含有并环基团的咪唑并嘧啶类化合物、其制备方法及用途与流程

含有并环基团的咪唑并嘧啶类化合物、其制备方法及用途
1.本技术是申请号为201910733001.x、申请日为2019-08-09、发明名称为“含有并环基团的咪唑并嘧啶类化合物、其制备方法及用途”申请的分案申请。
技术领域
2.本发明涉及一种含有并环基团的咪唑并嘧啶类化合物，包含其的药物组合物和药盒，其制备方法及其在制备由tgfβr1介导的疾病(尤其是癌症，例如肝癌)的药物中的用途。


背景技术：

3.转化生长因子-β(tgf-β)是一种多功能细胞因子，其调节各种细胞应答，例如细胞增殖、分化、迁移和凋亡。tgf-β超家族包含tgf-β1、tgf-β2、tgf-β3、活化素、抑制素、骨形态发生蛋白等。tgf-β通过两种高保守性单跨膜丝氨酸/苏氨酸激酶转导信号，即tgfβr1和tgfβr2(acs med chem lett.2018,9,1117)。
4.smads是细胞内重要的tgf-β信号转导和调节分子，可以将tgf-β信号直接由细胞膜转导至细胞核内，tgf-β/smads信号通路在肿瘤的发生和发展中起到重要的作用。在tgf-β/smads信号转导中，活化的tgf-β首先与细胞膜表面的tgfβr2结合，形成异源二聚体复合物，tgfβr1识别并结合该二元复合物。活化的tgfβr1进一步磷酸化smad2/smad3蛋白，后者再进一步与smad4结合成异三聚体复合物，这一复合物进入细胞核内与辅助活化/抑制因子协同作用调节靶基因的转录(nature.2003,425,577)。tgf-β/smads信号通路任一环节改变，都会导致信号转导通路的异常(pnas.2019,116,9166)。
5.tgf-β信号通路在包括癌症在内的许多疾病中失调，在胃癌、结肠直肠癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、肝癌、肺癌、宫颈癌和头颈部癌细胞系和肿瘤组织中tgfβr1蛋白水平显著升高。tgf-β信号通路的活化在肿瘤基质中引发明显的病理效应，包括免疫抑制、血管再生和结缔组织增生。此外，tgf-β信号通路能够增强肿瘤细胞的侵袭力，促进上皮细胞向间充质转化以及增强对肿瘤上皮细胞治疗的耐受度(nat neurosci.2014,17,943)。
6.目前，针对tgf-β信号通路关键靶点tgfβr1抑制剂的开发在医药工业界已逐渐得到重视，已公开的专利申请包括wo2002094833a1、wo2009150547a1、wo2017035118a1、wo2018019106a1等。但本领域仍然亟需新的tgfβr1抑制剂，特别是具有高活性、高选择性的tgfβr1抑制剂。


技术实现要素：

7.本发明通过大量的研究，意外地发现了一种含有并环基团的咪唑并嘧啶类化合物，该类化合物可显著抑制tgfβr1的活性，在tgfβr1和tgfβr2之间具有良好的选择性，同时具有良好的药代动力学性质，其作为tgfβr1抑制剂可用于治疗由tgf-β信号通路的引起增殖性病症及细胞凋亡失调性病症，尤其是tgfβr1介导的疾病如癌症，例如肝癌。
8.本发明的第一方面涉及式i所示的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，
[0009][0010]
其中，
[0011]
a选自3-8元杂环烷基和单键；
[0012]
y、z各自独立地选自碳原子和氮原子；
[0013]
r1选自c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，所述c
6-10
芳基或5-10元杂芳基任选地被一个或多个r6取代；
[0014]
r6在每次出现时各自独立地选自氘、氰基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-8
环烷基和3-8元杂环烷基；
[0015]
当a环为3-8元杂环烷基时，r2在每次出现时各自独立地选自氢、氘、氰基、卤素、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、-ora、-nrbrc、-c(o)qra、-c(o)nrbrc、-s(o)qra、-s(o)qnrbrc、-o-(c
2-6
亚烷基-o)
t-ra和-o-c
2-6
亚烷基-nrbrc，所述c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基任选地被一个或多个r7取代；
[0016]
当a为单键时，为r2、z和与z相邻的碳原子共同形成任选地被一个或多个r
10
取代的5-10元杂芳基或c
6-10
芳基；
[0017]r10
在每次出现时各自独立地选自氘、氰基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-8
环烷基和3-8元杂环烷基；
[0018]
r3在每次出现时各自独立地选自氢、氘、卤素、c
1-6
烷基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、-ora、-nrbrc、-c(o)qra和-c(o)nrbrc，所述c
1-6
烷基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基任选地被一个或多个r7取代；
[0019]
r7在每次出现时各自独立地选自氘、卤素、-ora、-nrbrc、-c(o)qra、-c(o)nrbrc、-s(o)qra和-s(o)qnrbrc；
[0020]
r4选自氢、氘、卤素、氰基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-8
环烷基和3-8元杂环烷基；
[0021]
r5选自氢、c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基；
[0022]
ra在每次出现时各自独立地选自氢、氘、-c(o)wr8、-s(o)wr8、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，所述c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基任选地被一个或多个选自以下的基团取代：氘、c
1-6
烷基、卤素、羟基、-nrdre、-c(o)wr9和-s(o)wr9；
[0023]
rb、rc在每次出现时各自独立地选自氢、氘、-c(o)wr8、-s(o)wr8、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，所述c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基被任选地被一个或多个选
自以下的基团取代：氘、c
1-6
烷基、卤素、羟基、-nrdre、-c(o)wr9和-s(o)wr9；或者
[0024]
rb、rc和与其所连接的原子共同形成3-7元环；
[0025]
r8和r9在每次出现时各自独立地选自氢、氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基；
[0026]
rd、re在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基和3-8元杂环烷基；或者
[0027]
rd、re和与其所连接的原子共同形成3-7元环；
[0028]
q、w在每次出现时各自独立地选自1和2；
[0029]
t在每次出现时各自独立地选自1、2、3和4；且
[0030]
m、n各自独立地选自0、1、2和3。
[0031]
另一方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含预防或治疗有效量的本发明的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，以及一种或多种药学可接受的载体。
[0032]
另一方面，本发明提供了一种药盒，其包含：
[0033]
a)本发明的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，或者作为第一药物组合物的本发明的药物组合物；
[0034]
和b)任选存在的包装和/或说明书。
[0035]
另一方面，本发明提供了本发明的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，或者本发明的药物组合物，或者本发明的药盒，其用于治疗由tgfβr1介导的疾病或病症(尤其是癌症，例如肝癌)。
[0036]
另一方面，本发明提供了本发明的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，或者本发明的药物组合物，或者本发明的药盒在制备用于治疗由tgfβr1介导的疾病或病症(尤其是癌症，例如肝癌)的药物中的用途。
[0037]
另一方面，本发明提供了预防或治疗由tgfβr1介导的疾病或病症(尤其是癌症，例如肝癌)的方法，其包括向有此需要的个体给药预防或治疗有效量的本发明的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，或者本发明的药物组合物，或者本发明的药盒。
[0038]
另一方面，本发明提供了制备本发明的化合物的方法，其包括以下反应路线1所示的步骤：
[0039]
反应路线1
[0040][0041]
其中，
[0042]
r1、r2、r3、r4、a、y、z、m、n如上文中所定义；
[0043]
r5为氢；
[0044]
pg为氨基的保护基；且
[0045]
lg为离去基团。
[0046]
所述式e的化合物可通过反应路线2、路线3或专利wo2017035118中的方法制得：
[0047]
反应路线2
[0048][0049]
或者
[0050]
反应路线3
[0051][0052]
其中，
[0053]
r1、r4、lg、pg如上文中所定义，x为卤素；且
[0054]
m选自-snbu3、-snme3、-b(oh)2和
[0055]
定义
[0056]
除非在下文中另有定义，本文中所用的所有技术术语和科学术语的含义意图与本领域技术人员通常所理解的相同。提及本文中使用的技术意图指在本领域中通常所理解的技术，包括那些对本领域技术人员显而易见的技术的变化或等效技术的替换。虽然相信以下术语对于本领域技术人员很好理解，但仍然阐述以下定义以更好地解释本发明。
[0057]
如本文中所使用，术语“包括”、“包含”、“具有”、“含有”或“涉及”及其在本文中的其它变体形式为包含性的(inclusive)或开放式的，且不排除其它未列举的元素或方法步骤。
[0058]
如本文中所使用，术语“烷基”定义为直链或支链的饱和脂肪族烃基。在一些实施方案中，烷基具有1至8个，例如1至4个碳原子。例如，如本文中所使用，术语“c
1-6
烷基”指具有1至6个碳原子的直链或支链的基团(例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基或正己基)，其任选地被一个或多个(诸如1至3个)适合的取代基如卤素取代。
[0059]
如本文中所使用，术语“亚烷基”指直链或支链的二价烷基。
[0060]
如本文中所使用，术语“环烷基”指饱和或部分不饱和的非芳族单环或多环(诸如双环)烃环(例如单环，诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基，或双环，包括螺环、稠合或桥连系统，诸如双环[1.1.1]戊基、双环[2.2.1]庚基、双环[3.2.1]辛基或双环[5.2.0]壬基、十氢化萘基等)，其任选地被一个或多个(诸如1至3个)适合的取代基取代。所述环烷基具有3至15个，例如3至10个碳原子、3至8个碳原子或3至6个碳原子。例如，如本文中所使用，术语“c
3-8
环烷基”指具有3至8个成环碳原子的饱和或不饱和的非芳族单环或多环(诸如双环)烃环(例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基)，其任选地被一
个或多个(诸如1至3个)适合的取代基取代，例如甲基取代的环丙基。
[0061]
如本文中所使用，术语“烷氧基”指通过氧原子连接至母体分子部分的如上文所定义的“烷基”，例如c
1-6
烷氧基、c
1-3
烷氧基或c
3-8
环烷氧基。c
1-6
烷氧基的代表性实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等，所述烷氧基可以任选地被一个或多个(诸如1至3个)相同或不同的取代基取代。
[0062]
如本文中所使用，术语“卤代”或“卤素”基团定义为包括氟、氯、溴或碘。
[0063]
如本文中所使用，术语“卤代烷基”是指被一个或多个(诸如1至3个)相同或不同的卤素原子取代的烷基。例如，术语“c
1-6
卤代烷基”指具有1至6个碳原子的卤代烷基，例如-cf3、-c2f5、-chf2、-ch2f、-ch2cf3、-ch2cl或-ch2ch2cf3等。
[0064]
如本文中所使用，术语“卤代烷氧基”是指被一个或多个(诸如1至3个)相同或不同的卤素原子取代的烷氧基。例如，术语“c
1-6
卤代烷氧基”指具有1至6个碳原子的卤代烷氧基，例如-ocf3、-oc2f5、-ochf2、-och2f、-och2cf3、-och2cl或-och2ch2cf3等。
[0065]
如本文中所使用，术语“杂环烷基”指饱和的单环或双环基团，其在环中具有例如2、3、4、5、6、7、8或9个碳原子和一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)选自o、s、n、s(＝o)、s(＝o)2的含杂原子的基团。所述杂环烷基可以通过所述环中的任一个碳原子或杂原子(如果价态允许)与分子的其余部分连接。3-8元杂环烷基的代表性实例包括但不限于环氧乙烷基、氮丙啶基、氮杂环丁烷基(azetidinyl)、氧杂环丁烷基(oxetanyl)、四氢呋喃基、二氧杂环戊烯基(dioxolinyl)、吡咯烷基、吡咯烷酮基、咪唑烷基、吡唑烷基、四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、二噻烷基(dithianyl)、硫吗啉基、哌嗪基或三噻烷基(trithianyl)。
[0066]
如本文中所使用，术语“芳基”指具有共轭π电子系统的全碳单环或稠合环多环芳族基团。例如，术语“c
6-10
芳基”指含有6至10个碳原子的芳族基团，诸如苯基或萘基。芳基任选地被一个或多个(诸如1至3个)适合的取代基(例如卤素、-oh、-cn、-no2、c
1-6
烷基等)取代。
[0067]
如本文中所使用，术语“杂芳基”指含有至少一个选自n、o和s的杂原子的单环、双环或三环芳族环系，其具有例如5、6、8、9、10、11、12、13或14个环原子，特别是具有1或2或3或4或5或6或9或10个碳原子，并且，另外在每一种情况下可为苯并稠合的。例如，如本文中所使用，术语“5-10元杂芳基”意指具有5-10个环原子的单环、双环或三环芳族环系统，并且其中包含至少一个可以相同或不同的杂原子(所述杂原子是例如n、o或s)。5-10元杂芳基的实例包括但不限于噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基等，以及它们的苯并衍生物；或吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等，以及它们的苯并衍生物。杂芳基任选地被1或多个(诸如1至3个)适合的取代基(例如卤素、c
1-6
烷基等)取代。
[0068]
如本文中所使用，术语“烯基”是指含有至少一个c＝c双键的烃基。烯基可以是直链或支链烯基，并且含有2至15个碳原子。例如本文中“c
2-6
烯基”为含有2至6个碳原子的烯基。烯基的非限制性例子包括乙烯基、丙烯基、正丁烯基、3-甲基丁-2-烯基、正戊烯基、辛烯基和癸烯基。烯基可以是未取代的，也可以被一个或多个相同或不同的取代基取代。
[0069]
如本文中所使用，术语“炔基”是指具有至少一个c≡c三键的烃基。炔基可以是直链或支链炔基，并且含有2至15个碳原子。例如本文中“c
2-6
炔基”为含有2至6个碳原子的炔基。炔基的非限制性实例包括但不限于乙炔基、2-丙炔基、2-丁炔基和1,3-丁二炔基等。炔
基可以是未取代的，也可以被一个或多个相同或不同的取代基取代。
[0070]
术语“取代”指所指定的原子上的一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)氢被从所指出的基团的选择代替，条件是未超过所指定的原子在当前情况下的正常原子价并且所述取代形成稳定的化合物。取代基和/或变量的组合仅仅当这种组合形成稳定的化合物时才是允许的。
[0071]
如果取代基被描述为“任选地被
…
取代”，则取代基可(1)未被取代或(2)被取代。如果取代基的碳被描述为任选地被取代基列表中的一个或多个取代，则碳上的一个或多个氢(至存在的任何氢的程度)可单独和/或一起被独立地选择的取代基替代或未替代。如果取代基的氮被描述为任选地被取代基列表中的一个或多个取代，则氮上的一个或多个氢(至存在的任何氢的程度)可各自被独立地选择的取代基替代或未替代。
[0072]
如果取代基被描述为“独立地选自”一组基团，则各取代基独立于另一者被选择。因此，各取代基可与另一(其他)取代基相同或不同。
[0073]
如本文中所使用，术语“一个或多个”意指在合理条件下的1个或超过1个，例如2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个。
[0074]
除非指明，否则如本文中所使用，取代基的连接点可来自取代基的任意适宜位置。
[0075]
当取代基的键显示为穿过环中连接两个原子的键时，则这样的取代基可键连至该可取代的环中的任一成环原子。
[0076]
本发明还包括所有药学上可接受的同位素标记的化合物，其与本发明的化合物相同，除了一个或多个原子被具有相同原子序数但原子质量或质量数不同于在自然界中占优势的原子质量或质量数的原子替代。适合包含入本发明的化合物中的同位素的实例包括但不限于氢的同位素(例如2h、3h、氘d、氚t)；碳的同位素(例如
11
c、
13
c及
14
c)；氯的同位素(例如
37
cl)；氟的同位素(例如
18
f)；碘的同位素(例如
123
i及
125
i)；氮的同位素(例如
13
n及
15
n)；氧的同位素(例如
15
o、
17
o及
18
o)；磷的同位素(例如
32
p)；及硫的同位素(例如
35
s)。
[0077]
术语“立体异构体”表示由于至少一个不对称中心形成的异构体。在具有一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)不对称中心的化合物中，其可产生外消旋混合物、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单独的非对映异构体。特定个别分子也可以几何异构体(顺式/反式)存在。类似地，本发明的化合物可以两种或更多种处于快速平衡的结构不同的形式的混合物(通常称作互变异构体)存在。互变异构体的代表性实例包括酮-烯醇互变异构体、苯酚-酮互变异构体、亚硝基-肟互变异构体、亚胺-烯胺互变异构体等。要理解，本技术的范围涵盖所有这样的以任意比例(例如60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％)的异构体或其混合物。
[0078]
本发明涵盖本发明的化合物的所有可能的结晶形式或多晶型物，其可为单一多晶型物或多于一种多晶型物的任意比例的混合物。
[0079]
还应当理解，本发明的某些化合物可以游离形式存在用于治疗，或适当时，以其药学上可接受的衍生物形式存在。在本发明中，药学上可接受的衍生物包括但不限于：药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、代谢物或前药，在将它们向需要其的患者给药后，能够直接或间接提供本发明的化合物或其代谢物或残余物。因此，当在本文中提及“本发明的化合物”时，也意在涵盖化合物的上述各种衍生物形式。
[0080]
本发明所用术语“药学上可接受的”是指物质或组合物必须与构成制剂的其他组
分和/或用其治疗的哺乳动物在化学和/或毒理学上相容。
[0081]
本发明的化合物的药学上可接受的盐包括其酸加成盐及碱加成盐。适合的酸加成盐由形成药学上可接受盐的酸来形成。适合的碱加成盐由形成药学上可接受盐的碱来形成。适合的盐的综述参见stahl及wermuth的“handbook of pharmaceutical salts:properties,selection,and use”(wiley-vch,2002)。用于制备本发明的化合物的药学上可接受的盐的方法为本领域技术人员已知的。
[0082]
本发明的化合物可以溶剂合物(优选水合物)的形式存在，其中本发明的化合物包含作为所述化合物晶格的结构要素的极性溶剂，特别是例如水、甲醇或乙醇。极性溶剂特别是水的量可以化学计量比或非化学计量比存在。
[0083]
在本发明的范围内还包括本发明的化合物的代谢物，即在给药本发明的化合物时体内形成的物质。这样的产物可由例如被给药的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、酶解等产生。因此，本发明包括本发明的化合物的代谢物，包括通过使本发明的化合物与哺乳动物接触足以产生其代谢产物的时间的方法制得的化合物。
[0084]
本发明在其范围内进一步包括本发明的化合物的前药，其为自身可具有较小药理学活性或无药理学活性的本发明的化合物的某些衍生物，当被给药至身体中或其上时可通过例如水解裂解转化成具有期望活性的本发明的化合物。通常这样的前药会是所述化合物的官能团衍生物，其易于在体内转化成期望的治疗活性化合物。关于前药的使用的其他信息可参见“pro-drugs as novel delivery systems”，第14卷，acs symposium series(t.higuchi及v.stella)及“bioreversible carriers in drug design,”pergamon press,1987(e.b.roche编辑，american pharmaceutical association)。本发明的前药可例如通过用本领域技术人员已知作为“前-部分(pro-moiety)(例如“design of prodrugs”，h.bundgaard(elsevier,1985)中所述)”的某些部分替代本发明的化合物中存在的适当官能团来制备。
[0085]
本发明还涵盖含有保护基的本发明的化合物。在制备本发明的化合物的任何过程中，保护在任何有关分子上的敏感基团或反应基团可能是必需的和/或期望的，由此形成本发明的化合物的化学保护的形式。这可以通过常规的保护基实现，例如，在protective groups in organic chemistry,ed.j.f.w.mcomie,plenum press,1973；和t.w.greene&p.g.m.wuts,protective groups in organic synthesis,john wiley&sons,1991中所述的那些保护基，这些参考文献通过援引加入本文。使用本领域已知的方法，可以在适当的后续阶段移除保护基。
[0086]
本发明所用术语“室温”是指20℃
±
5℃。
[0087]
本发明所用术语“约”在用于修饰某一数值或数值范围时，是指包括该数值或数值范围以及该数值或数值范围的本领域技术人员可接受的误差范围，例如该误差范围为
±
10％、
±
5％、
±
4％、
±
3％、
±
2％、
±
1％、
±
0.5％等。
[0088]
本发明所用术语“药物组合物”包括包含治疗有效量的本发明的化合物的产品，以及直接地或间接地由本发明的化合物的组合产生的任何产品。
[0089]
化合物
[0090]
本发明的一个目的在于提供一种式i所示的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，
[0091][0092]
其中，
[0093]
a选自3-8元杂环烷基和单键；
[0094]
y、z各自独立地选自碳原子和氮原子；
[0095]
r1选自c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，所述c
6-10
芳基或5-10元杂芳基任选地被一个或多个r6取代；
[0096]
r6在每次出现时各自独立地选自氘、氰基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-8
环烷基和3-8元杂环烷基；
[0097]
当a环为3-8元杂环烷基时，r2在每次出现时各自独立地选自氢、氘、氰基、卤素、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、-ora、-nrbrc、-c(o)qra、-c(o)nrbrc、-s(o)qra、-s(o)qnrbrc、-o-(c
2-6
亚烷基-o)
t-ra和-o-c
2-6
亚烷基-nrbrc，所述c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基任选地被一个或多个r7取代；
[0098]
当a为单键时，为r2、z和与z相邻的碳原子共同形成任选地被一个或多个r
10
取代的5-10元杂芳基或c
6-10
芳基；
[0099]r10
在每次出现时各自独立地选自氘、氰基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-8
环烷基和3-8元杂环烷基；
[0100]
r3在每次出现时各自独立地选自氢、氘、卤素、c
1-6
烷基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基、5-10元杂芳基、-ora、-nrbrc、-c(o)qra和-c(o)nrbrc，所述c
1-6
烷基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基任选地被一个或多个r7取代；
[0101]
r7在每次出现时各自独立地选自氘、卤素、-ora、-nrbrc、-c(o)qra、-c(o)nrbrc、-s(o)qra和-s(o)qnrbrc；
[0102]
r4选自氢、氘、卤素、氰基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-8
环烷基和3-8元杂环烷基；
[0103]
r5选自氢、c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基；
[0104]
ra在每次出现时各自独立地选自氢、氘、-c(o)wr8、-s(o)wr8、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，所述c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基任选地被一个或多个选自以下的基团取代：氘、c
1-6
烷基、卤素、羟基、-nrdre、-c(o)wr9和-s(o)wr9；
[0105]
rb、rc在每次出现时各自独立地选自氢、氘、-c(o)wr8、-s(o)wr8、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，所述c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基被任选地被一个或多个选
自以下的基团取代：氘、c
1-6
烷基、卤素、羟基、-nrdre、-c(o)wr9和-s(o)wr9；或者
[0106]
rb、rc和与其所连接的原子共同形成3-7元环；
[0107]
r8和r9在每次出现时各自独立地选自氢、氨基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基；
[0108]
rd、re在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基和3-8元杂环烷基；或者
[0109]
rd、re和与其所连接的原子共同形成3-7元环；
[0110]
q、w在每次出现时各自独立地选自1和2；
[0111]
t在每次出现时各自独立地选自1、2、3和4；且
[0112]
m、n各自独立地选自0、1、2和3。
[0113]
根据本发明的一些实施方案，a为5-6元杂环烷基。
[0114]
在本发明的一些实施方案中，a选自吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和吗啉基。
[0115]
根据本发明的一些实施方案，当a为3-8元杂环烷基(优选5-6元杂环烷基，例如吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基)时，
[0116]
r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、卤素、c
1-6
烷基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、-ora、-nrbrc、-coora和-c(o)nrbrc，所述c
1-6
烷基、c
3-8
环烷基或3-8元杂环烷基任选地被一个或多个卤素取代；
[0117]
ra在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和c
1-6
卤代烷基；
[0118]
rb、rc在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和-c(o)r8；且
[0119]
r8选自c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基。
[0120]
在本发明的一些实施方案中，当a为3-8元杂环烷基(优选5-6元杂环烷基，例如吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基)时，
[0121]
r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基、5-6元杂环烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基和-nrbrc；
[0122]
rb、rc在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和-c(o)r8；且
[0123]
r8选自c
1-6
烷基和c
3-6
环烷基。在本发明的一些实施方案中，当a为3-8元杂环烷基(优选5-6元杂环烷基，例如吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基)时，
[0124]
r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基、吗啉基、吡咯烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基和-nrbrc；
[0125]
rb、rc在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和-c(o)r8；且
[0126]
r8选自c
1-6
烷基和c
3-6
环烷基。
[0127]
在本发明的一些实施方案中，当a为3-8元杂环烷基(优选5-6元杂环烷基，例如吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基)时，
[0128]
r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、氨基、甲基、乙基、三氟甲基、环丙基、环丁基、环戊基、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基、-nhch3、-n(ch3)2、吗啉基、吡咯烷基、-nhc(o)ch3和
[0129]
在本发明的一些实施方案中，当a为3-8元杂环烷基(优选5-6元杂环烷基，例如吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基)时，
[0130]
r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、氨基、甲基、三氟甲基、环戊基、甲氧基、二氟甲氧基、-nhch3、-n(ch3)2、吗啉基、吡咯烷基、-nhc(o)ch3和
[0131]
根据本发明的一些实施方案，a为单键。
[0132]
根据本发明的一些实施方案，当a为单键时，
[0133]
为其中b为任选地被一个或多个r
10
取代的5-6元杂芳基或c
6-10
芳基。
[0134]
在本发明的一些实施方案中，当a为单键时，b为未被取代的5-6元杂芳基或c
6-10
芳基。
[0135]
在本发明的一些实施方案中，当a为单键时，b为呋喃环或苯环。
[0136]
根据本发明的一些实施方案，y为氮原子。
[0137]
根据本发明的一些实施方案，z为碳原子。
[0138]
根据本发明的一些实施方案，r1为任选地被一个或多个r6取代的5-10元杂芳基。
[0139]
在本发明的一些实施方案中，r1为任选地被一个或多个r6取代的5-6元杂芳基。
[0140]
在本发明的一些实施方案中，r1为任选地被一个或多个r6取代的6元杂芳基。
[0141]
在本发明的一些实施方案中，r1为任选地被一个或多个r6取代的吡啶基。
[0142]
在本发明的一些实施方案中，r1为任选地被c
1-6
烷基或c
1-6
卤代烷基取代的6元杂芳基。
[0143]
在本发明的一些实施方案中，r1为任选地被c
1-6
烷基或c
1-6
卤代烷基取代的吡啶基。
[0144]
在本发明的一些实施方案中，r1为被c
1-6
烷基或c
1-6
卤代烷基取代的吡啶基。
[0145]
在本发明的一些实施方案中，r1为被甲基、二氟甲基或三氟甲基取代的吡啶基。
[0146]
在本发明的一些实施方案中，r1选自和其中波浪线表示该基团与分子其余部分的连接点。
[0147]
在本发明的一些实施方案中，r1为任选地被c
1-6
烷基取代的吡啶基。
[0148]
在本发明的一些实施方案中，r1为被c
1-6
烷基取代的吡啶基。
[0149]
在本发明的一些实施方案中，r1为被甲基取代的吡啶基。
[0150]
在本发明的一些实施方案中，r1为其中波浪线表示该基团与分子其余部分的连接点。
[0151]
根据本发明的一些实施方案，r3在每次出现时各自独立地选自氢、氘、c
1-6
烷基、卤代c
1-6
烷基、-c(o)ra、-coora和-c(o)nrbrc，ra、rb和rc各自独立地选自氢、c
1-6
烷基、c
3-8
环烷
基和3-8元杂环烷基。
[0152]
在本发明的一些实施方案中，r3在每次出现时各自独立地选自氢和c
1-6
烷基。
[0153]
在本发明的一些实施方案中，r3在每次出现时各自独立地选自氢和甲基。
[0154]
根据本发明的一些实施方案，r4选自氢、氘、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基和c
3-8
环烷基。
[0155]
在本发明的一些实施方案中，r4为氢。
[0156]
根据本发明的一些实施方案，r5选自氢和c
1-6
烷基。
[0157]
在本发明的一些实施方案中，r5为氢。
[0158]
根据本发明的一些实施方案，m、n各自独立地选自0、1和2。
[0159]
在本发明的一些实施方案中，m选自0和1。
[0160]
在本发明的一些实施方案中，n为0。
[0161]
在本发明的一些实施方案中，m选自0和1；且n为0。
[0162]
根据本发明的一些实施方案，在式i的化合物中，
[0163]
a为5-6元杂环烷基；
[0164]
r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基、5-6元杂环烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基和-nrbrc；
[0165]
rb、rc在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和-c(o)r8；
[0166]
r8选自c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基；
[0167]
y为氮原子；
[0168]
z为碳原子；
[0169]
r1为任选地被c
1-6
烷基或c
1-6
卤代烷基取代的6元杂芳基；
[0170]
r3在每次出现时各自独立地选自氢和c
1-6
烷基；
[0171]
r4为氢；
[0172]
r5为氢；且
[0173]
m、n各自独立地选自0、1和2。
[0174]
根据本发明的一些实施方案，在式i的化合物中，
[0175]
a选自吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和吗啉基；
[0176]
r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基、吗啉基、吡咯烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基和-nrbrc；
[0177]
rb、rc在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和-c(o)r8；
[0178]
r8选自c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基；
[0179]
y为氮原子；
[0180]
z为碳原子；
[0181]
r1为被c
1-6
烷基取代的吡啶基；
[0182]
r3在每次出现时各自独立地选自氢和c
1-6
烷基；
[0183]
r4为氢；
[0184]
r5为氢；且
[0185]
m、n各自独立地选自0、1和2。
[0186]
根据本发明的一些实施方案，在式i的化合物中，a为单键；
[0187]
为b为未被取代的5-6元杂芳基或c
6-10
芳基；
[0188]
y为氮原子；
[0189]
z为碳原子；
[0190]
r1为任选地被c
1-6
烷基或c
1-6
卤代烷基取代的6元杂芳基；
[0191]
r3在每次出现时各自独立地选自氢和c
1-6
烷基；
[0192]
r4为氢；
[0193]
r5为氢；且
[0194]
m、n各自独立地选自0、1和2。
[0195]
根据本发明的一些实施方案，在式i的化合物中，a为单键；
[0196]
为b为呋喃环或苯环；
[0197]
y为氮原子；
[0198]
z为碳原子；
[0199]
r1为被c
1-6
烷基取代的吡啶基；
[0200]
r3在每次出现时各自独立地选自氢和c
1-6
烷基；
[0201]
r4为氢；
[0202]
r5为氢；且
[0203]
m、n各自独立地选自0、1和2。
[0204]
本发明涵盖对上述优选基团进行任意组合所得的式i的化合物。根据本发明的一些实施方案，本发明的化合物具有式i-1的结构：
[0205][0206]
其中，
[0207]
a为3-8元杂环烷基；
[0208]
r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、卤素、c
1-6
烷基、c
3-8
环烷基、3-8元杂环烷基、-ora、-nrbrc、-coora和-c(o)nrbrc，所述c
1-6
烷基、c
3-8
环烷基或3-8元杂环烷基任选地被一个或多个卤素取代；
[0209]
ra在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和c
1-6
卤代烷基；
[0210]
rb、rc在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和-c(o)r8；
[0211]
r8选自c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基；且
[0212]
r3、r6、m和n如上文所定义。
[0213]
根据本发明的一些实施方案，在式i-1的化合物中，
[0214]
a为5-6元杂环烷基；
[0215]
r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基、5-6元杂环烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基和-nrbrc；
[0216]
rb、rc在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和-c(o)r8；
[0217]
r8选自c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基；
[0218]
r3在每次出现时各自独立地选自氢和c
1-6
烷基；
[0219]
r6选自c
1-6
烷基和c
1-6
卤代烷基；且
[0220]
m、n各自独立地选自0、1和2。
[0221]
根据本发明的一些实施方案，在式i-1的化合物中，
[0222]
a为5-6元杂环烷基；
[0223]
r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基、吗啉基、吡咯烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基和-nrbrc；
[0224]
rb、rc在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和-c(o)r8；
[0225]
r8选自c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基；
[0226]
r3在每次出现时各自独立地选自氢和c
1-6
烷基；
[0227]
r6为c
1-6
烷基；且
[0228]
m、n各自独立地选自0、1和2。
[0229]
根据本发明的一些实施方案，本发明的化合物具有式i-1-1的结构：
[0230][0231]
其中，r2、r3、r6、m和n如上文所定义。
[0232]
根据本发明的一些实施方案，在式i-1-1的化合物中，
[0233]
r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基、吗啉基、吡咯烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基和-nrbrc；
[0234]
rb、rc在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和-c(o)r8；
[0235]
r8选自c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基；
[0236]
r3在每次出现时各自独立地选自氢和c
1-6
烷基；
[0237]
r6为c
1-6
烷基；且
[0238]
m、n各自独立地选自0、1和2。
[0239]
根据本发明的一些实施方案，本发明的化合物具有式i-1-2的结构：
[0240][0241]
其中，r2、r3、r6、m和n如上文所定义。
[0242]
根据本发明的一些实施方案，在式i-1-2的化合物中，
[0243]
r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基、吗啉基、吡咯烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基和-nrbrc；
[0244]
rb、rc在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和-c(o)r8；
[0245]
r8选自c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基；
[0246]
r3在每次出现时各自独立地选自氢和c
1-6
烷基；
[0247]
r6为c
1-6
烷基；且
[0248]
m、n各自独立地选自0、1和2。
[0249]
根据本发明的一些实施方案，本发明的化合物具有式i-1-3的结构：
[0250][0251]
其中，r2、r3、r6、m和n如上文所定义。
[0252]
根据本发明的一些实施方案，在式i-1-3的化合物中，
[0253]
r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基、吗啉基、吡咯烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基和-nrbrc；
[0254]
rb、rc在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和-c(o)r8；
[0255]
r8选自c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基；
[0256]
r3在每次出现时各自独立地选自氢和c
1-6
烷基；
[0257]
r6为c
1-6
烷基；且
[0258]
m、n各自独立地选自0、1和2。
[0259]
根据本发明的一些实施方案，本发明的化合物具有式i-1-4的结构：
[0260][0261]
其中，r2、r3、r6、m和n如上文所定义。
[0262]
根据本发明的一些实施方案，在式i-1-4的化合物中，
[0263]
r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基、吗啉基、吡咯烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基和-nrbrc；
[0264]
rb、rc在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和-c(o)r8；
[0265]
r8选自c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基；
[0266]
r3在每次出现时各自独立地选自氢和c
1-6
烷基；
[0267]
r6为c
1-6
烷基；且
[0268]
m、n各自独立地选自0、1和2。
[0269]
根据本发明的一些实施方案，本发明的化合物具有式i-2的结构：
[0270][0271]
其中，
[0272]
b为未被取代的5-6元杂芳基或c
6-10
芳基；且
[0273]
r6选自c
1-6
烷基和c
1-6
卤代烷基。
[0274]
根据本发明的一些实施方案，在式i-2的化合物中，
[0275]
b为呋喃环或苯环；且
[0276]
r6为c
1-6
烷基。
[0277]
根据本发明的一些实施方案，本发明的化合物选自：
[0278][0279][0280]
制备方法
[0281]
本发明的另一目的在于提供制备本发明的化合物的方法，其包括以下反应路线1所示的步骤：
[0282]
反应路线1
[0283][0284]
其中，
[0285]
r1、r2、r3、r4、a、y、z、m、n如上文中所定义；
[0286]
r5为氢；
[0287]
pg为氨基的保护基；优选地，pg选自甲氧羰基、乙氧羰基、叔丁氧羰基、烯丙氧羰基、9-芴甲氧羰基、苄氧羰基(cbz)、苄基、对甲氧基苄基；更优选地，pg为对甲氧基苄基；且
[0288]
lg为离去基团；优选地，lg选自卤素、甲磺酰氧基、三氟甲磺酰氧基和苯氧基；更优选地，lg选自卤素、苯氧基；特别优选地，lg为氯或苯氧基。
[0289]
步骤1：使化合物e与化合物f发生取代反应以得到化合物g。
[0290]
当lg为氯时，
[0291]
该反应优选在适合的有机溶剂中进行，所述有机溶剂可选自dmf、dma、dmso、n-甲基吡咯烷酮、醚类(例如乙二醇二甲醚、四氢呋喃、二氧六环等)、芳烃类(例如甲苯、二甲苯等)及其任意组合，优选dmso；
[0292]
该反应优选在适合的碱的存在下进行，所述碱包括有机碱或无机碱，所述有机碱可选自三乙胺、dipea、吡啶、nmm、叔丁醇钠、乙酸钾和乙酸钠，优选三乙胺；所述无机碱可选自碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸铯、磷酸钾和磷酸二氢钾，优选碳酸钾；
[0293]
该反应在适合的温度下进行，所述反应温度优选为0-200℃，更优选50-150℃。
[0294]
当lg为苯氧基时，
[0295]
该反应优选在适合的有机溶剂中进行，所述有机溶剂可选自卤代烃类(例如二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷等)、腈类(例如乙腈等)、n-甲基吡咯烷酮、dmf、dma、四氢呋喃、二氧六环、dmso及其任意组合，优选dmso或dmf；
[0296]
该反应优选在适合的碱的存在下进行，所述碱包括有机碱或无机碱，所述有机碱可选自dipea、三乙胺、叔丁醇钾和吡啶，所述无机碱可选自磷酸钾、氢化钠、碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯和氢氧化钠，优选碳酸钾或氢化钠；
[0297]
该反应在适合的温度下进行，所述反应温度优选为0-200℃，更优选25-70℃。
[0298]
步骤2：使化合物g脱除氨基保护基得到式i的化合物。
[0299]
该反应优选在适合的酸的存在下进行，所述酸可选自三氟乙酸和盐酸，优选三氟乙酸。
[0300]
所述反应在适合的温度下进行，所述反应温度优选为0-200℃，更优选20-80℃。
[0301]
上述式e的化合物可通过以下反应路线2、路线3或专利wo2017035118中的方法制得：
[0302]
反应路线2
[0303][0304]
其中，
[0305]
r1、r4、lg、pg如上文中所定义。
[0306]
步骤一：化合物a与化合物b反应生成化合物c。
[0307]
该反应优选在适合的有机溶剂中进行。所述有机溶剂可选自dmf、dma、n-甲基吡咯烷酮、醚类(例如乙二醇二甲醚、四氢呋喃、二氧六环)、芳烃类(例如甲苯、二甲苯)、水及其任意组合，优选dma。
[0308]
该反应在适合的还原剂的存在下进行。所述还原剂可选自无水亚硫酸钠、亚硫酸氢钠和偏重亚硫酸钠；优选地，所述还原剂为亚硫酸氢钠或偏重亚硫酸钠。
[0309]
该反应在适合的温度下进行，所述反应温度优选为0-200℃，更优选90-160℃。
[0310]
步骤二：化合物c与取代试剂发生取代反应得到化合物d。
[0311]
当lg为卤素时，所述取代试剂为卤代试剂。当lg为氯时，所述卤代试剂为三氯氧磷、氯化亚砜、草酰氯，优选三氯氧磷。
[0312]
该反应优选在适合的有机溶剂中进行。当lg为卤素(特别是氯)时，所述有机溶剂可选三氯氧磷、氯化亚砜、草酰氯、dmf、乙腈、醚类(例如乙二醇二甲醚、四氢呋喃、二氧六环等)、二氯甲烷、芳烃类(例如甲苯、二甲苯)及其任意组合，优选三氯氧磷。
[0313]
该反应在适合的温度下进行，所述反应温度优选为0-200℃，优选90-150℃。
[0314]
步骤三：对化合物d的氨基进行保护得到化合物e。
[0315]
该反应中使用的氨基保护剂为对甲氧基苄氯、苄氯、二碳酸二叔丁酯、苄氧羰基氯、甲氧羰基氯、乙氧羰基氯、烯丙氧羰基氯、9-芴甲氧羰基氯，优选对甲氧基苄氯。
[0316]
该反应优选在适合的有机溶剂中进行。所述有机溶剂可选自dmf、dma、n-甲基吡咯烷酮、醚类(例如乙二醇二甲醚、四氢呋喃、二氧六环)、芳烃类(例如甲苯、二甲苯)及其任意组合，优选dmf。
[0317]
该反应优选在适合的碱的存在下进行。所述碱包括有机碱或无机碱，所述有机碱可选自三乙胺、dipea、吡啶、nmm、叔丁醇钠、乙酸钾和乙酸钠，所述无机碱可选自碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸铯、磷酸钾和磷酸二氢钾，优选为碳酸钾。
[0318]
该反应在适合的温度下进行，所述反应温度优选为0-200℃，更优选20-50℃。
[0319]
反应路线3
[0320][0321]
其中，
[0322]
r1、r4、lg、pg如上文中所定义，x为卤素；且
[0323]
m为-snbu3、-snme3、-b(oh)2和
[0324]
步骤一’：对化合物i的氨基进行保护得到化合物j。
[0325]
该反应中使用的氨基保护剂为对甲氧基苄氯、苄氯、二碳酸二叔丁酯、苄氧羰基氯、甲氧羰基氯、乙氧羰基氯、烯丙氧羰基氯、9-芴甲氧羰基氯，优选对甲氧基苄氯。
[0326]
该反应优选在适合的有机溶剂中进行。所述有机溶剂可选dmf、dma、n-甲基吡咯烷酮、醚类(例如乙二醇二甲醚、四氢呋喃、二氧六环)、芳烃类(例如甲苯、苯二甲苯)及其任意组合，优选dmf。
[0327]
该反应优选在适合的碱的存在下进行。所述碱包括有机碱或无机碱，所述有机碱可选自三乙胺、dipea、吡啶、nmm、叔丁醇钠、乙酸钾和乙酸钠，所述无机碱可选自碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸铯、磷酸钾和磷酸二氢钾，优选碳酸钾。
[0328]
该反应在适合的温度下进行，所述反应温度优选为0-200℃，更优选20-90℃。
[0329]
步骤二’：化合物j发生重氮化卤化反应得到化合物k；
[0330]
该反应优选在适合的有机溶剂中进行。所述有机溶剂可选自醚类(例如乙二醇二甲醚、thf、二氧六环及其任意组合)，优选thf。
[0331]
该反应中使用的重氮化试剂可选自亚硝酸钠和亚硝酸异戊酯，优选亚硝酸异戊酯。
[0332]
该反应中使用的卤化试剂可选自二碘甲烷、碘化铜、碘单质和氢碘酸，优选二碘甲烷。
[0333]
该反应在适合的温度下进行，所述反应温度优选为0-200℃，更优选20-90℃。
[0334]
步骤三’：化合物k发生偶联反应得到化合物e；
[0335]
该反应优选在适合的有机溶剂中进行。所述有机溶剂可选自卤代烃类(例如二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷等)、甲醇、乙醇、dmf、乙腈、醚类(例如乙二醇二甲醚、四氢呋喃、二氧六环)、芳烃类(例如甲苯、二甲苯)、水及其任意组合，优选1,2-二氯乙烷。
[0336]
该反应优选在催化剂的存在下进行。所述催化剂优选为钯催化剂，例如四(三苯基膦)钯、乙酸钯、pd2(dba)3、pd(pph3)2cl2、pd(pph3)2cl2二氯甲烷络合物或pd(dppf)cl2，优选pd2(dba)3。
[0337]
该反应在适合的温度下进行，所述反应温度优选为0-200℃，更优选50-150℃。
[0338]
药物组合物和药盒
[0339]
本发明的另一目的在于提供一种药物组合物，其包含预防或治疗有效量的本发明的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，以及一种或多种药学可接受的载体。
[0340]
本发明的另一目的在于提供一种药盒，其包含：
[0341]
a)本发明的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，或者本发明的药物组合物；
[0342]
和b)任选存在的包装和/或说明书。
[0343]
本发明中“药学可接受的载体”是指与治疗剂一同给药的稀释剂、辅剂、赋形剂或媒介物，并且其在合理的医学判断的范围内适于接触人类和/或其它动物的组织而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或与合理的益处/风险比相应的其它问题或并发症。
[0344]
在本发明的药物组合物或药物制剂中可使用的药学上可接受的载体包括但不限于：a)稀释剂，例如水、氢化或部分氢化的植物油或其混合物、玉米油、橄榄油、向日葵油、红花油、鱼油、二十二碳六烯酸或其酯、甘油三酯、ω-3脂肪酸或其衍生物、乳糖、右旋糖、蔗
糖、甘露醇、山梨糖醇、纤维素、钠、葡萄糖、甘氨酸，或其混合物；b)润滑剂，例如二氧化硅、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸钠、硬脂酸镁、油酸钠、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠、聚乙二醇，或其混合物；c)粘合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、碳酸镁、天然糖(诸如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味剂、天然和合成树胶(诸如阿拉伯胶、海藻酸钠)、蜡、聚乙烯吡咯烷酮，或其混合物；d)崩解剂，例如淀粉、琼脂、甲基纤维素、膨润土、黄原胶、海藻酸或其钠盐、泡腾剂，或其混合物；e)吸收剂、着色剂、调味剂和/或甜味剂；f)乳化剂或分散剂，诸如辛酸/癸酸聚乙二醇甘油酯、油酸聚乙二醇甘油酯、油酸甘油酯、二乙二醇单乙酯，或其他可接受的乳化剂：和/或g)增强化合物的吸收的物质，例如环糊精、羟丙基环糊精、聚乙二醇200、聚乙二醇400等。
[0345]
本发明的药物组合物可以系统地作用和/或局部地作用。为此目的，它们可以适合的途径给药，例如通过胃肠外、局部、静脉内、口服、皮下、动脉内、真皮内、经皮、直肠、颅内、腹膜内、鼻内、肌内途径或作为吸入剂给药。
[0346]
对于这些给药途径，可以适合的剂型给药本发明的药物组合物。所述剂型包括但不限于片剂、胶囊剂、锭剂、硬糖剂、散剂、喷雾剂、乳膏剂、软膏剂、栓剂、凝胶剂、糊剂、洗剂、软膏剂、水性混悬剂、可注射溶液剂、酏剂、糖浆剂等。
[0347]
当口服给药时，可将本发明的药物组合物制成任意口服可接受的制剂形式，包括但不限于片剂、胶囊剂、水溶液剂、水混悬剂等。其中，片剂中使用的载体一般包括乳糖和玉米淀粉，另外也可加入润滑剂如硬脂酸镁。胶囊剂中使用的稀释剂一般包括乳糖和干燥玉米淀粉。水混悬剂则通常是通过将活性成分与适宜的乳化剂和助悬剂混合而制成的。任选地，以上口服制剂中还可加入一些甜味剂、芳香剂、着色剂等。
[0348]
当局部给药时，可将本发明的药物组合物制成适当的软膏剂、洗剂或乳膏剂形式，其中通过将活性成分悬浮或溶解于一种或多种载体中而制得的。软膏剂中使用的载体包括但不限于：矿物油、液体凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧化乙烯、聚氧化丙烯、乳化蜡和水。洗剂或乳膏剂中使用的载体包括但不限于：矿物油、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯(如吐温60)、2-辛基十二烷醇、苄醇和水。
[0349]
本发明的药物组合物还可以无菌注射剂的形式给药，包括无菌注射水或油混悬剂、或者无菌注射水或油溶液剂。其中，可使用的载体和溶剂包括但不限于：水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。另外，灭菌的非挥发油也可用作溶剂或悬浮介质，如单甘油酯或二甘油酯。
[0350]
本发明的药物组合物可以包含0.01mg至1000mg的本发明的化合物。
[0351]
在一些实施方案中，本发明提供制备本发明的药物组合物的方法，所述方法包括将本发明的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药与一种或多种药学上可接受的载体组合。
[0352]
本发明的药物组合物可以任选地与在治疗各种疾病中至少有一定效果的其它药剂联合给药。在一些实施方案中，本发明提供同时、分开或依次用于治疗的本发明化合物与额外治疗剂的组合制剂。
[0353]
治疗方法和用途
[0354]
本发明的另一目的在于提供本发明的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，或者本发明的药物组合
物，或者本发明的药盒，其用于预防或治疗由tgfβr1介导的疾病或病症。
[0355]
本发明的另一目的在于提供本发明的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，或者本发明的药物组合物，或者本发明的药盒在制备用于预防或治疗由tgfβr1介导的疾病或病症的药物中的用途。
[0356]
本发明的另一目的在于提供预防或治疗由tgfβr1介导的疾病或病症的方法，其包括向有此需要的个体给药预防或治疗有效量的本发明的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，或者本发明的药物组合物，或者本发明的药盒。
[0357]
根据本发明的一些实施方案，所述由tgfβr1介导的疾病或病症为癌症，例如肺癌、结直肠癌、多发性骨髓瘤、急性骨髓性白血病、t-急性淋巴母细胞性白血病、胰腺癌、肝癌、神经母细胞瘤、乳腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、其它实体肿瘤或其它血液癌症。
[0358]
如本文中所使用的术语“有效量”是指足以实现所需预防或治疗效果的量，例如，实现减轻与待治疗疾病相关的一或多种症状的量。
[0359]
可调整给药方案以提供最佳所需响应。例如，可给药单次推注，可随时间给药数个分剂量，或可如治疗情况的急需所表明而按比例减少或增加剂量。要注意，剂量值可随要减轻的病况的类型及严重性而变化，且可包括单次或多次剂量。要进一步理解，对于任何特定个体，具体的给药方案应根据个体需要及给药组合物或监督组合物的给药的人员的专业判断来随时间调整。
[0360]
所给药的本发明的化合物的量会取决于所治疗的个体、病症或病况的严重性、给药的速率、化合物的处置及处方医师的判断。一般而言，有效剂量为约0.001mg/千克体重/天至约10000mg/千克体重/天。在合适的情况下，有效剂量为约0.01mg/千克体重/天至约1000mg/千克体重/天。可以每天、每两天或每三天给药约0.01至1000mg/kg受试者体重，通常0.1至500mg/kg受试者体重。示例性的治疗方案为每天一次或多次或每周一次或多次或每月一次或多次给药。通常多次给予所述制剂，单次剂量之间的间隔可以是每天、每周、每月或每年。或者，可以缓释制剂的形式给予所述制剂，在这种情况下，需要较低的给药频率。剂量和频率根据制剂在受试者中的半衰期而不同。也可以根据是预防性处理还是治疗性处理而不同。在预防性应用中，以相对低频率的间隔长期给予相对低的剂量。在治疗性应用中，有时需要以相对短的间隔给予相对高的剂量，直至疾病的进展被延缓或停止，并优选地直至个体表现出疾病症状的部分或完全改善，在此之后，可以给予患者预防方案。
[0361]
所给药的本发明的化合物的量会取决于所治疗的个体、病症或病况的严重性、给药的速率、化合物的处置及处方医师的判断。
[0362]
本发明所用的术语“治疗”目的是减轻或消除所针对的疾病状态或病症。如果受试者按照本文所述方法接受了治疗量的化合物、其光学异构体或其药学上可接受的盐或其药物组合物，该受试者一种或多种指征和症状表现出可观察到的和/或可检测出的降低或改善，则受试者被成功地“治疗”了。还应当理解，所述的疾病状态或病症的治疗的不仅包括完全地治疗，还包括未达到完全地治疗，但实现了一些生物学或医学相关的结果。
[0363]“治疗”表示本发明化合物的任何给药，包括：
[0364]
(1)在可能有疾病倾向、但是尚未经历或显示疾病病理学或症状学的动物中防止
疾病发生；
[0365]
(2)在正在经历或显示疾病病理学或症状学的动物中抑制疾病(也就是阻止病理学和/或症状学的进一步发展)；或者
[0366]
(3)在正在经历或显示疾病病理学或症状学的动物中改善疾病(也就是逆转病理学和/或症状学)。
[0367]
如本文所使用的“个体”包括人或非人动物。示例性人个体包括患有疾病(例如本文所述的疾病)的人个体(称为患者)或正常个体。本发明中“非人动物”包括所有脊椎动物，例如非哺乳动物(例如鸟类、两栖动物、爬行动物)和哺乳动物，例如非人灵长类、家畜和/或驯化动物(例如绵羊、犬、猫、奶牛、猪等)。
具体实施方式
[0368]
为了使本发明的目的和技术方案更加清楚，以下结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述。但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，均按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
[0369]
在常规的合成法以及实施例和中间体合成例中，各缩写的含义如下表所示。
[0370][0371]
以下的实施例中记载的化合物的结构通过核磁共振(1h-nmr)或质谱(ms)来确定。
[0372]
核磁共振(1h-nmr)的测定仪器使用bruker 400mhz核磁共振仪，测定溶剂为氘代
甲醇(cd3od)、氘代氯仿(cdcl3)，六氘代二甲基亚砜(dmso-d6)；内标物质为四甲基硅烷(tms)。
[0373]
以下的实施例中的核磁共振(nmr)图谱中的缩写代表的含义如下：
[0374]
s：单峰(singlet)、d：二重峰(doublet)、t：三重峰(triplet)、q：四重峰(quartet)、dd：双二重峰(double doublet)、qd：四二重峰(quartet doublet)、ddd：双双二重峰(double double doublet)、ddt：双双三重峰(double double triplet)、dddd：双双双二重峰(double double double doublet)、m：多重峰(multiplet)、br：宽峰(broad)、j：偶合常数、hz：赫兹、dmso-d6：氘化二甲基亚砜。
[0375]
全部化学位移(δ)值以百万分之一(ppm)的单位给出。
[0376]
质谱(ms)的测定仪器使用agilent(esi)质谱仪，型号为agilent 6120b。
[0377]
本发明的实施例采用如下所示方法进行制备型高效液相色谱纯化。
[0378]
方法a：
[0379]
色谱柱：gelai prep c18 ods 10μm 150
×
450mm
[0380]
流动相a：乙腈；流动相b：水(含有0.05％三氟乙酸)
[0381]
时间[min]流动相a[％]流动相b[％]流速[ml/min]0.0010.090.02007.0010.090.020040.0040.060.0200
[0382]
方法b：
[0383]
色谱柱：gelai prep c18 ods 8μm 45
×
450mm
[0384]
流动相a：乙腈；流动相b：水(含有0.05％三氟乙酸)
[0385]
时间[min]流动相a[％]流动相b[％]流速[ml/min]0.0015.085.0607.0015.085.06050.0060.040.060
[0386]
方法c：
[0387]
色谱柱：sunfire prep c18 obd 5μm 19
×
150mm
[0388]
流动相a：乙腈；流动相b：水(含有0.05％甲酸)
[0389]
时间[min]流动相a[％]流动相b[％]流速[ml/min]0.0010.090.02616.0090.010.026
[0390]
方法d：
[0391]
色谱柱：xbridge prep c18 obd 5μm 19
×
150mm
[0392]
流动相a：乙腈；流动相b：水(含有0.05％碳酸氢铵)
[0393]
时间[min]流动相a[％]流动相b[％]流速[ml/min]0.0010.090.0262.0010.090.02618.00901026
[0394]
方法e：
[0395]
色谱柱：sunfire prep c18 obd 5μm 19
×
150mm
[0396]
流动相a：乙腈；流动相b：水(含有0.05％甲酸)
[0397]
时间[min]流动相a[％]流动相b[％]流速[ml/min]0.0030.070.02816.0070.030.028
[0398]
方法f：
[0399]
色谱柱：waters xbridge prep c18 obd 5μm 19
×
150mm
[0400]
流动相a：乙腈；流动相b：水(含有0.05％甲酸)
[0401]
时间[min]流动相a[％]流动相b[％]流速[ml/min]0.005.095.0284.005.095.02820.0085.015.028
[0402]
方法g：
[0403]
色谱柱：waters xbridge prep c18 obd 5μm 19
×
150mm
[0404]
流动相a：乙腈；流动相b：水(含有0.05％tfa)
[0405]
时间[min]流动相a[％]流动相b[％]流速[ml/min]0.0010.090.02816.0090.010.028
[0406]
方法h：
[0407]
色谱柱：waters xbridge prep c18 obd 5μm 19
×
150mm流动相a：乙腈；流动相b：水(含有0.05％tfa)
[0408]
时间[min]流动相a[％]流动相b[％]流速[ml/min]0.0010.090.0284.0010.090.028
[0409]
实施例
[0410]
实施例1：1-(2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤-6-基)-1,2,3,4-四氢-1,6-萘啶(化合物1)的合成
[0411][0412]
步骤一：1-(9-(4-甲氧基苄基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤-6-基)-1,2,3,4-四氢-1,6-萘啶(化合物1-2)的合成
[0413]
将化合物1-1(100mg,0.24mmol,合成方法参考专利wo2017035118)、1,2,3,4-四氢-1,6-萘啶(47.53mg,0.35mmol)溶于dmf(2ml)中，一次性加入氢化钠(47.23mg,1.18mmol，60％分散在矿物油中)，置于25℃，反应16h。向反应液中加入水(30ml)淬灭反应，
用乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(30ml
×
3)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干溶剂得粗品，将粗品经制备高效液相色谱纯化(方法c)，将制备液冷冻干燥，得标题化合物(10mg)。
[0414]
esi-ms(m/z)：464.2[m+h]
+
。
[0415]
步骤二：1-(2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤-6-基)-1,2,3,4-四氢-1,6-萘啶(化合物1)的合成
[0416]
将化合物1-2(20mg,0.043mmol)溶于三氟乙酸(3ml)中，升温至80℃，反应16h。将反应液减压蒸干溶剂，将粗品经制备高效液相色谱纯化(方法d)，冻干得标题化合物(1.74mg)。
[0417]
其结构表征如下：
[0418]1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.55(s,1h),8.45(s,1h),8.34(s,1h),8.21(d,j＝5.9hz,1h),8.09(d,j＝7.8hz,1h),7.81(t,j＝7.7hz,1h),7.75(d,j＝5.9hz,1h),7.33(d,j＝7.6hz,1h),4.50(t,j＝5.8hz,2h),2.88(t,j＝6.4hz,2h),2.57(s,3h),2.12-1.98(m,2h)。
[0419]
esi-ms(m/z)：344.2[m+h]
+
。
[0420]
实施例2：1-(2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤-6-基)-2,3-二氢-1h-吡啶并[3,4-b][1,4]噁嗪(化合物2)的合成
[0421][0422]
步骤一：1-(9-(4-甲氧基苄基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤-6-基)-2,3-二氢-1h-吡啶并[3,4-b][1,4]噁嗪(化合物2-1)的合成
[0423]
将化合物1-1(50mg,0.12mmol)、2,3-二氢-1h-吡啶并[3,4-b][1,4]噁嗪(24.11mg,0.18mmol)溶于dmf(2ml)中，一次性加入氢化钠(23.61mg,0.59mmol，60％分散在矿物油中)，置于25℃，搅拌反应3h。向反应液中加入水(0.5ml)淬灭反应，将粗品经制备高效液相色谱纯化(方法e)，冻干得标题化合物(30mg)。
[0424]
esi-ms(m/z)：466.2[m+h]
+
。
[0425]
步骤二：1-(2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤-6-基)-2,3-二氢-1h-吡啶并[3,4-b][1,4]噁嗪(化合物2)的合成
[0426]
将化合物2-1(30mg,0.064mmol)溶于三氟乙酸(3ml)中，升温至80℃，反应16h，将反应液缓慢加入甲基叔丁基醚(40ml)中，搅拌0.5h，固体析出，过滤，将固体用水溶解，冻干得标题化合物的三氟乙酸盐(4mg)。
[0427]
其结构表征如下：
[0428]1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.85(s,1h),8.64(s,1h),8.56(s,2h),8.28(d,j＝6.6hz,1h),8.20(d,j＝7.8hz,1h),7.90(t,j＝7.7hz,1h),7.42(d,j＝7.6hz,1h),4.73(t,j＝4.4hz,2h),4.59(t,j＝4.4hz,2h),2.62(s,3h)。
[0429]
esi-ms(m/z)：346.1[m+h]
+
。
[0430]
实施例3：6-(2,3-二氢-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤(化合物3)的合成
[0431][0432]
步骤一：2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤-6-醇(化合物3-3)的合成
[0433]
将化合物3-1(8.64g,71.36mmol)、5-氨基-1h-咪唑-4-甲酰胺(化合物3-2,9g,71.36mmol)溶于dma(150ml)中，加入nahso3(5.57g,53.52mmol)，升温到150℃，反应24h。将反应液冷却至室温，加入水(1.5l)，搅拌0.5h后，过滤，将滤液经制备高效液相色谱纯化(方法a)，冻干得标题化合物(3.1g)。
[0434]
esi-ms(m/z)：228.2[m+h]
+
。
[0435]
步骤二：6-氯-2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤(化合物3-4)的合成
[0436]
将化合物3-3(1.3g,5.72mmol)溶于三氯氧磷(7ml)中，升温到117℃，反应12h。浓缩除去三氯氧磷，将冰水(100ml)加入到浓缩物中，搅拌下用固体碳酸氢钠调节至ph＝8，固体析出，过滤，将滤饼水洗(30ml
×
3)，干燥得标题化合物(0.8g)。
[0437]
esi-ms(m/z)：246.7[m+h]
+
。
[0438]
步骤三：6-氯-9-(4-甲氧基苄基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤(化合物3-5)的合成
[0439]
将化合物3-4(0.8g,3.26mmol)、4-苄氧基氯苄(509.99mg,3.26mmol)、k2co3(900.11mg,6.51mmol)溶于dmf(15ml)中，在25℃下反应12h。将反应液倾入水中，用乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(30ml
×
3)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干溶剂得粗品。将粗品经制备高效液相色谱纯化(方法b)，冻干得标题化合物(527mg)。
[0440]
其结构表征如下:
[0441]1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.83(s,1h),8.26(d,j＝7.8hz,1h),7.90(t,j＝7.8hz,1h),7.42(dd,j＝8.4,3.0hz,3h),6.96
–
6.87(m,2h),5.52(s,2h),3.71(s,3h),2.61(s,3h)。
[0442]
esi-ms(m/z):366.8[m+h]
+
。
[0443]
步骤四：6-(2,3-二氢-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-9-(4-甲氧基苄基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤(化合物3-6)的制备
[0444]
将化合物3-5(100mg,0.27mmol)、2,3-二氢-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶盐酸盐
(46.51mg,0.30mmol)、碳酸钾(75.56mg,0.55mmol)溶于dmso(5ml)中，加热至80℃，反应12h。将反应液冷却至室温，倾入水(20ml)中，固体析出，抽滤，干燥滤饼，得到标题化合物(100mg)。
[0445]
esi-ms(m/z):450.2[m+h]
+
。
[0446]
步骤五：6-(2,3-二氢-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤(化合物3)的制备
[0447]
将化合物3-6(50mg,0.11mmol)溶于三氟乙酸(5ml)中，加热至80℃，反应4h。将反应液冷却至室温，减压浓缩反应液，将浓缩物经制备高效液相色谱纯化(方法f)，冻干得到标题化合物的三氟乙酸盐(8mg)。
[0448]
其结构表征如下：
[0449]1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ:13.71(s,1h),9.39(d,j＝8.0hz,1h),8.63(d,j＝8.0hz,1h),8.53(s,2h),8.23(d,j＝8.0hz,1h),7.89(t,j＝8.0hz,1h),7.41(d,j＝8.0hz,1h),4.99(t,j＝8.0hz,2h),3.45(t,j＝8.0hz,2h),2.66(s,3h)。
[0450]
esi-ms(m/z):330.1[m+h]
+
。
[0451]
实施例4：n-(2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤-6-基)-喹啉-4-胺(化合物18)的合成
[0452][0453]
步骤一：n-(9-(4-甲氧基苄基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤-6-基)-喹啉-4-胺(化合物18-1)的制备
[0454]
将化合物1-1(20mg,0.05mmol)、4-氨基喹啉(14mg,0.09mmol)溶于dmf(2ml)中，加入nah(9.45mg,0.24mmol)，在25℃下搅拌3h，向反应液中加入水(60ml)淬灭反应，固体析出，过滤，干燥滤饼得到标题化合物(20mg)，未经进一步纯化，直接用于下一步反应。
[0455]
esi-ms(m/z):474.2[m+h]
+
。
[0456]
步骤二：n-(2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤-6-基)-喹啉-4-胺(化合物18)的制备
[0457]
将化合物18-1(30mg,0.063mmol)溶于三氟乙酸(3ml)，升温至80℃，反应16h，将反应液冷却至室温，减压浓缩反应液，将浓缩物经制备高效液相色谱纯化(方法d)，冻干得标题化合物(5.0mg)。
[0458]
其结构表征如下：
[0459]1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.83(d,j＝5.1hz,1h),8.51(d,j＝5.1hz,1h),8.38(d,j＝9.8hz,2h),8.09(d,j＝7.8hz,1h),8.02(d,j＝8.2hz,1h),7.82
ꢀ‑
7.72(m,2h),7.65-7.58(m,1h),7.31(d,j＝7.6hz,1h),2.59(s,3h)。
[0460]
esi-ms(m/z):354.2[m+h]
+
。
[0461]
实施例5：n-[2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤-6-基]-呋喃并[3,2-b]吡啶-7-胺(化合物19)的合成
[0462][0463]
步骤一：n-[9-(4-甲氧基苯基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤-6-基]-呋喃并[3,2-b]吡啶-7-胺(化合物19-1)的制备
[0464]
将化合物3-5(50mg,0.14mmol)、呋喃并[3,2-b]吡啶-7-胺(20.17mg,0.15mmol)、碳酸钾(37.8mg,0.27mmol)溶于dmso(1ml)中，加热至80℃，反应12h。将反应液冷却至室温，经制备高效液相色谱纯化(方法g)，冻干得到标题化合物(29mg)。
[0465]
esi-ms(m/z):464.2[m+h]
+
。
[0466]
步骤二：n-[2-(6-甲基吡啶-2-基)-9h-嘌呤-6-基]-呋喃并[3,2-b]吡啶-7-胺(化合物19)的制备
[0467]
将化合物19-1(29mg,0.11mmol)溶于三氟乙酸(1ml)中，加热至80℃，反应6h。将反应液冷却至室温，减压浓缩反应液，将浓缩物经制备高效液相色谱纯化(方法h)，冻干得标题化合物的三氟乙酸盐(3.67mg)。
[0468]
其结构表征如下：
[0469]1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.50(d,j＝5.7hz,3h),8.31(d,j＝2.2hz,1h),8.09(d,j＝7.8hz,1h),7.84(t,j＝7.7hz,1h),7.37(d,j＝7.6hz,1h),7.17(d,j＝2.3hz,1h),2.61(s,3h)。
[0470]
esi-ms(m/z)：343.9[m+h]
+
。
[0471]
药理活性测试
[0472]
试验例1：体外酶学活性抑制试验(tgfβr1)
[0473]
实验方法：根据adp-glo
tm
激酶检测试剂盒(promega，cat v9102)的说明测定本发明化合物对tgfβr1酶活性的抑制作用，步骤如下：
[0474]
将tgfβr1酶与不同浓度的测试化合物(1000nm、100nm、10nm)在30℃下预孵育30min后，加入tgfβr1肽和三磷酸腺苷(atp)启动反应。在30℃下孵育3h后加入adp-glotm试剂，室温下孵育90min后加入激酶检测试剂，室温下孵育30min后检测其化学发光信号值。
[0475]
以溶剂组(dmso)为阴性对照，缓冲液组(不含tgfβr1酶)为空白对照。
[0476]
按照下式计算不同浓度化合物的百分比抑制率：
[0477]
百分比抑制率＝(1-(测试化合物的化学发光信号值-空白对照的化学发光信号值)/(阴性对照的化学发光信号值-空白对照的化学发光信号值))*100％。
[0478]
当百分比抑制率介于30-80％之间时，按照下述公式计算化合物对tgfβr1的半数抑制浓度(ic
50
)：
[0479]
ic
50
＝x
×
(1-百分比抑制率)/百分比抑制率，
[0480]
其中x为化合物的测试浓度。
[0481]
实验结果如下表1所示：
[0482]
表1.本发明的化合物对tgfβr1酶的抑制
[0483]
实施例编号ic
50
(nm)12.47
±
0.1622.92
±
0.2133.47
±
0.07
[0484]
由表1可以看出，本发明化合物对tgfβr1酶具有明显的抑制作用。
[0485]
试验例2：体外酶学活性抑制试验(tgfβr2)
[0486]
实验方法：根据adp-glo
tm
激酶检测试剂盒(promega，cat#v9102)的说明测定本发明化合物对tgfβr2酶活性的抑制作用，步骤如下：
[0487]
将tgfβr2酶与不同浓度的测试化合物(1000nm、100nm、10nm)在30℃下预孵育30min后，加入髓鞘碱性蛋白(mbp)和三磷酸腺苷(atp)启动反应。在30℃下孵育3h后加入adp-glo
tm
试剂，室温下孵育90min后加入激酶检测试剂。室温下孵育30min后检测其化学发光信号值。
[0488]
以溶剂组(dmso)为阴性对照，缓冲液组(不含tgfβr2酶)为空白对照。
[0489]
按照下式计算不同浓度化合物的百分比抑制率：
[0490]
百分比抑制率＝(1-(测试化合物的化学发光信号值-空白对照的化学发光信号值)/(阴性对照的化学发光信号值-空白对照的化学发光信号值))*100％。
[0491]
当百分比抑制率介于30-80％之间时，按照下述公式计算化合物对tgfβr2的半数抑制浓度(ic
50
)或范围：
[0492]
ic
50
＝x
×
(1-百分比抑制率)/百分比抑制率，
[0493]
其中x为化合物的测试浓度。
[0494]
实验结果如下表2所示：
[0495]
表2.本发明的化合物对tgfβr2酶的抑制
[0496]
实施例编号ic
50
(nm)11248.18
±
77.143665.55
±
174.86
[0497]
由表2可以看出，本发明的化合物对tgfβr2具有较弱的抑制活性。
[0498]
由表1和表2可以看出，本发明的化合物对tgfβr1具有高度选择性抑制作用。
[0499]
试验例3：体外细胞活性抑制试验
[0500]
实验方法：根据bright-glo荧光素酶检测试剂盒(promega，cat#e2620)的说明测定本发明化合物对hek293-sbe细胞的抑制作用，步骤如下：
[0501]
将hek293-sbe细胞(bpsbioscience,cat#60653)铺96孔板(10％fbs培养基)，3万/孔，37℃，5％ co2培养过夜。将培养基换成0.5％ fbs培养基，并加入0.5％ fbs培养基稀释的测试化合物，测试化合物终浓度最高为10μm，4倍稀释，共8个浓度梯度。培养4-5小时后，加入10μl tgfβ。tgfβ的终浓度为0.5ng/ml。加入10μl培养基以代替tgfβ作为阴性对照组。空白对照中不加测试化合物，加入tgfβ。每孔加入bright glo试剂，在酶标仪上读取化学发光信号值。
[0502]
按照下述公式计算不同浓度化合物的百分比抑制率：
[0503]
百分比抑制率＝(1-(测试化合物化学发光信号值-空白对照化学发光信号值)/(阴性对照化学发光信号值-空白对照化学发光信号值))*100％。
[0504]
将不同浓度的化合物的百分比抑制率相对于化合物浓度作图，按照四参数模型拟合曲线，通过下式计算ic
50
值：
[0505]
y＝min+(max-min)/(1+(x/ic
50
)^(-hillslope))
[0506]
其中y为百分比抑制率；max和min分别为拟合曲线的最大值与最小值；x为化合物的测试浓度；hillslope为曲线斜率。
[0507]
实验结果如下表3所示：
[0508]
表3.本发明的化合物对hek293-sbe细胞荧光素酶报告基因的抑制作用
[0509]
实施例编号ic
50
(nm)110.79
±
3.7825.08
±
2.7832.67
±
0.73
[0510]
由表3可以看出，本发明的化合物对tgfβ诱导的hek293-sbe细胞荧光素酶报告基因具有显著的抑制作用。
[0511]
试验例4.生化herg抑制试验
[0512]
试验系统：
[0513]
试剂盒：predictor
tm herg fluorescence polarization assay,(thermofisher catalog:pv5365)，
[0514]
试剂盒中含有：
[0515]
阳性对照化合物：herg钾通道阻断剂e-4031；
[0516]
herg细胞膜；
[0517]
亲和性示踪剂tracer和
[0518]
herg缓冲液。
[0519]
试验参数：
[0520]
herg浓度：1
×
[0521]
tracer浓度：1nm
[0522]
孵育时间：2h
[0523]
bmg pherastar fs fp
[0524]
试验方法：
[0525]
按照试剂盒说明书进行试验，步骤如下：
[0526]
测试组：将10μm和1μm的待测化合物分别加入到含有herg细胞膜的微孔板中，每孔中再加入具有高herg亲和性示踪剂tracer，将微孔板在室温孵育2小时后，使用多功能酶标仪检测荧光偏振(excitation：540nm；emission：590nm)值的变化。
[0527]
阳性对照组：用30μm阳性对照化合物e4031代替待测化合物，实验方法与测试组相同。
[0528]
空白对照组：用herg缓冲液代替待测化合物，并且不加herg细胞膜，实验方法与测试组相同。
[0529]
数据处理：
[0530]
根据下列公式，计算本发明的化合物在不同浓度下对herg百分比抑制率，判断化合物的半数抑制浓度(ic
50
)的范围。
[0531]
百分比抑制率＝(1-(待测化合物的荧光偏振值-阳性对照组的荧光偏振值)/(空白对照组的的荧光偏振值-阳性对照组的荧光偏振值))*100％
[0532]
实验结果：
[0533]
采用上述方法测定化合物对herg的抑制，结果如下表4中所示。
[0534]
表4.herg抑制试验结果
[0535]
实施例编号ic
50
(μm)2＞10
[0536]
测试结果表明，本发明化合物与herg亲和性低，与亲和性示踪剂tracer竞争的ic
50
均＞10μm。证明本发明化合物具有herg离子通道相关的心脏毒性风险较低。

技术特征：
1-4的化合物：4的化合物：
9.权利要求7或8所述的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，其中，r2在每次出现时各自独立地选自氢、氰基、c
1-6
烷基、c
3-6
环烷基、吗啉基、吡咯烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
卤代烷氧基和-nr
b
r
c
；r
b
、r
c
在每次出现时各自独立地选自氢、c
1-6
烷基和-c(o)r8；r8选自c
1-6
烷基和c
3-8
环烷基；r3选自氢和c
1-6
烷基；r6为c
1-6
烷基；且m、n各自独立地选自0、1和2。10.权利要求1-9任一项所述化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，其中所述化合物选自：
11.药物组合物，其包含预防或治疗有效量的权利要求1-10中任一项所述的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，以及一种或多种药学可接受的载体。12.药盒，其包含：a)权利要求1-10中任一项所述的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，或者权利要求11所述的药物组合物；和b)任选存在的包装和/或说明书。13.权利要求1-10中任一项所述的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，或者权利要求11所述的药物组合物，或者权利要求12所述的药盒在制备用于预防或治疗由tgfβr1介导的疾病或病症(尤其是癌症，例如肺癌、结直肠癌、多发性骨髓瘤、急性骨髓性白血病、t-急性淋巴母细胞性白血病、胰腺癌、肝癌、神经母细胞瘤、乳腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、其它实体肿瘤或其它血液癌症)的药物中的用途。14.制备权利要求1-10中任一项所述的化合物的方法，其包括反应路线1所示的步骤：反应路线1其中，r1、r2、r3、r4、a、y、z、m、n如1-10中任一项所定义；r5为氢；pg为氨基的保护基；且lg为离去基团。15.权利要求14所述的方法，其中所述式e的化合物是通过反应路线2或路线3制备的：反应路线2
或者反应路线3其中，r1、r4、lg、pg如权利要求14中所定义，x为卤素；且m选自-snbu3、-snme3、-b(oh)2和

技术总结
本发明涉及含有并环基团的咪唑并嘧啶类化合物、其制备方法及用途。具体而言，本发明涉及式I的化合物或其药学可接受的盐、酯、溶剂合物(例如水合物)、立体异构体、互变异构体、多晶型物、代谢物或前药，包含其的药物组合物和药盒，其制备方法及其在制备用于预防或治疗由TGFβR1介导的疾病或病症(尤其是癌症，例如肝癌)的药物中的用途。例如肝癌)的药物中的用途。


技术研发人员：陈寿军 宋帅 刘春池 张毅涛 邓汉文 田强 宋宏梅 薛彤彤 王晶翼
受保护的技术使用者：四川科伦博泰生物医药股份有限公司
技术研发日：2019.08.09
技术公布日：2023/9/23