Mavorixafor的纯化方法、其盐及有关物质与流程

mavorixafor的纯化方法、其盐及有关物质
技术领域
1.本发明涉及一种mavorixafor的纯化方法、其盐及有关物质。


背景技术：

2.mavorixafor化学名为：(s)-n
’‑
(1h-苯并咪唑-2-基甲基)-n
’‑
(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基丁烷-1,4-二胺，其结构如式1所示。mavorixafor是x4 pharmaceuticals公司开发的一种趋化因子cxcr4受体拮抗剂。mavorixafor作为治疗whim综合征的药物正处于临床iii期阶段。whim综合征是一种罕见的常染色体显性遗传性疾病，表现为疣，低丙种球蛋白血症，细菌感染以及无效生成性慢性粒细胞缺乏的四联症。此外，mavorixafor对肾透明细胞癌、先天性严重中性粒细胞减少症、巨球蛋白血症和三阴性乳腺癌等疾病也处于临床研究阶段。
3.2018年和2019年，mavorixafor在美国获得了治疗whim综合征的孤儿药和突破性治疗指定，并在欧盟获得了相同适应症的孤儿药地位。2020年，该产品在美国获得快速通道指定，用于治疗成人whim综合征。
4.

技术实现要素：

5.本发明所要解决的技术问题是克服现有技术中缺少化合物1的质量控制方法和纯化方法，其可能影响化合物1的终产品质量，从而提供了一种化合物1的纯化方法、其盐及有关物质，进一步还提供了该盐和有关物质的制备方法。
6.本发明提供了一种化合物1的纯化方法，其包括如下步骤：
7.步骤(1)：溶剂中，将待纯化的化合物1产品与h2so4进行如下所示的成盐反应，得化合物4；
[0008][0009]
步骤(2)：溶剂中，将步骤(1)制得的化合物4在碱的存在下进行如下所示的中和反应，得纯化后的化合物1；
[0010][0011]
本发明一些实施方案中，所述待纯化的化合物1产品包含如下化合物2和/或化合物3：
[0012][0013]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应的条件可为本领域该类反应的常规条件。
[0014]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应中，所述溶剂可选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、异丙醇和水中的一种或多种，优选为乙醇。
[0015]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应中，所述溶剂的用量可为本领域该类反应的常规用量。
[0016]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应中，所述溶剂与所述化合物1的体积质量比可为7ml/g-15ml/g，例如为10ml/g。
[0017]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应中，所述h2so4可以质量浓度为95％～98％的硫酸水溶液形式用于成盐反应中。
[0018]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应中，所述h2so4与所述化合物1的摩尔比可为
2:1～2.5:1；优选为2.1:1。
[0019]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应的温度可为本领域该类反应的常规的温度，优选为50℃-78℃。
[0020]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应的各条件，除上述特别说明的以外，都可按照本领域该类反应的条件进行。
[0021]
所述的成盐反应的进程可采用本领域中的常规测试方法(如tlc)进行监控，本领域技术人员可依据监测结果(包括原料转化程度、杂质生成情况等)确定何时终止反应，以获得较佳的反应结果。
[0022]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应还可包括以下步骤：所述成盐反应的反应液溶清后，于20-30℃下搅拌以析出固体，分离出固体即得化合物4。
[0023]
本发明一些实施方案中，所述中和反应的条件可为本领域该类反应的常规条件。
[0024]
本发明一些实施方案中，所述中和反应中，所述溶剂可为本领域该类反应的常规溶剂，例如为水。
[0025]
本发明一些实施方案中，所述中和反应中，所述溶剂的用量可为本领域该类反应的常规用量。
[0026]
本发明一些实施方案中，所述中和反应中，所述的碱可为本领域此类反应常用的碱，优选选自碳酸钠、氢氧化钠、碳酸氢钠和碳酸钾中的一种或多种，更优选为碳酸钠。
[0027]
本发明一些实施方案中，所述中和反应中，所述的碱优选以碱水溶液的形式存在，例如为饱和碳酸钠水溶液。
[0028]
本发明一些实施方案中，所述中和反应中，所述碱的用量可为本领域该类反应的常规用量。
[0029]
本发明一些实施方案中，所述中和反应的温度可为本领域该类反应的常规的温度，例如为10℃-35℃，优选为25℃。
[0030]
本发明一些实施方案中，所述中和反应的各条件，除上述特别说明的以外，都可按照本领域该类反应的条件进行。
[0031]
本发明一些实施方案中，所述中和反应还可包括以下步骤：所述中和反应结束后，分离出反应液中的固体即得纯化后的化合物1。
[0032]
本发明提供一种化合物4：
[0033][0034]
本发明提供一种化合物4的制备方法，其包括以下步骤：溶剂中，化合物1与h2so4进行如下所示的成盐反应，即得化合物4；
[0035][0036]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应的条件可为本领域该类反应的常规条件。
[0037]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应中，所述溶剂可选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、异丙醇和水中的一种或多种，优选为乙醇。
[0038]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应中，所述溶剂的用量可为本领域该类反应的常规用量。
[0039]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应中，所述溶剂与所述化合物1的体积质量比可为7ml/g-15ml/g，例如为10ml/g。
[0040]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应中，所述h2so4可以质量浓度为95％～98％的硫酸溶液形式用于成盐反应中。
[0041]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应中，所述h2so4与所述化合物1的摩尔比可为2:1～2.5:1，优选为2.1:1。
[0042]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应的温度可为本领域该类反应的常规的温度，优选为50℃-78℃。
[0043]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应的各条件，除上述特别说明的以外，都可按照本领域该类反应的条件进行。
[0044]
所述的成盐反应的进程可采用本领域中的常规测试方法(如tlc)进行监控，本领域技术人员可依据监测结果(包括原料转化程度、杂质生成情况等)确定何时终止反应，以获得较佳的反应结果。
[0045]
本发明一些实施方案中，所述成盐反应还可包括以下步骤：所述成盐反应的反应液溶清后，于20-30℃下搅拌以析出固体，分离出固体即得化合物4。
[0046]
本发明提供了一种化合物2：
[0047][0048]
本发明提供了一种化合物2的制备方法，其包括如下步骤：溶剂中，化合物1-1和化合物1-2在碱的存在的下进行取代反应，再于酸的存在下进行脱保护反应，即制得化合物2；
[0049][0050]
本发明一些实施方案中，所述取代反应的条件可为本领域该类反应的常规条件。
[0051]
本发明一些实施方案中，所述取代反应中，所述化合物1-2和化合物1-1的摩尔比可为1:1～2.5:1，优选为1:1～2:1，例如为1.88:1或1.89:1。
[0052]
本发明一些实施方案中，所述取代反应中，所述溶剂可选自甲醇、乙醇、异丙醇与乙腈中的一种或多种，优选为甲醇或乙醇，更优选为乙醇。
[0053]
本发明一些实施方案中，所述取代反应中，所述溶剂的用量可为本领域该类反应的常规用量。
[0054]
本发明一些实施方案中，所述取代反应中，所述溶剂与所述化合物1-1的体积质量比可为7ml/g～15ml/g，例如为10ml/g。
[0055]
本发明一些实施方案中，所述取代反应中，所述碱可选自碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钠、三乙胺和n，n-二异丙基乙胺中的一种或多种，优选为碳酸钾或n，n-二异丙基乙胺，更优选为碳酸钾。
[0056]
本发明一些实施方案中，所述取代反应中，所述碱的用量可为本领域该类反应的常规用量。
[0057]
本发明一些实施方案中，所述取代反应中，所述碱与所述化合物1-1的摩尔比可为1:1～2.5:1，例如为1:1～2:1。
[0058]
本发明一些实施方案中，所述脱保护反应的条件可为本领域该类反应的常规条件。
[0059]
本发明一些实施方案中，所述脱保护反应中，所述酸可选自盐酸和三氟乙酸中的一种或两种，优选为盐酸。
[0060]
本发明一些实施方案中，所述脱保护反应中，所述酸的用量可为本领域该类反应的常规用量，例如将所述脱保护反应反应液的ph调至1～2，需要的酸的用量。
[0061]
本发明一些实施方案中，所述取代反应和所述脱保护反应的反应温度可独立地为本领域该类反应的常规温度，优选为30℃～60℃，更优选为38～42℃。
[0062]
本发明一些实施方案中，所述取代反应和所述脱保护反应的进程可采用本领域中的常规测试方法(如tlc)进行监控，本领域技术人员可依据监测结果(包括原料转化程度、杂质生成情况等)确定何时终止反应，以获得较佳的反应结果。所述取代反应的时间可为10h～20h，优选为14h。所述脱保护反应的时间可为2h～6h，优选为4h。
[0063]
本发明一些实施方案中，所述取代反应和所述脱保护反应完成后，还可以进一步包括后处理步骤，例如：上述反应完成后，经萃灭、萃取、洗涤、干燥、浓缩、柱层析，即得到化合物2。
[0064]
本发明提供一种化合物3：
[0065][0066]
本发明提供了一种化合物3的制备方法，其包括如下步骤：溶剂中，化合物1-1和化合物1-2在碱的存在的下，进行如下所示的取代反应，再于酸的存在下进行脱保护反应，即得化合物3；
[0067][0068]
本发明一些实施方案中，所述取代反应的条件可为本领域该类反应的常规条件。
[0069]
本发明一些实施方案中，所述取代反应中，所述化合物1-2和化合物1-1的摩尔比可为3:1以上，优选为3:1～5:1，例如为3.76:1。
[0070]
本发明一些实施方案中，所述取代反应中，所述溶剂可选自甲醇、乙醇、异丙醇与乙腈中的一种或多种，优选为甲醇或乙醇，更优选为乙醇。
[0071]
本发明一些实施方案中，所述取代反应中，所述溶剂的用量可为本领域该类反应的常规用量。
[0072]
本发明一些实施方案中，所述取代反应中，所述溶剂与所述化合物1-1的体积质量比可为7ml/g-15ml/g，例如为10ml/g。
[0073]
本发明一些实施方案中，所述取代反应中，所述碱可选自碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钠、三乙胺和n，n-二异丙基乙胺中的一种或多种，优选为碳酸钾或n，n-二异丙基乙胺，更优选为碳酸钾。
[0074]
本发明一些实施方案中，所述取代反应中，所述碱的用量可为本领域该类反应的常规用量。
[0075]
本发明一些实施方案中，所述取代反应中，所述碱与所述化合物1-1的摩尔比可为2:1～3.5:1，例如为2:1～3:1。
[0076]
本发明一些实施方案中，所述脱保护反应的条件可为本领域该类反应的常规条件。
[0077]
本发明一些实施方案中，所述脱保护反应中，所述酸可选自盐酸和三氟乙酸中的一种或两种，优选为盐酸。
[0078]
本发明一些实施方案中，所述脱保护反应中，所述酸的用量可为本领域该类反应
的常规用量，例如将所述脱保护反应的ph调至1～2，需要的酸的用量。
[0079]
本发明一些实施方案中，所述取代反应和所述脱保护反应的反应温度可独立地为本领域该类反应的常规温度，优选为30℃～60℃，更优选为38～42℃。
[0080]
所述的取代反应和所述脱保护反应的进程可采用本领域中的常规测试方法(如tlc)进行监控，本领域技术人员可依据监测结果(包括原料转化程度、杂质生成情况等)确定何时终止反应，以获得较佳的反应结果。所述取代反应的时间可为10h～20h，优选为14h。所述脱保护反应的时间可为2h～6h，优选为4h。
[0081]
所述的取代反应和所述脱保护反应完成后，还可以进一步包括后处理步骤，例如：上述反应完成后，经萃灭、萃取、洗涤、干燥、浓缩、柱层析和干燥，即得到化合物3。
[0082]
在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
[0083]
本发明所用试剂和原料均市售可得。
[0084]
本发明的积极进步效果有以下一个或多个：
[0085]
1、分析合成的mavorixafor粗品，发现了关键杂质化合物2和化合物3，并进行结构确证。通过成盐纯化的方法，对mavorixafor粗品进行纯化，hplc控制，杂质《0.2％。
[0086]
2、本发明对mavorixafor的成盐纯化方法能以高纯度制得mavorixafor，无需进行柱层析，后处理简单。
[0087]
3、合成杂质化合物2和化合物3，其作为对照品使用，可以加强对该杂质的控制，有利于mavorixafor的工艺研究及其质量标准的制定。
[0088]
4、杂质化合物2和化合物3的合成未见文献报道，合成方法步骤简单，反应条件温和，可操作性强，经简单纯化即可得到较高纯度的有关物质，也可以为同类化合物的合成提供借鉴。
具体实施方式
[0089]
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
[0090]
以下实施例中，室温指20℃-30℃。
[0091]
化合物1与化合物4化学纯度的hplc测定方法：
[0092]
表1
[0093]
时间流动相a流动相b0mins90％10％5mins40％60％50mins90％10％60mins90％10％
[0094]
流动相a：乙腈；流动相b：含1
‰
三氟醋酸的水溶液；
[0095]
进样量：10μl；柱温：25℃；流速：1ml/mins；波长：268nm；
[0096]
柱子型号：agilent zorbax sb-c8；内径：5μm；填料粒径：4.6mm；柱长：250mm。
[0097]
化合物1与化合物4手性纯度的hplc测定方法：
[0098]
表2
[0099]
时间流动相a流动相b40mins90％10％
[0100]
流动相a：含1
‰
二乙胺的正己烷溶液；流动相b：含1
‰
二乙胺的异丙醇液；
[0101]
进样量：20μl；柱温：35℃；流速：1ml/mins；波长：266nm；
[0102]
柱子型号：chiralpak ay-h，内径：5μm，填料粒径4.6mm，柱长250mm。
[0103]
实施例1：分离得到(s)-n1,n
1-双((1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物2)和(s)-n1,n1,n
4-三((1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物3)
[0104]
向50ml反应瓶中加入化合物1-1(2.656g,12.128mmol)，20ml乙醇，对硝基苯甲醛(2.014g，13.338mmol)，回流反应2h后浓缩备用。
[0105]
向另一50ml反应瓶中加入上述备用浓缩物的25ml乙腈溶液，化合物1-2(3.226g,12.128mmol)和k2co3(1.674g,12.130mmol)，于油浴38-41℃反应14h。停止加热，降至室温，抽滤，浓缩，加20ml水，浓盐酸调ph至1-2，于油浴38-42℃下搅拌4h，抽滤，滤液用饱和碳酸钠水溶液调至ph6左右，10ml二氯甲烷萃取3次。水相继续加少量naoh调ph至10左右，用20ml的dcm萃取3次，合并有机相，用10ml的水洗2次，无水硫酸钠干燥，抽滤，真空浓缩，柱层析纯化，得到3.652g化合物1，收率86.3％，1h-nmr(600mhz,cdcl3+d2o):δ8.54-8.55(d,1h),7.56-7.59(m,2h),7.39-7.42(dd,1h),7.11-7.20(d,3h),3.95-4.08(m,3h),2.79-2.86(m,1h),2.64-2.74(m,2h),2.45-2.54(m,3h),2.16-2.22(m,1h),1.99-2.01(m,1h),1.84-1.95(m,1h),1.65-1.72(m,1h),1.31-1.48(m,4h)；m/z,350[m+h]
+
；得到0.116g黄色泡沫状固体化合物2，收率2％；1h-nmr(600mhz,cdcl3):δ8.52-8.53(m,1h),7.56-7.60(m,4h),7.41-7.42(d,1h),7.18-7.22(m,4h),7.12-7.14(q,1h),3.93-4.08(m,5h),2.96(s,1h),2.89(s,1h),2.84-2.85(m,1h),2.70-2.74(m,1h),2.60-2.64(m,1h),2.47-2.53(m,3h),2.11-2.14(m,1h),2.00-2.04(m,1h),1.81-1.85(m,1h),1.66-1.70(m,1h),1.39-1.46(m,4h)；
13
c nmr(100mhz,cdcl3)δ156.65,155.78,153.25,146.00,137.15,134.40,121.80,121.67,121.39,61.62,49.98,49.10,48.17,46.96,28.68,26.38,25.00,22.84,20.68；hrms(esi)(m/z):[m+h]
+
calcd for c
29h34
n7,480.287；found,480.2871；
[0106]
得到0.038g化合物3，收率0.5％，1h nmr(600mhz,cdcl3+d2o):δ8.52-8.54(m,1h),7.42-7.46(m,7h),7.12-7.25(m,7h),3.87-4.03(d,3h),3.74-3.83(m,4h),2.67-2.81(m,2h),2.30-2.43(m,4h),1.90-1.98(m,2h),1.60-1.68(m,2h),1.41-1.49(m,1h),1.25-1.35(m,3h)；
13
c nmr(100mhz,cdcl3)δ156.97,156.59,152.23,146.20,137.99,135.07,128.85,122.46,122.30,122.23,65.61,63.33,53.53,52.00,51.05,49.19,30.58,28.92,24.83,24.12,20.70,19.19,13.74；ms(esi+):m/z,610([m+h]
+
)；hrms(esi)(m/z):[m+h]
+
calcd for c
37h40
n9,610.3401；found,610.3404。
[0107]
实施例2：制备(s)-n1,n
1-双((1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物2)
[0108]
向50ml反应瓶中加入化合物1-1(2.000g，9.229mmol)，20ml乙醇，sm2(4.636g，17.363mmol)和k2co3(2.552g，18.500mmol)，于油浴38-42℃下反应14h。停止加热，降至室温，抽滤，浓缩，加20ml水，浓盐酸调ph至1-2，于油浴38-42℃下搅拌4h，加少量naoh调ph至
10左右，用20ml的dcm萃取3次，合并有机相，并用10ml的水洗2次，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩，柱层析，得到0.675g淡黄色泡沫状固体化合物2，收率15.4％。1h-nmr(600mhz,cdcl3):δ8.52-8.53(m,1h),7.56-7.60(m,4h),7.41-7.42(d,1h),7.18-7.22(m,4h),7.12-7.14(q,1h),3.93-4.08(m,5h),2.96(s,1h),2.89(s,1h),2.84-2.85(m,1h),2.70-2.74(m,1h),2.60-2.64(m,1h),2.47-2.53(m,3h),2.11-2.14(m,1h),2.00-2.04(m,1h),1.81-1.85(m,1h),1.66-1.70(m,1h),1.39-1.46(m,4h)；
13
c nmr(100mhz,cdcl3)δ156.65,155.78,153.25,146.00,137.15,134.40,121.80,121.67,121.39,61.62,49.98,49.10,48.17,46.96,28.68,26.38,25.00,22.84,20.68；hrms(esi)(m/z):[m+h]
+
calcd for c
29h34
n7,480.287；found,480.2871。
[0109]
实施例3：制备(s)-n1,n
1-双((1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物2)
[0110]
向50ml反应瓶中加入化合物1-1(2.000g，9.229mmol)，20ml甲醇，sm2(4.631g，17.410mmol)和k2co3(2.550g，18.478mmol)，于油浴38-42℃下反应14h。停止加热，降至室温，抽滤，浓缩，加20ml水，浓盐酸调ph至1-2，于油浴38-42℃下搅拌4h，加少量naoh调ph至10左右，用20ml的dcm萃取3次，合并有机相，用10ml的水洗2次，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩，柱层析，得到0.515g淡黄色泡沫状固体化合物2，收率11.8％。1h-nmr(600mhz,cdcl3):δ8.52-8.53(m,1h),7.56-7.60(m,4h),7.41-7.42(d,1h),7.18-7.22(m,4h),7.12-7.14(q,1h),3.93-4.08(m,5h),2.96(s,1h),2.89(s,1h),2.84-2.85(m,1h),2.70-2.74(m,1h),2.60-2.64(m,1h),2.47-2.53(m,3h),2.11-2.14(m,1h),2.00-2.04(m,1h),1.81-1.85(m,1h),1.66-1.70(m,1h),1.39-1.46(m,4h)；
13
c nmr(100mhz,cdcl3)δ156.65,155.78,153.25,146.00,137.15,134.40,121.80,121.67,121.39,61.62,49.98,49.10,48.17,46.96,28.68,26.38,25.00,22.84,20.68；hrms(esi)(m/z):[m+h]
+
calcd for c
29h34
n7,480.287；found,480.2871。
[0111]
实施例4：制备(s)-n1,n
1-双((1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物2)
[0112]
向50ml反应瓶中加入化合物1-1(2.000g，9.229mmol)，20ml乙醇，sm2(4.636g，17.363mmol)和dipea(2.387g，18.504mmol)，于油浴38-42℃下反应14h。停止加热，降至室温，抽滤，浓缩，加20ml水，浓盐酸调ph至1-2，于油浴38-42℃下搅拌4h，加少量naoh调ph至10左右，用20ml的dcm萃取3次，合并有机相，用10ml的水洗2次，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩，柱层析，得到0.386g淡黄色泡沫状固体化合物2，收率8.8％。1h-nmr(600mhz,cdcl3):δ8.52-8.53(m,1h),7.56-7.60(m,4h),7.41-7.42(d,1h),7.18-7.22(m,4h),7.12-7.14(q,1h),3.93-4.08(m,5h),2.96(s,1h),2.89(s,1h),2.84-2.85(m,1h),2.70-2.74(m,1h),2.60-2.64(m,1h),2.47-2.53(m,3h),2.11-2.14(m,1h),2.00-2.04(m,1h),1.81-1.85(m,1h),1.66-1.70(m,1h),1.39-1.46(m,4h)；
13
c nmr(100mhz,cdcl3)δ156.65,155.78,153.25,146.00,137.15,134.40,121.80,121.67,121.39,61.62,49.98,49.10,48.17,46.96,28.68,26.38,25.00,22.84,20.68；hrms(esi)(m/z):[m+h]
+
calcd for c
29h34
n7,480.287；found,480.2871。
[0113]
实施例5：制备(s)-n1,n1,n
4-三((1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物3)
[0114]
向50ml反应瓶中加入化合物1-1(2.000g，9.229mmol)，20ml乙醇，化合物1-2(9.272g，34.727mmol)和k2co3(3.821g，27.688mmol)，于油浴38-42℃下反应14h。停止加热，降至室温，抽滤，浓缩，加20ml水，浓盐酸调ph至1-2，于油浴38-42℃下搅拌4h，加少量naoh调ph至10左右，用20ml的dcm萃取3次，合并有机相，用10ml的水洗2次，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩，柱层析，得到3.215g淡黄色泡沫状固体化合物3，收率57.8％。1h nmr(600mhz,cdcl3+d2o):δ8.52-8.54(m,1h),7.42-7.46(m,7h),7.12-7.25(m,7h),3.87-4.03(d,3h),3.74-3.83(m,4h),2.67-2.81(m,2h),2.30-2.43(m,4h),1.90-1.98(m,2h),1.60-1.68(m,2h),1.41-1.49(m,1h),1.25-1.35(m,3h)；
13
c nmr(100mhz,cdcl3)δ156.97,156.59,152.23,146.20,137.99,135.07,128.85,122.46,122.30,122.23,65.61,63.33,53.53,52.00,51.05,49.19,30.58,28.92,24.83,24.12,20.70,19.19,13.74；ms(esi+):m/z,610([m+h]
+
)；hrms(esi)(m/z):[m+h]
+
calcd for c
37h40
n9,610.3401；found,610.3404。
[0115]
实施例6：制备(s)-n1,n1,n
4-三((1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物3)
[0116]
向50ml反应瓶中加入化合物1-1(2.000g，9.229mmol)，20ml乙醇，化合物1-2(9.270g，34.719mmol)和dipea(3.572g，27.690mmol)，于油浴38-42℃下反应14h。停止加热，降至室温，抽滤，浓缩，加20ml水，浓盐酸调ph至1-2，于油浴38-42℃下搅拌4h，加少量naoh调ph至10左右，用20ml的dcm萃取3次，合并有机相，用10ml的水洗2次，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩，柱层析，得到2.097g淡黄色泡沫状固体化合物3，收率37.7％。1h nmr(600mhz,cdcl3+d2o):δ8.52-8.54(m,1h),7.42-7.46(m,7h),7.12-7.25(m,7h),3.87-4.03(d,3h),3.74-3.83(m,4h),2.67-2.81(m,2h),2.30-2.43(m,4h),1.90-1.98(m,2h),1.60-1.68(m,2h),1.41-1.49(m,1h),1.25-1.35(m,3h)；
13
c nmr(100mhz,cdcl3)δ156.97,156.59,152.23,146.20,137.99,135.07,128.85,122.46,122.30,122.23,65.61,63.33,53.53,52.00,51.05,49.19,30.58,28.92,24.83,24.12,20.70,19.19,13.74；ms(esi+):m/z,610([m+h]
+
)；hrms(esi)(m/z):[m+h]
+
calcd for c
37h40
n9,610.3401；found,610.3404。
[0117]
实施例7：制备(s)-n1,n1,n
4-三((1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物3)
[0118]
向50ml反应瓶中加入化合物1-1(2.000g，9.229mmol)，20ml异丙醇，化合物1-2(9.273g，34.730mmol)和k2co3(3.825g，27.717mmol)，于油浴38-42℃下反应14h。停止加热，降至室温，抽滤，浓缩，加20ml水，浓盐酸调ph至1-2，于油浴38-42℃下搅拌4h，加少量naoh调ph至10左右，用20ml的dcm萃取3次，合并有机相，用10ml的水洗2次，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩，柱层析，得到2.697g淡黄色泡沫状固体化合物3，收率44.3％。1h nmr(600mhz,cdcl3+d2o):δ8.52-8.54(m,1h),7.42-7.46(m,7h),7.12-7.25(m,7h),3.87-4.03(d,3h),3.74-3.83(m,4h),2.67-2.81(m,2h),2.30-2.43(m,4h),1.90-1.98(m,2h),1.60-1.68(m,2h),1.41-1.49(m,1h),1.25-1.35(m,3h)；
13
c nmr(100mhz,cdcl3)δ156.97,156.59,152.23,146.20,137.99,135.07,128.85,122.46,122.30,122.23,65.61,63.33,53.53,52.00,51.05,49.19,30.58,28.92,24.83,24.12,20.70,19.19,13.74；ms(esi+):m/z,610([m+h]
+
)；hrms(esi)(m/z):[m+h]
+
calcd for c
37h40
n9,610.3401；found,610.3404。
[0119]
实施例8：制备(s)-n
’‑
(1h-苯并咪唑-2-基甲基)-n
’‑
(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(粗品化合物1)
[0120]
向50ml反应瓶中加入化合物1-1(2.000g，9.229mmol)，20ml乙醇，2,4-二硝基苯甲醛(1.991g，10.152mmol)，回流反应2h后浓缩备用。
[0121]
向另一50ml反应瓶中加入上述备用浓缩物的25ml乙腈溶液，化合物1-2(2.484g，9.313mmol)和dipea(1.687g，13.052mmol)，于油浴38℃-41℃反应14h。停止加热，降至室温，抽滤，浓缩，加20ml水，浓盐酸调ph至1-2，于油浴38℃-42℃下搅拌4h，抽滤，滤饼为小极性醛基化合物，滤液用饱和碳酸钠水溶液调至ph6左右，10ml二氯甲烷萃取3次。水相继续加少量naoh调ph至10左右，用20ml的dcm萃取3次，合并有机相，用10ml的水洗2次，无水硫酸钠干燥，抽滤，旋干，油泵拉干，得到黑色胶状固体3.072g，粗品化合物1收率101.4％，hplc化学纯度94.94％，hplc光学纯度：100.00％。1h-nmr(600mhz,cdcl3+d2o):δ8.54-8.55(d,1h),7.56-7.59(m,2h),7.39-7.42(dd,1h),7.11-7.20(d,3h),3.95-4.08(m,3h),2.79-2.86(m,1h),2.64-2.74(m,2h),2.45-2.54(m,3h),2.16-2.22(m,1h),1.99-2.01(m,1h),1.84-1.95(m,1h),1.65-1.72(m,1h),1.31-1.48(m,4h)；m/z,350[m+h]
+
。
[0122]
实施例9：(s)-n
1-(1h-苯并咪唑-2-基甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物1)的成盐纯化
[0123][0124]
将按照实施例8制得的粗品化合物1(含3.57％的化合物2和0.86％的化合物3)(3.021g，8.656mmol，化学纯度94.94％，光学纯度100.00％)溶于30ml乙醇，于室温下加浓硫酸(1.781g，18.173mmol)，加毕，升温至回流，反应液溶清后于室温缓慢搅拌析晶，抽滤，烘干，得到4.25g白色固体产物化合物4，收率90.1％，hplc化学纯度：99.97％，hplc光学纯度：100.00％。c
21h27
n5·
2h2so4(化合物4)的元素分析(anal.calcd)：c,46.23；h,5.73；n,12.84；o,23.46；s,11.75.found:c,46.25；h,5.74；n,12.93；s,11.71。
[0125]
化合物4(4.13g，7.578mmol)于饱和碳酸钠溶液中搅拌1h，抽滤，烘干，得到2.643g白色固体化合物1(含0.01％的化合物2)，总收率99.9％，hplc化学纯度：99.97％，hplc光学纯度：100.00％。1h-nmr(600mhz,cdcl3+d2o):δ8.54-8.55(d,1h),7.56-7.59(m,2h),7.39-7.42(dd,1h),7.11-7.20(d,3h),3.95-4.08(m,3h),2.79-2.86(m,1h),2.64-2.74(m,2h),2.45-2.54(m,3h),2.16-2.22(m,1h),1.99-2.01(m,1h),1.84-1.95(m,1h),1.65-1.72(m,1h),1.31-1.48(m,4h)；m/z,350[m+h]
+
。
[0126]
实施例10：(s)-n
1-(1h-苯并咪唑-2-基甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物1)的成硫酸盐纯化
[0127]
将按照实施例8制得的粗品化合物1(含3.62％的化合物2和0.79％的化合物3)(3.025g，8.668mmol，化学纯度94.91％，光学纯度100.00％)溶45ml乙醇，于室温下加浓硫酸(1.783g，18.194mmol)，加毕，升温至回流，反应液溶清后于室温缓慢搅拌析晶，抽滤，烘干，得到4.17g白色固体产物化合物4，收率88.3％，hplc化学纯度：99.85％，hplc光学纯度：
100.00％。c
21h27
n5·
2h2so4(化合物4)的元素分析(anal.calcd)：c,46.23；h,5.73；n,12.84；o,23.46；s,11.75.found:c,46.25；h,5.74；n,12.93；s,11.71。
[0128]
化合物4(4.17g，7.651mmol)于饱和碳酸钠溶液中搅拌1h，抽滤，烘干，得到2.669g白色固体化合物1(含0.02％的化合物2和0.01％化合物3)，总收率100％，hplc化学纯度：99.85％，hplc光学纯度100.00％。1h-nmr(600mhz,cdcl3+d2o):δ8.54-8.55(d,1h),7.56-7.59(m,2h),7.39-7.42(dd,1h),7.11-7.20(d,3h),3.95-4.08(m,3h),2.79-2.86(m,1h),2.64-2.74(m,2h),2.45-2.54(m,3h),2.16-2.22(m,1h),1.99-2.01(m,1h),1.84-1.95(m,1h),1.65-1.72(m,1h),1.31-1.48(m,4h)；m/z,350[m+h]
+
。
[0129]
实施例11：(s)-n
1-(1h-苯并咪唑-2-基甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物1)的成硫酸盐纯化
[0130]
将按照实施例8制得的粗品化合物1(含3.55％的化合物2和0.88％的化合物3)(3.056g，8.756mmol，化学纯度94.85％，光学纯度100.00％)溶24ml甲醇，于室温下加浓硫酸(1.786g，18.224mmol)，加毕，升温至回流，反应液溶清后于室温缓慢搅拌析晶，抽滤，烘干，得到3.56g白色固体产物化合物4，收率68.2％，hplc化学纯度：99.91％，hplc光学纯度：100.00％。c
21h27
n5·
2h2so4(化合物4)的元素分析(anal.calcd)：c,46.23；h,5.73；n,12.84；o,23.46；s,11.75.found:c,46.25；h,5.74；n,12.93；s,11.71。
[0131]
化合物4(3.52g，6.532mmol)于饱和碳酸钠溶液中搅拌1h，抽滤，烘干，得到2.253g白色固体化合物1(含0.02％的化合物2)，总收率100％，hplc化学纯度：99.91％，hplc光学纯度：100.00％。1h-nmr(600mhz,cdcl3+d2o):δ8.54-8.55(d,1h),7.56-7.59(m,2h),7.39-7.42(dd,1h),7.11-7.20(d,3h),3.95-4.08(m,3h),2.79-2.86(m,1h),2.64-2.74(m,2h),2.45-2.54(m,3h),2.16-2.22(m,1h),1.99-2.01(m,1h),1.84-1.95(m,1h),1.65-1.72(m,1h),1.31-1.48(m,4h)；m/z,350[m+h]
+
。
[0132]
实施例12：(s)-n
1-(1h-苯并咪唑-2-基甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物1)的成硫酸盐纯化
[0133]
将按照实施例8制得的粗品化合物1(3.050g，8.739mmol，化学纯度94.83％，光学纯度100.00％)溶24ml乙醇，于室温下加浓硫酸(0.865g，8.826mmol)，加毕，升温至回流，溶清后于室温缓慢搅拌，抽滤，烘干，得到1.268g白色固体产物化合物4，收率26.6％，hplc化学纯度：99.81％，hplc光学纯度：100.00％。c
21h27
n5·
2h2so4(化合物4)的元素分析(anal.calcd)：c,46.23；h,5.73；n,12.84；o,23.46；s,11.75.found:c,46.25；h,5.74；n,12.93；s,11.71。
[0134]
对比例1：(s)-n
1-(1h-苯并咪唑-2-基甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物1)的成盐纯化
[0135]
将按照实施例8制得的粗品化合物1(3.050g，8.739mmol，化学纯度94.85％，光学纯度100.00％)溶24ml乙醇，于室温下加浓盐酸(0.8ml，9.6mmol)，加毕，升温至回流，反应液溶清后于室温，不能析出固体，真空浓缩后为油。
[0136]
对比例2：(s)-n
1-(1h-苯并咪唑-2-基甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物1)的成盐纯化
[0137]
将按照实施例8制得的粗品化合物1(3.052g，8.745mmol，化学纯度94.89％，光学纯度100.00％)溶24ml甲醇，于室温下加浓盐酸(1.5ml，18mmol)，加毕，升温至回流，反应液
溶清后于室温，不能析出固体，真空浓缩后为油。
[0138]
对比例3：(s)-n
1-(1h-苯并咪唑-2-基甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物1)的成盐纯化
[0139]
将按照实施例8制得的粗品化合物1(3.059g，8.765mmol，化学纯度94.87％，光学纯度100.00％)溶24ml甲醇，于室温下加浓盐酸(3.4ml，40.8mmol)，加毕，升温至回流，反应液溶清后于室温，不能析出固体，真空浓缩后为油。
[0140]
对比例4：(s)-n
1-(1h-苯并咪唑-2-基甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物1)的成盐纯化
[0141]
将按照实施例8制得的粗品化合物1(3.049g，8.736mmol，化学纯度94.91％，光学纯度100.00％)溶24ml甲醇，于室温下加苯甲酸(1.172g，9.607mmol)，加毕，升温至回流，溶清后于室温缓慢搅拌，不能析出固体，真空浓缩后为油。
[0142]
对比例5：(s)-n
1-(1h-苯并咪唑-2-基甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物1)的成盐纯化
[0143]
将按照实施例8制得的粗品化合物1(3.021g，8.736mmol，化学纯度94.87％，光学纯度100.00％)溶24ml甲醇，于室温下加对甲苯磺酸一水合物(1.809g，9.521mmol)，加毕，升温至回流，溶清后于室温缓慢搅拌，不能析出固体，真空浓缩后为油。
[0144]
对比例6：(s)-n
1-(1h-苯并咪唑-2-基甲基)-n
4-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(化合物1)的成盐纯化
[0145]
将按照实施例8制得的粗品化合物1(3.568g，10223mmol，化学纯度94.81％，光学纯度100.00％)溶24ml甲醇，于室温下加醋酸(0.736g，12.267mmol)，加毕，升温至回流，溶清后于室温缓慢搅拌，不能析出固体，真空浓缩后为油。

技术特征：
1.一种化合物1的纯化方法，其特征在于，其包括如下步骤：步骤(1)：溶剂中，将待纯化的化合物1产品与h2so4进行如下所示的成盐反应，得化合物4；步骤(2)：溶剂中，将步骤(1)制得的化合物4在碱的存在下进行如下所示的中和反应，得纯化后的化合物1；2.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述待纯化的化合物1产品包含如下化合物2和/或化合物3：3.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述成盐反应中，所述溶剂选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、异丙醇和水中的一种或多种，优选为乙醇；和/或，所述成盐反应中，所述溶剂与所述化合物1的体积质量比为7ml/g-15ml/g，例如为10ml/g；和/或，所述成盐反应中，所述h2so4以质量浓度为95％～98％的硫酸水溶液形式用于成盐反应中；和/或，所述成盐反应中，所述h2so4与所述化合物1的摩尔比为2:1～2.5:1，优选为2.1:
1；和/或，所述成盐反应的温度为50℃-78℃；和/或，所述成盐反应包括以下步骤：所述成盐反应的反应液溶清后，于20-30℃下搅拌以析出固体，分离出固体即得化合物4；和/或，所述中和反应中，所述溶剂为水；和/或，所述中和反应中，所述碱选自碳酸钠、氢氧化钠、碳酸氢钠和碳酸钾中的一种或多种，优选为碳酸钠；和/或，所述中和反应中，所述的碱以碱水溶液的形式存在，例如为饱和碳酸钠水溶液；和/或，所述中和反应的温度为10℃-35℃，优选为25℃；和/或，所述中和反应还包括以下步骤：所述中和反应结束后，分离出反应液中的固体即得纯化后的化合物1。4.一种化合物4：5.一种化合物4的制备方法，其包括以下步骤：溶剂中，化合物1与h2so4进行如下所示的成盐反应，即得化合物4；6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述成盐反应中，所述溶剂选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、异丙醇和水中的一种或多种，优选为乙醇；和/或，所述成盐反应中，所述溶剂与所述化合物1的体积质量比为7ml/g-15ml/g，例如为10ml/g；和/或，所述成盐反应中，所述h2so4以质量浓度为95％～98％的硫酸溶液形式用于成盐反应中；和/或，所述成盐反应中，所述h2so4与所述化合物1的摩尔比为2:1～2.5:1，优选为2.1:1；
和/或，所述成盐反应的温度为50℃-78℃。7.一种化合物2：8.一种化合物2的制备方法，其包括如下步骤：溶剂中，化合物1-1和化合物1-2在碱的存在的下进行取代反应，再于酸的存在下进行脱保护反应，即制得化合物2；9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述取代反应中，所述化合物1-2和化合物1-1的摩尔比为1:1～2.5:1，优选为1:1～2:1，例如为1.88:1或1.89:1；和/或，所述取代反应中，所述溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇与乙腈中的一种或多种，优选为甲醇或乙醇，更优选为乙醇；和/或，所述取代反应中，所述取代反应中，所述溶剂与所述化合物1-1的体积质量比为7ml/g～15ml/g，例如为10ml/g；和/或，所述取代反应中，所述碱选自碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钠、三乙胺和n，n-二异丙基乙胺中的一种或多种，优选为碳酸钾或n，n-二异丙基乙胺，更优选为碳酸钾；和/或，所述取代反应中，所述碱与所述化合物1-1的摩尔比为1:1～2.5:1，例如为1:1～2:1；和/或，所述脱保护反应中，所述酸选自盐酸和三氟乙酸中的一种或两种，优选为盐酸；和/或，所述脱保护反应中，所述酸的用量为将所述脱保护反应反应液的ph调至1～2，需要的酸的用量；和/或，所述取代反应和所述脱保护反应的反应温度独立地为30℃～60℃，优选为38～42℃；和/或，所述取代反应的时间为10h～20h，优选为14h；和/或，所述脱保护反应的时间为2h～6h，优选为4h。10.一种化合物3：
11.一种化合物3的制备方法，其包括如下步骤：溶剂中，化合物1-1和化合物1-2在碱的存在的下，进行如下所示的取代反应，再于酸的存在下进行脱保护反应，即得化合物3；12.如权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述取代反应中，所述化合物1-2和化合物1-1的摩尔比为3:1以上，优选为3:1～5:1，例如为3.76:1；和/或，所述取代反应中，所述溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇与乙腈中的一种或多种，优选为甲醇或乙醇，更优选为乙醇；和/或，所述取代反应中，所述溶剂与所述化合物1-1的体积质量比为7ml/g-15ml/g，例如为10ml/g；和/或，所述取代反应中，所述碱选自碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钠、三乙胺和n，n-二异丙基乙胺中的一种或多种，优选为碳酸钾或n，n-二异丙基乙胺，更优选为碳酸钾；和/或，所述取代反应中，所述碱与所述化合物1-1的摩尔比为2:1～3.5:1，例如为2:1～3:1；和/或，所述脱保护反应中，所述酸选自盐酸和三氟乙酸中的一种或两种，优选为盐酸；和/或，所述脱保护反应中，所述酸的用量为将所述脱保护反应的ph调至1～2，需要的酸的用量；和/或，所述取代反应和所述脱保护反应的反应温度独立地为30℃～60℃，优选为38～42℃；和/或，所述取代反应的时间为10h～20h，优选为14h；和/或，所述脱保护反应的时间为2h～6h，优选为4h。

技术总结
本发明公开了Mavorixafor的纯化方法、其盐及有关物质。本发明具体公开了一种化合物1的纯化方法、其硫酸盐及其有关物质化合物2和化合物3。通过将待纯化的化合物1产品形成硫酸盐可以改善其纯度，有效降低所含化合物2和化合物3的含量。合物3的含量。合物3的含量。


技术研发人员：刘潍源 周伟澄 田婷 路芳芳 陈舒旸 周亭 林快乐
受保护的技术使用者：中国医药工业研究总院有限公司
技术研发日：2022.03.14
技术公布日：2023/9/23