃。3龄成熟，可人工繁殖。最大体重15-20kg。为中国主要的淡水鱼类养殖对象。分布于各大水系。
3.中国自唐代开始驯养“四大家鱼”，鱼种来源长期以来依靠长江、西江的天然鱼苗。1951年开始进行池塘养殖“四大家鱼”人工繁殖研究与推广，1957年，家鱼人工繁殖研究。1961年实现大规模繁殖，全国生产数字达到12亿尾，亲鱼培育池为土塘，池塘面积一般在2000-4000m2。鲢鱼人工繁殖技术规程(db5110/t17-2019、db22/t767-2019)，亲鱼培育池均为土塘，db5110/t17-2019中亲鱼池面积为667-3350m2，db22/t 767-2019中亲鱼池面积为2000-3335m2。亲鱼培育以施用生物菌肥和藻种肥水方式进行，并根据浮游植物量适当投喂黄豆浆或人工配合浮性饲料。适时加注新水或更换部分池水，保持水质清爽。
4.经检索中国专利，专利申请号为：202010186704.8，发明名称为一种快速生长鲢的选育方法，其内容是：1：选择生长快、个体大的4龄～6龄性成熟鲢雌性个体和3龄～4龄鲢雄性个体，进行池塘养殖；2：收集性成熟的2龄～4龄兴国红鲤雄性个体进行池塘养殖；3：在繁殖季节对鲢雌性个体和兴国红鲤雄性个体分别进行催产；4：对成熟的兴国红鲤精子进行遗传灭活；5：利用灭活的兴国红鲤精子与鲢卵子相混合，采用人工授精方法受精，进行雌核发育；6：受精后雌核发育处理：受精后1min～3min，水温25℃～28℃，受精卵平撒在小密眼网布上，放入低温培养箱中盛有水的塑料盘中，设置温度为2℃-4℃，进行冷休克10min～15min，取出受精卵网布置入25℃～28℃水体进行孵化出苗；7：将不同鲢个体雌核发育的f1代鱼苗进行池塘单养至性成熟，选择生长快、体型好的性成熟f1雌性个体第二次雌核发育，f2代鱼苗按照家系进行养殖；8：在f2代进行性别鉴定，获得雄性个体，利用f2代中的个体生长快、体型好的雌性个体和雄性个体进行配组繁殖f3代鱼苗，建立不同的家系纯系；9：按照不同的亲本进行f3代家系纯系鱼苗的培育，并开展不同纯系之间的生长对比试验，基于生长对比试验获得快速生长鲢。该专利申请主要存在技术问题是：该专利为鱼类新品系的选育方法，其核心是雌核发育和生长性能筛选、建立新品系，其技术难点在于雄性配子选择与处理，以及胚胎发育激活方法。主要问题是不涉及鲢的亲鱼培育和催产技术，但不适用于鲢的野生种群资源恢复和遗传多样性保护。十二
5.坚持人与自然和谐共生，随着人们对生态环境保护意识的逐步提升，生态环境保护力度的加大，水产养殖的废水排放要求越来越高，需要实现达标排放或零排放。寻找高效、环保的人工繁殖模式是今后一段时间水产养殖业发展的重要方向之一。


技术实现要素：

6.鉴于上述存在的技术问题，本发明的目的是在于提供了一种鲢人工繁殖方法，方法易行，操作简便，亲鱼具有稳定的产卵量和排精量，其受精率和孵化率高，所得子代苗种鱼体健壮、匀称，成活率和饵料利用率高，生长速度较野生个体快。
7.为了实现上述目的，本发明采用以下技术措施：
8.一种鲢人工繁殖的方法，其步骤是：
9.1)筛选成熟、活力强的鲢作为亲本；筛选体重4kg以上，3-4龄鲢作为亲本；
10.2)亲本强化培育：
11.a)选择长宽高12
×
12
×
1.3m室外土工膜池作为培育池，静水环境培育，培育密度为4-5尾/池，全池采用土工膜铺设；投喂人工配合饲料(海大泥鳅料)、豆浆(视浮游植物量适时泼洒)、生物肥(多藻肥水膏，按说明书使用)等；自4月中旬开始，采用循环水流水刺激，每周2-3次，每次2-3小时；
12.b)自4月中旬开始，拉网检查发育情况，挑选肥满度较好的个体进行强化培育；水温达到15-17℃后，增加冲水刺激频率，2天一次，每次2-3小时，水温达到18-20℃时，更改冲水频率至每天一次，每次2-4小时；
13.3)人工催产：5月上旬至中旬水温达到20-25℃后，拉网挑选发育成熟亲本，采用两针注射法进行人工催产。第一针雌鱼19:00注射3μg/kg促黄体素释放激素(lrh-a2)，雄鱼不注射，第二针雌鱼00:00(与第一针间隔5h)注射1000单位/kg绒促性素(hcg)、5ug/kg促黄体素释放激素(lrh-a2)和6mg/kg水溶地欧酮(dom)的混合液，雄鱼第二针注射液是雌鱼的一半；注射催产药物后亲本混养在催产池，催产池水深1-1.2m，1kw污水泵平池冲水，催产池上方用防跳网覆盖，防止亲本跳出催产池；第二针雌鱼注射1000单位的hcg是为了进一步促进雌鱼卵细胞的发育、成熟和诱导排卵作用。
14.4)人工采卵：第二针注射1000单位/kg绒促性素(hcg)、5ug/kg促黄体素释放激素(lrh-a2)和6mg/kg水溶地欧酮(dom)的混合液后5-6h开始观察亲本状态，若发现雄鱼追逐雌鱼或雌雄亲鱼相互交尾时，拉网进行活体采精卵；
15.5)人工授精：对精卵个体进行人工授精，先采卵后将精液挤于卵上，挤压1次卵1滴精液，用羽毛逆时针轻柔搅拌1-2分钟，进行人工授精；
16.6)人工孵化：人工授精完成后，倒入锥形孵化桶中孵化，孵化密度为600-800粒/l，孵化20-25h后及时挑出死卵；水温为20-23℃时，孵化出膜时间为30-40h，待鱼苗卵黄囊消失平游后，减小孵化桶水的流速，并在孵化桶中培养2-3天，然后转入一级苗种培养池中培养。
17.所述的步骤2中a采用培养池为12
×
12
×
1.3m的规格，培养池中心底部与循环水系统淤泥沉淀池联通。
18.所述的步骤2中a采用的循环水系统以水流顺序为：4个培育池
→
淤泥沉淀池
→
筛网网目为40目的弧形筛
→
4m
×
6m的弹性填料(规格为φ150
×
1500mm)区
→
紫外线消毒(此区域水流流量≤150m3/h)
→
补水池
→
4个培养池。
19.所述的步骤3中第一针与第二针时间间隔为5h。
20.通过上述六个步骤的技术措施：与传统鲢人工繁殖技术规程相比，本发明的关键步骤2)亲鱼培育，选择了12
×
12
×
1.3m规格连接循环水系统的小型水体作为亲鱼培育池。
实验的成功，有效的解决了鲢人工繁殖对养殖的技术难点，进一步减小了鲢人工繁殖对养殖水体大小的依赖问题，同时循环水系统的使用减少了养殖废水对周边水体的影响。是一种可推广的高效、环保人工繁殖模式。
21.本发明与现有技术相比，具有以下优点和效果：
22.1.减小了鲢人工繁殖对水体面积的依赖：通过小水体循环水养殖系统，实现了零排放。亲鱼培育池面积为144m2，仅为已有技术规程或传统人工繁殖所需水体面积的4.3-21.6％。
23.2.具有较强的可操作性：成功培育成熟亲鱼，保证人工催产顺利进行，方法简单，操作简便，实践应用性好，其催产率达100％，出苗率达89.5％，达到了苗种规模化生产技术条件。
24.3.人工繁育苗种具有的优势明显：1)鱼苗体格健壮、匀称，成活率高，饵料利用率高；2)生长速度较野生个体快，在自然环境中具有良好的适应性；3)鱼苗抗病能力较强，易于人工驯化，经5个月培育，苗种体长可达到4-15cm，符合人工放流要求，有利于自然种群的维持和恢复。
具体实施方式
25.以下结合具体的实施方式，对本发明进一步说明。
26.实施例1：
27.一种鲢人工繁殖的方法，其步骤是：
28.1)筛选成熟、活力强的鲢作为亲本；筛选体重4kg或5kg或6kg或7kg或8kg，3龄或4龄或4龄以上的鲢作为亲本；
29.2)亲本强化培育：
30.a)选择长宽高12
×
12
×
1.3m室外土工膜池作为培育池，除定时清污水位调节外，其余时间为静水环境培育，培育密度为4尾或5尾/池，全池采用土工膜铺设，投喂人工配合饲料(海大泥鳅料)、豆浆(视浮游植物量适时泼洒)、生物肥(多藻肥水膏，按说明书使用)等；自3月开始，采用循环水进行流水刺激，每周2次或3次，每次2h或3h；
31.b)自4月中旬，拉网检查发育情况，挑选肥满度较好的个体进行强化培育；水温达15℃或16℃或17℃后，增加冲水刺激频率，2天一次，每次2h或3h，水温达18℃或19℃或20℃时，更改冲水频率至每天一次，每次2h或3h或4h。
32.3)人工催产：5月上旬至中旬水温达到22℃或23℃或24℃或25℃后，拉网挑选发育成熟亲本，采用两针注射法进行人工催产。第一针雌鱼19:00注射3μg/kg lrh-a2，雄鱼不注射，第二针雌鱼00:00(与第一针间隔5h)注射1000单位/kg hcg、5ug/kg lrh-a2和6mg/kg dom的混合液，雄鱼第二针注射500单位/kg hcg、2.5ug/kg lrh-a2和3mg/kg dom的混合液；注射完催产剂后亲本混养在催产池中，催产池水深1m或1.1m或1.2m，1kw污水泵平池冲水，催产池上方采用防跳网全池覆盖，防止亲本跳出催产池。第二针雌鱼注射1000单位的hcg是为了更好的进一步促进雌鱼卵细胞的发育、成熟和诱导排卵的作用。
33.4)人工采卵：第二针注射催产剂后5h或6h开始观察亲本状态，若看到雄鱼追逐雌鱼或雌雄亲本交尾情况出现，及时拉网采用腹部节律性挤压，进行活体采集精卵；
34.5)人工授精：对精卵个体进行人工授精，先采卵，后将精液挤于卵上，挤压1次卵，
滴1滴精液，用羽毛逆时针轻柔搅拌1min或2min，进行人工授精；
35.6)人工孵化：人工授精后，将受精卵倒入锥形孵化桶中进行孵化，孵化密度为600颗或700颗或800颗/l，孵化20h或21h或22h或23h或24h或25h后及时挑出死卵，水温23℃时，35h左右可开始脱膜出苗；待鱼苗卵黄囊消失平游后，减小孵化桶流水的流速，并在孵化桶中培养2天或3天，再转入一级苗种培育池培育。
36.所述的步骤2中a采用培养池为12
×
12
×
1.3m的规格，培养池中心底部与循环水系统淤泥沉淀池联通。
37.所述的步骤(2)中a采用的循环水系统构成以水流顺序为：4个12
×
12
×
1.3m的培育池
→
淤泥沉淀池
→
筛网网目为40目的弧形筛
→
4m
×
6m的弹性填料(规格为φ150
×
1500mm)区
→
紫外线消毒(此区域水流流量≤150m3/h)
→
补水池
→
4个12
×
12
×
1.3m的培养池。
38.所述的步骤3中第一针与第二针时间间隔为5h。
39.综上所述，本发明在2019-2022年共计进行了6批次催产实验，获得受精卵323万粒，出苗275万尾。催产成功率100％，平均出苗率达85.1％。有关鲢人工繁殖情况请见表1。
40.表1 2019-2022年鲢人工繁殖记录表
[0041][0042]

技术特征：
1.一种鲢人工繁殖的方法，其步骤是：(1)筛选成熟、活力的鲢作为亲本，筛选体重4-8kg，3-4龄鲢作为亲本；(2)亲本强化培育：a)选择长宽高12
×
12
×
1.3m室外土工膜池作为培育池，静水环境培育，培育密度为4-5尾/池，全池采用土工膜铺设；投喂人工配合饲料、豆浆、生物肥；自4月中旬开始，采用循环水流水刺激，每周2-3次，每次2-3小时；b)自4月中旬开始，拉网检查发育情况，挑选肥满度的个体进行强化培育；水温达到15-17℃后，增加冲水刺激频率，2天一次，每次2-3小时，水温达到18-20℃时，更改冲水频率至每天一次，每次2-4小时；3)人工催产：5月上旬至中旬水温达到20-25℃后，拉网挑选发育成熟亲本，采用两针注射法进行人工催产，第一针雌鱼19:00注射3μg/kg促黄体素释放激素，雄鱼不注射，第二针雌鱼00:00注射1000单位/kg绒促性素、5ug/kg促黄体素释放激素和6mg/kg水溶地欧酮的混合液，雄鱼第二针注射液是雌鱼的一半；注射催产药物后亲本混养在催产池，催产池水深1-1.2m，1kw污水泵平池冲水，催产池上方用防跳网覆盖；4)人工采卵：第二针注射1000单位/kg绒促性素、5ug/kg促黄体素释放激素和6mg/kg水溶地欧酮的混合液后5-6h开始观察亲本状态，发现雄鱼追逐雌鱼或雌雄亲鱼相互交尾时，拉网进行活体采精卵；5)人工授精：对精卵个体进行人工授精，先采卵后将精液挤于卵上，挤压1次卵1滴精液，用羽毛逆时针轻柔搅拌1-2分钟，进行人工授精；6)人工孵化：人工授精完成后，倒入锥形孵化桶中孵化，孵化密度为600-800粒/l，孵化20-25h后挑出死卵；水温为20-23℃时，孵化出膜时间为30-40h，鱼苗卵黄囊消失平游后，在孵化桶中培养2-3天，转入一级苗种培养池中培养。2.根据权利要求1所述的一种鲢人工繁殖的方法，其特征在于：所述的步骤(2)a中培养池中心底部与循环水系统连接。3.根据权利要求1所述的一种鲢人工繁殖的方法，其特征在于：所述的步骤(2)中a采用的循环水系统构成以水流顺序为：4个12
×
12
×
1.3m的培育池
→
淤泥沉淀池
→
筛网网目为40目的弧形筛
→
4m
×
6m的弹性填料区
→
紫外线消毒
→
补水池
→
4个12
×
12
×
1.3m的培养池。4.根据权利要求1所述的一种鲢人工繁殖的方法，其特征在于：所述的步骤(3)中第一针与第二针时间间隔为5h。

技术总结
本发明公开了一种鲢人工繁殖的方法，步骤是：1)筛选成熟、活力的鲢作为亲本；2)亲本培育：a)选择室外土工膜池作为培育池；b)采用增加冲水频率进行培育；3)人工催产：5月上旬至中旬水温达到后，拉网挑选发育成熟亲本，采用两针注射法进行人工催产；4)人工采卵：进行活体人工采精卵；5)人工授精：对精卵个体进行人工授精；6)人工孵化：人工授精后放于锥形孵化桶中孵化；待鱼苗卵黄囊消失平游后，在孵化桶中培养2-3日后移出孵化设备，转入苗种培育池中培育。减小了鲢人工繁殖对水体面积的依赖，方法易行，操作简便，其受精率和孵化率高，成活率和饵料利用率高，生长速度较野生个体快。生长速度较野生个体快。


技术研发人员：李德旺 郑海涛 陈锋 李全宏 赵鹏 付昕 龚昱田
受保护的技术使用者：水利部中国科学院水工程生态研究所
技术研发日：2023.05.08
技术公布日：2023/9/23