生物检测装置、生物检测系统及生物检测方法与流程

未命名 09-24 阅读:49 评论:0
1.本发明实施例涉及一种生物检测装置,特别涉及一种具有反射式次偏光单元的生物检测装置。
背景技术
::2.整合式感测装置近来已普遍用于生物分析。使用这类应用时,会在如生物芯片的生物检测装置上放置生物或生化样品。可通过荧光分子的激发或发射光谱及/或强度而报导生物反应或交互作用的现象,例如dna测序与免疫荧光检测。荧光分子可利用较短波长的激发光激发,并朝向光检测器产生较长波长的发射光。可通过生物检测系统的光检测器来检测及判断荧光的光谱分布及强度。光检测器也可整合至生物检测装置以形成生物感测器,因此,生物检测系统可不包含光检测器。3.在生物检测装置演进的过程中,为了追求较低成本且达到较高的产能,生物检测装置上的像素阵列密度一般通过减少间隔宽度或孔洞节距(wellpitch)而增加。然而,减少像素阵列尺寸可能会导致相邻孔洞之间的串扰,且可能无法精确地检测各个单独的荧光信号,进而造成不准确的分析结果。4.虽然现有的生物检测装置普遍符合它们的需求,但并不是在所有方面皆令人满意。因此,仍需要一种崭新的生物检测装置并搭配崭新的生物检测系统及生物检测方法。技术实现要素:5.根据本发明的一些实施例,提供一种生物检测装置。生物检测装置包括多个像素单元。像素单元各包括基板、一或多对反射式次偏光单元以及多个反应区。一或多对反射式次偏光单元设置于基板上。每对反射式次偏光单元中反射式次偏光单元的个别偏光角度间的绝对值差异为90°。反应区定义于一或多对反射式次偏光单元之上。反应区一对一对应至反射式次偏光单元。6.根据本发明的一些实施例,提供一种生物检测系统。生物检测系统包括激发光源、前偏光元件、上述的生物检测装置。激发光源用以发出激发光。前偏光元件用以偏振激发光。生物检测装置用以接收偏振的激发光。7.根据本发明的一些实施例,提供一种生物检测方法。生物检测方法包括以下步骤:提供上述的生物检测系统;将生物样品固定于生物芯片的反应区;进行第一检测步骤以获得第一荧光信号,第一荧光信号来自固定于对应像素单元中第一对反射式次偏光单元的第一反射式次偏光单元的反应区的生物样品;进行第二检测步骤以获得第二荧光信号,第二荧光信号来自固定于对应像素单元中第一对反射式次偏光单元的第二反射式次偏光单元的反应区的生物样品;以及结合第一荧光信号与第二荧光信号。8.以下实施例中参照说明书附图提供详细叙述。附图说明9.搭配说明书附图阅读后续的详细叙述与范例将能更全面地理解本发明实施例,其中:10.图1a、2a与2c是根据本发明各种实施例的生物检测装置的剖面图。11.图1b、2b与2d是根据本发明各种实施例的生物检测装置的上视图。12.图3a-3b与4a-4b是根据本发明各种实施例的生物检测系统的剖面图。13.图5a-5d是根据本发明各种实施例的像素单元的上视图,像素单元具有不同排列方式的多对反射式次偏光单元。14.图6a是根据本发明的一些实施例的生物检测方法流程图。15.图6b与6c是根据本发明的一些实施例,示出使用生物检测系统来检测生物样品。16.图7是根据本发明的其他实施例的生物检测方法流程图。17.附图标记说明:18.10,20,30:生物检测装置19.100a,100b,100c,100d,100e:像素单元20.102:基板21.104a:第一对反射式次偏光单元22.104b:第二对反射式次偏光单元23.104c:第三对反射式次偏光单元24.104d:第四对反射式次偏光单元25.104a1,104a2,104b1,104b2,104c1,104c2,104d1,104d2:反射式次偏光单元26.106:样品隔离层27.108:反应区28.110:激发光源29.112:激发光30.112’:偏振激发光31.112”:绕射偏振激发光32.114:前偏光元件33.116,126:透镜34.118:滤光元件35.120:光检测器36.122:光电二极管37.124:滤层38.128:光吸收层39.130:分光元件40.132:发射光41.200a,200b,200c:生物检测系统42.300,500:生物检测方法43.302,304,306,308,310,502,504,506,508,510,512,514,516,518:步骤44.400a,400b:生物样品45.400as:第二荧光信号46.400bs:第一荧光信号47.a-a’,b-b’:剖线48.h1,h2,h3,h4:高度具体实施方式49.以下详述本发明实施例的生物检测装置、生物检测系统及生物检测方法。为了说明的目的,以下实施方式中阐述许多特定细节与实施例以完整理解本发明实施例。以下实施方式中所述的特定元件与配置是用以清楚描述本发明实施例。然而,本文所述的例示性实施例显然仅是为了说明而使用,本发明实施例的概念可以各种形式呈现而并非局限于这些例示性实施例。50.此外,为了清楚描述本发明实施例,不同实施例的附图可使用类似及/或相对应的数字,以表示类似及/或相对应的元件。然而,并不表示不同的实施例之间有任何关连。应能理解的是,此例示性实施例的叙述可配合附图一并理解,本发明实施例的附图亦被视为本发明实施例说明的一部分。附图并未以实际装置及元件的比例示出。此外,结构及装置是以示意的方式示出,以简化附图。51.此外,当述及“一膜层位于另一膜层上方(overlying)”、“一膜层设置于另一模层之上(above)”、“一膜层设置于另一模层上(on)”、“一膜层设置于另一模层上方(over)”可指的是膜层与其他膜层直接接触的情形。或者,亦可能是膜层不与其他膜层直接接触的情形,在此情形中,膜层与其他膜层之间设置有一或更多中间层。52.应能理解的是,虽然本文可使用“第一”、“第二”、“第三”等用词来叙述各种元件、组件、区域、膜层、及/或部分,这些元件、组件、区域、膜层、及/或部分不应被这些用词限定。这些用词仅是用来区别不同的元件、组件、区域、膜层、及/或部分。因此,以下讨论的第一元件、组件、区域、膜层、及/或部分可在不偏离本发明实施例的启示下被称为第二元件、组件、区域、膜层、及/或部分。[0053]“约(about)”与“实质上(substantially)”的用词通常表示在一给定值或范围的10%之内,优选是5%之内,或3%之内,或2%之内,或1%之内,且更佳是0.5%之内。在此给定的数量为大约的数量,亦即在没有特定说明“约”或“实质上”的情况下,仍可隐含“约”或“实质上”的含义。[0054]除非另外定义,在此使用的所有技术及科学用语具有与本发明所属
技术领域
:中技术人员所通常理解的相同涵义。应能理解的是,这些用语,例如在通常使用的字典中定义的用语,应被解读成具有与相关技术及本发明的背景或上下文一致的意思,而不应以理想化或过度正式的方式解读,除非在本发明实施例有特别定义。[0055]根据本发明的一些实施例,生物检测装置的像素单元各包括一或多对反射式次偏光单元。每对反射式次偏光单元中反射式次偏光单元的个别偏光角度间的绝对值差异为90°。像素单元中的反射式次偏光单元可在固定有生物样品的反应区引发反射的绕射点,因而实现局部增强的效果以使得位在特定绕射点的生物样品可产生足够的发射光。此外,根据一些实施例,生物检测系统包括可旋转定向的(orientablebyrotation)前偏光元件,可旋转定向的前偏光元件可具有与任一反射式次偏光单元相同的偏光角度。以这样的配置搭配多步骤的检测方法,可减少相邻反应区荧光信号间的串扰,且可以较高的像素阵列密度制造出生物检测装置。[0056]图1a至1b是根据一些实施例的生物检测装置10的剖面图与上视图。应注意的是,图1a所示的生物检测装置10的剖面图是沿着图1b中的剖线a-a’所截取。参照图1a与1b,生物检测装置10包括多个像素单元100a。像素单元100a定义出1×2像素阵列。像素单元100a各包括基板102、第一对反射式次偏光单元104a与多个反应区108。[0057]基板102可包括任何合适的材料。在一些实施例中,基板102可为可挠式材料,例如聚对苯二甲酸乙二酯(polyethyleneterephthalate,pet)、聚醚砜(polyethersulfone,pes)、聚酰亚胺(polyimide,pi)、聚碳酸酯(polycarbonate,pc)、聚甲基丙烯酸甲酯(polymethylmethacrylate,pmma)、硅氧树脂(silicone)、环氧树脂(epoxy)或前述的组合。在其他实施例中,基板102可为刚性(rigid)材料,例如玻璃基板或蓝宝石基板。再者,基板102可为透明的或半透明的。具体而言,在基板102为透明的实施例中,基板102的材料对波长介于400nm至750nm之间的光可具有大于85%的光穿透率,或优选具有大于92%的光穿透率。在基板102为半透明的实施例中,基板102的材料对波长介于400nm至750nm之间的光可具有大于25%且小于85%的光穿透率。在一些特定的实施例中,基板102为透明的。[0058]第一对反射式次偏光单元104a包括反射式次偏光单元104a1与104a2。本文所使用的“反射式”一词指的是次偏光单元可传送具有所欲偏振特性的入射光且可反射剩余的入射光而不吸收剩余的入射光。第一对反射式次偏光单元104a中的反射式次偏光单元104a1与104a2的偏光角度间的绝对值差异为90°。本文所使用的“偏光角度”一词指的是以90°偏移的角度偏振或以与偏光角度垂直的角度偏振的光无法穿过具有此偏光角度的反射式次偏光单元。因此,当入射光(例如,激发光)以90°偏移的角度偏振或以与反射式次偏光单元的偏光角度垂直的角度偏振,偏振的入射光无法穿过反射式次偏光单元,因而从反射式次偏光单元反射。[0059]根据一些实施例,反射式次偏光单元104a1与104a2可包括一层金属线光栅(grating)。反射式次偏光单元104a1与104a2的金属材料可为不透明的材料,例如铝(al)、金(au)、银(ag)、铜(cu)或前述的组合。在其他实施例中,反射式次偏光单元104a1与104a2为经图案化形成光栅结构的硅层。在一些实施例中,反射式次偏光单元104a1与104a2的光栅结构可具有约20nm至约500nm之间的厚度。在一些实施例中,反射式次偏光单元104a1与104a2的光栅结构可具有约20nm至约400nm之间的光栅周期。在一些实施例中,反射式次偏光单元104a1与104a2的光栅结构可具有约0.2至约0.8的填充比(或占空比(dutycycle))。[0060]应能理解的是,在下文实施例中所述的反射式次偏光单元可具有相似或相同的组成与厚度,将不再重复说明。[0061]光栅脊(gratingridge)的方向性主要会影响偏振光的穿透百分比。详细而言,当偏振光与反射式次偏光单元104a1或104a2的方向呈现平行、呈45°偏移或90°偏移时,穿过反射式次偏光单元的穿透光强度分别是最大值、约50%或最小值。因此,当激发光为与反射式次偏光单元呈90°偏移的偏振光时,反应区之下的反射式次偏光单元将阻挡激发光穿过反射式次偏光单元且将激发光反射至反应区的生物样品。[0062]除了反射式次偏光单元的偏光角度,阻挡效率的消光比(extinctionratio)也会受到光栅结构的薄膜厚度、光栅周期、光栅轮廓及填充比影响。pengli等人已于“investigationofachromaticmicropolarizerarrayforpolarizationimaginginvisible-infraredband.”optik,vol158,april2018,pp.1427-1435”中模拟使用厚度为160nm、填充比为0.5及周期为150nm的铝线可达到104的消光比(相当于光学密度(opticaldensity)为4)。在一些实施例中,具有大于3的光学密度以阻挡激发光的光照明系统可足以用于生物感测应用。[0063]如图1a与1b所示,根据一些实施例,第一对反射式次偏光单元104a中的反射式次偏光单元104a1与104a2可具有相同的光栅周期。如图1a与1b所示,反射式次偏光单元104a1与104a2被示出为具有相同的线条密度。[0064]应注意的是,虽然仅示出一对反射式次偏光单元104a包含于每个像素单元100a中,但不发明不以此为限。在其他实施例中,生物检测装置的像素单元可各包括一对以上的反射式次偏光单元,例如2、3、4、6或更多对反射式次偏光单元,其配置方式将于以下内文及实施例中进行详细讨论。[0065]反应区108定义于第一对反射式次偏光单元104a之上。如图1a与1b所示,反应区108及反射式次偏光单元104a1与a2为一对一的对应关系。亦即,反射式次偏光单元104a1之上定义有一个反应区108,且反射式次偏光单元104a2之上定义有一个反应区108。根据一些实施例,反应区108可形成为纳米孔(nanowell)或纳米图案(nanopattern)的形式。反应区108是由形成于样品隔离层106中的开口所定义,样品隔离层106则形成于第一对反射式次偏光单元104a上。因此,反应区108的底表面也是形成于样品隔离层106中的开口的底表面。[0066]在一些实施例中,可修饰反应区108以提升生物样品的固定效果。例如,在一些实施例中,可使用自组装单层(self-assemblymonolayer,sam)、功能聚合物或水凝胶(hydrogel)来涂布或处理样品隔离层106以将生物样品固定于反应区108。然而,在其他实施例中,可不修饰样品隔离层106。生物样品可根据其重量、尺寸、表面电荷或凡得瓦力(vanderwaalsforce)等而固定于反应区108。[0067]根据一些实施例,样品隔离层106的材料可为透明的或半透明。具体而言,在样品隔离层106为透明的实施例中,样品隔离层106的材料对波长介于400nm至750nm之间的光可具有大于85%的光穿透率,或优选具有大于92%的光穿透率。在样品隔离层106为半透明的实施例中,样品隔离层106的材料对波长介于400nm至750nm之间的光可具有大于25%且小于85%的光穿透率。[0068]样品隔离层106的材料可包括金属、金属合金、金属氧化物、金属氮化物、硅、氧化硅、氮化硅或前述的组合。在一些实施例中,金属、金属合金、金属氧化物与金属氮化物可包括,但不限于,银(ag)、铝(al)、金(au)、铌(nb)、钛(ti)、钨(w)、前述的合金、氧化钛(例如,tio2)、氧化钽(例如,ta2o5)、氧化铝(例如,al2o3)、氧化铌(例如,nb2o5)、氮化钛、氮化钽或前述的组合。[0069]可利用溅镀(sputtering)、蒸镀(evaporation)、旋转涂布(spin-coating)、化学气相沉积(chemicalvapordeposition,cvd)、分子束沉积(molecularbeamdeposition)、任何其他合适的工艺或前述的组合来形成样品隔离层106。例如,化学气相沉积可包括低压化学气相沉积(low-pressurecvd,lpcvd)、低温化学气相沉积(low-temperaturecvd,ltcvd)、快速热化学气相沉积(rpaidthermalcvd,rtcvd)、等离子体增强化学气相沉积(plasmaenhancedcvd,pecvd)、原子层沉积(atomiclayerdeposition,ald)或前述的组合。[0070]图2a与2b是根据一些实施例的生物检测装置20的剖面图与上视图。图2a与2b所示的生物检测装置20相似于图1a与1b所示的生物检测装置10,但生物检测装置20包括多个像素单元100b。像素单元100b定义出2×2像素阵列。应注意的是,图2a所示的生物检测装置20的剖面图是沿着图2b中的剖线b-b’所截取。[0071]参照图2a,像素单元100b包括第一对反射式次偏光单元104a与第二对反射式次偏光单元104b。第一对反射式次偏光单元104a包括反射式次偏光单元104a1与104a2,且第二对反射式次偏光单元104b包括反射式次偏光单元104b1与104b2。在一些实施例中,如图2b所示,第一对反射式次偏光单元104a的反射式次偏光单元104a1与104a2可设置于像素单元100b的对角线上。同样地,第二对反射式次偏光单元104b的反射式次偏光单元104b1与104b2可设置于像素单元100b的另一对角线上。[0072]第一对反射式次偏光单元104a中反射式次偏光单元104a1与104a2的偏光角度间的绝对值差异为90°。第二对反射式次偏光单元104b中反射式次偏光单元104b1与104b2的偏光角度间的绝对值差异为90°。再者,根据一些实施例,如图2a与2b所示,像素单元100b中所有反射式次偏光单元104a1、104a2、104b1与104b2可具有不同的个别偏光角度。[0073]此外,在一些实施例中,相同的一对反射式次偏光单元中的两个反射式次偏光单元可具有相同的光栅周期。具体而言,第一对反射式次偏光单元104a中的反射式次偏光单元104a1与104a2具有相同的光栅周期(如图2a与2b中所示具有相同线条密度),且第二对反射式次偏光单元104b中反射式次偏光单元104b1与104b2具有相同的光栅周期(如图2a与2b中所示具有相同线条密度)。然而,在一些实施例中,不同对的反射式次偏光单元中的反射式次偏光单元可具有不同的光栅周期。具体而言,第一对反射式次偏光单元104a中的反射式次偏光单元104a1及104a2具有与第二对反射式次偏光单元104b中的反射式次偏光单元104b1与104b2不同的光栅周期(如图2a与2b中所示具有不同线条密度)。[0074]此外,根据一些实施例,对应相同一对的反射式次偏光单元中的反射式次偏光单元的反应区108可具有相同的高度。如图2a所示,本文提及的反应区108的高度从反射式次偏光单元的顶表面测量至反应区108的底表面。图2a中,第一对反射式次偏光单元104a中的反射式次偏光单元104a1及104a2可分别具有高度h1与h3。高度h1与高度h3相同。同样地,第二对反射式次偏光单元104b中的反射式次偏光单元104b1与104b2可分别具有高度h2与h4。高度h2与高度h4相同。然而,根据一些实施例,对应不同对的反射式次偏光单元中的反射式次偏光单元的反应区108可具有不同的高度。例如,图2a中,第一对反射式次偏光单元104a中反射式次偏光单元104a1及104a2的高度h1与h3与第二对反射式次偏光单元104b中反射式次偏光单元104b1与104b2的高度h2与h4不同。[0075]反射式次偏光单元所引发的反射绕射点位置可取决于反射式次偏光单元之间的节距(pitch)、反射式次偏光单元的光栅周期、激发光的波长以及激发光的角度。可调整容置生物样品的反应区的高度,使得生物样品可置于反射绕射点的位置。因此,可在反应区达到激发光局部增强的效果。于此同时,固定于没有位在反射绕射点的反应区的生物样品不会被照射到或被照射到较弱的光线,因此,这些生物样品发出的发射光较弱。如此一来,可减少相邻反应区荧光信号之间的串扰。[0076]此外,反射式次偏光单元的光栅结构的材料、填充因数(即,光栅宽度对光栅周期的比值)或高度可能会影响从反射式次偏光单元反射的激发光绕射效率。为了达到更好的局部增强效果,可调整反射式次偏光单元的光栅结构的材料、填充因数或高度。然而,本发明中反射式次偏光单元的光栅结构的材料、填充因数或高度没有特别限定,只要反应区位在反射的绕射点即可。[0077]图2c与2d是根据一些实施例的生物检测装置30的剖面图与上视图。图2c与2d所示的生物检测装置30相似于图2a与2b所示的生物检测装置20,但生物检测装置20与30中第一对与第二对反射式次偏光单元104a与104b的排列方式不同。详细而言,在一些实施例中,如图2c与2d所示,第一对反射式次偏光单元104a的反射式次偏光单元104a1与104a2彼此邻接(adjoin),且第二对反射式次偏光单元104b的反射式次偏光单元104b1与104b2彼此邻接。应能理解的是,反射式次偏光单元104a1、104a2、104b1与104b2的排列方式并非特别局限于图2d所示,只要相同的一对反射式次偏光单元中的反射式次偏光单元彼此邻接即可。[0078]同样地,如前文所述且如图2c所示,在这些实施例中,对应第一对反射式次偏光单元104a中的反射式次偏光单元104a1与104a2的反应区108或对应第二对反射式次偏光单元104b的反射式次偏光单元104b1与104b2的反应区108可具有相同的高度。[0079]图3a是根据一些实施例的生物检测系统200a的剖面图。参照图3a,生物检测系统包括激发光源110、前偏光元件114与生物检测装置20。虽然图3a示出生物检测装置20包含于生物检测系统200a中,但应能理解的是,可采用参照先前附图的实施例中所述的生物检测装置10、20与30的任一者包含于生物检测系统200a中,或者包含于参照后续附图的其他实施例中所述的其他生物检测系统。[0080]激发光源110可用以发出激发光112。在一些实施例中,激发光源110可包括多个次激发光源(未示出),且次激发光源可各发出具有单一激发光波长的激发光。在一些实施例中,次激发光源可轮流发出具有各种激发光波长的多个激发光。例如,具有不同激发光波长的次激发光源可依序发出激发光。或者,次激发光源可成组地发出激发光。在一些实施例中,激发光源110为单光仪(monochromator),其连续发出从短波长到长波长(或从长波长到短波长)的光。例如,单光仪可发出波长介于约200nm至约1000nm的光。[0081]前偏光元件114可用以偏振从激发光源110发出的激发光112。因此,生物检测装置20可接收由前偏光元件114所偏振的激发光112。根据一些实施例,前偏光元件114可为可旋转定向的(orientablebyrotation),以使得前偏光元件114具有与每个像素单元中一或多对反射式次偏光单元的任一反射式次偏光单元相同的偏光角度。例如,可转动前偏光元件114使其具有与反射式次偏光单元104a1相同的偏光角度,因而偏振的激发光可穿过反射式次偏光单元104a1但不会完全穿过反射式次偏光单元104a2、104b1与104b2。因此,没有穿过反射式次偏光单元的剩余偏振激发光可从反射式次偏光单元反射至位于对应这些反射式次偏光单元的反应区108的生物样品并照射生物样品。再者,反射的偏振激发光可在高度调整至可让固定的生物样品接收较高强度的反射偏振激发光的反应区产生反射的绕射点。[0082]再次参照图3a,在一些实施例中,生物检测系统200a可还包括透镜116、光检测器120与滤光元件118。透镜116可为任何合适的光学透镜。在一些实施例中,透镜116为可调整至位于特定高度的焦点的可调焦透镜(focus-tunablelens)。因此,在以穿过前偏光元件114的偏振激发光照射生物样品之后,每次可收集固定于仅对应一对反射式次偏光单元的反应区的生物样品所发出的发射光,前偏光元件114被转动为具有与这些反应区下方的那对反射式次偏光单元中任一反射式次偏光单元相同的偏光角度。再者,反应区可具有与可调焦透镜的焦点相同的高度。[0083]例如,当前偏光元件114被转动为具有与反射式次偏光单元104a1相同的偏光角度,且透镜116被调整至位在图2a所示的高度h1或h3的焦点时,将仅收集到固定于对应反射式次偏光单元104a2的反应区108的生物样品所发出的发射信号。固定于对应第二对反射式次偏光单元104b的反应区108的生物样品所发出的发射信号将不会被收集到,因为可调焦透镜的焦点所位在的高度h1或h3与图2a中所示的高度h2或h4不同,而高度h2或h4是固定于对应第二对反射式次偏光单元104b的生物样品所发出的发射信号发生的位置。[0084]光检测器120可用以检测发射光。光检测器120可以是光电二极管或可将测量到的光线转换成电流信号的任何合适的光感测组件。在光检测器120为光电二极管的实施例中,光检测器120可连接至金属氧化物半导体(metal-oxide-semiconductor,mos)晶体管的源极与漏极(未示出),其可将电流传送至另一组件,例如另一金属氧化物半导体晶体管。另一组件可包括重置晶体管(resettransistor)、电流源极随耦器(currentsourcefollower)或列选择器(rowselector),以将电流转变为数字信号,但并非以此为限。[0085]根据一些实施例,滤光元件118可为拒斥滤镜(rejectionfilter),其可过滤激发光而不让激发光进入光检测器120。在一些实施例中,滤光元件118可设置于如图3a中所示的透镜116与光检测器120之间的光径上,但本发明并非以此为限。在其他实施例中,滤光元件118也可设置于生物检测装置20与透镜116之间的光径上。在一些实施例中,滤光元件118可包括吸收滤镜、干涉滤镜、等离子体子超表面(plasmonicmetasurface)结构、介电超表面结构或前述的组合。[0086]根据本发明的实施例,生物检测系统包括前述的生物检测装置与前偏光元件。生物检测系统中的生物检测装置包括一或多对反射式次偏光单元。在每对反射式次偏光单元(例如,图3a中所示的第一对反射式次偏光单元104a或第二对反射式次偏光单元104b)中反射式次偏光单元(例如,图3a中所示的反射式次偏光单元104a1与104a2或反射式次偏光单元104b1与104b2)的个别偏光角度间的绝对值差异为90°。此外,前偏光元件为可旋转定向的,以使其具有与每个像素单元中一或多对反射式次偏光单元的任一反射式次偏光单元相同的偏光角度。再者,当每个像素单元包括一对以上的反射式次偏光单元,可使用可调焦透镜以每次仅收集固定于对应一对反射式次偏光单元的反应区的生物样品所发出的发射光,可调焦透镜的焦点可调整至特定高度。对应这对反射式次偏光单元的反应区具有与可调焦透镜的焦点相同的高度。如此一来,生物检测系统可依序检测固定于具有不同高度且对应不同反射式次偏光单元的反应区的生物样品,且可结合生物样品产生的荧光信号以获得完整且精确的分析结果。因此,可减少每张影像中相邻反应区之间的串扰,进而得到较好的空间分辨率,且也可以较高的像素阵列密度来制造生物检测装置。[0087]接着,参照图3b,图3b是根据一些实施例的生物检测系统200b的剖面图。图3b所示的生物检测系统200b相似于图3a所示的生物检测系统200a,但生物检测系统200b使用反射式装置来将激发光引导至生物检测装置20。[0088]如图3b所示,在一些实施例中,生物检测系统200b可还包括分光元件130,分光元件130作为可将激发光引导至生物检测装置20的反射式装置。根据一些实施例,分光元件130可设置于透镜116与滤光元件118之间的光径上。在一些实施例中,分光元件130可包括分色滤镜(dichroicfilter,例如干涉滤镜),其对于小于580nm的短波长具有反射的特性且对于大于580nm的长波长具有穿透的特性。反射与穿透的截止波长可基于荧光分子的激发及发射特性而改变。[0089]由于偏振的激发光112’与来自生物样品的发射光132的光谱具有差异,分光元件130可使偏振的激发光112’反射至生物检测装置20,且可使发射光132穿透。根据一些其他的实施例,分光元件130可包括具有50/50分光比的分光镜(beamsplitter),但本发明并非以此为限。在又一些实施例中,分光元件130也可为具有50/50之外的分光比的分光镜,例如为60/40或70/30。在一些实施例中,分光镜可为立方(cube)分光镜、板式(plate)分光镜或薄膜(pellicle)分光镜。[0090]此外,在图3b所示的实施例中,前偏光元件114设置于激发光源110与分光元件130之间的光径上,但本发明并非以此为限。根据其他实施例,前偏光元件114可设置于透镜116与生物检测装置20之间的光径上(未示出)。[0091]图4a与4b是根据各种实施例的生物检测系统200c的剖面图。参照图4a,图4a所示的生物检测系统200c相似于图3a所示的生物检测系统200a,但透镜、光检测器与滤光元件整合至生物检测装置30之中。如图4a所示,在一些实施例中,除了上述实施例中所示的生物检测装置10或20的元件外,生物检测装置30的像素单元100c可还包括光电二极管122、滤层124与透镜126。光电二极管122内嵌于基板102中。滤层124设置于光电二极管122上。透镜126设置于滤层124及第一对与第二对反射式次偏光单元104a、104b之间。生物检测装置30的光电二极管122、滤层124与透镜126的功能与材料分别相似或相同于图3a中生物检测系统200a的光检测器120、滤光元件118与透镜116,于此不再重复说明。[0092]此外,在一些实施例中,生物检测装置30的透镜126可以是可调焦透镜。例如,可调焦透镜可以是声学可调整透镜、液体曲率可调整透镜或电性可调整透镜,其焦距可利用机械式、液态或电性的方式调整。亦即,可调焦透镜是用于以可控方式改变穿过可调焦透镜的光束焦点位置的光学元件。声学可调整透镜是以液体填充并由声波驱动的适应性光学元件,且电性可调整透镜也是以液体填充但通过施加不同电信号而驱动的适应性光学元件。[0093]参照图4b,根据一些实施例,生物检测装置30的像素单元100c可各还包括光吸收层128。光吸收层128设置于滤层124与透镜126之间。根据一些实施例,光吸收层128可包括吸收滤镜。当滤层124为反射式滤镜而不是吸收滤镜时,光吸收层128可更设置于滤层124之上以吸收从滤层124反射的剩余激发光。此外,光吸收层128设计为不吸收生物样品照光后产生的发射光(或荧光信号)。[0094]图5a-5d是根据各种实施例的像素单元100d与100e的上视图,像素单元100d与100e具有不同排列方式的多对反射式次偏光单元。参照图5a,图5a中的像素单元100d相似于图1a中的像素单元100a或图2a中的像素单元100b,但像素单元100d包括3对反射式次偏光单元,即,第一对反射式次偏光单元104a、第二对反射式次偏光单元104b与第三对反射式次偏光单元104c。[0095]如图5a所示,根据一些实施例,第一对反射式次偏光单元104a包括彼此相对设置的反射式次偏光单元104a1与104a2。第二对反射式次偏光单元104b包括彼此相对设置的反射式次偏光单元104b1与104b2。第三对反射式次偏光单元104c包括彼此相对设置的反射式次偏光单元104c1与104c2。在相同的一对反射式次偏光单元中反射式次偏光单元的个别偏光角度间的绝对值差异为90°。例如,反射式次偏光单元104a1与104a2的个别偏光角度间的绝对值差异为90°,反射式次偏光单元104b1与104b2的个别偏光角度间的绝对值差异为90°,且反射式次偏光单元104c1与104c2的个别偏光角度间的绝对值差异为90°。[0096]再者,在一些实施例中,在相同的一对反射式次偏光单元中的两个反射式次偏光单元可具有相同的光栅周期。例如,如图5a中的线条密度所示,反射式次偏光单元104a1与104a2具有相同的光栅周期(亦即,图5a中的相同线条密度),反射式次偏光单元104b1与104b2具有相同的光栅周期(亦即,图5a中的相同线条密度),且反射式次偏光单元104c1与104c2具有相同的光栅周期(亦即,图5a中的相同线条密度)。[0097]此外,如前文所述,在一些实施例中,对应相同的一对反射式次偏光单元中的反射式次偏光单元的反应区108可具有相同的高度。例如,对应反射式次偏光单元104a1与104a2的反应区108可具有相同的高度,对应反射式次偏光单元104b1与104b2的反应区108可具有相同的高度,且对应反射式次偏光单元104c1与104c2可具有相同的高度。[0098]在一些实施例中,对应不同对反射式次偏光单元中的反射式次偏光单元的反应区108可具有不同的高度。例如,对应反射式次偏光单元104a1的反应区108可具有与对应反射式次偏光单元104b1、104b2、104c1与104c2的反应区108不同的高度,对应反射式次偏光单元104b1的反应区108可具有与对应反射式次偏光单元104a1、104a2、104c1与104c2的反应区108不同的高度,且对应反射式次偏光单元104c1的反应区108可具有与对应反射式次偏光单元104a1、104a2、104b1与104b2的反应区108不同的高度。[0099]根据一些实施利,反射式次偏光单元可以顺时钟方向排列,以相对于前一个反射式次偏光单元的偏光角度具有30°偏移的偏光角度。如图5a中所示,反射式次偏光单元104c2相对于反射式次偏光单元104a1的偏光角度可具有30°偏移的偏光角度。反射式次偏光单元104b2相对于反射式次偏光单元104c2的偏光角度可具有30°偏移的偏光角度。反射式次偏光单元104a2相对于反射式次偏光单元104b2的偏光角度可具有30°偏移的偏光角度。然而,本发明不以此为限。[0100]在其他实施例中,在相同一对的反射式次偏光单元中的反射式次偏光单元可设置为彼此邻接。如图5b所示,第一对反射式次偏光单元104a中的反射式次偏光单元104a1与104a2被设置为彼此邻接,第二对反射式次偏光单元104b中的反射式次偏光单元104b1与104b2被设置为彼此邻接,且第三对反射式次偏光单元104c中的反射式次偏光单元104c1与104c2被设置为彼此邻接。通过将相同一对的反射式次偏光单元中具有相同高度的反射式次偏光单元设置成彼此靠近,可减少制造过程的复杂度。[0101]接着,参照图5c与5d,图5c与5d中所示的像素单元100e相似于图5a与5b中所示的像素单元100d,但像素单元100e包括4对反射式次偏光单元,即,第一对反射式次偏光单元104a、第二对反射式次偏光单元104b、第三对反射式次偏光单元104c与第四对反射式次偏光单元104d。同样地,在一些实施例中,如图5c所示,反射式次偏光单元可以顺时钟方向排列,以相对于前一个反射式次偏光单元的偏光角度具有22.5°偏移的偏光角度。在其他实施例中,如图5d所示,在相同一对的反射式次偏光单元中的反射式次偏光单元可设置为彼此邻接。图5c与5d所示的实施例中反射式次偏光单元的排列概念相似于图5a与5b所示的实施例,于此不再详细重复说明。[0102]此外,在图5c与5d中,根据一些实施例,像素单元100e中没有设置反射式次偏光单元的空间可由前述的样品隔离层填充,因此没有形成反应区。[0103]图6a是根据一些实施例的生物检测方法300的流程图,且图6b与6c是根据一些实施例示出使用生物检测系统200d来检测生物样品400a与400b。参照图6a-6c,生物检测方法300为使用图6b与6c中的生物检测系统200d的两步骤检测方法,其中生物检测系统200d包括生物检测装置10。[0104]生物检测方法300始于步骤302以提供将用于生物检测系统200d中的生物检测装置10。接着,参照图6a的步骤304与图6b,将生物样品400a与400b固定于反应区108。详细而言,将含有生物样品的适量溶液施于生物检测装置10。待含有生物样品的溶液干燥后,从反应区108之外的区域移除残留过多的生物样品,且生物样品可固定于各个反应区108。图6b中,生物样品400a指的是固定于对应像素单元100a中第一对反射式次偏光单元104a的反射式次偏光单元104a1的反应区108的生物样品,且生物样品400b指的是固定于对应像素单元100a中第一对反射式次偏光单元104a的反射式次偏光单元104a2的反应区108的生物样品。[0105]在一些实施例中,生物样品400a与400b可包括生物分子、化学分子或前述的组合,但并非以此为限。在一些实施例中,分物分子可包括dna、rna、蛋白质或前述的组合,但并非以此为限。根据一些实施例,可分析生物样品400a与400b以判断基因序列、dna-dna杂交(hybridization)、单核苷酸多型性(singlenucleotidepolymorphisms,snp)、蛋白质的交互作用、胜肽的交互作用、抗原抗体间的交互作用、葡萄糖监测或胆固醇监测等。[0106]接着,参照图6a的步骤306与图6b,进行第一检测步骤以获得生物样品400b所发出的第一荧光信号400bs,其中生物样品400b固定于对应反射式次偏光单元104a2的反应区108。详细而言,在一些实施例中,转动前偏光元件114使其相对于反射式次偏光单元104a2的偏光角度具有90°偏移的的偏光角度。以穿过前偏光元件114与从反射式次偏光单元104a2反射的偏振激发光112’照射生物样品400b。从反射式次偏光单元反射的偏振激发光112’成为“绕射偏振激发光112””。于此同时,生物样品400a被较少的偏振激发光112’照射,因为偏振激发光112’没有从反射式次偏光单元104a1反射,且没有任何绕射偏振激发光112”到达生物样品400a所在的反应区108。因此,与生物样品400b产生的荧光信号相比,生物样品400a产生出较弱的荧光信号,进而避免串扰的问题。[0107]根据一些实施例,可由从反射式次偏光单元在0阶(在反射式次偏光单元的法线方向)、1阶、2阶等的绕射而产生绕射偏振激发光112”。绕射偏振激发光112”在设计为具有特定高度的相邻反应区108可产生局部增强的效果。除了偏振激发光112’,具有特定高度的相邻反应区108可更接收到绕射偏振激发光112”,因此,可利用较高强度的激发光来照射固定于这些反应区108的生物样品400b。如此一来,如图6b所示,以偏振激发光112’与绕射偏振激发光112”照射的生物样品400b可产生具有较高强度的第一荧光信号400bs。透镜116可聚焦发散的第一荧光信号400bs以达到较高的信号强度,接着以光检测器120检测第一荧光信号400bs。相反地,位于对应反射式次偏光单元104a1的反应区108的生物样品400a没有被绕射偏振激发光112”照射,因而产生出较弱的荧光信号或甚至没有产生荧光信号。[0108]接着,参照图6a的步骤308与图6c,进行第二检测步骤以获得生物样品400a所发出的第二荧光信号400as,其中生物样品400a固定于对应反射式次偏光单元104a1的反应区108。详细而言,在一些实施例中,转动前偏光元件114使其相对于反射式次偏光单元104a1的偏光角度具有90°偏移的的偏光角度。以穿过前偏光元件114与绕射偏振激发光112”照射生物样品400a,因而产生第二荧光信号400as。透镜116可聚焦发散的第二荧光信号400as以达到较高的信号强度,接着以光检测器120检测第二荧光信号400as。同样地,因为偏振激发光112’可穿过反射式次偏光单元104a2且不会从反射式次偏光单元104a2反射,位于对应反射式次偏光单元104a2的反应区108的生物样品400b没有被绕射偏振激发光112”照射。因此,生物样品400b产生出较弱的荧光信号或甚至没有产生荧光信号,因而避免了相邻的反应区108之间的串扰。[0109]接着,参照图6a的步骤310,结合第一荧光信号400bs与第二荧光信号400as以获得来自生物样品400a与400b的完整荧光信号,进而完成生物检测。详细而言,可结合分别包括第一荧光信号400bs与第二荧光信号400as的两张影像,接着进行结合影像的分析以获得完整的荧光信号。或者,可分别分析包括第一荧光信号400bs的影像与包括第二荧光信号400as的影像,接着结合来自两张影像的结果。可通过生物样品的荧光信号存在与否来分析前述的影像,或通过荧光信号的荧光光谱来区别固定反应区108的不同分子。虽然第一检测步骤与第二针测步骤的顺序如前文所述,应能理解的是,可在第一检测步骤的前进行第二检测步骤。[0110]图7是根据其他实施例的生物检测方法500。图7中的生物检测方法500相似于图6a中的生物检测方法300,但使用图3a中的生物检测系统200a或图4a中的生物检测系统200c来进行生物检测方法500。此外,在这些特定的实施例中,生物检测系统200a的透镜或生物检测系统200c中生物检测装置30的透镜126为可调焦透镜。根据一些实施例,除了第一检测步骤与第二检测步骤,生物检测方法500可还包括调整可调焦透镜的焦平面以及进行第三检测步骤与第四检测步骤。[0111]详细而言,参照图3a、4a与7,在进行第一检测步骤508与第二检测步骤510之前,将可调焦透镜的焦平面调整至反射式次偏光单元104b1与104b2的高度(图7中的步骤506),使图3a中的光检测器120或图4a中的光电二极管122得以在第一检测步骤508与第二检测步骤510时获取清晰的影像。[0112]接着,进行第一检测步骤508与第二检测步骤510,以获得固定于分别对应如反射式次偏光单元104b1与104b2的反应区108的生物样品所发出的第一荧光信号与第二荧光信号。具体而言,在一些实施例中,第一检测步骤508与第二检测步骤510可包括转动前偏光元件114使其分别相对于反射式次偏光单元104b1与104b2的偏光角度具有90°偏移的偏光角度。因此,在第一检测步骤508中,可照射到固定于对应反射式次偏光单元104b1的反应区108的生物样品,进而产生第一荧光信号。在第二检测步骤510中,可照射到固定于对应反射式次偏光单元104b2的反应区108的生物样品,进而产生第二荧光信号。[0113]进行第一检测步骤508与第二检测步骤510之后,进行图7中的步骤512,以将可调焦透镜的焦平面调整至反射式次偏光单元104a1与104a2的高度,使图3a中的光检测器120或图4a中的光电二极管122得以在接下来的第三检测步骤514与第四检测步骤516时获取清晰的影像。[0114]接着,进行第三检测步骤514与第四检测步骤516以获得固定于分别对应如反射式次偏光单元104a1与104a2的反应区108的生物样品所发出的第三荧光信号与第四荧光信号。具体而言,在一些实施例中,第三检测步骤514与第四检测步骤516可包括转动前偏光元件114使其分别相对于反射式次偏光单元104a1与104a2的偏光角度具有90°偏移的偏光角度。因此,在第三检测步骤514中,可照射到固定于对应反射式次偏光单元104a1的反应区108的生物样品,进而产生第三荧光信号。在第四检测步骤516中,可照射到固定于对应反射式次偏光单元104a2的反应区108的生物样品,进而产生第四荧光信号。[0115]参照图7的步骤518,完成第一检测步骤508、第二检测步骤510、第三检测步骤514与第四检测步骤516之后,结合第一荧光信号、第二荧光信号、第三荧光信号与第四荧光信号,以获得固定于对应图3a中各像素单元100b中或图4a中各像素单元100c中所有的反射式次偏光单元104a1、104a2、104b1与104b2的反应区108的生物样品所产生的完整荧光信号,进而完成生物检测。[0116]应能理解的是,如前文所述且如图3a与4a所示,第一对反射式次偏光单元104a的反射式次偏光单元104a1与104a2的高度不同于第二反射式次偏光单元104b的反射式次偏光单元104b1与104b2的高度。因此,图7中的步骤506与512将可调焦透镜的焦平面调整至不同高度,因此,可在每个检测步骤(图7中的步骤508、510、514或516)获取到清晰的影像。[0117]此外,根据一些实施例,生物检测方法可包括4个以上的检测步骤,例如6个检测步骤(未示出),且可使用像素单元包括3对反射式次偏光单元的生物检测装置(例如,图5a或5b中所示的像素单元100d)来进行生物检测方法。同样地,生物检测方法可还包括将可调焦透镜的焦平面调整至不同高度,因为每对反射式次偏光单元的高度皆彼此不同。通过每次将可调焦透镜的焦平面调整至特定高度,可在每个检测步骤获取清晰的影像,且在较少串扰的情况下获得完整的生物信息。[0118]总结以上,根据本发明的一些实施例,生物检测装置的像素单元各包括一或多对反射式次偏光单元。每对反射式次偏光单元中反射式次偏光单元的个别偏光角度间的绝对值差异为90°。像素单元中的反射式次偏光单元可在固定有生物样品的反应区引发反射的绕射点,因而实现局部增强的效果以使得位在特定绕射点的生物样品可产生足够的发射光(或充足的荧光信号)。此外,根据一些实施例,生物检测系统包括可旋转定向的前偏光元件,可旋转定向的前偏光元件可具有与任一反射式次偏光单元相同的偏光角度。以这样的配置搭配多步骤的检测方法,可减少相邻反应区荧光信号间的串扰,且可以较高的像素阵列密度制造出生物检测装置。[0119]虽然已详述本发明的一些实施例及其优点,应能理解的是,在不背离如本发明的保护范围所定义的发明的构思与范围下,可作各种变动、取代与润饰。例如,本发明所属
技术领域
:中技术人员应能轻易理解在不背离本发明的范围内可改变此述的许多部件、功能、工艺与材料。再者,本技术的范围并不局限于说明书中所述的工艺、机器、制造、物质组成、方法与步骤的特定实施例。本发明所属
技术领域
:中技术人员可从本发明轻易理解,现行或未来所发展出的工艺、机器、制造、物质组成、方法或步骤,只要可以与此述的对应实施例实现大抵相同功能或达成大抵相同结果者皆可根据本发明实施例使用。因此,本发明的保护范围包括上述工艺、机器、制造、物质组成、方法或步骤。当前第1页12当前第1页12
技术特征:
1.一种生物检测装置,包括:多个像素单元,其中该些像素单元各包括:一基板;一或多对反射式次偏光单元,设置于该基板上,其中每对反射式次偏光单元中该些反射式次偏光单元的个别偏光角度间的绝对值差异为90
°
;以及多个反应区,定义于该一或多对反射式次偏光单元之上,其中该些反应区一对一对应至该些反射式次偏光单元。2.如权利要求1所述的生物检测装置,其中对应至相同的一对反射式次偏光单元中的该些反射式次偏光单元的该些反应区具有相同的一高度,该高度从该些反射式次偏光单元的顶表面测量至该些反应区的底表面,且其中对应至不同对的反射式次偏光单元中的该些反射式次偏光单元的该些反应区具有不同的一高度,该高度从该些反射式次偏光单元的顶表面测量至该些反应区的底表面。3.如权利要求1所述的生物检测装置,其中每个像素单元中该一或多对反射式次偏光单元的所有反射式次偏光单元具有不同的个别偏光角度,且其中相同的一对反射式次偏光单元中的两个该些反射式次偏光单元具有相同的光栅周期。4.如权利要求1所述的生物检测装置,其中该些反应区形成为纳米孔或纳米图案的形式,且其中该基板为一透明基板。5.如权利要求1所述的生物检测装置,其中该些像素单元各还包括:一光电二极管,内嵌于该基板中;一滤层,设置于该光电二极管上;以及一透镜,设置于该滤层与该一或多对反射式次偏光单元之间。6.如权利要求5所述的生物检测装置,其中该透镜为一可调焦透镜。7.如权利要求5所述的生物检测装置,其中该些像素单元各还包括一光吸收层,该光吸收层设置于该滤层与该透镜之间。8.一种生物检测系统,包括:一激发光源,用以发出一激发光;一前偏光元件,用以偏振该激发光;以及如权利要求1所述的生物检测装置,用以接收该偏振的激发光。9.如权利要求8所述的生物检测系统,其中该前偏光元件为可旋转定向的,以使得该前偏光元件具有与每个像素单元中该一或多对反射式次偏光单元的任一反射式次偏光单元相同的一偏光角度。10.如权利要求8所述的生物检测系统,还包括:一透镜,用以聚焦收集一发射光,该发射光来自固定于该生物检测装置的该些反应区的一生物样品;一光检测器,用以检测该发射光;以及一滤光元件,用以过滤进入该光检测器的该激发光。11.如权利要求8所述的生物检测系统,还包括一分光元件,该分光元件用以将该激发光引导至该生物检测装置。12.一种生物检测方法,包括:
提供如权利要求8所述的生物检测系统;将生物样品固定于该生物检测装置的该些反应区;进行一第一检测步骤以获得一第一荧光信号,该第一荧光信号来自固定于对应该些像素单元中第一对反射式次偏光单元的第一反射式次偏光单元的该些反应区的该些生物样品;进行一第二检测步骤以获得一第二荧光信号,该第二荧光信号来自固定于对应该些像素单元中该些第一对反射式次偏光单元的第二反射式次偏光单元的该些反应区的该些生物样品;以及结合该第一荧光信号与该第二荧光信号。13.如权利要求12所述的生物检测方法,其中:该第一检测步骤包括:转动该前偏光元件,使得该前偏光元件的偏光角度相对于该些第一反射式次偏光单元的偏光角度为90
°
偏移;以及以该激发光照射固定于对应该些第一反射式次偏光单元的该些反应区的该些生物样品,其中该激发光穿过该前偏光元件且从该些第一反射式次偏光单元反射;以及该第二检测步骤包括:转动该前偏光元件,使得该前偏光元件的偏光角度相对于该些第二反射式次偏光单元的偏光角度为90
°
偏移;以及以该激发光照射固定于对应该些第二反射式次偏光单元的该些反应区的该些生物样品,其中该激发光穿过该前偏光元件且从该些第二反射式次偏光单元反射。14.如权利要求12所述的生物检测方法,还包括:进行一第三检测步骤以获得一第三荧光信号,该第三荧光信号来自固定于对应该些像素单元中第二对反射式次偏光单元的第三反射式次偏光单元的该些反应区的该些生物样品;进行一第四检测步骤以获得一第四荧光信号,该第四荧光信号来自固定于对应该些像素单元中该些第二对反射式次偏光单元的第四反射式次偏光单元的该些反应区的该些生物样品;以及结合该第一荧光信号、该第二荧光信号、该第三荧光信号与该第四荧光信号。15.如权利要求14所述的生物检测方法,其中:该第三检测步骤包括:转动该前偏光元件,使得该前偏光元件的偏光角度相对于该些第三反射式次偏光单元的偏光角度为90
°
偏移;以及以该激发光照射固定于对应该些第三反射式次偏光单元的该些反应区的该些生物样品,其中该激发光穿过该前偏光元件且从该些第三反射式次偏光单元反射;以及该第四检测步骤包括:转动该前偏光元件,使得该前偏光元件的偏光角度相对于该些第四反射式次偏光单元的偏光角度为90
°
偏移;以及以该激发光照射固定于对应该些第四反射式次偏光单元的该些反应区的该些生物样品,其中该激发光穿过该前偏光元件且从该些第四反射式次偏光单元反射;以及
该些第一反射式次偏光单元、该些第二反射式次偏光单元、该些第三反射式次偏光单元与该些第四反射式次偏光单元的偏光角度彼此不同。

技术总结
本发明实施例提供一种生物检测装置。生物检测装置包括多个像素单元。像素单元各包括基板、一或多对反射式次偏光单元以及多个反应区。一或多对反射式次偏光单元设置于基板上。每对反射式次偏光单元中反射式次偏光单元的个别偏光角度间的绝对值差异为90


技术研发人员:谢馨仪
受保护的技术使用者:采钰科技股份有限公司
技术研发日:2022.07.15
技术公布日:2023/9/22
版权声明

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