用于虾类养殖的含黑水虻粉的改良饲料的制作方法

用于虾类养殖的含黑水虻粉的改良饲料
1.本发明属于含昆虫粉的十足目动物饲喂领域。更具体地涉及一种用于虾类养殖的含黑水虻(hermetia illucens)幼虫粉的改良饲料。该饲料允许改善虾的增重、生长速度和饲料转化率以及对感染的抵抗力。
技术领域
2.虾类养殖是水产养殖的一个分支，受到美国、日本和西欧等地区大量需求的刺激，其商业生产不断增加。绝大多数养殖虾属于对虾科并且属于两个种，凡纳滨对虾(litopenaeus vannamei)和斑节对虾(penaeus monodon)占所有养殖的近80％，为了满足全球需求的增长，生产商必须生产更多的虾，这意味着巨大的养殖成本，特别是在整个养殖周期中饲喂这些动物的成本。用于虾的饲料通常由鱼粉(“fish meal”)组成。除了价格昂贵外，鱼粉还具有明显的生态足迹，因为它是由可枯竭资源生产的，并且种植业和更普遍的水产养殖供给所需的量相当可观。事实上，今天，虾食用大量鱼粉对于它们最好地满足人类消费至关重要。
3.这种单一工业养殖非常容易感染疾病。后者在某些养殖虾群中引起了多次大规模爆发。常见疾病包括严重的肝胰腺坏死综合征或白斑综合征。
4.凡纳滨对虾(litopenaeus vannamei)是世界上产量最大的虾种，2016年产量超过410万吨(fao，2018年)。为了支持凡纳滨对虾行业的发展，有必要找到可持续生产的高效饲料成分，并改善生产系统的效率以便提供更高的产量，同时减少对自然资源的压力。
5.保护该行业的长期潜力和保护自然资源是一项日益严峻的挑战，不仅是在凡纳滨对虾(l.vannamei)生产方面，而且在所有现代饲料生产系统中也是如此。
6.因此近几十年来，植物来源成分已成为水产养殖饲料配方中的常用成分(barrows等人，2007年，gatlin等人，2007年，oliva-teles等人，2015年)。因此，它们已被成功地用来替代这些饲料配方中的一部分鱼粉。然而，植物蛋白对水产养殖饲料存在一定的营养限制：抗营养因子的存在、高纤维水平和高非淀粉多糖水平、脂肪酸不足、必需氨基酸分布不平衡、消化率和适口性下降。此外，用植物性成分完全替代鱼粉会对基本农业资源和环境造成额外压力(例如森林砍伐与大豆种植有关)。因此，大力进行研究以找到表现更好的替代成分。
7.为此，生产商转向鱼粉的新替代品。越来越多的饲料，特别是在鱼类养殖中，添加有昆虫粉。事实上，昆虫粉的生产更加环保，可以来自基于垂直农业模式的养殖，这意味着与其它养殖相比所需的占地面积更小。
8.现有技术报告了使用昆虫粉作为鱼粉替代物的示例。专利cn108576485公开了一种用于饲喂鱼类的由黑水虻(hermetia illucens)昆虫粉构成的饲料。
9.从现有技术中还已知，在十足目动物日粮中添加hi粉可以改善虾苗的抗病性。尤其是文献cn110432381描述了一种用于虾苗的昆虫来源的健康饲料。该饲料含有按重量占比计的以下成分：黑水虻干粉15％-20％、鱼粉5％-10％、花生粉15％-25％、面粉10％-28％、混合油2％-5％、大豆粉5％-15％、玉米粉10％-25％。黑水虻干粉用于改善虾苗的抗
病性、提高生长率并改善成活率。
10.mastoraki等人的文章(2019年)报告了一项两种饲料日粮的对照研究，所述饲料含有昆虫粉，尤其是hi粉，并结合植物粉或鱼粉。在这些试验中，hi粉的添加比例为7.8％。这项研究表明，与含有黄粉虫(tenebrio molitor)粉的饲料相比，用含hi昆虫粉或家蝇(musca domestica)粉和鱼粉的配方饲喂的虾的生长表现有所改善。
11.然而，从现有技术中众所周知的是，与鱼粉相比，以昆虫为基础的饲料，特别是以黑水虻(hermetia illucens)为基础的饲料，当其替代鱼粉时，无法获得合适的增重和最终重量。因此，文章“黑水虻(hermetia illucens)幼虫粉在凡纳滨对虾(litopenaeus vannamei)实用日粮中部分或全部替代海洋鱼粉的评价”(cummins等人，2017年)描述了含有通过乙醇提取获得的hi粉与大豆粉相结合的组合物。在这些试验中，hi粉的添加比例在7％至36％之间。日粮含hi粉的虾中，在生长表现或存活率方面未观察到显着差异。该文章的结论是，用含鱼粉和hi粉饲料饲喂的虾的生长低于用鱼粉饲喂的虾。
12.考虑到当前和未来的饲料挑战，水产养殖在全球范围内是具有前景的解决方案；生产商正在寻找解决方案以改善虾的养殖效率。


技术实现要素：

13.发明人开发出了一种用于虾类养殖的饲料，其含有黑水虻(hermetia illucens)粉并结合鱼粉；相对于基于鱼粉的同等常规饲料，这种饲料允许改善虾的养殖效率。
14.因此，本发明涉及一种用于虾类养殖的饲料，允许改善养殖效率，其含有5％至30％的动物粉来代替传统饲料中5％至30％的鱼粉，所述动物粉由鱼粉和黑水虻(hermetia illucens)幼虫粉构成，其特征在于，所述黑水虻(hermetia illucens)幼虫粉在所述动物粉中的占比为40％至60％。
15.本发明还涉及这种饲料用于改善虾的增重、生长速度和饲料转化率以及对感染的抵抗力。
16.本发明的优点
17.发明人开发出了一种用于虾类养殖的饲料，其含有黑水虻(hermetia illucens)(hi)幼虫粉，并且完全出人意料地，允许达到的效率明显高于含鱼粉而不含hi粉的同等饲料。在水产养殖的几个关键参数上观察到了效率的这种改善。
18.首先，当这种饲料用于虾的饲喂时，观察到生长表现显着改善。相比用基于鱼粉的传统饲料饲喂的虾，用这种饲料饲喂的虾增重更高而且快得多。生长速度改善使得十足目动物在更短时间内达到给定重量，这意味着固定生产成本下降。
19.使用这种饲料还改善了饲料转化率。该参数对于控制水产养殖生产成本具有重要的经济意义，因为通过这种饲料，虾达到同样重量只需较少的饲料即可。
20.最后，使用本技术中描述的饲料允许改善养殖过程中对感染的抵抗力。这意味着死亡率的降低。特别是，使用这种饲料允许提高对病毒感染的抵抗力，特别是导致白斑综合征的病毒，这种病毒在虾中很常见，更广泛地出现在十足目动物中。使用这种饲料还允许提高对细菌感染的抵抗力，尤其是导致急性肝胰坏死综合征的弧菌(vibrio)。
具体实施方式
21.本发明的第一个目的涉及一种用于虾类养殖的饲料，允许改善养殖效率，其含有5％至30％的动物粉，所述动物粉由鱼粉和黑水虻(hermetia illucens)幼虫粉构成，其特征在于，所述黑水虻(hermetia illucens)幼虫粉在所述动物粉中的占比为40％至60％。
[0022]“用于虾类养殖的饲料”是指用于水产养殖的任何饲料，用作养殖虾日粮中的饲料。在本发明的范围中，是指含5％至30％动物粉的饲料，所述动物粉由鱼粉和hi粉组成。
[0023]“动物粉”是指利用动物，特别是鱼类和甲壳类动物等海洋动物、昆虫或家禽等其它动物单独或混合制成的粉料。在一种优选实施方案中，动物粉含鱼粉。
[0024]
在一种优选实施方案中，hi粉在动物粉中的占比为50％至60％；这种实施方案特别适于改善虾对感染的抵抗力。
[0025]“改善虾的养殖效率”是指，相比用含鱼粉而不含hi粉的同等传统(或称为“常规”)饲料饲喂的虾的表现，改善增重、生长速度和饲料转化率。此外，效率的概念还包括饲料允许更好地抵抗感染的事实；通过最大限度地减少养殖死亡率，总体生产得到改善。
[0026]
在一种具体实施方案中，虾选自凡纳滨对虾(litopenaeus vannamei)、细角滨对虾(litopenaeus stylirostris)和斑节对虾(penaeus monodon)。
[0027]
在本发明的一种具体实施方案中，hi粉是通过机械制备方法获得的，无需化学处理，无需溶剂提取。这种机械方法可以是机械提取事先破碎并加热的幼虫固体部分，然后干燥和破碎该固体部分以获得粉料。
[0028]
通过机械制备获得的hi粉的主要优点是不经过例如酶解步骤等化学处理步骤转化。hi粉的成分保持其原始形式，因此使得所述成分的浓度更高并且hi粉的性质不变。
[0029]
无论何种方法，用于制造粉料的黑水虻(h.illucens)幼虫优选完整幼虫。
[0030]
在本发明的第二个目的中，用于虾类养殖的饲料，用于改善所述虾类养殖的效率。
[0031]
效率包括所养殖虾类在增重、生长速度和饲料转化率以及对感染的抵抗力上的生长表现。
[0032]
使用根据本发明的饲料改善了所述十足目动物的增重和生长速度。用含有5％至30％的动物粉(由鱼粉和hi粉构成)的饲料饲喂的虾，其特征在于黑水虻(hermetia illucens)(hi)幼虫粉在所述动物粉中的占比为30％至60％，并且生长远比含鱼粉而不含hi粉的同等饲料饲喂的虾快得多。
[0033]
使用根据本发明的饲料还改善了所述虾的饲料转化率。用含有5％至30％的动物粉(由鱼粉和hi粉构成)的饲料饲喂的虾，其特征在于黑水虻(hermetia illucens)(hi)幼虫粉在所述动物粉中的占比为40％至60％，将饲料转化为生物质的能力远比含鱼粉而不含hi粉的同等饲料饲喂的虾高得多。
[0034]
最后，使用根据本发明的饲料改善了所述十足目动物对感染的抵抗力。因此，允许通过防止感染的发生来保护虾的健康。用含有5％至30％的动物粉(由鱼粉和hi粉构成)的饲料饲喂的虾，其特征在于黑水虻(hermetia illucens)(hi)幼虫粉在所述动物粉中的占比为40％至60％，并且相比用含鱼粉而不含hi粉的饲料饲喂的虾更能抵抗感染。
[0035]
尤其注意到对病毒感染的抵抗力更强。病毒感染可以是选自以下病毒的病毒引起的：白斑综合征病毒(wssv)-dbdna、肝胰细小病毒(hpv)-sbdna、单齿杆状病毒(mbv)-dbdna、感染性皮下和造血坏死病毒(ihhnv)-sdna、引起松壳综合征(lss)的病毒-dbdna、兰
辛格病毒(lsnv)-dbrna、鳃相关病毒(gav)-sbrna、引起陶拉综合征的病毒-ssrna、感染性肌坏死病毒(imnv)-dsrna(dbdna＝双链dna；sbdna＝单链dna；sbrna＝单链rna)。
[0036]
在一种优选实施方案中，根据本发明的饲料允许预防白斑综合征致病病毒引起的感染。
[0037]
用根据本发明的饲料饲喂的虾对细菌感染的抵抗力也更强，例如：
[0038]
·
弧菌病，病因如下：弧菌，例如哈维弧菌(v.harveyi)、副溶血弧菌(v.parahaemolyticus)、杀对虾弧菌(v.penaecida)、黑弧菌(v.nigripulcritudo)和创伤弧菌(v.vulnificus)。
[0039]
·
丝状细菌性疾病，病因如下：亮发菌属(leucothrix sp.)、丝硫菌属(thiothrix sp.)、屈挠杆菌属(flexibacter sp.)、噬纤维菌属(cytophaga sp.)、黄杆菌属(flavobacterium sp.)
[0040]
·
坏死性胰腺炎(nph)，病因如下：革兰氏阴性菌、卵胞浆内alpha-变形杆菌(菌种尚未确定)
[0041]
·
分枝杆菌病，病因如下：海洋分枝杆菌(mycobacteriummarinum)、偶然分枝杆菌(mycobacterium fortuitum)和更广义的分枝杆菌属(mycobacterium sp.)。
[0042]
因此该饲料可用于预防以下细菌引起的细菌感染：哈维弧菌(v.harveyi)、副溶血弧菌(v.parahaemolyticus)、杀对虾弧菌(v.penaecida)、黑弧菌(v.nigripulcritudo)、创伤弧菌(v.vulnificus)、亮发菌属(leucothrix sp.)、丝硫菌属(thiothrix sp.)、屈挠杆菌属(flexibacter sp.)、噬纤维菌属(cytophaga sp.)、黄杆菌属(flavobacterium sp.)、革兰氏阴性卵胞浆内alpha-变形杆菌、分枝杆菌属(mycobacterium sp.)，特别是海洋分枝杆菌(mycobacterium marinum)或偶然分枝杆菌(mycobacterium fortuitum)。
[0043]
在一种优选实施方案中，该饲料允许预防发生副溶血弧菌(v.parahaemolyticus)引起的严重肝胰坏死综合征。
[0044]
通过阅读作为描述给出的以下实施例将能够更好地理解本发明，并且任何情况下均不应视为对本发明范围的限制。
附图说明
[0045]
图1：平均增重(％)随摄入饲料变化的图形表示。水平线体现了相对于对照饲料的增重的观察，其中的动物粉全部由鱼粉组成，高达30％(不含hi粉的饲料)。斜线体现了对增重观察到的正向趋势。与同一字母关联的值彼此之间没有显着差异(费歇尔检验，p》0.05)。
[0046]
图2：平均增重(％)随摄入饲料变化的图形表示。水平线体现了相对于对照饲料的增重的观察，其中的动物粉全部由鱼粉组成，高达30％(不含hi粉的饲料)。虚线体现了对增重观察到的正向趋势。与同一字母关联的值彼此之间没有显着差异(费歇尔检验，p》0.05)。
[0047]
图3：平均转化指数随摄入饲料变化的图形表示。水平线体现了相对于对照饲料的转化指数的观察，其中的动物粉全部由鱼粉组成，高达30％(不含hi粉的饲料)。虚线体现了相对于对照饲料的转化指数观察到的趋势。与同一字母关联的值彼此之间没有显着差异(费歇尔检验，p》0.05)。
[0048]
图4：增重(g)、特定增长率(％/d)和平均饲料转化率随摄入饲料变化的图形表示。ctrl对应于对照饲料，其中的动物粉全部由鱼粉组成，高达15％。a、b、c对应于改良饲料，其
中hi粉在鱼粉和hi粉组成的动物粉中的占比分别为30％、50％和70％。与同一字母关联的值彼此之间没有显着差异(费歇尔检验，p》0.05)。
[0049]
图5：ahpns病原体实验过程中收集到的结果的图形表示。“mock”对应于该疾病的阴性对照组，“ctrl”对应于该疾病的阳性对照组。这些组的虾用对照饲料饲喂，其中的动物粉全部由鱼粉组成，高达15％。a、b、c对应于改良饲料，其中hi粉在鱼粉和hi粉组成的动物粉中的占比分别为30％、50％和70％。与同一字母关联的值彼此之间没有显着差异(费歇尔检验，p》0.05)。
[0050]
图6：wssv病原体实验过程中收集到的结果的图形表示。“mock”对应于该疾病的阴性对照组，“ctrl”对应于该疾病的阳性对照组。这些组的虾用对照饲料饲喂，其中的动物粉全部由鱼粉组成，高达15％。a、b、c对应于改良饲料，其中hi粉在鱼粉和hi粉组成的动物粉中的占比分别为30％、50％和70％。与同一字母关联的值彼此之间没有显着差异(费歇尔检验，p》0.05)。
[0051]
实施例
[0052]
实施例1：通过饲喂含黑水虻(hermetia illucens)的改良饲料改善细角滨对虾(l.stylirostris)的养殖效率
[0053]
设备和方法
[0054]
实验条件：对细角滨对虾(l.stylirostris)实施了这项实验。实验区由40个50l水箱及其供水罐组成。所有水箱均采用每小时100％海水更新。通过机械过滤系统确保海水的供应质量。此外，水温调节是通过水罐中的“冷机组”和/或电阻器实现的。只有盐度(35
‰
左右的自然盐度)和光周期未设置连续控制系统。这项实验是采用来自补给池(ifremer/lead-nc)的动物来完成的，初始平均重量为5.83
±
1.23g，密度为7只/水箱。在研究开始前7天实施转移，以使动物适应实验条件。在此期间，对动物进行了个体称重及标记，以确定个体初始重量并允许在整个养殖期间对其进行识别。标记当天，密度降低到6只/水箱。因此，可以在研究期结束时评估最终个体重量和生存率。
[0055]
对照方案：每天(07:30和16:00)监测温度(℃)。每个水箱每周(不包括周末和节假日)还进行5次剩余物虹吸、清理和虾数量计数(生存监测)。必要情况下，记录有关脱换期、动物行为或任何其它重要参数的观察。
[0056]
黑水虻(hermetia illucens)粉的制备
[0057]
利用经过加热、3个阶段的机械分离(机械提取，不使用溶剂)、干燥然后破碎的黑水虻(h.illucens)幼虫获得粉料。
[0058]
幼虫浸入加热至约70℃的水中杀死。将失去活力的幼虫破碎，然后加热至最低90℃。如此获得的产物机械地分离成3个相：固体部分(泥饼)、含水溶性营养物质的液体部分(胶性水)和油。由泥饼、胶性水和抗氧化剂组成的粉料经过干燥处理。粉料的输出含水量在5％至10％之间。最后对粉料进行破碎。碾磨机输出的粉料粒径小于2mm。
[0059]
目标实验饲料的制备和特征：
[0060]
组合物除动物粉和植物粉以外，还含有虾饲料的常规成分，即：油、氨基酸、维生素和矿物。组成如表1所述的饲料1至7，是通过按1:1的比例用hi粉替代对照饲料中所含的一部分鱼粉获得的。这样可以获得约含重量比30％的动物粉(由鱼粉和hi粉构成)的饲料，并且饲料中的hi粉含量不同，等于对照饲料中hi粉替代鱼粉的比例(表2)。对于饲料1至7中的
每一种，对照饲料代表含鱼粉而不含hi粉的同等饲料。
[0061]
饲料对照1234567hi粉036912192833鱼粉30272422191250面粉4040403939383535豆饼1515151515161717谷蛋白55555555
[0062]
表1：以百分比计的饲料组成(主要成分)
[0063]
这项研究中所研究参数的计算公式：
[0064]
(gp；％)＝[(p
最终-p
初始
)*100]/p
初始
，其中p是个体重量；
[0065]-摄入量(ing.；g/只)＝q
摄入
/nb，其中q是饲料摄入量而nb是个体数量；
[0066]-转化指数(ic)＝ing./gp，其对应于饲料的转化率
[0067]
结果
[0068] 动物粉中的hi含量*(％)增重(％)摄入量(g/只)转化指数对照021.24a±
19.014.02a±
0.334.45a±
1.63饲料11027.08
ab
±
23.276.68
ab
±
1.714.47a±
0.43饲料22036.68
bc
±
24.367.81
ab
±
2.113.65a±
1.10饲料32938.01
cd
±
17.848.32b±
2.663.27a±
0.20饲料43944.67c±
22.167.22
ab
±
2.003.06a±
0.23饲料56143.58c±
15.237.56
ab
±
1.603.35a±
0.62饲料68529.66
abd
±
15.377.40
ab
±
1.424.50a±
0.97饲料710016.71a±
12.808.88b±
1.839.81b±
6.95
[0069]
表2：根据不同实验饲料获得的增重、饲料摄入量和转化指数的平均值以及它们的标准差。与同一字母关联的值彼此之间没有显着差异(费歇尔检验，p》0.05)。(*动物粉＝鱼粉+hi粉)
[0070]
对于增重，结果如表2以及图1所示。观察到饲料2至5，其对应于30％的动物粉(鱼粉+hi粉)中hi粉的含量为20％至61％，增重明显高于对照饲料所观察到的增重。特别是，观察到饲料4和5，其特征在于hi粉在动物粉中的占比分别为39％和61％，表明增重几乎比对照组高两倍。
[0071]
关于采食，观察到摄入量高于对照饲料观察到的摄入量，这意味着更高的适口性。结果还表明了饲料摄入量与动物粉中10％至29％的hi粉含量之间在数值上的趋势。特别是，饲料3的摄入量，其对应于动物粉中29％的hi粉含量，明显高于对照饲料的相关摄入量。
[0072]
转化指数允许结合摄入和生长数据进行客观衡量。因此，ic(转化指数)允许提供有关饲料转化为动物生物质的能力的信息。在这项实验中，结果表明，含有黑水虻(hermetia illucens)粉的饲料ic在数值上的趋势低于对照饲料，这意味着对于相同甚至更低的饲料摄入量，相比含鱼粉而不含hi粉的同等饲料，用含hi粉的饲料饲喂的虾增重更高。
[0073]
结论：这些实验，在于按1:1的比例用hi粉替代鱼粉(作为参照采用基于鱼粉的传统饲料)，表明与含有鱼粉而不含hi粉的同等饲料相比，采用动物粉中含有hi粉的饲料时生
长表现更好。
[0074]
实施例2：通过饲喂含黑水虻(hermetia illucens)的改良饲料改善细角滨对虾(l.stylirostris)的养殖效率
[0075]
设备和方法
[0076]
实验条件：对细角滨对虾(l.stylirostris))实施了这项实验。实验区由40个50l水箱及其供水罐组成。所有水箱均采用每小时100％海水更新。通过机械过滤系统确保海水的供应质量。此外，水温调节是通过水罐中的“冷机组”和/或电阻器实现的。只有盐度(35
‰
左右的自然盐度)和光周期未设置连续控制系统。这项实验是采用来自补给池(ifremer/lead-nc)的动物来完成的，初始平均重量为5.83
±
1.23g，密度为7只/水箱。在研究开始前7天实施转移，以使动物适应实验条件。在此期间，对动物进行了个体称重及标记，以确定个体初始重量并允许在整个养殖期间对其进行识别。标记当天，密度降低到6只/水箱。因此，可以在研究期结束时评估最终个体重量和生存率。
[0077]
对照方案：每天(07:30和16:00)监测温度(℃)。每个水箱每周(不包括周末和节假日)还进行5次剩余物虹吸、清理和虾数量计数(生存监测)。必要情况下，记录有关脱换期、动物行为或任何其它重要参数的观察。
[0078]
目标实验饲料的制备和特征：
[0079]
组合物除动物粉和植物粉以外，还含有虾饲料的常规成分，即：油、氨基酸、维生素和矿物。组成如表3所述的饲料1至7，是通过按1:1的比例用hi粉替代对照饲料中所含的一部分鱼粉获得的。这样可以获得约含重量比30％的动物粉(由鱼粉和hi粉构成)的饲料，并且饲料中的hi粉含量不同，等于对照饲料中hi粉替代鱼粉的比例(表4)。对于饲料1至7中的每一种，对照饲料代表含鱼粉而不含hi粉的同等饲料。
[0080][0081][0082]
表3：以百分比计的饲料组成(主要成分)
[0083]
这项研究中所研究参数的计算公式：
[0084]
所研究的参数与实施例1中的相同。
[0085]
结果
[0086] 动物粉中的hi含量*(％)增重(％)摄入量(g/只)转化指数对照038.77a±
16.78.64a±
1.873.56a±
0.53饲料11037.77a±
12.788.48a±
2.083.36a±
0.32饲料21241.25
ab
±
12.508.21a±
1.813.30a±
0.36饲料31441.31
ab
±
14.188.89a+1.833.44a±
0.71饲料41639.73
ab
±
12.199.09a±
1.463.46a±
0.60饲料51845.08
ab
±
14.168.22a±
1.873.04a±
0.44饲料62041.25
ab
±
11.108.64a±
1.833.44a±
0.23
饲料74047.16b±
15.589.42a±
1.893.34a±
0.42
[0087]
表4：根据不同实验饲料获得的增重、饲料摄入量和转化指数的平均值以及它们的标准差。与同一字母关联的值彼此之间没有显着差异(费歇尔检验，p》0.05)。(*动物粉＝鱼粉+hi粉)
[0088]
对于增重，结果如表4以及图2所示。观察到饲料2至7的增重高于对照饲料。即使增重相对于对照饲料没有明显差异，但可以观察到线性趋势。此外，饲料7，其对应于30％的动物粉(鱼粉+hi粉)中hi粉的含量为40％，增重明显高于对照饲料所观察到的增重。
[0089]
关于采食，未观察到明显差异，这意味着同等适口性。
[0090]
最后，关于转化指数，结果的图形表示如图3所示。结果表明，含有黑水虻(hermetia illucens)粉的饲料转化率在数值上的趋势低于对照饲料，这意味着对于相同甚至更低的饲料摄入量，相比用含鱼粉而不含hi粉的饲料饲喂的虾，用含hi粉的饲料饲喂的虾增重更高。
[0091]
结论：这些实验，在于按1:1的比例用hi粉替代鱼粉(作为参照采用基于鱼粉的传统饲料)，表明与不含hi粉的同等饲料相比，采用动物粉中含有40％hi粉的饲料时增重得到改善。与对照饲料的转化指数相比，有关转化指数的结果显示有所下降。
[0092]
实施例3：通过饲喂含黑水虻(hermetia illucens)的改良饲料改善凡纳滨对虾(litopenaeus vannamei)的养殖效率
[0093]
设备和方法
[0094]
实验条件：对凡纳滨对虾(litopenaeus vannamei.)实施了这项实验。
[0095]
实验区由12个290l水箱组成。在含有盐度为20g l-1
的人工海水的水循环系统中养殖虾幼虫。全面的生物/机械过滤器和定期换水允许保持总氨含量(nh3/nh
4+
)低于0.05mg l-1且亚硝酸盐(no
2-)含量低于或等于0.8mg l-1
。通过自动温度控制系统保持恒定水温27℃
±
1℃。共选取1200只平均重量约0.1g的虾，随机组成12组，每组100只。每组置于一个饲喂单元中。每种实验日粮被分配给3个饲喂单元。实验开始时和第28天时测量各组的总重量。
[0096]
实验饲料的制备和特征：
[0097]
hi粉被添加到其它成分(鱼粉、蔬菜粉、氨基酸、维生素和矿物等)中，并将全部成分仔细混匀。为了对所得混合物造粒，加入了饲料粘合剂和水。所得糊状物通过造粒机。过程期间的温度不超过50℃，每种饲料生产2kg。
[0098]
组成如表5所述的饲料a、b、c，是通过按1:1的比例用hi粉替代对照饲料中所含的一部分鱼粉获得的。这样可以获得约含重量比15％的动物粉(由鱼粉和hi粉构成)的饲料，并且饲料中的hi粉含量不同，等于对照饲料中hi粉替代鱼粉的比例(表6)。对于所得饲料中的每一种，对照饲料代表含鱼粉而不含hi粉的同等饲料。
[0099]
饲料对照abchi粉04.57.510.5鱼粉1510.57.54.5小麦面粉35333232豆饼30.532.53333.5
[0100]
表5：以百分比计的饲料组成(主要成分)
[0101]
在实验期间，每天自动分配6次饲料。各组虾根据每日定量获得其各自的日粮，所述每日定量是根据虾的平均重量(标准重量百分比)计算的并根据每组的预期生长情况、观察到的死亡率和饲料消耗量进行调整。
[0102]
根据以下参数对表现进行了评价：
[0103]-增重
[0104]-定生长率(tcs；％/天)＝[(ln p
最终
–
ln p
初始
)*100]/t，其中t是以天计的持续时间
[0105]-饲料转化率
[0106]-成活率
[0107]
这项实验中使用的对虾已证实没有以下病原体的特异性病原体(spf)：imnv、ehp、wssv、tsv、yhv、nhp-b、ihhnv、cmnv、pvnv、mbv、hpv、ahpnd/ems、bp。将三组虾用表5中所述的饲料喂食28天。该程序可以评价这些饲料对虾生长表现的作用。在对病原体的抵抗力测试开始前三天，将虾转移到充有人工海水的10l感染单元中(每个单位1只虾)，以便适应环境。对白斑综合征致病病毒的抵抗力测试，由a、b和c组的虾各形成3个块，每个块10只。块1作为阴性对照(模拟)，块3作为阳性对照，由ctrl组的虾构成。虾经口服途径接种了病毒制剂。接种后，每天两次用各自的日粮饲喂虾。每天两次监测疾病和死亡的临床体征。采用了对导致急性肝胰坏死综合征的弧菌的抵抗力测试的相同方案，不同之处在于病原体是一种细菌并且已通过浸渍接种。
[0108]
病毒制剂
[0109]
在这项实验中使用了wssv thai-1菌株(escobedo-bonilla等人，2005年)。该病毒原种在-70℃下保存。这种菌株事先分离自在泰国自然感染的斑节对虾，并按如下所述一次性接入宽大太平螯虾(pacifastacus leniusculus)(jiravanichpaisal等人，2001年)。将螯虾鳃悬液的冷冻原种(已证实不含虾的其它主要病原体)注射到无特异性病原体(spf)的凡纳滨对虾中以扩增病毒。
[0110]
所得的感染虾的躯体用于制备wssv悬液并立即冷冻。然后根据escobedo bonilla等人(2005)描述的程序确定感染水平。该接种物已被用于通过肌内途径使虾感染。所得的感染虾的躯体用于制备wssv固体接种物，用于口腔感染实验。经过相同程序但接种了无病毒悬液的未感染虾的躯体用于制备固体空白接种物(mock)。
[0111]
细菌制剂
[0112]
这项实验中使用的细菌是从感染ahpns/ems的虾中分离出的副溶血性弧菌(vibrio parahaemolyticus)。更具体地，在这项实验中使用的是ahpnd/ems特异性菌株tw01。这种细菌分离自在泰国感染的虾池。该细菌原种在-70℃下保存。解冻后，原种无菌接种到培养基中并在标准条件下培养。使用tw01的定量悬液通过浸渍对虾接种。
[0113]
结果
[0114]
有关生长表现的结果
[0115]
生长表现结果如表6所示：
[0116] 动物粉中的hi含量*(％)增重(g)特定生长率(％/天)饲料转化率对照00.42a±
0.056.01a±
0.331.70a±
0.17a300.57b±
0.036.83b±
0.141.42
ab
±
0.07b500.61
bc
±
0.017.08
bc
±
0.221.31b±
0.10
c700.70c±
0.037.53c±
0.181.23c±
0.12
[0117]
表6：根据不同实验饲料获得的增重、特定生长率和饲料转换率的平均值及其标准差。与同一字母关联的值彼此之间没有显着差异(费歇尔检验，p》0.05)。(*动物粉＝鱼粉+hi粉)
[0118]
与对照组相比，黑水虻(hermetia illucens)粉饲喂的各组虾，在增重和特定生长率方面的表现显着提高。结果如表6以及图4所示。观察到，与不含hi粉的同等饲料饲喂的虾相比，用饲料a、b、c饲喂的虾的增重和增长速度(通过特定增长率来衡量)总体上显着改善。这种改善与动物粉中黑水虻(hermetia illucens)粉的含量成正比。
[0119]
结果还表明，饲料转化率呈下降趋势，与动物粉中hi粉的含量升高有关。特别是，对应于15％的动物粉中hi粉的含量分别为50％和70％的日粮b和c，其转化率明显低于ctrl对照组日粮。
[0120]
有关ahpns病原体的结果：
[0121] 动物粉中的hi含量*(％)对ahpns的抵抗力测试中的最终死亡率(％)模式00
±
0对照060.0
ac
±
20.0a3068.9a±
1.9b5073.3a±
15.3c7046.7b±
15.3
[0122]
表7：在对ahpns的抵抗力测试中，根据不同实验饲料获得的最终死亡率的平均值以及它们的标准差。与同一字母关联的值彼此之间没有显着差异(费歇尔检验，p》0.05)。(*动物粉＝鱼粉+hi粉)
[0123]
结果如表7以及图5所示。
[0124]
正如预期的那样，ctrl对照组(对疾病呈阳性的对照组)的死亡率在50％至80％之间，而mock对照组(对疾病呈阴性的对照组)的死亡率为0％。这证明了方案的有效性。饲料a和b饲喂组与ctrl组之间的死亡率没有显着差异。这表明用hi粉替代鱼粉不会导致由急性肝胰腺坏死综合征致病细菌引起的死亡率增加。饲料c观察到死亡率显着降低，其对应于动物粉中70％的hi粉含量。
[0125]
这些结果表明，在虾生长日粮中用hi粉替代鱼粉时，存在部分保护作用以保护虾免于感染ahpns。动物粉中55％至60％的hi粉含量(或等同于，hi粉替代鱼粉的比例)，对于此应用是有效的。
[0126]
有关wssv病原体的结果：
[0127] 动物粉中的hi含量(％)对wssv的抵抗力测试中的最终死亡率(％)mock00
±
0对照076.7a±
23.1a3043.3b±
15.3b5056.7
ab
±
15.3c7053.3
ab
±
11.5
[0128]
表8：在wssv抵抗力测试中获得的最终死亡率的平均值及其与不同实验饲料有关的标准差。与同一字母关联的值彼此之间没有显着差异(费歇尔检验，p》0.05)。(*动物粉＝
鱼粉+hi粉)
[0129]
结果如图6所示。
[0130]
正如预期的那样，ctrl对照组(对疾病呈阳性的对照组)的死亡率在50％至80％之间，而mock对照组(对疾病呈阴性的对照组)的死亡率为0％。这证明了方案的有效性。观察到的总体趋势表明用饲料a、b、c饲喂的虾的存活率远高于阳性对照组。从统计学角度，这种改善对于饲料a饲喂组是显着的。这些结果表明，在虾的日粮中添加hi粉可显着改善其对wssv的抵抗力，其中动物粉中的hi粉含量为30％(或等同于，hi粉替代鱼粉的比例)。饲料b和c观察到的死亡率下降表明，在虾生长日粮中用hi粉替代鱼粉时，存在部分保护作用以保护虾免于感染wssv。40％至60％的hi粉替代鱼粉的替代比例对于此应用是有效的。
[0131]
结论：这些实验，在于按1:1的比例用hi粉替代鱼粉(作为参照采用基于鱼粉的传统饲料)，表明与含有鱼粉而不含hi粉的同等饲料相比，采用动物粉中含有hi粉的饲料时生长表现更好。
[0132]
此外，观察到在虾生长日粮中用hi粉替代鱼粉时，存在部分保护作用以保护虾免于感染ahpns和wssv。使用hi粉以替代虾饲料中的鱼粉时，hi粉可有助于改善感染ahpns和wssv病原体的虾的存活率。

技术特征：
1.一种用于虾类养殖的饲料，其允许改善养殖效率，其含有5％至30％的动物粉，所述动物粉由鱼粉和黑水虻幼虫粉构成，其特征在于，所述黑水虻幼虫粉在所述动物粉中的占比为40％至60％。2.根据权利要求1所述的饲料用于改善所述虾增重的用途。3.根据权利要求1所述的饲料用于改善所述虾生长速度的用途。4.根据权利要求1所述的饲料用于改善饲料转化率的用途。5.根据权利要求2至4中任一项所述的用途，其中所述虾选自凡纳滨对虾、细角滨对虾和斑节对虾。6.根据权利要求1所述的饲料，其用于改善所述虾对感染的抵抗力。7.根据权利要求6所述的饲料，其用于根据权利要求6所述的用途，用于改善对病毒感染的抵抗力。8.根据权利要求7所述的饲料，其用于根据权利要求7所述的用途，其中所述病毒感染是由选自以下病毒的病毒引起的：白斑综合征病毒(wssv)、肝胰细小病毒(hpv)、单齿杆状病毒(mbv)、感染性皮下和造血坏死病毒(ihhnv)、引起松壳综合征(lss)、兰辛格病毒(lsnv)、鳃相关病毒(gav)、引起陶拉综合征的病毒、感染性肌坏死病毒(imnv)。9.根据权利要求8所述的饲料，其用于根据权利要求8所述的用途，用于改善对引起白斑综合征的病毒的抵抗力。10.根据权利要求6所述的饲料，其用于根据权利要求6所述的用途，用于改善对细菌感染的抵抗力。11.根据权利要求10所述的饲料，其用于根据权利要求10所述的用途，其中所述细菌感染是由以下细菌引起的：哈维弧菌(v.harveyi)、副溶血弧菌(v.parahaemolyticus)、杀对虾弧菌(v.penaecida)、黑弧菌(v.nigripulcritudo)、创伤弧菌(v.vulnificus)、亮发菌属(leucothrix sp.)、丝硫菌属(thiothrix sp.)、屈挠杆菌属(flexibacter sp.)、噬纤维菌属(cytophaga sp.)、黄杆菌属(flavobacterium sp.)、革兰氏阴性卵胞浆内alpha-变形杆菌、分枝杆菌属(mycobacterium sp.)。12.根据权利要求11所述的饲料，其用于根据权利要求11所述的用途，用于预防发生严重肝胰坏死综合征。13.根据权利要求6至12中任一项所述的饲料，其用于根据权利要求6至12中任一项所述的用途，其中所述虾选自凡纳滨对虾、细角滨对虾和斑节对虾。

技术总结
本发明涉及含动物粉的十足目动物饲喂领域。更具体地，本发明涉及一种用于虾类养殖的改良饲料，其允许获得更好的虾类养殖效率并且含有黑水虻物种的黑兵蝇幼虫粉。含有黑水虻物种的黑兵蝇幼虫粉。


技术研发人员：C
受保护的技术使用者：因诺娃非德
技术研发日：2021.11.19
技术公布日：2023/9/23