含有三嗪衍生物的医药组合物

1.本发明涉及含有显示出冠状病毒3cl蛋白酶抑制活性的化合物的医药组合物。


背景技术：

2.属于巢式病毒(nidovirus)目冠状病毒科正冠状病毒亚科的冠状病毒具有约30kb的基因组大小，是已知的rna病毒中最大级的单链+链rna病毒。冠状病毒可分类为α冠状病毒属、β冠状病毒属、γ冠状病毒属及δ冠状病毒属这4种，作为感染人的冠状病毒，已知有α冠状病毒属的2种(hcov-229e、hcov-nl63)及β冠状病毒属的5种(hcov-hku1、hcov-oc43、sars-cov、mers-cov、sars-cov-2)，共计7种。其中的4种(hcov-229e、hcov-nl63、hcov-hku1、hcov-oc43)为感冒的病原体，其余的3种为引起重症肺炎的重症急性呼吸综合症(sars)冠状病毒(sars-cov)、中东呼吸综合症(mers)冠状病毒(mers-cov)及新型冠状病毒(sars-cov-2)。
3.新型冠状病毒传染病(covid-19)在2020年3月11日由who声明为流行病。在2022年9月21日时确认到的感染人数为6.1亿人以上，死亡人数达到650万人以上(非专利文献1)。作为sars-cov-2的主要感染途径，报道了飞沫感染、接触感染及气溶胶感染，确认了sars-cov-2与气溶胶一起在空气中持续漂浮3小时左右并且维持感染力(非专利文献2)。潜伏期间为2～14天左右，发热(87.9％)、干咳(67.7％)、疲倦感(38.1％)、痰(33.4％)等感冒样症状是典型的(非专利文献3)。在重症例中，会发生由急性呼吸窘迫综合征、急性肺损伤、间质性肺炎等导致的呼吸衰竭。另外，还报道了肾衰竭、肝衰竭等多器官衰竭。
4.在日本，基于现有药的药物重新定位，作为抗病毒药的瑞德西韦、作为抗炎药的地塞米松、作为风湿药的巴瑞替尼已作为针对covid-19的治疗药而获得批准，在2022年1月追加批准了作为抗il-6受体抗体的托珠单抗。另外，在2021年7月，作为抗体鸡尾酒疗法的ronapreve(卡西瑞单抗(casirivimab)/伊德维单抗(imdevimab))获得特批，在2021年9月，索托维单抗(sotrovimab)获得特批，在2021年12月，莫努匹拉韦(molnupiravir)获得特批。关于这些药剂的有效性、安全性，并未获得充分的证据。因此，当务之急是创制针对covid-19的治疗药、尤其是口服药。
5.冠状病毒若感染细胞，则合成自复制所需的各种蛋白质。其中有2种多聚蛋白，包含制作病毒基因组的复制复合体、2种蛋白酶。蛋白酶将由病毒合成的多聚蛋白切断，并起到为了使各种蛋白质发挥功能所不可或缺的作用。2种蛋白酶中，3cl蛋白酶(主蛋白酶)承担大部分的多聚蛋白的切断(非专利文献4)。
6.作为以3cl蛋白酶为靶标的covid-19治疗药，2021年6月由pfizer公司实施的作为pf-00835231的前药的lufotrelvir(pf-07304814)的1b期临床试验的完成被登载于clinicaltrials.gov(nct04535167)。另外，在2021年3月，pfizer公司宣布了开始针对新型冠状病毒传染病的治疗药pf-07321332的1期临床试验。pf-00835231、lufotrelvir及pf-07321332的结构式如下所示，化学结构与本发明涉及的化合物不同(非专利文献5、12及13以及专利文献5及6)。
7.pf-00835231：
8.[化学式1]
[0009][0010]
lufotrelvir(pf-07304814)：
[0011]
[化学式2]
[0012][0013]
pf-07321332：
[0014]
[化学式3]
[0015][0016]
此外，clinicaltrials.gov中登载了于2021年7月开始以具有高危因素的covid-19患者为对象进行pf-07321332及利托那韦并用的2/3期临床试验(nct04960202)。另外，在2021年11月，在pfizer公司的主页上，报道了paxlovid(tm)(pf-07321332；利托那韦)与安慰剂相比，在成人的高危患者中，使住院或死亡的风险减小了89％(非专利文献14)。此外，在2021年12月，paxlovid(tm)在美国获得紧急使用许可，在2022年2月10日，paxlovid(注册商标)组合包装在日本获得特批。
[0017]
虽然在非专利文献5～8中公开了具有3cl蛋白酶抑制活性的化合物，但任意文献中均未记载或暗示包含本发明涉及的化合物的医药组合物。
[0018]
虽然在专利文献1～4中公开了具有ρ2x3及/或ρ2x
2/3
受体拮抗作用的三嗪衍生物，但任意文献中均没有关于包含具有3cl蛋白酶抑制活性及抗病毒效果的化合物的医药组合物的记载或暗示。
[0019]
虽然在非专利文献9～11中公开了具有抗肿瘤效果的三嗪衍生物，但任意文献中均没有关于冠状病毒3cl蛋白酶抑制活性及抗病毒效果的记载，另外，也均未记载或暗示包含本发明涉及的化合物的医药组合物。
[0020]
现有技术文献
[0021]
专利文献
[0022]
专利文献1：国际公开第2012/020749号
[0023]
专利文献2：国际公开第2013/089212号
[0024]
专利文献3：国际公开第2010/092966号
[0025]
专利文献4：国际公开第2014/200078号
[0026]
专利文献5：国际公开第2021/205298号
[0027]
专利文献6：国际公开第2021/250648号
[0028]
非专利文献
[0029]
非专利文献1：“covid-19dashboard by the center for syst ems science and engineering at johns hopkins university”，[onli ne]，johns hopkins university，[2022年9月21日检索]，网址《ur l:https://coronavirus.jhu.edu/map.html》
[0030]
非专利文献2：the new england journal of medicin e(2020年)，第382卷，1564～1567页
[0031]
非专利文献3：“report of the who-china joint mission on coronavirus disease 2019(covid-19)”，[online]，2020年2月28日，who，[2022年9月21日检索]，网址《url:https://www.wh o.int/docs/default-source/coronaviruse/who-china-joint-mission-on-covi d-19-final-report.pdf》
[0032]
非专利文献4：science(2003年)，第300卷，1763～1767页
[0033]
非专利文献5：“a comparative analysis of sars-cov-2anti virals characterizes 3clpro inhibitor pf-00835231as a potential new treatment for covid-19”，journal of virology，[online]，2021年2月23日，[2022年9月21日检索]，网址《url:https://jvi.as m.org/content/early/2021/02/19/jvi.01819-20》《doi:10.1128/jvi.01819-20》
[0034]
非专利文献6：cell research(2020年)，第30卷，678～692页
[0035]
非专利文献7：science(2020年)，第368卷，409～412页
[0036]
非专利文献8：acs central science(2021年)，第7卷，3期，467～475页
[0037]
非专利文献9：cancer treatment reviews(1984年)，第11卷，增刊(supplement)1，99～110页
[0038]
非专利文献10：contributions to oncology(1984年)，第18卷，221～234页
[0039]
非专利文献11：arzneimittel-forschung(1984年)，第11卷，6期，663～668页
[0040]
非专利文献12：261st am chem soc(acs)natl meet
·
2021-04-05/2021-04-16
·
virtual,n/a
·
abst 243
[0041]
非专利文献13：science(2021年)，第374卷，1586～1593页
[0042]
非专利文献14：“pfizer’s novel covid-19oral antiviral tr eatment candidate reduced risk of hospitalization or death by89％in interim analysis of phase 2/3epic-hr study”，[online]，2021年11月5日，pfizer press release，[2022年9月21日检索]，网址《url：https://www.pfizer.com/news/press-release/press-release-de tail/pfizers-novel-covid-19-oral-antiviral-treatment-candidate》


技术实现要素：

[0043]
发明所要解决的课题
[0044]
本发明的目的在于提供含有具有冠状病毒3cl蛋白酶抑制活性的化合物的医药组合物。优选地，本发明提供含有具有抗病毒作用、尤其是冠状病毒的增殖抑制作用的化合物的医药。
[0045]
用于解决课题的手段
[0046]
本发明涉及以下内容。
[0047]
(1)
[0048]
医药组合物，其含有式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐。
[0049]
[化学式4]
[0050][0051]
(式中，y为n；
[0052]
r1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0053]
r2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；
[0054]
r3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0055]-x-为-nh-；
[0056]
m为0或1；
[0057]r5a
为氢原子；
[0058]r5b
为氢原子；
[0059]
n为1；
[0060]r4a
为氢原子；
[0061]r4b
为氢原子)
[0062]
(2)如上述项目(1)所述的医药组合物，其中，r1为取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团。
[0063]
(3)如上述项目(1)或(2)所述的医药组合物，其中，r2为被选自取代基组g中的1个、2个或3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团；
[0064]
其中，取代基组g为由卤素、氰基及烷基组成的组。
[0065]
(4)如上述项目(1)～(3)中任一项所述的医药组合物，其中，r3为取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团。
[0066]
(5)医药组合物，其含有上述项目(1)所述的化合物或其制药上允许的盐，其中，式(i)所示的化合物选自由化合物i-003、化合物i-005、化合物i-017及化合物i-023组成的组。
[0067]
(6)如上述项目(1)～(5)中任一项所述的医药组合物，其为3cl蛋白酶抑制剂。
[0068]
(7)如上述项目(1)～(6)中任一项所述的医药组合物，其用于抑制sars-cov-2的病毒增殖。
[0069]
(8)如上述项目(1)～(7)中任一项所述的医药组合物，其为新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗剂及/或预防剂。
[0070]
(9)如上述项目(1)～(8)中任一项所述的医药组合物，其用于抑制由sars-cov-2导致的传染病的重症化。
[0071]
(10)如上述项目(1)～(9)中任一项所述的医药组合物，其以下述方式使用：在由sars-cov-2导致的传染病的症状显现之后、或者自判定sars-cov-2阳性起在72小时以内开始施予。
[0072]
(11)如上述项目(1)～(9)中任一项所述的医药组合物，其以下述方式使用：在由sars-cov-2导致的传染病的症状显现之后、或者自判定sars-cov-2阳性起在24小时以内开始施予。
[0073]
(12)如上述项目(1)～(9)中任一项所述的医药组合物，其以下述方式使用：在由sars-cov-2导致的传染病的症状显现之后、或者自判定sars-cov-2阳性起在120小时以内开始施予。
[0074]
(13)如上述项目(1)～(12)中任一项所述的医药组合物，其中，由sars-cov-2导致的传染病的症状具有covid-19的12种症状中的任意1项以上，该症状为中度以上的症状。
[0075]
(14)如上述项目(1)～(9)中任一项所述的医药组合物，其用于抑制sars-cov-2的病毒传播。
[0076]
(15)sars-cov-2的病毒增殖抑制方法，所述方法包括向需要治疗及/或预防新型冠状病毒传染病(covid-19)的个体施予式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐的步骤。
[0077]
[化学式5]
[0078][0079]
(式中，y为n；
[0080]
r1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0081]
r2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；
[0082]
r3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0083]-x-为-nh-；
[0084]
m为0或1；
[0085]r5a
为氢原子；
[0086]r5b
为氢原子；
[0087]
n为1；
[0088]r4a
为氢原子；
[0089]r4b
为氢原子)
[0090]
(16)如上述项目(15)所述的sars-cov-2的病毒增殖抑制方法，其中，r1为取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团。
[0091]
(17)如上述项目(15)或(16)所述的sars-cov-2的病毒增殖抑制方法，其中，r2为
被选自取代基组g中的1个、2个或3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团；
[0092]
其中，取代基组g为由卤素、氰基及未取代烷基组成的组。
[0093]
(18)如上述项目(15)～(17)中任一项所述的sars-cov-2的病毒增殖抑制方法，其中，r3为取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团。
[0094]
(19)如上述项目(15)所述的sars-cov-2的病毒增殖抑制方法，其中，式(i)所示的化合物选自由化合物i-003、化合物i-005、化合物i-017及化合物i-023组成的组。
[0095]
(20)新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗及/或预防方法，所述方法包括向需要治疗及/或预防新型冠状病毒传染病(covid-19)的个体施予式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐的步骤。
[0096]
[化学式6]
[0097][0098]
(式中，y为n；
[0099]
r1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0100]
r2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；
[0101]
r3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0102]-x-为-nh-；
[0103]
m为0或1；
[0104]r5a
为氢原子；
[0105]r5b
为氢原子；
[0106]
n为1；
[0107]r4a
为氢原子；
[0108]r4b
为氢原子)
[0109]
(21)如上述项目(20)所述的新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗及/或预防方法，其中，r1为取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团。
[0110]
(22)如上述项目(20)或(21)所述的新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗及/或预防方法，其中，r2为被选自取代基组g中的1个、2个或3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团；
[0111]
其中，取代基组g为由卤素、氰基及未取代烷基组成的组。
[0112]
(23)如上述项目(20)～(22)中任一项所述的新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗及/或预防方法，其中，r3为取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团。
[0113]
(24)如上述项目(20)所述的新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗及/或预防方法，其中，式(i)所示的化合物选自由化合物i-003、化合物i-005、化合物i-017及化合物i-023组成的组。
[0114]
(25)由sars-cov-2导致的传染病的重症化抑制方法，所述方法包括向需要治疗及/或预防新型冠状病毒传染病(covid-19)的个体施予式(i)所示的化合物或其制药上允
许的盐的步骤。
[0115]
[化学式7]
[0116][0117]
(式中，y为n；
[0118]
r1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0119]
r2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；
[0120]
r3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0121]-x-为-nh-；
[0122]
m为0或1；
[0123]r5a
为氢原子；
[0124]r5b
为氢原子；
[0125]
n为1；
[0126]r4a
为氢原子；
[0127]r4b
为氢原子)
[0128]
(26)如上述项目(25)所述的由sars-cov-2导致的传染病的重症化抑制方法，其中，r1为取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团。
[0129]
(27)如上述项目(25)或(26)所述的由sars-cov-2导致的传染病的重症化抑制方法，其中，r2为被选自取代基组g中的1个、2个或3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团；
[0130]
其中，取代基组g为由卤素、氰基及未取代烷基组成的组。
[0131]
(28)如上述项目(25)～(27)中任一项所述的由sars-cov-2导致的传染病的重症化抑制方法，其中，r3为取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团。
[0132]
(29)如上述项目(25)所述的由sars-cov-2导致的传染病的重症化抑制方法，其中，式(i)所示的化合物选自由化合物i-003、化合物i-005、化合物i-017及化合物i-023组成的组。
[0133]
(30)新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗方法，其为新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗及/或预防方法，所述方法包括下述步骤：对于需要治疗及/或预防新型冠状病毒传染病(covid-19)的个体，在由sars-cov-2导致的传染病的症状显现之后、或者自判定sars-cov-2阳性起在72小时以内施予式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐。
[0134]
[化学式8]
[0135][0136]
(式中，y为n；
[0137]
r1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0138]
r2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；
[0139]
r3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0140]-x-为-nh-；
[0141]
m为0或1；
[0142]r5a
为氢原子；
[0143]r5b
为氢原子；
[0144]
n为1；
[0145]r4a
为氢原子；
[0146]r4b
为氢原子)
[0147]
(31)如上述项目(30)所述的新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗方法，其中，r1为取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团。
[0148]
(32)如上述项目(30)或(31)所述的新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗方法，其中，r2为被选自取代基组g中的1个、2个或3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团；
[0149]
其中，取代基组g为由卤素、氰基及未取代烷基组成的组。
[0150]
(33)如上述项目(30)～(32)中任一项所述的新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗方法，其中，r3为取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团。
[0151]
(34)如上述项目(30)所述的新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗方法，其中，式(i)所示的化合物选自由化合物i-003、化合物i-005、化合物i-017及化合物i-023组成的组。
[0152]
(35)新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗方法，其为新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗及/或预防方法，所述方法包括下述步骤：对于需要治疗及/或预防新型冠状病毒传染病(covid-19)的个体，在由sars-cov-2导致的传染病的症状显现之后、或者自判定sars-cov-2阳性起在24小时以内施予式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐。
[0153]
[化学式9]
[0154][0155]
(式中，y为n；
[0156]
r1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0157]
r2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；
[0158]
r3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0159]-x-为-nh-；
[0160]
m为0或1；
[0161]r5a
为氢原子；
[0162]r5b
为氢原子；
[0163]
n为1；
[0164]r4a
为氢原子；
[0165]r4b
为氢原子)
[0166]
(36)如上述项目(35)所述的新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗方法，其中，r1为取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团。
[0167]
(37)如上述项目(35)或(36)所述的新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗方法，其中，r2为被选自取代基组g中的1个、2个或3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团；
[0168]
其中，取代基组g为由卤素、氰基及未取代烷基组成的组。
[0169]
(38)如上述项目(35)～(37)中任一项所述的新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗方法，其中，r3为取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团。
[0170]
(39)如上述项目(35)所述的新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗方法，其中，式(i)所示的化合物选自由化合物i-003、化合物i-005、化合物i-017及化合物i-023组成的组。
[0171]
(40)抑制sars-cov-2的病毒传播的方法，所述方法包括向需要治疗及/或预防新型冠状病毒传染病(covid-19)的个体施予式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐的步骤。
[0172]
[化学式10]
[0173][0174]
(式中，y为n；
[0175]
r1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0176]
r2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；
[0177]
r3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0178]-x-为-nh-；
[0179]
m为0或1；
[0180]r5a
为氢原子；
[0181]r5b
为氢原子；
[0182]
n为1；
[0183]r4a
为氢原子；
[0184]r4b
为氢原子)
[0185]
(41)如上述项目(40)所述的抑制sars-cov-2的病毒传播的方法，其中，r1为取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团。
[0186]
(42)如上述项目(40)或(41)所述的抑制sars-cov-2的病毒传播的方法，其中，r2为被选自取代基组g中的1个、2个或3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团；
[0187]
其中，取代基组g为由卤素、氰基及未取代烷基组成的组。
[0188]
(43)如上述项目(40)～(42)中任一项所述的抑制sars-cov-2的病毒传播的方法，其中，r3为取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团。
[0189]
(44)如上述项目(40)所述的抑制sars-cov-2的病毒传播的方法，其中，式(i)所示的化合物选自由化合物i-003、化合物i-005、化合物i-017及化合物i-023组成的组。
[0190]
(45)式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐用于抑制sars-cov-2的病毒增殖的用途。
[0191]
[化学式11]
[0192][0193]
(式中，y为n；
[0194]
r1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0195]
r2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；
[0196]
r3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0197]-x-为-nh-；
[0198]
m为0或1；
[0199]r5a
为氢原子；
[0200]r5b
为氢原子；
[0201]
n为1；
[0202]r4a
为氢原子；
[0203]r4b
为氢原子)
[0204]
(46)如上述项目(45)所述的用途，其中，r1为取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团。
[0205]
(47)如上述项目(45)或(46)所述的用途，其中，r2为被选自取代基组g中的1个、2个或3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团；
[0206]
其中，取代基组g为由卤素、氰基及未取代烷基组成的组。
[0207]
(48)如上述项目(45)～(47)中任一项所述的用途，其中，r3为取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团。
[0208]
(49)如上述项目(45)所述的用途，其中，式(i)所示的化合物选自由化合物i-003、化合物i-005、化合物i-017及化合物i-023组成的组。
[0209]
(50)式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐用于制造新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗及/或预防用医药的用途。
[0210]
[化学式12]
[0211][0212]
(式中，y为n；
[0213]
r1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0214]
r2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；
[0215]
r3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0216]-x-为-nh-；
[0217]
m为0或1；
[0218]r5a
为氢原子；
[0219]r5b
为氢原子；
[0220]
n为1；
[0221]r4a
为氢原子；
[0222]r4b
为氢原子)
[0223]
(51)如上述项目(50)所述的用途，其中，r1为取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团。
[0224]
(52)如上述项目(50)或(51)所述的用途，其中，r2为被选自取代基组g中的1个、2个或3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团；
[0225]
其中，取代基组g为由卤素、氰基及未取代烷基组成的组。
[0226]
(53)如上述项目(50)～(52)中任一项所述的用途，其中，r3为取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团。
[0227]
(54)如上述项目(50)所述的用途，其中，式(i)所示的化合物选自由化合物i-003、化合物i-005、化合物i-017及化合物i-023组成的组。
[0228]
(55)式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐用于抑制由sars-cov-2导致的传染病的重症化的用途。
[0229]
[化学式13]
[0230][0231]
(式中，y为n；
[0232]
r1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0233]
r2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；
[0234]
r3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0235]-x-为-nh-；
[0236]
m为0或1；
[0237]r5a
为氢原子；
[0238]r5b
为氢原子；
[0239]
n为1；
[0240]r4a
为氢原子；
[0241]r4b
为氢原子)
[0242]
(56)如上述项目(55)所述的用途，其中，r1为取代或未取代的5～6元芳香族杂环
式基团。
[0243]
(57)如上述项目(55)或(56)所述的用途，其中，r2为被选自取代基组g中的1个、2个或3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团；
[0244]
其中，取代基组g为由卤素、氰基及未取代烷基组成的组。
[0245]
(58)如上述项目(55)～(57)中任一项所述的用途，其中，r3为取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团。
[0246]
(59)如上述项目(55)所述的用途，其中，式(i)所示的化合物选自由化合物i-003、化合物i-005、化合物i-017及化合物i-023组成的组。
[0247]
(60)式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐用于在由sars-cov-2导致的传染病的症状显现之后、或者自判定sars-cov-2阳性起在72小时以内施予的用途。
[0248]
[化学式14]
[0249][0250]
(式中，y为n；
[0251]
r1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0252]
r2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；
[0253]
r3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0254]-x-为-nh-；
[0255]
m为0或1；
[0256]r5a
为氢原子；
[0257]r5b
为氢原子；
[0258]
n为1；
[0259]r4a
为氢原子；
[0260]r4b
为氢原子)
[0261]
(61)如上述项目(60)所述的用途，其中，r1为取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团。
[0262]
(62)如上述项目(60)或(61)所述的用途，其中，r2为被选自取代基组g中的1个、2个或3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团；
[0263]
其中，取代基组g为由卤素、氰基及未取代烷基组成的组。
[0264]
(63)如上述项目(60)～(62)中任一项所述的用途，其中，r3为取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团。
[0265]
(64)如上述项目(60)所述的用途，其中，式(i)所示的化合物选自由化合物i-003、化合物i-005、化合物i-017及化合物i-023组成的组。
[0266]
(65)式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐用于在由sars-cov-2导致的传染病的症状显现之后、或者自判定sars-cov-2阳性起在24小时以内施予的用途。
[0267]
[化学式15]
[0268][0269]
(式中，y为n；
[0270]
r1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0271]
r2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；
[0272]
r3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0273]-x-为-nh-；
[0274]
m为0或1；
[0275]r5a
为氢原子；
[0276]r5b
为氢原子；
[0277]
n为1；
[0278]r4a
为氢原子；
[0279]r4b
为氢原子)
[0280]
(66)如上述项目(65)所述的用途，其中，r1为取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团。
[0281]
(67)如上述项目(65)或(66)所述的用途，其中，r2为被选自取代基组g中的1个、2个或3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团；
[0282]
其中，取代基组g为由卤素、氰基及未取代烷基组成的组。
[0283]
(68)如上述项目(65)～(67)中任一项所述的用途，其中，r3为取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团。
[0284]
(69)如上述项目(65)所述的用途，其中，式(i)所示的化合物选自由化合物i-003、化合物i-005、化合物i-017及化合物i-023组成的组。
[0285]
(70)式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐用于抑制sars-cov-2的病毒传播的用途。
[0286]
[化学式16]
[0287][0288]
(式中，y为n；
[0289]
r1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0290]
r2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；
[0291]
r3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；
[0292]-x-为-nh-；
[0293]
m为0或1；
[0294]r5a
为氢原子；
[0295]r5b
为氢原子；
[0296]
n为1；
[0297]r4a
为氢原子；
[0298]r4b
为氢原子)
[0299]
(71)如上述项目(70)所述的用途，其中，r1为取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团。
[0300]
(72)如上述项目(70)或(71)所述的用途，其中，r2为被选自取代基组g中的1个、2个或3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团；
[0301]
其中，取代基组g为由卤素、氰基及未取代烷基组成的组。
[0302]
(73)如上述项目(70)～(72)中任一项所述的用途，其中，r3为取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团。
[0303]
(74)如上述项目(70)所述的用途，其中，式(i)所示的化合物选自由化合物i-003、化合物i-005、化合物i-017及化合物i-023组成的组。
[0304]
发明效果
[0305]
本发明涉及的化合物具有针对冠状病毒3cl蛋白酶的抑制活性，含有本发明涉及的化合物的医药组合物作为冠状病毒传染病的治疗剂及/或预防剂是有用的。
[0306]
另外，本发明涉及的化合物中，含有化合物(i-003)或化合物(i-005)的医药组合物作为医药原体是有用的。
[0307]
此外，含有化合物(i-003)的对甲苯磺酸盐晶体或化合物(i-005)的富马酸共晶体的医药组合物作为新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗剂是非常有用的。
附图说明
[0308]
[图1]示出式(i-a)所示的化合物的对甲苯磺酸盐i型晶体(form i)的粉末x射线衍射图案。横轴为2θ(
°
)，纵轴表示强度(count)。
[0309]
[图2]示出式(i-a)所示的化合物的对甲苯磺酸盐i型晶体的不对称单元中的结构。
[0310]
[图3]示出式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型(form i)的粉末x射线衍射图案。横轴为2θ(
°
)，纵轴表示强度(count)。
[0311]
[图4]示出式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型(form i)的不对称单元中的结构。
[0312]
[图5a]示出针对hcov-19/japan/ty7-501/2021感染小鼠(按1.00
×
104tcid
50
/只小鼠进行经鼻接种)、自刚刚感染之后起一天两次地施予介质或者单次施予(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体时的、感染1天后的肺内病毒效价。纵轴表示肺内病毒效价，横轴表示各施予组。
[0313]
[图5b]示出针对hcov-19/japan/ty7-501/2021感染小鼠(按1.00
×
104tcid
50
/只小鼠进行经鼻接种)、自刚刚感染之后起一天两次地施予介质及(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体时的、感染1天后的肺内病毒效价。纵轴表示肺内病毒效价，横轴表示各施予组。
[0314]
[图6a]示出针对hcov-19/japan/ty7-501/2021感染小鼠(按1.00
×
104tcid
50
/只小鼠进行经鼻接种)、自感染1天后起一天两次地施予介质及(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体2天时的、感染1-3天后的肺内病毒效价。纵轴表示肺内病毒效价，横轴表示自感染后起算的天数。
[0315]
[图6b]示出针对hcov-19/japan/ty7-501/2021感染小鼠(按1.00
×
104tcid
50
/只小鼠进行经鼻接种)、自感染3天后起一天两次地施予介质及(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体2天时的、感染1-5天后的肺内病毒效价。纵轴表示肺内病毒效价，横轴表示自感染后起算的天数。
[0316]
[图7]示出针对hcov-19/japan/ty7-501/2021感染小鼠(按1.00
×
104tcid
50
/只小鼠进行经鼻接种)、自感染1天后起一天三次地施予介质及(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体2天时的、感染1-3天后的肺内病毒效价。纵轴表示肺内病毒效价，横轴表示自感染后起算的天数。
[0317]
[图8a]示出针对hcov-19/japan/ty7-501/2021感染小鼠(按1.00
×
105tcid
50
/只小鼠进行经鼻接种，35-45周龄的高周龄退役小鼠)、自感染1天后起一天两次地施予介质及(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体5天时的、到感染7天后为止的体重变动。纵轴表示将感染当天的体重设为100％时的体重变动(％)，横轴表示自感染后起算的天数。
[0318]
[图8b]示出针对hcov-19/japan/ty7-501/2021感染小鼠(按1.00
×
105tcid
50
/只小鼠进行经鼻接种，35-45周龄的高周龄退役小鼠)、自感染1天后起一天两次地施予介质及(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体5天时的、到感染7天后为止的存活率。纵轴表示存活率(％)，横轴表示自感染后起算的天数。
[0319]
[图8c]示出针对hcov19/japan/ty/wk-521/2020株小鼠驯化株ma-p10感染小鼠(按1.00
×
103或1.00
×
104tcid
50
/只小鼠进行经鼻接种，15周龄小鼠)、自感染1天后起一天两次地施予介质及(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体5天时的、到感染7天后为止的体重变动。纵轴表示将感染当天的体重设为100％时的体重变动(％)，横轴表示自感染后起算的天数。
[0320]
[图8d]示出针对hcov19/japan/ty/wk-521/2020株小鼠驯化株ma-p10感染小鼠(按1.00
×
103或1.00
×
104tcid
50
/只小鼠进行经鼻接种，15周龄小鼠)、自感染1天后起一天两次地施予介质及(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体5天时的、到感染7天后为止的存活率。纵轴表示存活率(％)，横轴表示自感染后起算的天数。
[0321]
[图8e]示出针对hcov19/japan/ty/wk-521/2020株小鼠驯化株ma-p10感染小鼠(按1.00
×
103tcid
50
/只小鼠进行经鼻接种，35-45周龄的高周龄退役小鼠)、自感染1天后起一天两次地施予介质及(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体5天时的、到感染7天后为止的体重变动。纵轴表示将感染当天的体重设为100％时的体重变动(％)，横轴表示自感染后起算的天数。
[0322]
[图8f]示出针对hcov19/japan/ty/wk-521/2020株小鼠驯化株ma-p10感染小鼠(按1.00
×
103tcid
50
/只小鼠进行经鼻接种，35-45周龄的高周龄退役小鼠)、自感染1天后起一天两次地施予介质及(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体5天时的、到感染7天后为止的存活率。纵轴表示存活率(％)，横轴表示自感染后起算的天数。
[0323]
[图9]示出使hcov19/japan/ty11-927/2021感染仓鼠(按5.00
×
103pfu/只仓鼠进
行经鼻接种)与不接种病毒的给药仓鼠同住时的感染6天后的给药仓鼠的肺内病毒效价。给药仓鼠自刚刚感染之后起一天两次地施予了介质及(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体。纵轴表示肺内病毒效价，横轴表示各施予组。
[0324]
[图10]示出将化合物给药至hcov19/japan/ty11-927/2021感染仓鼠(按5.00
×
103pfu/只仓鼠进行经鼻接种)、自刚刚感染之后起使不接种病毒的非感染仓鼠同住时的感染6天后的感染(infected)及非感染(contact)仓鼠的肺内病毒效价。给药仓鼠自刚刚感染之后起一天两次地施予了介质及(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体。纵轴表示肺内病毒效价，横轴表示各施予组。
[0325]
[图11a]示出将化合物给药至hcov19/japan/ty11-927/2021感染仓鼠(按1.00
×
102tcid
50
/只仓鼠进行经鼻接种)、自感染2天后起使不接种病毒的非感染仓鼠同住时的感染5天后的感染(infected)及非感染(contact)仓鼠的肺内病毒效价。给药仓鼠自感染1天后起一天两次地施予了介质及(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体。纵轴表示肺内病毒效价，横轴表示各施予组。
[0326]
[图11b]示出将化合物给药至hcov19/japan/ty11-927/2021感染仓鼠(按1.00
×
102tcid
50
/只仓鼠进行经鼻接种)、自感染2天后起使不接种病毒的非感染仓鼠同住时的感染5天后的感染(infected)及非感染(contact)仓鼠的肺内病毒效价。给药仓鼠自感染1天后起一天两次地施予了介质及(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体。纵轴表示鼻甲中病毒效价，横轴表示各施予组。
[0327]
[图12a]示出针对hcov19/japan/ty/wk-521/2020株小鼠驯化株ma-p10感染小鼠(按3.00
×
102tcid
50
/只小鼠进行经鼻接种，37-57周龄小鼠)、在感染24小时前皮下施予介质及(i-b)所示的化合物时的、到感染14天后为止的体重变动。纵轴表示将感染当天的体重设为100％时的体重变动(％)，横轴表示自感染后起算的天数。
[0328]
[图12b]示出针对hcov19/japan/ty/wk-521/2020株小鼠驯化株ma-p10感染小鼠(按3.00
×
102tcid
50
/只小鼠进行经鼻接种，37-57周龄小鼠)、在感染24小时前皮下施予介质及(i-b)所示的化合物时的、到感染14天后为止的存活率。纵轴表示存活率(％)，横轴表示自感染后起算的天数。
具体实施方式
[0329]
以下，对本说明书中使用的各术语的含义进行说明。只要没有特别说明，各术语在单独使用的情况下或者与其他术语组合使用的情况下，均以相同的含义使用。
[0330]
术语“由
……
组成”是指仅具有构成要件。
[0331]
术语“包含”是指不限于构成要件，不排除未记载的要素。
[0332]
以下，示出实施方式来说明本发明。在本说明书的全文中，只要没有特别说明，单数形式的表达应理解为也包含其复数形式的概念。因此，只要没有特别说明，单数形式的冠词(例如，在英语情况下，“a”、“an”、“the”等)应理解为也包含其复数形式的概念。
[0333]
另外，本说明书中，只要没有特别说明，使用的术语应理解为以本领域中通常使用的含义使用。因此，只要不是另有定义，本说明书中使用的全部的专业术语及科学技术术语具有与本发明所属领域的技术人员的通常理解相同的含义。存在冲突时，本说明书(包括定义)优先。
[0334]
所谓“卤素”，包括氟原子、氯原子、溴原子、及碘原子。特别优选为氟原子及氯原子。
[0335]
所谓“烷基”，包括碳原子数为1～15、优选碳原子数为1～10、更优选碳原子数为1～6、进一步优选碳原子数为1～4的直链或支链状的烃基。例如，可举出甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、正庚基、异庚基、正辛基、异辛基、正壬基、正癸基等。
[0336]
作为“烷基”的优选方式，可举出甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基。作为进一步优选方式，可举出甲基、乙基、正丙基、异丙基、叔丁基。
[0337]
所谓“烯基”，包括在任意位置具有1个以上双键的、碳原子数为2～15、优选碳原子数为2～10、更优选碳原子数为2～6、进一步优选碳原子数为2～4的直链或支链状的烃基。例如，可举出乙烯基、烯丙基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基、异丁烯基、异戊二烯基(prenyl)、丁二烯基、戊烯基、异戊烯基、戊二烯基、己烯基、异己烯基、己二烯基、庚烯基、辛烯基、壬烯基、癸烯基、十一碳烯基、十二碳烯基、十三碳烯基、十四碳烯基、十五碳烯基等。
[0338]
作为“烯基”的优选方式，可举出乙烯基、烯丙基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基。作为进一步优选方式，可举出乙烯基、正丙烯基等。
[0339]
所谓“炔基”，包括在任意位置具有1个以上三键的、碳原子数为2～10、优选碳原子数为2～8、进一步优选碳原子数为2～6、进一步优选碳原子数为2～4的直链或支链状的烃基。也可以进一步在任意位置具有双键。例如，包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基、庚炔基、辛炔基、壬炔基、癸炔基等。
[0340]
作为“炔基”的优选方式，可举出乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基。作为进一步优选方式，可举出乙炔基、丙炔基等。
[0341]
所谓“芳香族碳环式基团”，是指单环或2环以上的、环状芳香族烃基。例如，可举出苯基、萘基、蒽基、菲基等。
[0342]
作为“芳香族碳环式基团”的优选方式，可举出苯基。
[0343]
所谓“6元芳香族碳环式基团”，是指单环的环状芳香族烃基。例如，可举出苯基。
[0344]
所谓“非芳香族碳环式基团”，是指单环或2环以上的、环状饱和烃基或环状非芳香族不饱和烃基。2环以上的“非芳香族碳环式基团”也包括在单环或2环以上的非芳香族碳环式基团上稠合上述“芳香族碳环式基团”中的环而得到的基团。
[0345]
此外，“非芳香族碳环式基团”也包括如以下这样进行了桥连的基团、或形成螺环的基团。
[0346]
[化学式17]
[0347][0348]
作为单环的非芳香族碳环式基团，优选碳原子数为3～16，更优选碳原子数为3～12，进一步优选碳原子数为4～8。例如，可举出环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基、环己二烯基等。
[0349]
作为2环以上的非芳香族碳环式基团，优选碳原子数为8～20，更优选碳原子数为8～16。例如，可举出茚满基、茚基、苊烯基、四氢萘基、芴基等。
[0350]
所谓“芳香族杂环式基团”，是指在环内具有1个以上的从o、s及n中任意选择的相同或不同的杂原子的、单环或2环以上的芳香族环式基团。
[0351]
2环以上的芳香族杂环式基团也包括在单环或2环以上的芳香族杂环式基团上稠合上述“芳香族碳环式基团”中的环而得到的基团，可以在任意环上具有该连接键。
[0352]
作为单环的芳香族杂环式基团，优选为5～8元，更优选为5元或6元。作为5元芳香族杂环式基团，例如，可举出吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基等。作为6元芳香族杂环式基团，例如，可举出吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等。
[0353]
作为2环的芳香族杂环式基团，优选为8～10元，更优选为9元或10元。例如，可举出吲哚基、异吲哚基、吲唑基、吲哚嗪基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、萘啶基、喹喔啉基、嘌呤基、蝶啶基、苯并咪唑基、苯并异噁唑基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并异噻唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并三唑基、咪唑并吡啶基、三唑并吡啶基、咪唑并噻唑基、吡嗪并哒嗪基、噁唑并吡啶基、噻唑并吡啶基等。作为9元芳香族杂环式基团，可举出吲哚基、异吲哚基、吲唑基、吲哚嗪基、嘌呤基、苯并咪唑基、苯并异噁唑基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并异噻唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、苯并呋喃基、咪唑并吡啶基、三唑并吡啶基、噁唑并吡啶基、噻唑并吡啶基等。作为10元芳香族杂环式基团，可举出喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、萘啶基、喹喔啉基、蝶啶基、吡嗪并哒嗪基等。
[0354]
作为3环以上的芳香族杂环式基团，优选为13～15元。例如，可举出咔唑基、吖啶基、呫吨基、吩噻嗪基、吩噁噻基、吩噁嗪基、二苯并呋喃基等。
[0355]
所谓“5～6元芳香族杂环式基团”，是指上述“芳香族杂环式基团”中的、5元或6元的芳香族杂环式基团。
[0356]
所谓“9～10元芳香族杂环式基团”，是指上述“芳香族杂环式基团”中的、9元或10元的芳香族杂环式基团。
[0357]
所谓“非芳香族杂环式基团”，是指在环内具有1个以上的从o、s及n中任意选择的相同或不同的杂原子的、单环或2环以上的非芳香族环式基团。2环以上的非芳香族杂环式基团也包括在单环或2环以上的非芳香族杂环式基团上稠合上述“芳香族碳环式基团”、“非芳香族碳环式基团”、及/或“芳香族杂环式基团”中的各个环而得到的基团、以及在单环或2环以上的非芳香族碳环式基团上稠合上述“芳香族杂环式基团”中的环而得到的基团，可以在任意环上具有该连接键。
[0358]
此外，“非芳香族杂环式基团”也包括如以下这样进行了桥连的基团、或形成螺环的基团。
[0359]
[化学式18]
[0360][0361]
作为单环的非芳香族杂环式基团，优选为3～8元，更优选为5元或6元。
[0362]
作为3元非芳香族杂环式基团，例如，可举出硫杂环丙烷基、氧杂环丙基、氮丙啶基。作为4元非芳香族杂环式基团，例如，可举出氧杂环丁基、氮杂环丁基。作为5元非芳香族杂环式基团，例如，可举出氧杂硫杂环戊基、噻唑烷基、吡咯烷基、吡咯啉基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、四氢呋喃基、二氢噻唑基、四氢异噻唑基、二氧杂环戊基、间二氧杂环戊烯基、四氢噻吩基等。作为6元非芳香族杂环式基团，例如，可举出二氧杂环己基、噻烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、吗啉代基、硫代吗啉基、硫代吗啉代基、二氢吡啶基、四氢吡啶基、四氢吡喃基、二氢噁嗪基、四氢哒嗪基、六氢嘧啶基、二噁嗪基、噻炔基、噻嗪基等。作为7元非芳香族杂环式基团，例如，可举出六氢氮杂基、四氢二氮杂基、氧杂环庚烷基。
[0363]
作为2环以上的非芳香族杂环式基团，优选为8～20元，更优选为8～13元，进一步优选为8～10元。例如，可举出吲哚啉基、异吲哚啉基、苯并二氢吡喃基、异苯并二氢吡喃基等。
[0364]
本说明书中，所谓“可被取代基组α取代”，是指“可被选自取代基组α中的1个以上基团取代”。对于取代基组β、γ及γ’而言也是同样的。
[0365]
取代基组α：卤素、羟基、羧基、烷基氧基、卤代烷基氧基、烯基氧基、炔基氧基、硫烷基、及氰基。
[0366]
取代基组β：卤素、羟基、羧基、氰基、可被取代基组α取代的烷基、可被取代基组α取代的烯基、可被取代基组α取代的炔基、可被取代基组α取代的烷基羰基、可被取代基组α取代的烯基羰基、可被取代基组α取代的炔基羰基、可被取代基组α取代的烷基硫烷基、可被取代基组α取代的烯基硫烷基、可被取代基组α取代的炔基硫烷基、可被取代基组α取代的烷基亚磺酰基、可被取代基组α取代的烯基亚磺酰基、可被取代基组α取代的炔基亚磺酰基、可被取代基组α取代的烷基磺酰基、可被取代基组α取代的烯基磺酰基、可被取代基组α取代的炔基磺酰基，
[0367]
可被取代基组γ取代的芳香族碳环式基团、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环式基团、可被取代基组γ取代的芳香族杂环式基团、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环式基团、可被取代基组γ取代的芳香族碳环烷基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环烷基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环烷基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环烷基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环羰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环羰基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环羰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环羰基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环氧羰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环氧羰基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环氧羰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环氧羰基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环硫烷基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环硫烷基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环硫烷基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环硫烷基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环亚磺酰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环亚磺酰基、
可被取代基组γ取代的芳香族杂环亚磺酰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环亚磺酰基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环磺酰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环磺酰基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环磺酰基及可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环磺酰基。
[0368]
取代基组γ：取代基组α、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烯基、炔基、烷基羰基、卤代烷基羰基、烯基羰基及炔基羰基。
[0369]
取代基组γ’：取代基组γ及氧代基。
[0370]
作为“取代芳香族碳环式基团”及“取代芳香族杂环式基团”的“芳香族碳环”及“芳香族杂环”的环上的取代基，可举出以下的取代基组b。环上的任意位置的原子可以与选自以下的取代基组b中的1个以上基团键合。
[0371]
取代基组b：卤素、羟基、羧基、甲酰基、甲酰基氧基、硫烷基、亚磺基、磺基、硫代甲酰基、硫代羧基、二硫代羧基、硫代氨基甲酰基、氰基、硝基、亚硝基、叠氮基、肼基、脲基、脒基、胍基、五氟硫基、三烷基甲硅烷基，
[0372]
可被取代基组α取代的烷基、可被取代基组α取代的烯基、可被取代基组α取代的炔基、可被取代基组α取代的烷基氧基、可被取代基组α取代的烯基氧基、可被取代基组α取代的炔基氧基、可被取代基组α取代的烷基羰基氧基、可被取代基组α取代的烯基羰基氧基、可被取代基组α取代的炔基羰基氧基、可被取代基组α取代的烷基羰基、可被取代基组α取代的烯基羰基、可被取代基组α取代的炔基羰基、可被取代基组α取代的烷基氧基羰基、可被取代基组α取代的烯基氧基羰基、可被取代基组α取代的炔基氧基羰基、可被取代基组α取代的烷基硫烷基、可被取代基组α取代的烯基硫烷基、可被取代基组α取代的炔基硫烷基、可被取代基组α取代的烷基亚磺酰基、可被取代基组α取代的烯基亚磺酰基、可被取代基组α取代的炔基亚磺酰基、可被取代基组α取代的烷基磺酰基、可被取代基组α取代的烯基磺酰基、可被取代基组α取代的炔基磺酰基，
[0373]
可被取代基组β取代的氨基、可被取代基组β取代的亚氨基、可被取代基组β取代的氨基甲酰基、可被取代基组β取代的氨磺酰基，
[0374]
可被取代基组γ取代的芳香族碳环式基团、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环式基团、可被取代基组γ取代的芳香族杂环式基团、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环式基团、可被取代基组γ取代的芳香族碳环氧基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环氧基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环氧基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环氧基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环羰基氧基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环羰基氧基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环羰基氧基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环羰基氧基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环羰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环羰基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环羰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环羰基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环氧羰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环氧羰基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环氧羰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环氧羰基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环烷基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环烷基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环烷基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环烷基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环烷基氧基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环烷基氧基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环烷基氧基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环烷基
氧基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环烷基氧基羰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环烷基氧基羰基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环烷基氧基羰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环烷基氧基羰基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环烷基氧基烷基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环烷基氧基烷基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环烷基氧基烷基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环烷基氧基烷基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环硫烷基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环硫烷基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环硫烷基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环硫烷基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环亚磺酰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环亚磺酰基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环亚磺酰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环亚磺酰基、可被取代基组γ取代的芳香族碳环磺酰基、可被取代基组γ’取代的非芳香族碳环磺酰基、可被取代基组γ取代的芳香族杂环磺酰基及可被取代基组γ’取代的非芳香族杂环磺酰基。
[0375]
作为“取代非芳香族碳环式基团”及“取代非芳香族杂环式基团”的“非芳香族碳环”及“非芳香族杂环”的环上的取代基，可举出以下的取代基组c。环上的任意位置的原子可以与选自以下的取代基组c时的1个以上基团键合。
[0376]
取代基组c：取代基组b及氧代基。
[0377]“非芳香族碳环”及“非芳香族杂环”被“氧代基”取代的情况下，是指碳原子上的2个氢原子如以下这样被取代的环。
[0378]
[化学式19]
[0379][0380]
作为r1中的“取代或未取代的芳香族杂环式基团”或“取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团”的取代基，例如，可举出：
[0381]
卤素；
[0382]
取代或未取代的烷基。
[0383]
可以被选自它们中的1个以上基团取代。
[0384]
作为r1中的“取代或未取代的芳香族杂环式基团”或“取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团”的取代基，例如，可举出：
[0385]
卤素；
[0386]
取代烷基(羟基作为取代基)；未取代烷基。
[0387]
可以被选自它们中的1个以上基团取代。
[0388]
作为r2中的“取代或未取代的6元芳香族碳环式基团”的取代基，例如，可举出：
[0389]
卤素；氰基；
[0390]
取代或未取代的烷基。
[0391]
可以被选自它们中的1个以上基团取代。
[0392]
作为r2中的“取代或未取代的6元芳香族碳环式基团”的取代基，例如，可举出：
[0393]
卤素；氰基；
[0394]
取代烷基(卤素作为取代基)；未取代烷基。
[0395]
可以被选自它们中的1个以上基团取代。
[0396]
作为r3中的“取代或未取代的芳香族杂环式基团”或“取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团”的取代基，例如，可举出：
[0397]
卤素；
[0398]
取代或未取代的烷基；
[0399]
取代或未取代的非芳香族杂环式基团。
[0400]
可以被选自它们中的1个以上基团取代。
[0401]
作为r3中的“取代或未取代的芳香族杂环式基团”或“取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团”的取代基，例如，可举出：
[0402]
卤素；
[0403]
取代烷基(卤素、羟基、烷基羰基氨基、非芳香族杂环式基团作为取代基)；未取代烷基；
[0404]
取代非芳香族杂环式基团(烷基羰基作为取代基)；未取代非芳香族杂环式基团。
[0405]
可以被选自它们中的1个以上基团取代。
[0406]
以下示出式(i)所示的化合物中的、r1、r2、r3及m的优选方式。作为式(i)所示的化合物，可例示以下所示的具体例的所有组合方式。需要说明的是，y、-x-、r
5a
、r
5b
、n、r
4a
及r
4b
如上述项目(1)中所示的那样。
[0407]
[化学式20]
[0408][0409]
r1可举出取代或未取代的芳香族杂环式基团(以下记为a-1)。
[0410]
r1可举出取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团(以下记为a-2)。
[0411]
r1可举出被卤素、取代烷基(取代基：羟基)或未取代烷基取代的芳香族杂环式基团或未取代芳香族杂环式基团(以下记为a-3)。
[0412]
r1可举出被卤素、取代烷基(取代基：羟基)或未取代烷基取代的5～6元芳香族杂环式基团或未取代5～6元芳香族杂环式基团(以下记为a-4)。
[0413]
r1可举出被未取代烷基或卤素取代的芳香族杂环式基团或未取代芳香族杂环式基团(以下记为a-5)。
[0414]
r1可举出被未取代烷基或卤素取代的5～6元芳香族杂环式基团或未取代5～6元芳香族杂环式基团(以下记为a-6)。
[0415]
r1可举出被未取代烷基或卤素取代的芳香族杂环式基团(以下记为a-7)。
[0416]
r1可举出被未取代烷基或卤素取代的5～6元芳香族杂环式基团(以下记为a-8)。
[0417]
r1可举出被未取代烷基取代的芳香族杂环式基团或未取代芳香族杂环式基团(以下记为a-9)。
[0418]
r1可举出被未取代烷基取代的5～6元芳香族杂环式基团或未取代5～6元芳香族
杂环式基团(以下记为a-10)。
[0419]
r1可举出被未取代烷基取代的芳香族杂环式基团(以下记为a-11)。
[0420]
r1可举出被未取代烷基取代的5～6元芳香族杂环式基团(以下记为a-12)。
[0421]
r2可举出取代或未取代的6元芳香族碳环式基团(以下记为b-1)。
[0422]
r2可举出被卤素、氰基、取代烷基(取代基：卤素)或未取代烷基取代的6元芳香族碳环式基团(以下记为b-2)。
[0423]
r2可举出被卤素、氰基、或未取代烷基取代的6元芳香族碳环式基团(以下记为b-3)。
[0424]
r2可举出被选自取代基组g(取代基组g：卤素、氰基及未取代烷基)中的2～4个取代基取代的6元芳香族碳环式基团(以下记为b-4)。
[0425]
r2可举出被选自取代基组g(取代基组g：卤素、氰基及未取代烷基)中的2～3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团(以下记为b-5)。
[0426]
r2可举出被选自取代基组g(取代基组g：卤素、氰基及未取代烷基)中的3～4个取代基取代的6元芳香族碳环式基团(以下记为b-6)。
[0427]
r2可举出被3个卤素取代的6元芳香族碳环式基团(以下记为b-7)。
[0428]
r3可举出取代或未取代的芳香族杂环式基团(以下记为c-1)。
[0429]
r3可举出取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团(以下记为c-2)。
[0430]
r3可举出被卤素或者取代或未取代烷基取代的芳香族杂环式基团(以下记为c-3)。
[0431]
r3可举出被卤素或者取代或未取代烷基取代的9～10元芳香族杂环式基团(以下记为c-4)。
[0432]
r3可举出被卤素或未取代烷基取代的芳香族杂环式基团(以下记为c-5)。
[0433]
r3可举出被卤素或未取代烷基取代的9～10元芳香族杂环式基团(以下记为c-6)。
[0434]
r3可举出被卤素或未取代烷基取代的吲唑基(以下记为c-7)。
[0435]
r3可举出被卤素及未取代烷基取代的吲唑基(以下记为c-8)。
[0436]
m可举出0或1(以下记为d-1)。
[0437]
m可举出0(以下记为d-2)。
[0438]
m可举出1(以下记为d-3)。
[0439]
作为式(i)所示的化合物，可例示以下所示的方式。
[0440]
(a-1)
[0441]
r1为(a-12)；
[0442]
r2为(b-7)；
[0443]
r3为(c-8)；
[0444]
m为(d-2)。
[0445]
(a-2)
[0446]
r1为(a-12)；
[0447]
r2为(b-7)；
[0448]
r3为(c-8)；
[0449]
m为(d-3)。
[0450]
(a-3)
[0451]
r1为(a-12)；
[0452]
r2为(b-7)；
[0453]
r3为(c-8)；
[0454]
m为(d-1)。
[0455]
(a-4)
[0456]
r1为(a-4)；
[0457]
r2为(b-4)；
[0458]
r3为(c-4)；
[0459]
m为(d-1)。
[0460]
作为式(i)所示的化合物，优选为式(i-a)所示的化合物、式(i-b)所示的化合物。
[0461]
式(i)、式(i-a)及式(i-b)所示的化学结构式也在各式中统一使用。
[0462]
式(i)所示的化合物并不限定于特定的异构体，而包括所有可能的异构体(例如，酮-烯醇异构体、亚胺-烯胺异构体、非对映异构体、光学异构体、旋转异构体等)、消旋体或它们的混合物。例如，式(i)所示的化合物包括以下这样的互变异构体。
[0463]
[化学式21]
[0464][0465]
例如，式(i-a)所示的化合物、化合物(i-003)包括以下这样的互变异构体及它们的混合物。
[0466]
[化学式22]
[0467][0468]
例如，式(i-b)所示的化合物、化合物(i-005)包括以下这样的互变异构体及它们的混合物。
[0469]
[化学式23]
[0470][0471]
式(i)所示的化合物的一个以上的氢、碳及/或其他原子各自可被氢、碳及/或其他原子的同位素取代。作为这样的同位素的例子，各自如2h、3h、
11
c、
13
c、
14
c、
15
n、
18
o、
17
o、
31
p、
32
p、
35
s、
18
f、
123
i及
36
cl这样包含氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘及氯。式(i)所示的化合物也包括被这样的同位素取代而成的化合物。该被同位素取代而成的化合物作为医药品也是有用的，包括式(i)所示的化合物的所有放射性标记体。另外，用于制造该“放射性标记体”的“放射性标记化方法”也包括于本发明中，该“放射性标记体”作为代谢药物动态研究、结合分析中的研究及/或诊断的工具是有用的。
[0472]
另外，本发明的晶体也可以为氘转化体。本发明的晶体也可以被同位元素(例如，3h、
14
c、
35
s、
125
i等)标记。
[0473]
式(i)所示的化合物的放射性标记体可以利用该技术领域中公知的方法制备。例如，式(i)所示的氚标记化合物可以通过下述方式制备：通过使用了氚的催化脱卤反应，向式(i)所示的特定的化合物中导入氚。该方法包括下述步骤：在适当的催化剂、例如pd/c的存在下，在碱的存在下或非存在下，使适当地对式(i)所示的化合物进行卤素取代而得到的前体与氚气体反应。用于制备氚标记化合物的其他适当方法可以参照“isotopes in the physical and biomedical sciences,vol.1,labeled compounds(part a),chapter 6(1987年)”。
14
c-标记化合物可以通过使用具有
14
c碳的原料来制备。
[0474]
作为式(i)所示的化合物的制药上允许的盐，例如，可举出式(i)所示的化合物与碱金属(例如，锂、钠、钾等)、碱土金属(例如，钙、钡等)、镁、过渡金属(例如，锌、铁等)、氨、有机碱(例如，三甲基胺、三乙基胺、二环己基胺、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、葡甲胺、乙二胺、吡啶、甲基吡啶、喹啉等)及氨基酸形成的盐、或者与无机酸(例如，盐酸、硫酸、硝酸、碳酸、氢溴酸、磷酸、氢碘酸等)、及有机酸(例如，甲酸、乙酸、丙酸、三氟乙酸、柠檬酸、乳酸、酒石酸、草酸、马来酸、富马酸、琥珀酸、苯乙醇酸、戊二酸、苹果酸、苯甲酸、邻苯二甲酸、抗坏血酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、三氟乙酸等)形成的盐。这些盐可以利用通常所实施的方法来形成。
[0475]
作为式(i-a)所示的化合物的制药上允许的盐，例如由式(i-a)所示的化合物与抗衡分子或抗衡离子形成，可包含任意数目的抗衡分子或抗衡离子。式(i-a)所示的化合物的制药上允许的盐是指通过在化合物与抗衡分子或抗衡原子之间进行质子转移来介导离子键的盐。
[0476]
作为式(i-a)所示的化合物的制药上允许的盐，优选为式(i-a)所示的化合物的对甲苯磺酸盐。
[0477]
本发明的制剂中，可以使用式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐的复合体。式
(i)所示的化合物或其制药上允许的盐有时形成溶剂合物(例如，水合物等)、共晶体及/或包合物，本说明书中，将它们记载为“复合体”。
[0478]
本说明书中使用的“溶剂合物”是指，可以使任意数目的溶剂分子(例如，水分子等)与例如式(i)所示的化合物配位。通过将式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐放置于大气中，从而吸收水分，存在吸附水附着的情况、形成水合物的情况。
[0479]
作为溶剂分子，例如可举出乙腈、氯苯、氯仿、环己烷、1,2-二氯乙烯、二氯甲烷、1,2-二甲氧基乙烷、n,n-二甲基乙酰胺、n,n-二甲基甲酰胺、1,4-二氧杂环己烷、2-乙氧基乙醇、乙二醇、甲酰胺、己烷、甲醇、2-甲氧基乙醇、甲基丁基酮、甲基环己烷、n-甲基吡咯烷酮、硝基甲烷、吡啶、环丁砜、四氢化萘、甲苯、1,1,2-三氯乙烯、二甲苯、乙酸、苯甲醚、1-丁醇、2-丁醇、乙酸正丁酯、叔丁基甲基醚、枯烯、二甲基亚砜、乙酸乙酯、二乙基醚、甲酸乙酯、甲酸、庚烷、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、乙酸甲酯、3-甲基-1-丁醇、甲基乙基酮、甲基异丁基酮、2-甲基-1-丙醇、戊烷、1-戊醇、1-丙醇、2-丙醇、乙酸丙酯、四氢呋喃、水(即水合物)、乙醇、丙酮、1,1-二乙氧基丙烷、1,1-二甲氧基甲烷、2,2-二甲氧基丙烷、异辛烷、异丙基醚、甲基异丙基酮、甲基四氢呋喃、石油醚、三氯乙酸及三氟乙酸，优选可举出乙酸、苯甲醚、1-丁醇、2-丁醇、乙酸正丁酯、叔丁基甲基醚、枯烯、二甲基亚砜、乙酸乙酯、二乙基醚、甲酸乙酯、甲酸、庚烷、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、乙酸甲酯、3-甲基-1-丁醇、甲基乙基酮、甲基异丁基酮、2-甲基-1-丙醇、戊烷、1-戊醇、1-丙醇、2-丙醇、乙酸丙酯、四氢呋喃、水(即水合物)、乙醇、丙酮、1,1-二乙氧基丙烷、1,1-二甲氧基甲烷、2,2-二甲氧基丙烷、异辛烷、异丙基醚、甲基异丙基酮、甲基四氢呋喃、石油醚、三氯乙酸及三氟乙酸，更优选可举出水(即水合物)、乙醇、丙酮、1,1-二乙氧基丙烷、1,1-二甲氧基甲烷、2,2-二甲氧基丙烷、异辛烷、异丙基醚、甲基异丙基酮、甲基四氢呋喃、石油醚、三氯乙酸及三氟乙酸等。
[0480]
本说明书中使用的“共晶体”是指抗衡(counter)分子在同一晶格内规则地排列，可包含任意数目的抗衡分子。另外，所谓共晶体，是指：化合物与抗衡分子的分子间相互作用介由氢键、范德华力等非共价键性且非离子性的化学相互作用的物质。
[0481]
例如，作为式(i-b)所示的化合物的共晶体，由式(i-b)所示的化合物和抗衡分子组成，可包含任意数目的抗衡分子。优选由式(i-b)所示的化合物和富马酸组成，可包含任意数目的富马酸。进一步优选为式(i-b)所示的化合物及富马酸的摩尔比为1：1的共晶体。
[0482]
共晶体在下述方面与盐有区别：化合物本质上保持无电荷或中性。
[0483]
共晶体在下述方面与水合物或溶剂合物有区别：抗衡分子不是水或溶剂。
[0484]
本说明书中使用的“晶体”是指构成原子、离子、分子等在三维上有规律地排列的固体，与不具有这样的有规律的内部结构的非晶固体有区别。本发明的晶体可以为单晶、双晶、多晶等。
[0485]
此外，“晶体”有时存在组成相同但晶体中的排列不同的“多晶型”，将它们统称为“晶型”。
[0486]
晶型及结晶度例如可通过包括粉末x射线衍射测定、拉曼光谱法、红外吸收光谱测定法、水分吸收解吸测定、差示扫描量热测定、溶解特性在内的多种技术来测定。
[0487]
另外，通过将式(i)所示的化合物、其制药上允许的盐或它们的复合体重结晶，有时形成“多晶型”。
[0488]
本发明制剂中，可使用这样的各种盐、复合体(水合物、溶剂合物、共晶体、包合
物)、多晶型，另外，也可以使用它们中两种以上的混合物。
[0489]
(粉末x射线衍射(xrpd))
[0490]
粉末x射线衍射(xrpd)是用于测定固体的晶型及结晶性的灵敏度最好的分析方法之一。若向晶体照射x射线，则在晶格面发生反射，相互干涉，显示与结构的周期对应的有序的衍射线。另一方面，对于非晶固体，通常，在其结构中不具有有序的重复周期，因此，不发生衍射现象，显示无特征的宽xrpd图案(也被称为光晕图案)。
[0491]
式(i-a)及式(i-b)所示的化合物的晶型可通过粉末x射线衍射图案及特征衍射峰识别。式(i-a)及式(i-b)所示的化合物的晶型可通过特征衍射峰的存在与其他晶型区分。
[0492]
本说明书中使用的特征衍射峰是从观测到的衍射图案选择的峰。特征衍射峰优选从衍射图案中的约10个、更优选约5个、进一步优选约3个中选择。
[0493]
在对多种晶体进行区分方面，与峰的强度相比，在该晶体被确认、在其他晶体中未被确认的峰成为对于确定该晶体而言优选的特征峰。如果是这样的特征峰，则一个或两个峰也可以表征该晶体。对进行测定而得到的图进行比较，如果这些特征峰一致，则可以说粉末x射线衍射图案实质上一致。
[0494]
通常，粉末x射线衍射中的衍射角(2θ)在
±
0.2
°
的范围内可能产生误差，因此，需要理解为粉末x射线衍射的衍射角的值也包含
±
0.2
°
左右的范围内的数值。因此，不仅粉末x射线衍射中的峰的衍射角完全一致的晶体，而且峰的衍射角以
±
0.2
°
左右的误差而一致的晶体也被包含在本发明中。
[0495]
已知以下的表及图中显示的峰的强度通常可根据多种因素、例如相对于x射线束而言的晶体的择优取向的效果、粗大粒子的影响、被分析的物质的纯度或样品的结晶度而发生改变。另外，关于峰位置，也可基于样品高度的变动而发生偏移。此外，使用不同波长进行测定时，根据布拉格公式(nλ＝2dsinθ)，可得到不同的偏移，但这样的通过使用其他波长而得到的其他xrpd图案也被包含在本发明的范围内。
[0496]
(单晶结构分析)
[0497]
通过确定晶体的方法之一，可得到该晶体中的结晶学的参数、以及原子坐标(表示各原子的空间位置关系的值)及三维结构模型。参考樱井敏雄著“x射线结构分析的指南”裳华房发行(1983年)，stout&jensen著x-ray structure determination：a practical guide,macmillan co.,new york(1968)等。在鉴定本发明这样的复合体、盐、光学异构体、互变异构体、几何异构体的晶体的结构时，单晶结构分析是有用的。
[0498]
本发明涉及的化合物由于具有冠状病毒3cl蛋白酶抑制活性，因此作为冠状病毒3cl蛋白酶参与的疾病的治疗及/或预防剂有用。本发明中，提及“治疗剂及/或预防剂”时，也包含症状改善剂。作为冠状病毒3cl蛋白酶参与的疾病，可举出病毒传染病，优选可举出冠状病毒传染病。
[0499]
作为一个方式，作为冠状病毒，可举出感染人的冠状病毒。作为感染人的冠状病毒，可举出hcov-229e、hcov-nl63、hcov-hku1、hcov-oc43、sars-cov、mers-cov、及/或sars-cov-2。
[0500]
作为一个方式，作为冠状病毒，可举出α冠状病毒及/或β冠状病毒，更优选可举出β冠状病毒，进一步优选可举出sarbecovirus。
[0501]
作为一个方式，作为α冠状病毒，可举出hcov-229e及hcov-nl63。特别优选可举出
hcov-229e。
[0502]
作为一个方式，作为β冠状病毒，可举出hcov-hku1、hcov-oc43、sars-cov、mers-cov、及/或sars-cov-2。优选可举出hcov-oc43或sars-cov-2，特别优选可举出sars-cov-2。
[0503]
作为一个方式，作为β冠状病毒，可举出β冠状病毒谱系a(β-coronavirus lineage a)、β冠状病毒谱系b(β-coronavirus lineage b)、及β冠状病毒谱系c(β-coronavirus lineage c)。更优选可举出β冠状病毒谱系a(β-coronavirus lineage a)、及β冠状病毒谱系b(β-coronavirus lineage b)，特别优选可举出β冠状病毒谱系b(β-coronavirus lineage b)。
[0504]
作为β冠状病毒谱系a(β-coronavirus lineage a)，例如可举出hcov-hku1及hcov-oc43，优选可举出hcov-oc43。作为β冠状病毒谱系b(β-coronavirus lineage b)，例如可举出sars-cov及sars-cov-2，优选可举出sars-cov-2。作为β冠状病毒谱系c(β-coronavirus lineage c)，优选可举出mers-cov。
[0505]
作为一个方式，作为冠状病毒，可举出hcov-229e、hcov-oc43、及/或sars-cov-2，特别优选可举出sars-cov-2。
[0506]
需要说明的是，通常已知病毒在反复增殖、感染的过程中变异。在上述冠状病毒中，只要是本发明涉及的化合物能够发挥冠状病毒3cl蛋白酶抑制活性的病毒株即可，不仅包括本领域中已知的变异株，而且也包括今后出现的变异株。作为sars-cov-2的已知的变异株，例如，可举出本说明书的实施例中使用的变异株。
[0507]
作为冠状病毒传染病，可举出由hcov-229e、hcov-nl63、hcov-oc43、hcov-hku1、sars-cov、mers-cov、及/或sars-cov-2导致的传染病。优选可举出由hcov-229e、hcov-oc43、及/或sars-cov-2导致的传染病，特别优选可举出由sars-cov-2导致的传染病。
[0508]
作为冠状病毒传染病，特别优选可举出新型冠状病毒传染病(covid-19)。
[0509]
新型冠状病毒感染者的病情轻重程度分类示例如下。(参考：新型冠状病毒传染病covid-19诊疗指南第5.2版(日本厚生劳动省))
[0510]
(轻症)
[0511]
氧饱和度为96％以上。临床状态为：无呼吸器官症状，或仅有咳嗽，无呼吸困难，在任意情况下，均未发现肺炎表现。
[0512]
(中症i)
[0513]
氧饱和度小于96％且大于93％。有呼吸困难，有肺炎表现。
[0514]
(中症ii)
[0515]
氧饱和度小于93％。有呼吸衰竭，需要给氧。
[0516]
(重症)
[0517]
进入icu或需要人工呼吸器。
[0518]
上述的分类是日本的病情轻重程度分类的定义，例如，可引用中国、美国nih的病情轻重程度分类。
[0519]
另外，所谓无症状的sars-cov-2感染者，是指无症状病原体携带者。例如，可举出未确认到covid-19症状的14种症状的人。
[0520]
(covid-19的14种症状：疲劳感、肌肉或身体疼痛、头痛、寒战、感觉发热、味觉异常、嗅觉异常、流鼻涕或鼻塞、咽喉痛、咳嗽、气短、恶心、呕吐、腹泻)
[0521]
本说明书中，所谓covid-19的12种症状，可举出疲劳感、肌肉或身体疼痛、头痛、寒战、感觉发热、流鼻涕或鼻塞、咽喉痛、咳嗽、气短、恶心、呕吐、腹泻。
[0522]
本说明书中，重症化抑制是指：抑制无症状的sars-cov-2感染者上升至被分类为轻症、中症i、中症ii或重症的病情轻重程度。
[0523]
本说明书中，重症化抑制是指：抑制无症状的sars-cov-2感染者或轻症的sars-cov-2感染者上升至被分类为中症i、中症ii或重症的病情轻重程度。
[0524]
本说明书中，重症化抑制是指：抑制无症状的sars-cov-2感染者、轻症的sars-cov-2感染者或中症i的sars-cov-2感染者上升至被分类为中症ii或重症的病情轻重程度。
[0525]
本说明书中，重症化抑制是指：抑制无症状的sars-cov-2感染者、轻症的sars-cov-2感染者、中症i的sars-cov-2感染者或中症ii的sars-cov-2感染者上升至被分类为重症的病情轻重程度。
[0526]
本说明书中，重症化抑制是指：通过本发明的药剂的病毒增殖抑制效果，sars-cov-2感染者的住院、死亡风险减小。
[0527]
本说明书中，重症化抑制是指：通过本发明的药剂的病毒增殖抑制效果，减轻sars-cov-2感染者的肺内的炎症。
[0528]
本说明书中，重症化抑制是指：通过本发明的药剂的病毒增殖抑制效果，抑制由sars-cov-2的病毒感染所引起的肺炎。
[0529]
本说明书中，重症化抑制是指：通过本发明的药剂的病毒增殖抑制效果，抑制由sars-cov-2的病毒感染所引起的宿主的过度免疫反应。
[0530]
作为一个实施方式，可举出将本发明的医药组合物施予至sars-cov-2感染者中的具有至少一种如下所示的重症化风险因素的感染者。
[0531]
·
50岁以上
[0532]
·
肥胖(bmi为30kg/m2以上)
[0533]
·
心血管疾病(包括包含高血压、先天性心脏病在内的心血管系统疾病)
[0534]
·
慢性肺病(包括哮喘、间质性肺病)
[0535]
·
1型或2型糖尿病
[0536]
·
慢性肾损伤(包括透析患者)
[0537]
·
慢性肝病
[0538]
·
免疫抑制状态(例：恶性肿瘤治疗、骨髓或器官移植、免疫缺陷、控制不良的hiv、aids、镰状红细胞贫血、地中海贫血、免疫抑制剂的长期施予)
[0539]
·
慢性阻塞性肺病(copd)
[0540]
·
血脂异常
[0541]
·
吸烟
[0542]
·
实体器官移植后的免疫缺陷
[0543]
·
妊娠
[0544]
·
患有神经发育疾病、复杂病情的患者(例如：大脑性麻痹、先天性疾病)
[0545]
·
医疗依赖度高的患者(例如：气管切开、胃造瘘、正压通气)
[0546]
作为一个实施方式，本发明的医药组合物可用于向具有至少一种重症化风险因素的感染者施予来抑制covid-19症状的重症化。
[0547]
作为一个实施方式，本发明的医药组合物可用于患有由sars-cov-2导致的肺炎的患者。
[0548]
作为一个实施方式，可举出将本发明的医药组合物施予至sars-cov-2感染者中的具有至少一种如下所示的重症化风险因素的感染者。
[0549]
·
安装ecmo(体外式膜型人工肺)的患者
[0550]
·
安装人工呼吸器的患者
[0551]
·
进入icu中的患者
[0552]
·
氧饱和度(spo2)93％(室内空气)以下或需要吸氧的患者
[0553]
作为一个实施方式，可举出将本发明的医药组合物施予至sars-cov-2感染者中的具有至少一种如下所示的重症化风险因素的感染者。
[0554]
·
氧饱和度(spo2)小于94％(室内空气，海平面)
[0555]
·
pao2/fio2小于300mmhg
[0556]
·
呼吸频率为30次/分钟以上
[0557]
·
肺浸润为50％以上
[0558]
(式(i)所示的化合物的制造法)
[0559]
式(i)所示的化合物例如可通过下文所示的通常的合成法来制造。关于萃取、纯化等，进行通常的有机化学实验中进行的处理即可。可参考本领域中已知的方法合成。关于萃取、纯化等，进行通常的有机化学实验中进行的处理即可。
[0560]
式(i)所示的化合物可参考本领域中已知的方法制造。例如，可参考wo2010092966、wo2012020749、wo2013089212、wo2014200078、wo2012020742及wo2013118855等制造。
[0561]
(a法)
[0562]
[化学式24]
[0563][0564]
(式中，alk为c1-c3烷基，lg1为离去基团，r6为氢原子，其他符号与前文同义。)
[0565]
(第1工序)
[0566]
在n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、n,n
’‑
二甲基咪唑啉酮、二甲基亚砜、thf等溶剂中，在dbu、三乙基胺、n,n-二异丙基乙基胺、吡啶等碱(优选为dbu)的存在下，在-20℃～50℃、优选为-10℃～冰冷却的条件下，使化合物(a-1)或者其盐酸盐或溴酸盐等与异氰酸酯(a-2)或1-氨基甲酰基咪唑(a-2’)反应。接着，在-20℃～50℃、优选为-10℃～冰冷却的条件下，使反应混合物与1,1
’‑
羰基二咪唑、光气、三光气等羰基化剂、及dbu、三乙基胺、n,n-二异丙基乙基胺、吡啶等碱(优选为dbu)反应，由此能够制造化合物(a-3)。
[0567]
(第2工序)
[0568]
在乙腈、丙酮、dmf、dmso等溶剂中，在碳酸钾、碳酸钠、n,n-二异丙基乙基胺等碱的存在下，在50℃～加热回流下、优选加热回流下，使化合物(a-3)与化合物(a-4)反应，由此能够制造化合物(a-5)。
[0569]
作为离去基团，例如，可举出卤素及-oso2(c
tf2t+1
)(式中，t为1～4的整数)等。作为卤素，优选为氯、碘及溴，作为-oso2(c
tf2t+1
)基，优选为-otf基(三氟甲磺酸酯)。
[0570]
(第3工序)
[0571]
在nmp、dmf、dma、dmso、叔丁醇、2-甲基-2-丁醇等溶剂中，在乙酸等酸的存在下或非存在下，在60℃～150℃、优选80℃～120℃，使化合物(a-5)与化合物(a-6)或化合物(a-6’)反应，由此能够制造化合物(i)所示的化合物。
[0572]
通过使用光学活性的异氰酸酯(a-2)，能够制造具有光学活性的化合物(i)所示的化合物。
[0573]
(b法)
[0574]
[化学式25]
[0575][0576]
(式中，alk为c1-c3烷基，pro为c1-c4烷基或叔丁氧基羰基，lg2为离去基团，r6为氢原子，其他符号与前文同义。)
[0577]
(第1工序)
[0578]
可以与上述a法的第2工序同样地操作，从而由化合物(b-1)制造化合物(b-2)。
[0579]
(第2工序)
[0580]
在有机溶剂的存在下或非存在下，在-20℃～室温、优选室温，利用tfa等强酸对化合物(b-2)进行处理，由此能够制造化合物(b-3)。
[0581]
(第3工序)
[0582]
可以与上述a法的第3工序同样地操作，从而由化合物(b-3)制造化合物(b-4)。
[0583]
(第4工序)
[0584]
可以通过使用了化合物(b-4)及化合物(b-5)的goldberg胺化反应来制造化合物(i-x)。
[0585]
作为离去基团，可举出上述a法工序1中记载的离去基团。
[0586]
作为催化剂，例如，可以使用碘化铜、氰化铜、溴化铜等市售的铜催化剂。
[0587]
作为配位体，可以使用1,2-二甲基乙二胺、反式-n,n
‘‑
二甲基环己烷-1,2-二胺等。
[0588]
作为碱，可以使用碳酸钾、磷酸钾等。
[0589]
作为溶剂，可以使用nmp、二氧杂环己烷、dmso等。
[0590]
对于反应温度而言，只要在室温至溶剂回流的温度进行反应即可，可以优选在加热回流下进行反应。
[0591]
(c法)
[0592]
[化学式26]
[0593][0594]
(式中，alk为c1-c3烷基，lg3为离去基团，其他符号与前文同义。)
[0595]
(第1工序)
[0596]
可以与上述a法的第2工序同样地操作，从而制造化合物(c-2)。
[0597]
作为离去基团，可举出上述a法工序1中记载的离去基团。
[0598]
(第2工序)
[0599]
可以与上述a法的第3工序同样地操作，从而制造化合物(i)所示的化合物。
[0600]
本发明涉及的化合物具有冠状病毒3cl蛋白酶抑制活性，因此作为病毒传染病的治疗及/或预防剂有用。
[0601]
此外，本发明涉及的化合物具备作为医药的有用性，优选具有下述中的任意一种或多种优异的特征。
[0602]
a)对cyp酶(例如，cyp1a2、cyp2c9、cyp2c19、cyp2d6、cyp3a4等)的抑制作用弱。
[0603]
b)显示高生物利用度、适度的清除率等良好的药代动力学。
[0604]
c)代谢稳定性高。
[0605]
d)对于cyp酶(例如，cyp3a4)，在本说明书中记载的测定条件的浓度范围内不显示不可逆的抑制作用。
[0606]
e)不具有诱变性。
[0607]
f)心血管系统的风险低。
[0608]
g)显示高溶解性。
[0609]
h)蛋白未结合率(fu值)高。
[0610]
i)具有高的冠状病毒3cl蛋白酶选择性。
[0611]
j)具有高的冠状病毒增殖抑制活性。例如，在人血清(hs)或人血清白蛋白(hsa)添加下，具有高冠状病毒增殖抑制活性。
[0612]
作为冠状病毒增殖抑制剂，例如，可举出在后述的cpe抑制效果确认试验(sars-cov-2)中、例如ec
50
为10μm以下、优选1μm以下、更优选100nm以下的方式。
[0613]
另外，式(i)所示的化合物的盐
·
晶体
·
复合体(共晶体)具备作为医药的有用性，
优选具有下述中的任意一种或多种优异的特征。
[0614]
a)显示高生物利用度、适度的清除率、高auc、高最高血药浓度等、良好的药代动力学。
[0615]
b)显示高溶解性、高化学稳定性、低吸湿性。
[0616]
本发明的医药组合物可通过口服、肠胃外的任意方法施予。作为肠胃外施予的方法，可举出经皮、皮下、静脉内、动脉内、肌内、腹腔内、经粘膜、吸入、经鼻、滴眼、滴耳、阴道内施予等。
[0617]
口服施予的情况下，按照常规方法，制备成内用固形制剂(例如，片剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、膜剂等)、内用液剂(例如，混悬剂、乳剂、酏剂、糖浆剂、柠檬水剂、酒精剂、芳香水剂、浸膏剂、煎剂、酊剂等)等通常使用的任意的剂型施予即可。片剂可以为糖衣片、薄膜包衣片、肠溶性包衣片、缓释片、含片、舌下片、口腔片、咀嚼片或口腔内崩解片，散剂及颗粒剂可以为干式糖浆，胶囊剂可以为软胶囊剂、微胶囊剂或缓释胶囊剂。
[0618]
肠胃外施予的情况下，可通过注射剂、点滴剂、外用剂(例如，滴眼剂、滴鼻剂、滴耳剂、气雾剂、吸入剂、洗剂、注入剂、涂布剂、含嗽剂、灌肠剂、软膏剂、硬膏剂、胶冻剂、霜剂、贴剂、巴布剂、外用散剂、栓剂等)等通常使用的任意的剂型合适地施予。注射剂可以是o/w、w/o、o/w/o、w/o/w型等乳剂。
[0619]
根据需要可在有效量的本发明涉及的化合物中混合适合其剂型的赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等各种医药用添加剂而制成医药组合物。此外，该医药组合物也可通过适当变更本发明涉及的化合物的有效量、剂型及/或各种医药用添加剂而制成儿童用、老年人用、重症患者用或手术用的医药组合物。例如，儿童用医药组合物可向新生儿(出生后小于4周)、婴儿(出生后4周且小于1岁)、幼儿(1岁以上且小于7岁)、儿童(7岁以上且小于15岁)或15岁～18岁的患者施予。例如，老年人用医药组合物可向65岁以上的患者施予。
[0620]
本发明的医药组合物(例如，包含式(i-a)所示的化合物的对甲苯磺酸盐i型晶体的医药组合物、或包含式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型的医药组合物)的施予量优选在考虑患者的年龄、体重、疾病的种类、程度、施予途径等的基础上设定，在口服施予的情况下，通常为0.05～200mg/kg/天，优选为0.1～100mg/kg/天的范围内。肠胃外施予的情况下，虽然根据施予途径而存在较大差异，但通常为0.005～200mg/kg/天，优选为0.01～100mg/kg/天的范围内。将其以1天1次～分成数次施予即可。
[0621]
对于本发明涉及的化合物而言，出于增强该化合物的作用或减少该化合物的施予量等目的，例如可以与其他新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗药(包括作为该治疗药而已被批准的药剂、及开发中或今后开发的药剂)(以下，称为联用药剂)组合使用。此时，本发明涉及的化合物和联用药剂的施予时机没有限定，可以将它们向施予对象同时施予，也可以隔开时间差而施予。此外，本发明涉及的化合物和联用药剂可以以包含各活性成分的2种以上的制剂的形式施予，也可以以包含它们的活性成分的单一制剂的形式施予。
[0622]
联用药剂的施予量可以以临床上使用的用量为基准适当选择。另外，本发明涉及的化合物与联用药剂的配合比可根据施予对象、施予途径、对象疾病、症状、组合等适当选择。例如，施予对象为人的情况下，相对于本发明涉及的化合物1重量份而言，使用0.01～100重量份的联用药剂即可。
[0623]
实施例
[0624]
以下，举出实施例及参考例、以及试验例来更详细地说明本发明，但本发明不受它们的限定。
[0625]
另外，本说明书中使用的缩写表示以下的含义。
[0626]
boc：叔丁氧基羰基
[0627]
cdi：羰基二咪唑
[0628]
dbu：1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯
[0629]
diea：n,n-二异丙基乙基胺
[0630]
dma：n,n-二甲基乙酰胺
[0631]
dmf：n,n-二甲基甲酰胺
[0632]
dmso：二甲基亚砜
[0633]
dtt：二硫苏糖醇
[0634]
edc：1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺
[0635]
edt：1,2-乙二硫醇
[0636]
edta：乙二胺四乙酸
[0637]
fbs：胎牛血清
[0638]
hobt：1-羟基苯并三唑
[0639]
lhmds：双(三甲基甲硅烷基)氨基锂
[0640]
mem：eagle最低必需培养基
[0641]
nmp：n-甲基吡咯烷酮
[0642]
pd(oac)2：乙酸钯
[0643]
tfa：三氟乙酸
[0644]
tmscl：三甲基氯硅烷
[0645]
xantphos：4,5
’‑
双(二苯基膦基)-9,9
’‑
二甲基呫吨
[0646]
mm：mmol/l
[0647]
μm：μmol/l
[0648]
nm：nmol/l
[0649]
(化合物的鉴定方法)
[0650]
各实施例中得到的nmr分析在400mhz进行，使用dmso-d6、cdcl3、meoh-d4进行测定。另外，在表示nmr数据的情况下，存在未记载测定的全部峰的情况。
[0651]
说明书中rt表示lc/ms：液相色谱法/质谱法中的保留时间，在以下的条件下进行测定。
[0652]
(测定条件1)
[0653]
柱：acquity uplc(注册商标)beh c18(1.7μmi.d.2.1x50mm)(waters)
[0654]
流速：0.8ml/分钟
[0655]
uv检测波长：254nm
[0656]
流动相：[a]为含有0.1％甲酸的水溶液，[b]为含有0.1％甲酸的乙腈溶液
[0657]
梯度：用3.5分钟进行5％-100％溶剂[b]的线性梯度后，将100％溶剂[b]维持0.5分钟。
[0658]
(测定条件2)
[0659]
柱：shim-pack xr-ods(2.2μm，i.d.3.0x50mm)(shimadzu)
[0660]
流速：1.6ml/分钟
[0661]
uv检测波长：254nm
[0662]
流动相：[a]为含有0.1％甲酸的水溶液，[b]为含有0.1％甲酸的乙腈溶液
[0663]
梯度：用3分钟进行10％-100％溶剂[b]的线性梯度，将100％溶剂[b]维持0.5分钟。
[0664]
需要说明的是，在说明书中，ms(m/z)这一记载表示通过质谱法观测到的值。
[0665]
(粉末x射线衍射图案的测定)
[0666]
按照日本药局方的一般试验法中记载的粉末x射线衍射测定法，进行各实施例中得到的晶体的粉末x射线衍射测定。测定条件如下所示。
[0667]
(装置)
[0668]
rigaku corporation制smartlab
[0669]
(操作方法)
[0670]
测定方法：反射法
[0671]
使用波长：cukα线
[0672]
管电流：200ma
[0673]
管电压：45kv
[0674]
试样板：铝
[0675]
x射线的入射角：2.5
°
[0676]
采样宽度：0.02
°
[0677]
检测器：hypix-3000(二维检测模式)
[0678]
(单晶结构分析的测定和分析方法)
[0679]
单晶结构分析的测定条件及分析方法如下所示。
[0680]
(装置)
[0681]
rigaku corporation制xtalab p200 mm007
[0682]
(测定条件)
[0683]
测定温度：25℃
[0684]
使用波长：cukα线
[0685]
软件：crysalispro 1.171.39.46e(rigaku oxford diffraction,2018)
[0686]
(数据处理)
[0687]
软件：crysalispro 1.171.39.46e(rigaku oxford diffraction,2018)
[0688]
对数据进行洛伦兹及偏光校正、吸收校正。
[0689]
(晶体结构分析)
[0690]
使用直接法程序shelxt(sheldrick,g.m.，2015)进行相位确定，使用shelxl(sheldrick,g.m.，2015)，实施全矩阵(full-matrix)最小二乘法进行精修。非氢原子的位移参数全部以各向异性进行精修。使用shelxl的默认参数通过计算引入氢原子，作为骑原子(riding atom)处理。全部氢原子以各向同性参数进行精修。
[0691]
图2及图4的制图中使用platon(spek,1991)/ortep(johnson,1976)。
[0692]
[实施例1]
[0693]
化合物(i-003)的合成
[0694]
[化学式27]
[0695][0696]
工序1化合物14的合成
[0697]
将3,4,5-三氟苄基胺(3.34g，20.7mmol)溶解于二氯甲烷(33.4ml)中，在水浴中冷却。向反应溶液中加入异硫氰酸苯甲酰酯(2.93ml，21.8mmol)，于室温搅拌30分钟。
[0698]
将溶剂蒸馏除去，将残余物用甲醇稀释，加入1mol/l氢氧化钠水溶液(7.45ml，7.45mmol)。将反应溶液于室温搅拌30分钟，加入2mol/l盐酸水溶液。用乙酸乙酯萃取水层，用饱和碳酸氢钠水溶液及饱和食盐水洗涤有机层。用硫酸钠干燥有机层，在减压下将溶剂蒸馏除去，得到化合物14的粗产物(8.3g)。该粗产物在不进一步纯化的情况下作为收率100％用于下一工序。
[0699]
lc/ms(esi)：m/z＝221，rt＝1.45min，lc/ms测定条件2
[0700]
工序2化合物15的合成
[0701]
将化合物14的粗产物(8.3g)、dmf(85ml)、碘甲烷(4.84ml，77mmol)混合，将反应溶液于50℃搅拌40分钟。向反应溶液中加入水，用乙酸乙酯萃取，用水洗涤。向水层中加入2mol/l氢氧化钠水溶液，用乙酸乙酯萃取水层。用水及饱和食盐水洗涤有机层，用硫酸钠干
燥。在减压下将溶剂蒸馏除去，得到化合物15的粗产物(3.86g，16.5mmol，收率80％)。
[0702]
lc/ms(esi)：m/z＝235，rt＝0.84min，lc/ms测定条件2
[0703]
工序3化合物16的合成
[0704]
将三光气(0.507g，1.71mmol)及thf(6ml)混合，将反应溶液在冰浴中冷却。在thf(6ml)中混合3-氨基-5-甲基吡啶(0.462g，4.27mmol)及三乙基胺(1.48ml，10.7mmol)，将所得到的溶液滴加至反应溶液中。将反应溶液于室温搅拌40分钟后，在冰浴中冷却。将化合物15(1g，4.27mmol)加入反应溶液中，于室温搅拌55分钟。加入水，用乙酸乙酯萃取水层，用水洗涤有机层。用硫酸镁干燥有机层，在减压下将溶剂蒸馏除去，得到化合物16的粗产物(1.57g，4.26mmol，收率：定量)。
[0705]
lc/ms(esi)：m/z＝369，rt＝1.52min，lc/ms测定条件1
[0706]
工序4化合物17的合成
[0707]
将cdi(2.78g，17.2mmol)、化合物16(1.58g，4.29mmol)及dmf(12.6ml)混合。向反应溶液中加入二异丙基乙基胺(3.00ml，17.2mmol)，一边于110℃搅拌一边照射30分钟微波。将反应溶液注入冰中，滤出所生成的沉淀物，用水洗涤。对所得到的残余物进行减压干燥，得到化合物17的粗产物(649mg，1.51mmol，收率35％)。lc/ms(esi)：m/z＝395，rt＝1.74min，lc/ms测定条件1
[0708]
工序5化合物(i-003)的合成
[0709]
将6-氯-2-甲基-2h-吲唑-5-胺(55.3mg，0.304mmol)、化合物17(100mg，0.254mmol)及thf(1ml)混合。将反应溶液在冰浴中冷却，加入lhmds(0.761ml，0.761mmol)。将反应溶液在冰浴中搅拌40分钟，加入饱和氯化铵水溶液。用乙酸乙酯萃取有机层，进行减压浓缩。利用硅胶柱色谱法(氯仿/甲醇)对残余物进行纯化，得到化合物(i-003)(80mg，0.145mmol，收率57.4％)。
[0710]1h-nmr(methanol-d4)δ:8.43(d,j＝1.0hz,1h),8.36(d,j＝2.0hz,1h),8.18(s,1h),7.74(s,1h),7.72(br s,1h),7.48-7.35(m,3h),5.32(s,2h),4.20(s,3h),2.42(s,3h).
[0711]
lc/ms(esi)：m/z＝528，rt＝1.93min，lc/ms测定条件1
[0712]
[实施例2]
[0713]
化合物(i-005)的合成
[0714]
[化学式28]
[0715][0716]
工序1化合物18的合成
[0717]
将化合物4(926mg，4.04mmol)(合成法参见wo2012020749、wo2013089212及wo2014200078)、乙腈(7.41ml)、碳酸钾(726mg，5.25mmol)及2,4,5-三氟苄基溴(1000mg，4.44mmol)混合。将反应溶液于80℃搅拌40分钟，放置冷却后，用乙酸乙酯稀释。滤出不溶物后，浓缩滤液，得到化合物18的粗产物(1.51g，4.04mmol，收率：定量)。
[0718]
lc/ms(esi)：m/z＝374，rt＝2.54min，lc/ms测定条件1
[0719]
工序2化合物19的合成
[0720]
将化合物18(1.51g，4.04mmol)及tfa(3.02ml)混合。将反应溶液于室温搅拌4小时，静置一夜。在减压下将tfa蒸馏除去，向残余物中加入甲苯，进行共沸。向残余物中加入异丙基醚，进行混悬后，进行过滤，得到化合物19(1.22g，3.84mmol，收率95％)。lc/ms(esi)：m/z＝318，rt＝1.68min，lc/ms测定条件1
[0721]
工序3化合物20的合成
[0722]
将化合物19(200mg，0.63mmol)、dmf(1.8ml)、碳酸钾(261mg，1.89mmol)及3-(氯甲基)-1-甲基-1h-1,2,4-三唑盐酸盐(159mg，0.946mmol)混合。将反应溶液于60℃搅拌2小时，加入饱和氯化铵水溶液。用乙酸乙酯萃取水层，用饱和食盐水洗涤有机层。用硫酸镁干燥有机层，进行过滤，进行浓缩。将残余物用异丙基醚、己烷、乙酸乙酯及氯仿的混合溶剂混悬，进行过滤。将残余物、dmf(1.8ml)、碳酸钾(261mg，1.89mmol)及3-(氯甲基)-1-甲基-1h-1,2,4-三唑盐酸盐(159mg，0.946mmol)混合。将反应溶液于60℃搅拌6小时，加入饱和氯化
铵水溶液。用乙酸乙酯萃取水层，用饱和食盐水洗涤有机层。用硫酸镁干燥有机层，进行过滤，进行浓缩。将残余物用异丙基醚、己烷、乙酸乙酯及氯仿的混合溶剂混悬，进行过滤，得到化合物20(116mg，0.281mmol，收率45％)。
[0723]
lc/ms(esi)：m/z＝413，rt＝1.84min，lc/ms测定条件：1工序4化合物(i-005)的合成
[0724]
将化合物20(115mg，0.279mmol)、thf(2.30ml)及6-氯-2-甲基-2h-吲唑-5-胺(60.8mg，0.335mmol)混合。于0℃向反应溶液中滴加lhmds(558μl，0.558mmol)。将反应溶液于0℃搅拌2.5小时，于室温搅拌40分钟，加入饱和氯化铵水溶液。用氯仿萃取，将有机层浓缩。利用硅胶柱色谱法(氯仿/甲醇)对残余物进行纯化，得到化合物(i-005)(61.8mg，0.116mmol，收率42％)。
[0725]1h-nmr(cdcl3)δ：7.96(s,1h),7.82(d,j＝2.5hz,2h),7.48(br s,1h),7.45-7.37(m,1h),7.08(s,1h),6.97-6.88(m,1h),5.35(s,2h),5.17(s,2h),4.21(s,3h),3.89(s,3h).
[0726]
lc/ms(esi)：m/z＝532，rt＝1.70min，lc/ms测定条件1
[0727]
依照上述通常的合成法及实施例1及2记载的方法，合成了本发明中可使用的化合物。包括实施例1及2中制造的化合物在内，将各化合物的结构及物性(lc/ms数据)示于以下的表中。表中以氨基结构记载的化合物有时也具有亚氨基结构，以亚氨基结构示出的化合物有时也具有氨基结构。即，即使是相同的化合物，根据结晶化条件等，也存在具有亚氨基结构的情况和具有氨基结构的情况，即使在形成了盐、复合体的情况下，根据该盐、复合体的抗衡分子的种类，也存在具有亚氨基结构的情况和具有氨基结构的情况，即使是相同的抗衡分子，根据结晶化条件等，也存在具有亚氨基结构的情况和具有氨基结构的情况。另外，也有时是具有亚氨基结构的化合物、其盐或它们的复合体与具有氨基结构的化合物、其盐或它们的复合体的混合物。
[0728]
[表1]
[0729][0730]
[表2]
[0731][0732]
[表3]
[0733][0734]
[表4]
[0735][0736]
[表5]
[0737][0738]
[表6]
[0739][0740]
[表7]
[0741][0742]
[表8]
[0743][0744]
[表9]
[0745][0746]
[实施例3]
[0747]
向化合物(i-003)1400mg中加入乙酸乙酯7ml及5mol/l的对甲苯磺酸水溶液557μl(1.05eq)。于60℃搅拌15分钟后，于25℃搅拌2小时。过滤固体，进行干燥，由此得到式(i-a)所示的化合物的对甲苯磺酸盐i型晶体(1289.6mg，69％)。
[0748]
式(i-a)所示的化合物的对甲苯磺酸盐i型晶体的单晶结构分析的结果如下所示。
[0749]
r1(i》2.00s(i))为0.0444，由最终的差分傅里叶确认既没有电子密度的缺失也没有误置。
[0750]
将结晶学数据示于表10。
[0751]
[表10]
[0752][0753]
此处，体积表示单位晶格体积，z表示单位晶格中的分子数。
[0754]
将式(i-a)所示的化合物的对甲苯磺酸盐i型晶体的、不对称单元中的结构示于图2。
[0755]
在不对称单元中，式(i-a)所示的化合物、对甲苯磺酸各自存在有1分子。在对甲苯磺酸的o3、o4及o5所示的氧原子上未键合氢原子，在式(i-a)所示的化合物的n7的氮原子上键合有氢原子，由此确认形成了盐。
[0756]
n3-c9的键长约为n4-c9的键长约为由该键长鉴定了对甲苯磺酸盐i型晶体中的式(i-a)所示的化合物为亚氨基结构：
[0757]
[化学式29]
[0758][0759]
另外，示出式(i-a)所示的化合物的对甲苯磺酸盐i型晶体的粉末x射线衍射的结果。
[0760]
粉末x射线衍射图案中，在衍射角(2θ)：9.1
±
0.2
°
、11.5
±
0.2
°
、14.6
±
0.2
°
、15.2
±
0.2
°
、18.8
±
0.2
°
、20.2
±
0.2
°
、23.6
±
0.2
°
、24.2
±
0.2
°
、24.9
±
0.2
°
及26.9
±
0.2
°
处确认到峰。
[0761]
上述粉末x射线衍射图案中，衍射角(2θ)：9.1
±
0.2
°
、15.2
±
0.2
°
、18.8
±
0.2
°
、23.6
±
0.2
°
及24.9
±
0.2
°
的峰是作为式(i-a)所示的化合物的对甲苯磺酸盐i型晶体的特别的特征。
[0762]
[实施例4]
[0763]
向化合物(i-005)1170mg中加入富马酸278mg(1.1eq)及乙酸乙酯5.85ml，在室温
下搅拌45分钟。过滤固体，进行干燥，由此得到式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体(1369.4mg，94.6％)。
[0764]
式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型的单晶结构分析的结果如下所示。
[0765]
r1(i》2.00s(i))为0.0470，由最终的差分傅里叶确认既没有电子密度的缺失也没有误置。
[0766]
将结晶学数据示于表11。
[0767]
[表11]
[0768][0769]
此处，体积表示单位晶格体积，z表示单位晶格中的分子数。
[0770]
将式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型的、不对称单元中的结构示于图4。
[0771]
在不对称单元中，式(i-b)所示的化合物、富马酸各自存在有1分子。未确认到离子性的化学相互作用，确认了其为1：1的摩尔比的共晶体。
[0772]
n10-c9的键长约为n16-c9的键长约为由该键长鉴定了富马酸共晶体i型的式(i-b)所示的化合物为亚氨基结构：
[0773]
[化学式30]
[0774][0775]
另外，示出式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体的粉末x射线衍射的结果。
[0776]
粉末x射线衍射图案中，在衍射角(2θ)：7.8
±
0.2
°
、9.5
±
0.2
°
、10.1
±
0.2
°
、10.9
±
0.2
°
、13.8
±
0.2
°
、14.7
±
0.2
°
、18.6
±
0.2
°
、22.6
±
0.2
°
、23.5
±
0.2
°
及24.6
±
0.2
°
处确认到峰。
[0777]
上述粉末x射线衍射图案中，衍射角(2θ)：9.5
±
0.2
°
、10.9
±
0.2
°
、18.6
±
0.2
°
、23.5
±
0.2
°
及24.6
±
0.2
°
的峰是作为式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体的特别的特征。
[0778]
以下记载本发明涉及的化合物的生物试验例。本发明化合物本质上可以如下述试验例那样进行试验。
[0779]
本发明涉及的式(i)所示的化合物只要是具有冠状病毒3cl蛋白酶抑制作用、对冠状病毒3cl蛋白酶进行抑制的化合物即可。
[0780]
具体而言，在以下记载的评价方法中，ic50优选为50μm以下，更优选为1μm以下，进一步更优选为100nm以下。
[0781]
试验例1：使用了人tmprss2表达vero e6细胞(vero e6/tmprss2细胞)的细胞病变效应(cytopathic effect)(cpe)抑制效果确认试验
[0782]
《操作步骤》
[0783]
·
受试试样的稀释、分注
[0784]
预先用dmso将受试试样稀释至适度的浓度，制作2～5倍梯度稀释系列后，分注至384孔板中。
[0785]
·
细胞及sars-cov-2的稀释、分注
[0786]
将veroe6/tmprss2细胞(jcrb1819，5
×
103个细胞/孔)和sars-cov-2(100-300tcid
50
/孔)在培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)中混合，分注至装有受试试样的孔中后，在co2培养箱中培养3天。
[0787]
·
celltiter-glo(注册商标)2.0的分注及发光信号的测定
[0788]
将培养3天后的板恢复至室温后，将celltiter-glo(注册商标)2.0分注至各孔，用板混合机进行混合。放置一定时间后，用酶标仪测定发光信号(lum)。
[0789]
《各测定项目值的计算》
[0790]
·
50％sars-cov-2感染细胞死亡抑制浓度(ec
50
)计算
[0791]
设x为化合物浓度的对数值，设y为％效力(efficacy)时，通过以下的logistic回归方程拟合抑制曲线，计算代入y＝50(％)时的x值作为ec
50
。
[0792]
y＝min+(max-min)/{1+(x50/x)^hill}
[0793]
％效力＝{(样品-病毒对照)/(细胞对照-病毒对照)}*100％
[0794]
(％efficacy＝{(sample-virus control)/(cell control-virus control)}*100％)
[0795]
细胞对照(cell control)：细胞对照孔的平均lum(the average of lum of cell control wells)
[0796]
病毒对照(virus control)：病毒对照孔的平均lum(the average of lum of virus control wells)
[0797]
min：y轴下限值，max：y轴上限值，x50：拐点的x坐标，hill：min与max的中间点处的曲线斜率
[0798]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。将结果示于以下的表中。
[0799]
需要说明的是，ec
50
值小于1μm时记为“a”，为1μm以上且小于10μm时记为“b”。
[0800]
化合物i-003：0.177μm
[0801]
化合物i-005：0.328μm
[0802]
化合物i-006：0.747μm
[0803]
化合物i-010：0.306μm
[0804]
化合物i-012：0.131μm
[0805]
化合物i-017：0.0960μm
[0806]
化合物i-023：1.03μm
[0807]
化合物i-035：0.395μm
[0808]
[表12]
[0809][0810]
试验例1-2：使用了人tmprss2表达vero e6细胞(vero e6/tmprss2细胞)的细胞病变效应(cpe)抑制效果确认试验
[0811]
《操作步骤》
[0812]
·
受试试样的稀释、分注
[0813]
预先用dmso将受试试样稀释至适度的浓度，制作3倍梯度稀释系列后，分注至96孔板中。
[0814]
·
细胞及sars-cov-2的稀释、分注
[0815]
将veroe6/tmprss2细胞(jcrb1819，1.5
×
104个细胞/孔)和sars-cov-2hcov-19/japan/ty/wk-521/2020、hcov-19/japan/qk002/2020、hcov-19/japan/qhn001/2020、hcov-19/japan/qhn002/2020、hcov-19/japan/ty7-501/2021、hcov-19/japan/ty7-503/2021、hcov-19/japan/ty8-612/2021、hcov-19/japan/ty11-927-p1/2021、hc ov-19/japan/ty33-456/2021、hcov-19/japan/ty28-444/2021、hcov-19/japan/ty26-717/2021(30-3000tcid
50
/孔)在培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)中混合，分注至装有受试试样的孔中后，在co2培养箱中培养3天或4天。
[0816]
·
celltiter-glo(注册商标)2.0的分注及发光信号的测定
[0817]
将培养3天后的板恢复至室温后，将celltiter-glo(注册商标)2.0分注至各孔，用板混合机进行混合。放置一定时间后，用酶标仪测定发光信号(lum)。
[0818]
《各测定项目值的计算》
[0819]
·
50％sars-cov-2感染细胞死亡抑制浓度(ec
50
)计算
[0820]
设x为化合物浓度的对数值，设y为％效力时，通过以下的logistic回归方程拟合抑制曲线，计算代入y＝50(％)时的x值作为ec
50
。
[0821]
y＝min+(max-min)/{1+(x50/x)^hill}
[0822]
％效力＝{(样品-病毒对照)/(细胞对照-病毒对照)}*100％
[0823]
细胞对照：细胞对照孔的平均lum
[0824]
病毒对照：病毒对照孔的平均lum
[0825]
min：y轴下限值，max：y轴上限值，x50：拐点的x坐标，hill：min与max的中间点处的曲线斜率
[0826]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[0827]
[表13-1]
[0828][0829]
试验例1-3：使用了人tmprss2表达vero e6细胞(vero e6/tmprss2细胞)的细胞病变效应(cpe)抑制效果确认试验
[0830]
《操作步骤》
[0831]
·
受试试样的稀释、分注
[0832]
预先用dmso将受试试样稀释至适度的浓度，制作3倍梯度稀释系列后，分注至96孔板中。
[0833]
·
细胞及sars-cov-2的稀释、分注
[0834]
将veroe6/tmprss2细胞(jcrb1819，1.5
×
104个细胞/孔)和sars-cov-2hcov-19/japan/ty38-873/2021、hcov-19/japan/ty38-871/2021、hcov-19/japan/ty40-385/2022、hcov-19/japan/ty41-716/2022、hcov-19/japan/ty41-703/2022、hcov-19/japan/ty41-702/2022、hcov-19/japan/ty41-686/2022(300-3000tcid
50
/孔)在培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)中混合，分注至装有受试试样的孔中后，在co2培养箱中培养4天。
[0835]
·
celltiter-glo(注册商标)2.0的分注及发光信号的测定
[0836]
将培养3天后的板恢复至室温后，将celltiter-glo(注册商标)2.0分注至各孔，用板混合机进行混合。放置一定时间后，用酶标仪测定发光信号(lum)。
[0837]
《各测定项目值的计算》
[0838]
·
50％sars-cov-2感染细胞死亡抑制浓度(ec
50
)计算
[0839]
设x为化合物浓度的对数值，设y为％效力时，通过以下的logistic回归方程拟合抑制曲线，计算代入y＝50(％)时的x值作为ec
50
。
[0840]
y＝min+(max-min)/{1+(x50/x)^hill}
[0841]
％效力＝{(样品-病毒对照)/(细胞对照-病毒对照)}*100％
[0842]
细胞对照：细胞对照孔的平均lum
[0843]
病毒对照：病毒对照孔的平均lum
[0844]
min：y轴下限值，max：y轴上限值，x50：拐点的x坐标，hill：min与max的中间点处的曲线斜率
[0845]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[0846]
[表13-2]
[0847][0848]
试验例2：对sars-cov-2 3cl蛋白酶的抑制活性试验
[0849]
《材料》
[0850]
·
市售的重组sars-cov-2 3cl蛋白酶
[0851]
·
市售的底物肽
[0852]
dabcyl-lys-thr-ser-ala-val-leu-gln-ser-gly-phe-arg-lys-met-glu(edans)-nh2(序列号：1)
[0853]
·
内标肽(internal standard peptide)
[0854]
dabcyl-lys-thr-ser-ala-val-leu(13c6,15n)-gln(序列号：2)
[0855]
dabcyl-lys-thr-ser-ala-val-leu(13c6,15n)-gln可参考文献(atherton,e.；sheppard,r.c.，“in solid phase peptide synthesis,apractical approach”，牛津大学的irl出版社出版(irl press at oxford university pres)，1989.及bioorg.med.chem.，第5卷，第9期，1997年，1883-1891页，等等)合成。以下示出一例。
[0856]
使用rink酰胺树脂，通过fmoc固相合成，合成h-lys-thr-ser-ala-val-leu(13c6,15n)-glu(树脂)-oαotbu(lys侧链被boc保护，thr侧链被叔丁基保护，ser侧链被叔丁基保护，glu的c末端oh被叔丁基保护，glu侧链的羧酸与树脂缩合)。n末端dabcyl基的修饰是将4-二甲基氨基偶氮苯-4
’‑
羧酸(dabcyl-oh)用edc/hobt在树脂上缩合。最终脱保护及从树脂的切出通过用tfa/edt＝95：5进行处理来进行。然后，通过反相hplc进行纯化。
[0857]
·
rapidfire cartridge c4 typea
[0858]
《操作步骤》
[0859]
·
检测缓冲液的制备
[0860]
本试验中，使用由20mm tris-hcl、100mm氯化钠、1mm edta、10mm dtt、0.01％bsa组成的检测缓冲液。对于ic
50
值为10nm以下的化合物，使用由20mm tris-hcl、1mm edta、10mm dtt、0.01％bsa组成的检测缓冲液。
[0861]
·
受试试样的稀释、分注
[0862]
预先用dmso将受试试样稀释至适度的浓度，制作2～5倍梯度稀释系列后，分注至384孔板中。
[0863]
·
酶和底物的添加、酶反应
[0864]
向准备的化合物板中添加8μm的底物、及6或0.6nm的酶溶液，于室温进行3～5小时孵育。然后，加入反应终止液(0.067μm内标(internal standard)，0.1％甲酸，10或25％乙腈)，使酶反应停止。
[0865]
·
反应产物的测定
[0866]
对于反应完成后的板，使用rapidfire system 360及质谱仪(agilent，6550ifunnel q-tof)、或rapid fire system 365及质谱仪(agilent，6495c triple quadrupole)进行测定。作为测定时的流动相，使用a溶液(75％异丙醇，15％乙腈，5mm甲酸铵)和b溶液(0.01％三氟乙酸，0.09％甲酸)。
[0867]
通过质谱仪检测到的反应产物使用rapidfire integrator或能进行同等的分析的程序进行计算，作为产物面积(product area)值。另外，也对同时检测到的内标进行计算，作为内标面积(internal standard area)值。
[0868]
《各测定项目值的计算》
[0869]
·
p/is的计算
[0870]
通过下述式，计算前项目中得到的面积值，算出p/is。
[0871]
p/is＝产物面积值/内标面积值
[0872]
·
50％sars-cov-2 3cl蛋白酶抑制浓度(ic
50
)计算
[0873]
设x为化合物浓度的对数值，设y为％抑制(inhibition)时，通过以下的logistic回归方程拟合抑制曲线，计算代入y＝50(％)时的x值作为ic
50
。
[0874]
y＝min+(max-min)/{1+(x50/x)^hill}
[0875]
％抑制＝{1-(样品-对照(-))/对照(+)-对照(-))}*100
[0876]
(％inhibition＝{1-(sample-control(-))/control(+)-control(-))}*100)
[0877]
对照(-)：酶抑制条件孔的平均p/is
[0878]
(control(-)：the average of p/is of enzyme inhibited condition wells)
[0879]
对照(+)：dmso对照孔的平均p/is
[0880]
(control(+)：the average of p/is of dmso control wells)
[0881]
min：y轴下限值，max：y轴上限值，x50：拐点的x坐标，hill：min与max的中间点处的曲线斜率
[0882]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。将结果示于以下的表中。
[0883]
需要说明的是，ic
50
值小于0.1μm时记为“a”，为0.1μm以上且小于1μm时记为“b”，为
1μm以上且小于10μm时记为“c”。
[0884]
化合物i-003：0.014μm
[0885]
化合物i-005：0.010μm
[0886]
化合物i-006：0.0058μm
[0887]
化合物i-010：0.0054μm
[0888]
化合物i-012：0.0091μm
[0889]
化合物i-017：0.0034μm
[0890]
化合物i-023：0.0063μm
[0891]
化合物i-035：0.0098μm
[0892]
[表14-1]
[0893][0894]
试验例2-2：对sars-cov-2 3cl蛋白酶的抑制活性试验
[0895]
《材料》
[0896]
·
市售的重组sars-cov-2 3cl蛋白酶
[0897]
·
sars-cov-2 3cl蛋白酶各变异(g15s,t21i,t24i,k88r,l89f,k90r,p108s,p132h,a193v,h246y,a255v)
[0898]
·
市售的底物肽
[0899]
dabcyl-lys-thr-ser-ala-val-leu-gln-ser-gly-phe-arg-lys-met-glu(edans)-nh2(序列号：1)
[0900]
·
内标肽
[0901]
dabcyl-lys-thr-ser-ala-val-leu(13c6,15n)-gln(序列号：2)
[0902]
dabcyl-lys-thr-ser-ala-val-leu(13c6,15n)-gln可参考文献(atherton,e.；sheppard,r.c.，“in solid phase peptide synthesis,apractical approach”，牛津大学的irl出版社出版(irl press at oxford university pres)，1989.及bioorg.med.chem.，第5卷，第9期，1997年，1883-1891页，等等)合成。以下示出一例。
[0903]
使用rink酰胺树脂，通过fmoc固相合成，合成h-lys-thr-ser-ala-val-leu(13c6,15n)-glu(树脂)-oαotbu(lys侧链被boc保护，thr侧链被叔丁基保护，ser侧链被叔丁基保护，glu的c末端oh被叔丁基保护，glu侧链的羧酸与树脂缩合)。n末端dabcyl基的修饰是将4-二甲基氨基偶氮苯-4
’‑
羧酸(dabcyl-oh)用edc/hobt在树脂上缩合。最终脱保护及从树脂的切出通过用tfa/edt＝95：5进行处理来进行。然后，通过反相hplc进行纯化。
[0904]
·
rapidfire cartridge c4 typea
[0905]
《操作步骤》
[0906]
·
检测缓冲液的制备
[0907]
本试验中，使用由20mm tris-hcl、1mm edta、10mm dtt、0.01％bsa组成的检测缓冲液。
[0908]
·
受试试样的稀释、分注
[0909]
预先用dmso将受试试样稀释至适度的浓度，制作3倍梯度稀释系列后，分注至384孔板中。
[0910]
·
酶和底物的添加、酶反应
[0911]
向准备的化合物板中添加最终浓度为2-4μm的底物、及最终浓度为2-6nm的酶溶液，于室温进行2-3小时孵育。然后，加入反应终止液(0.072μm内标，0.1％甲酸，10％乙腈)，使酶反应停止。
[0912]
·
反应产物的测定
[0913]
对于反应完成后的板，使用rapidfire system 360及质谱仪(agilent，6550ifunnel q-tof)进行测定。作为测定时的流动相，使用a溶液(75％异丙醇，15％乙腈，5mm甲酸铵)和b溶液(0.01％三氟乙酸，0.09％甲酸)。
[0914]
通过质谱仪检测到的反应产物使用rapidfire integrator进行计算，作为产物面积值。另外，也对同时检测到的内标进行计算，作为内标面积值。
[0915]
《各测定项目值的计算》
[0916]
·
p/is的计算
[0917]
通过下述式，计算前项目中得到的面积值，算出p/is。
[0918]
p/is＝产物面积值/内标面积值
[0919]
·
50％sars-cov-2 3cl蛋白酶抑制浓度(ic
50
)计算
[0920]
设x为化合物浓度的对数值，设y为％抑制时，通过以下的logistic回归方程拟合抑制曲线，计算代入y＝50(％)时的x值作为ic
50
。
[0921]
y＝min+(max-min)/{1+(x50/x)＾hill}
[0922]
％抑制＝{1-(样品-对照(-))/对照(+)-对照(-))}*100
[0923]
对照(-)：无sars-cov-2 3cl蛋白酶和试验底物的孔的平均p/is比
[0924]
(control(-)：the average of p/is ratio in the wells without sars-cov-2 3cl protease and test substance)
[0925]
对照(+)：有sars-cov-2 3cl蛋白酶且无试验底物的孔的平均p/is比
[0926]
(control(+)：the average of p/is ratio in the wells with sars-cov-2 3cl protease and without test substance)
[0927]
min：y轴下限值，max：y轴上限值，x50：拐点的x坐标，hill：min与max的中间点处的曲线斜率
[0928]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[0929]
[表14-2]
[0930][0931]
试验例3：通过施予式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体而进行的sars-cov-2感染小鼠的肺内病毒效价增殖抑制试验
[0932]
《材料和方法》
[0933]
·
化合物
[0934]
式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体使用0.5％甲基纤维素(0.5％mc)溶液进行了制备。施予容量设定为10ml/kg。施予量表示按游离体换算得到的量。
[0935]
·
病毒
[0936]
使用了由国立感染症研究所分离到的sars-cov-2hcov19/jap an/ty7-501/2021株。
[0937]
·
小鼠肺感染、给药、肺回收
[0938]
本研究中使用了无特定病原体的5周龄的雌性balb/c小鼠(clea japan,inc.)。在接种病毒时，通过在pbs中包含0.03mg/ml的盐酸美托咪啶、0.4mg/ml的咪达唑仑、0.5mg/ml的酒石酸布托诺啡的100μl麻醉液的肌内施予而将小鼠麻醉。在麻醉下向小鼠经鼻接种50μl的hcov19/japan/ty7-501/2021(1.00
×
104tcid
50
)。将刚刚感染病毒之后作为开始点，将式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体以2mg/kg、4mg/kg、8mg/kg、16mg/kg、32mg/kg、64mg/kg的用量单次或者以1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg、8mg/kg、16mg/kg、32mg/kg的用量1天2次地口服施予至小鼠(n＝5―10/组)。对于对照小鼠，1天2次地口服施予0.5％mc。在病毒感染1天后回收小鼠肺，添加2ml的pbs并进行均质化，回收离心后的上清液。
[0939]
·
肺内病毒效价的测定
[0940]
利用培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)将肺匀浆液制成10倍稀释系列后，与veroe6/tmprss2细胞(jcrb1819，1.5
×
104个细胞/孔)混合，接种至96孔板。在co2培养箱中培养4天后，对细胞病变效应(cpe)进行观察，算出肺匀浆液中包含的病毒效价。
[0941]
·
统计分析
[0942]
通过dunnett检验分析了肺匀浆液中病毒效价的组间差别。统计分析使用统计分析软件sas版本9.4windows用(sas institute(ca ry,nc))来实施。调整后的双侧p值小于0.05时，视为统计学显著。
[0943]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[0944]
就式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体施予组而言，在单次或1天2次中的任意施予时均以用量依赖性的方式使感染1天后的肺内病毒效价降低，在2mg/kg以上的
全部施予量下，与0.5％mc施予组相比，显示出显著低的病毒效价(图5a及图5b)。在单次施予时的32、64mg/kg施予组、1天2次施予时的16、32mg/kg施予组中，肺内病毒效价大体上达到定量下限(1.80-log
10
tcid
50
/ml)。
[0945]
试验例4：通过式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体的延迟施予进行的sars-cov-2感染小鼠的肺内病毒效价增殖抑制试验
[0946]
《材料和方法》
[0947]
·
化合物
[0948]
本发明化合物(式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体)使用0.5％甲基纤维素(0.5％mc)溶液进行了制备。施予容量设定为10ml/kg。施予量表示按游离体换算得到的量。
[0949]
·
病毒
[0950]
使用了由国立传染病研究所分离到的sars-cov-2hcov19/jap an/ty7-501/2021株。
[0951]
·
小鼠肺感染、给药、肺回收
[0952]
本研究中使用了无特定病原体的5周龄的雌性balb/c小鼠(clea japan,inc.)。在接种病毒时，通过在pbs中包含0.03mg/ml的盐酸美托咪啶、0.4mg/ml的咪达唑仑、0.5mg/ml的酒石酸布托诺啡的100μl麻醉液的肌内施予而将小鼠麻醉。在麻醉下向小鼠经鼻接种50μl的hcov19/japan/ty7-501/2021(1.00
×
104tcid
50
)。将病毒感染1天后或3天后作为开始点，将式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体以30mg/kg、150mg/kg的用量1天2次地口服施予至小鼠(n＝5/组)。对于对照小鼠，1天1次地口服施予0.5％mc。化合物施予设定为自施予开始起2天。在自施予开始起2天后回收小鼠肺，添加2ml的pbs并进行均质化，回收离心后的上清液。
[0953]
·
肺内病毒效价的测定
[0954]
利用培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)将肺匀浆液制成10倍稀释系列后，与veroe6/tmprss2细胞(jcrb1819，1.5
×
104个细胞/孔)混合，接种至96孔板。在co2培养箱中培养4天后，对细胞病变效应(cpe)进行观察，算出肺匀浆液中包含的病毒效价。
[0955]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[0956]
在自感染1天后开始施予的组中，施予开始2天后的肺内病毒效价在0.5％mc施予组中显示为6.47-log
10
tcid
50
/ml，在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体30、150mg/kg施予组中分别显示为4.47-log
10
tcid
50
/ml、2.90-log
10
tcid
50
/ml(图6a)。在自感染3天后开始施予的组中，施予开始2天后的肺内病毒效价在0.5％mc施予组中显示为4.83-log
10
tcid
50
/ml，在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体30、150mg/kg施予组中分别显示为3.63-log
10
tcid
50
/ml、3.35-log
10
tcid
50
/ml(图6b)。
[0957]
在施予开始是感染1天后、3天后的任意情况下，在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体施予组中，肺内病毒效价均与0.5％mc施予组相比显示为低值，由此暗示了即使空出从感染至施予的期间，也具有降低肺内病毒效价的效果。
[0958]
试验例4-2：通过式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体的延迟施予进行的sars-cov-2感染小鼠的肺内病毒效价增殖抑制试验
[0959]
《材料和方法》
[0960]
·
化合物
[0961]
式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体使用0.5％甲基纤维素(0.5％mc)溶液进行了制备。施予容量设定为10ml/kg。施予量表示按游离体换算得到的量。
[0962]
·
病毒
[0963]
使用了由国立传染病研究所分离到的sars-cov-2hcov19/jap an/ty7-501/2021株。
[0964]
·
小鼠肺感染、给药、肺回收
[0965]
本研究中使用了无特定病原体的5周龄的雌性balb/c小鼠(clea japan,inc.)。在接种病毒时，通过在pbs中包含0.03mg/ml的盐酸美托咪啶、0.4mg/ml的咪达唑仑、0.5mg/ml的酒石酸布托诺啡的100μl麻醉液的肌内施予而将小鼠麻醉。在麻醉下向小鼠经鼻接种50μl的hcov19/japan/ty7-501/2021(1.00
×
104tcid
50
)。将病毒感染1天后作为开始点，将式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体以8、16、32、64mg/kg的用量1天3次地口服施予至小鼠(n＝5/组)。对于对照小鼠，1天1次地口服施予0.5％mc。化合物施予设定为自施予开始起2天。在自施予开始起2天后回收小鼠肺，添加2ml的pbs并进行均质化，回收离心后的上清液。
[0966]
·
肺内病毒效价的测定
[0967]
利用培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)将肺匀浆液制成10倍稀释系列后，与veroe6/tmprss2细胞(jcrb1819，1.5
×
104个细胞/孔)混合，接种至96孔板。在co2培养箱中培养4天后，对细胞病变效应(cpe)进行观察，算出肺匀浆液中包含的病毒效价。
[0968]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[0969]
在自感染1天后开始施予的组中，施予开始2天后的肺内病毒效价在0.5％mc施予组中显示为6.57-log
10
tcid
50
/ml，在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体8、16、32、64mg/kg施予组中分别显示为5.55、4.66、2.85、2.40-log
10
tcid
50
/ml。在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体施予组中，肺内病毒效价与0.5％mc施予组相比显示为低值，由此暗示了即使空出从感染至施予的期间，也具有降低肺内病毒效价的效果(图7)。
[0970]
试验例5：通过施予式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体而进行的sars-cov-2感染小鼠的致死、体重减少抑制试验
[0971]
《材料和方法》
[0972]
·
化合物
[0973]
本发明化合物(式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体)使用0.5％甲基纤维素(0.5％mc)溶液进行了制备。施予容量设定为10ml/kg。施予量表示按游离体换算得到的量。
[0974]
·
病毒
[0975]
使用了由国立传染病研究所分离到的sars-cov-2hcov19/jap an/ty7-501/2021株(ty7-501)及由北海道大学分离到的sars-co v-2hcov19/japan/ty/wk-521/2020株小鼠驯化株ma-p10。
[0976]
·
小鼠肺感染、给药、体重测定
[0977]
本研究中使用了无特定病原体的15周龄或35-45周龄的退役的雌性balb/c小鼠(clea japan,inc.)。在接种病毒时，通过在pb s中包含0.03mg/ml的盐酸美托咪啶、0.4mg/
ml的咪达唑仑、0.5mg/ml的酒石酸布托诺啡的100μl麻醉液的肌内施予而将小鼠麻醉。在麻醉下向小鼠经鼻接种50μl的ty7-501(1.00
×
105tcid
50
)、ma-p10(1.00
×
103tcid
50
或1.00
×
104tcid
50
)。ty7-501仅使用了35-45周龄退役小鼠。自病毒感染1天后起，将式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体以50mg/kg的量1天2次地口服施予至小鼠(n＝4/组)。对于对照小鼠，1天2次地口服施予0.5％mc。1天1次地监测体重，在存活率的评价中，在以即将感染之前的体重为基准计变得小于80％的情况下，视为死亡。
[0978]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[0979]
在使35-45周龄的高周龄退役小鼠感染了ty7-501 1.00
×
105tcid
50
的情况下，自感染3天后起体重减少，在感染5天后，全部试验例死亡。此时，在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体50mg/kg施予组中，直至进行了观察的感染7天后为止，全部试验例存活，抑制了体重减少(图8a及图8b)。在使15周龄小鼠感染了ma-p10 1.00
×
103tcid
50
的情况下，自感染3天后起观察到体重减少，但未观察到死亡例。另一方面，在使15周龄小鼠感染了ma-p10 1.00
×
104tcid
50
的情况下，自感染3天后起体重减少，在感染4天后，在一部分个体中观察到死亡例，在感染6天后，全部试验例死亡。此时，在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体50mg/kg施予组中，直至进行了观察的感染7天后为止，全部试验例存活，未观察到体重减少(图8c及图8d)。
[0980]
接下来，在使35-45周龄的高周龄退役小鼠感染了ma-p10 1.00
×
103tcid
50
的情况下，自感染3天后起体重减少，在感染5天后，在一部分个体中观察到死亡例，在感染6天后，全部试验例死亡，由此认为在高周龄即35-45周龄的退役小鼠中，即使在较低的感染量时，也容易重症化。此时，在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体50mg/kg施予组中，直至进行了观察的感染7天后为止，全部试验例存活，抑制了体重减少(图8e及图8f)。
[0981]
由以上的结果暗示，在15周龄小鼠及35-45周龄的高周龄退役小鼠中的任意小鼠中，通过式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体的施予，均具有抑制致死及体重减少的效果。
[0982]
已知与幼龄小鼠相比时，在老龄小鼠中，与人同样地，作为sa rs-cov-2的受体而已知的ace2受体的表达量增加(参考文献：sc ientific reports(2020)10:22401及molecular therapy methods&clinical development,vol.18,p1-6,2020)，另外，防御身体免受感染源损伤并将它们排除的正常免疫应答降低，因此，估计会由于病毒感染而致死。然而，如上文所示，在使用了老龄小鼠的sar s-cov-2感染小鼠模型中，通过式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体的施予，感染7天后的小鼠的存活率显示为100％。使用了老龄小鼠的非临床试验被定位为模仿了具有基础疾病的高危患者达到重症化的过程的非临床评价体系之一，因此，支持式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体作为对于重症化风险高的患者的治疗选项的有用性。
[0983]
另外，上述试验结果暗示在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体施予组中抑制了由病毒感染导致的重症化，不仅支持式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体针对sars-cov-2的抗病毒效果，而且支持其作为由sars-cov-2导致的传染病的重症化抑制用医药的有用性。
[0984]
试验例6：针对sars-cov的抗病毒效果
[0985]
《材料》
[0986]
·
维持培养基(含有2％fbs的mem)
[0987]
向1000ml的最低必需培养基(minimum essential medium)中加入8.5％nahco
3 10ml、fbs20ml、l-谷氨酰胺10ml从而制备。
[0988]
·
mtt液
[0989]
将3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基-2h-四唑鎓溴化物(3-(4,5-dimethyl-2-thiazol)-2,5-diphenyl-2h-tetrazolium bromide)以成为5μg/ml的方式用pbs溶解后，利用0.45μm或0.22μm过滤器进行过滤。
[0990]
·
细胞溶解液(病毒灭活液)
[0991]
向500ml异丙醇中加入50ml的triton x、4ml的盐酸(12mo l/l)从而制备。
[0992]
·
二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，dmso)
[0993]
·
酶标仪(thermo fisher公司、perkin elmer公司等)
[0994]
《操作步骤》
[0995]
·
受试试样的稀释、分注
[0996]
预先用dmso将受试试样稀释至适当的浓度，制作3倍梯度稀释系列。进一步用维持培养基稀释，以成为50μl/孔的方式分注至96孔板中。
[0997]
·
细胞及病毒的稀释、分注
[0998]
将病毒(sars-cov hanoi strain(1000tcid
50
/孔))分别用维持培养基稀释，各50μl/孔地分注至装有受试试样的96孔板中。
[0999]
将用维持培养基制备成的veroe6/tmprss2细胞(1.5
×
104个细胞/孔)各100μl/孔地分注至装有受试试样及病毒的96孔板中。用板混合机进行混合，在co2培养箱中培养3天。
[1000]
·
mtt液、细胞溶解液的分注
[1001]
用肉眼在显微镜下观察培养3天后的96孔板，确认了细胞的形态
·
晶体的有无等。将mtt液各30μl地分注至各孔中，在co2培养箱中培养4～6小时。以不吸入细胞的方式从板中各除去150μl上清液。将细胞溶解液(病毒灭活液)各150μl地分注至各孔中。以不会干燥的方式用保鲜膜包裹板，于室温放置一夜。
[1002]
·
吸光度的测定(96孔板)
[1003]
翌日，用板混合机对板进行混合。对于96孔板，使用酶标仪测定了570nm和630nm的2个波长下的吸光度。
[1004]
《各测定项目值的计算》
[1005]
·
50％病毒感染细胞死亡抑制浓度(ec
50
)计算
[1006]
设x为化合物浓度的对数值，设y为％效力时，通过以下的lo gistic回归方程拟合抑制曲线，计算代入y＝50(％)时的x值作为ec
50
。
[1007]
y＝min+(max-min)/{1+(x50/x)^hill}
[1008]
％效力＝{(样品-病毒对照)/(细胞对照-病毒对照)}*100％
[1009]
样品(sample)：样品孔的平均od(the average of ods of sample wells)
[1010]
细胞对照(cell control)：细胞对照孔的平均od(the average of ods of cell control wells)
[1011]
病毒对照(virus control)：病毒对照孔的平均od(the averag e of ods of virus control wells)
[1012]
od：od(570nm)-od(630nm)
[1013]
min：y轴下限值，max：y轴上限值，x50：拐点的x坐标，hill：min与max的中间点处的曲线斜率
[1014]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。ec
50
如下所示。
[1015]
式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体：sars-cov0.209μm
[1016]
试验例7：针对hcov-oc43的抗病毒效果
[1017]
《操作步骤》
[1018]
·
受试试样的稀释、分注
[1019]
预先用dmso将受试试样稀释至适度的浓度，制作3倍梯度稀释系列后，分注至96孔板中，用维持培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)稀释。
[1020]
·
细胞及hcov-oc43的稀释、分注
[1021]
在感染前一天将悬浮于传代培养基(dmem，10％fbs，青霉素-链霉素)中的mrc-5细胞(2
×
104个细胞/孔)接种至96孔板，翌日，用1小时使其感染悬浮于维持培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)中的hcov-oc43(100tcid
50
/孔)。然后，用维持培养基洗涤1次后，添加已加有受试试剂的维持培养基，在co2培养箱中培养42小时。另外，为了调查受试试剂的细胞毒性，在不存在病毒的条件下实施同样的操作。
[1022]
·
病毒量的定量
[1023]
回收培养42小时后的板的上清液，使用quick-rna viral kit(zymo research，#r1041)提取rna。利用实时pcr(applied biosystems quantstudio3)对提取后的rna溶液进行定量。引物参照文献(journal of clinical microbiology.，2005，jun 43(11)，5452-5456)。
[1024]
《各测定项目值的计算》
[1025]
·
90％hcov-oc43病毒复制抑制浓度(ec
90
)计算
[1026]
在设x为化合物浓度的对数值、设y为病毒的拷贝数(log copies/ml)的浓度依赖性曲线中，将与相对于病毒对照而言的1log reduction相当的值根据其前后的2个浓度的拷贝数由二点法算出。即，
[1027]
x＝log10(high conc.)
[1028]
x＝log10(low conc.)
[1029]
y＝log10(low copies/ml)-log10(control copies/ml)
[1030]
y＝log10(high copies/ml)-log10(control copies/ml)
[1031]
通过下式计算ec
90
值。
[1032]
ec
90
＝10[x+(-1-y)
×
(x-x)/(y-y)]
[1033]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[1034]
式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体：ec
90 0.074μm
[1035]
试验例8：针对hcov-229e的抗病毒效果
[1036]
《操作步骤》
[1037]
·
受试试样的稀释、分注
[1038]
预先用dmso将受试试样稀释至适度的浓度，制作3倍梯度稀释系列后，分注至96孔板中，用维持培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)稀释。
[1039]
·
细胞及hcov-229e的稀释、分注
[1040]
在感染前一天将悬浮于传代培养基(dmem，10％fbs，青霉素-链霉素)中的mrc-5细胞(2
×
104个细胞/孔)接种至96孔板，翌日，用1小时使其感染悬浮于维持培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)中的hcov-229e(1000tcid
50
/孔)。然后，将病毒液除去，添加已加有受试试剂的维持培养基，在co2培养箱中培养72小时。另外，为了调查受试试剂的细胞毒性，在不存在病毒的条件下实施同样的操作。
[1041]
·
celltiter-glo(注册商标)2.0的分注及发光信号的测定
[1042]
将培养72小时后的板恢复至室温后，将celltiter-glo(注册商标)2.0分注至各孔，用板混合机进行混合。放置一定时间后，用酶标仪测定发光信号(lum)。
[1043]
《各测定项目值的计算》
[1044]
·
50％hcov-229e感染细胞死亡抑制浓度(ec
50
)计算
[1045]
设x为化合物浓度的对数值，设y为％效力时，通过以下的logistic回归方程拟合抑制曲线，计算代入y＝50(％)时的x值作为ec
50
。
[1046]
y＝min+(max-min)/{1+(x50/x)^hill}
[1047]
％效力＝{(样品-病毒对照)/(细胞对照-病毒对照)}*100％
[1048]
细胞对照：细胞对照孔的平均lum
[1049]
病毒对照：病毒对照孔的平均lum
[1050]
min：y轴下限值，max：y轴上限值，x50：拐点的x坐标，hill：min与max的中间点处的曲线斜率
[1051]
·
50％细胞毒性浓度的计算
[1052]
设x为化合物浓度的对数值，设y为％细胞毒性(cytotoxicity)时，通过以下的logistic回归方程拟合抑制曲线，计算代入y＝50(％)时的x值作为cc
50
。
[1053]
y＝min+(max-min)/{1+(x50/x)^hill}
[1054]
％细胞毒性＝{(样品-培养基对照)/(细胞对照-培养基对照)}*100％
[1055]
(％cytotoxicity＝{(sample-medium control)/(cell con trol-medium control)}*100％)
[1056]
细胞对照：细胞对照孔的平均lum
[1057]
培养基对照(medium control)：培养基对照孔的平均lum(th e average of lum of medium control wells)
[1058]
min：y轴下限值，max：y轴上限值，x50：拐点的x坐标，hill：min与max的中间点处的曲线斜率
[1059]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[1060]
式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体：ec
50 5.53μm，cc
50
》200μm
[1061]
试验例9：人血清及小鼠血清对于抗sars-cov-2活性的影响
[1062]
《操作步骤》
[1063]
·
受试试样的稀释、分注
[1064]
预先用dmso将受试试样稀释至适度的浓度，制作3倍梯度稀释系列后，分注至96孔板中。
[1065]
·
添加有血清的培养基的添加
[1066]
以成为0、6.25％、12.5、25、50％人血清或0、3.125、6.25、12.5、25％小鼠血清的方式用培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)进行调整，分注至装有受试试样的孔中，于室温孵育1小时。
[1067]
·
细胞及sars-cov-2的稀释、分注
[1068]
将veroe6/tmprss2细胞(jcrb1819，1.5
×
103个细胞/孔)和sars-cov-2hcov-19/japan/ty7-501/2021(在人血清中为1000tcid 50
/孔，在小鼠血清中为10000tcid
50
/孔)在培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)中混合，向装有受试试样及人血清、小鼠血清的孔中等量分注后，在co2培养箱中培养3天。
[1069]
·
celltiter-glo(注册商标)2.0的分注及发光信号的测定
[1070]
将培养3天后的板恢复至室温后，将celltiter-glo(注册商标)2.0分注至各孔，用板混合机进行混合。放置一定时间后，用酶标仪测定发光信号(lum)。
[1071]
《各测定项目值的计算》
[1072]
·
50％sars-cov-2感染细胞死亡抑制浓度(ec
50
)计算
[1073]
设x为化合物浓度的对数值，设y为％效力时，通过以下的lo gistic回归方程拟合抑制曲线，计算代入y＝50(％)时的x值作为ec
50
。
[1074]
y＝min+(max-min)/{1+(x50/x)^hill}
[1075]
％效力＝{(样品-病毒对照)/(细胞对照-病毒对照)}*100％
[1076]
细胞对照：细胞对照孔的平均lum
[1077]
病毒对照：病毒对照孔的平均lum
[1078]
min：y轴下限值，max：y轴上限值，x50：拐点的x坐标，hill：min与max的中间点处的曲线斜率
[1079]
·
蛋白质调整(protein-adjusted)ec
50
(pa-ec
50
)的计算
[1080]
计算各血清浓度时的ec
50
后，通过线性回归计算血清100％条件下的pa-ec
50
值。
[1081]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[1082]
式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体：人血清pa-ec
50 3.02μm，小鼠血清pa-ec
50 3.93μm
[1083]
试验例10-1：使用了人ace2、tmprss2表达hek293t细胞(hek293t/ace2-tmprss2细胞)的细胞病变效应(cpe)抑制效果确认试验
[1084]
《操作步骤》
[1085]
·
受试试样的稀释、分注
[1086]
预先用dmso将受试试样稀释至适度的浓度，制作3倍梯度稀释系列后，分注至96孔板中。
[1087]
·
细胞及sars-cov-2的稀释、分注
[1088]
将hek293t/ace2-tmprss2细胞(sl222，1.5
×
104个细胞/孔)和sars-cov-2hcov-19/japan/ty/wk-521/2020、hcov-19/japan/qk002/2020、hcov-19/japan/ty7-501/2021、hcov-19/japan/ty8-612/2021、hcov-19/japan/ty11-927-p1/2021(3000-9000tcid
50
/孔)在培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)中混合，分注至装有受试试样的孔中后，在co2培养箱中培养3天。
[1089]
·
celltiter-glo(注册商标)2.0的分注及发光信号的测定
[1090]
将培养3天后的板恢复至室温后，将celltiter-glo(注册商标)2.0分注至各孔，用板混合机进行混合。放置一定时间后，用酶标仪测定发光信号(lum)。
[1091]
《各测定项目值的计算》
[1092]
·
50％sars-cov-2感染细胞死亡抑制浓度(ec
50
)计算
[1093]
设x为化合物浓度的对数值，设y为％效力时，通过以下的logistic回归方程拟合抑制曲线，计算代入y＝50(％)时的x值作为ec
50
。
[1094]
y＝min+(max-min)/{1+(x50/x)^hill}
[1095]
％效力＝{(样品-病毒对照)/(细胞对照-病毒对照)}*100％
[1096]
细胞对照：细胞对照孔的平均lum
[1097]
病毒对照：病毒对照孔的平均lum
[1098]
min：y轴下限值，max：y轴上限值，x50：拐点的x坐标，hill：min与max的中间点处的曲线斜率
[1099]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[1100]
式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体：0.026-0.058μm
[1101]
试验例10-2：使用了人ace2、tmprss2表达hek293t细胞(hek293t/ace2-tmprss2细胞)的细胞病变效应(cpe)抑制效果确认试验
[1102]
《操作步骤》
[1103]
·
受试试样的稀释、分注
[1104]
预先用dmso将受试试样稀释至适度的浓度，制作3倍梯度稀释系列后，分注至96孔板中。
[1105]
·
细胞及sars-cov-2的稀释、分注
[1106]
将hek293t/ace2-tmprss2细胞(sl222，1.5
×
104个细胞/孔)和sars-cov-2hcov-19/japan/ty38-873/2021(9000tcid
50
/孔)在培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)中混合，分注至装有受试试样的孔中后，在co2培养箱中培养3天。
[1107]
·
celltiter-glo(注册商标)2.0的分注及发光信号的测定
[1108]
将培养3天后的板恢复至室温后，将celltiter-glo(注册商标)2.0分注至各孔，用板混合机进行混合。放置一定时间后，用酶标仪测定发光信号(lum)。
[1109]
《各测定项目值的计算》
[1110]
·
50％sars-cov-2感染细胞死亡抑制浓度(ec
50
)计算
[1111]
设x为化合物浓度的对数值，设y为％效力时，通过以下的lo gistic回归方程拟合抑制曲线，计算代入y＝50(％)时的x值作为ec
50
。
[1112]
y＝min+(max-min)/{1+(x50/x)^hill}
[1113]
％效力＝{(样品-病毒对照)/(细胞对照-病毒对照)}*100％
[1114]
细胞对照：细胞对照孔的平均lum
[1115]
病毒对照：病毒对照孔的平均lum
[1116]
min：y轴下限值，max：y轴上限值，x50：拐点的x坐标，hill：min与max的中间点处的曲线斜率
[1117]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[1118]
式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体：0.083μm
[1119]
试验例11：通过式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体的预防施予而进行的从sars-cov-2感染动物向非感染动物的病毒传播抑制试验
[1120]
《材料和方法》
[1121]
·
化合物
[1122]
式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体使用0.5％甲基纤维素(0.5％mc)溶液进行了制备。施予容量设定为10ml/kg。施予量表示按游离体换算得到的量。
[1123]
·
病毒
[1124]
使用了由国立传染病研究所分离到的sars-cov-2hcov19/jap an/ty11-927/2021株。
[1125]
·
仓鼠肺感染、给药、肺回收
[1126]
本研究中使用了无特定病原体的5周龄的雄性叙利亚仓鼠(jap an slc,inc.)。将接种病毒的感染仓鼠1只与不接种病毒的给药仓鼠3只在同一个笼内饲养，试验了向与感染仓鼠同住的给药仓鼠的病毒传播。在接种病毒时，通过异氟烷的吸入施予而将仓鼠麻醉。在麻醉下将200μl的hcov19/japan/ty11-927/2021(5.00
×
103pfu)经鼻接种至仓鼠。对于不进行病毒接种的给药仓鼠，将向感染仓鼠的病毒接种时作为开始点，以30、200mg/kg的用量1天2次地口服施予式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体。对于对照仓鼠，1天2次地口服施予0.5％mc。化合物施予设定为自施予开始起6天。在自施予开始起6天后回收仓鼠肺，添加5ml的pbs并进行均质化，回收离心后的上清液。
[1127]
·
肺内病毒效价的测定
[1128]
利用培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)将肺匀浆液制成10倍稀释系列后，接种至预先在24孔板中进行了培养的veroe6/tmprss2细胞(jcrb1819，2.0
×
105个细胞/孔)。在co2培养箱中培养2天后，观察病毒空斑，算出肺匀浆液中包含的病毒效价。
[1129]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[1130]
在与感染仓鼠的同住开始6天后，给药仓鼠的肺内病毒效价在0.5％mc施予组中显示为6.12-log
10
pfu/ml，在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体30、200mg/kg施予组中分别显示为3.48-log
10
pfu
50
/ml、检测限值以下(图9)。在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体施予组中，肺内病毒效价与0.5％mc施予组相比显示为低值，由此暗示了具有减少从感染仓鼠的病毒传播的效果。
[1131]
试验例12：通过在刚刚感染之后施予式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体而进行的从sars-cov-2感染动物向非感染动物的病毒传播抑制试验
[1132]
《材料和方法》
[1133]
·
化合物
[1134]
式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体使用0.5％甲基纤维素(0.5％mc)溶液进行了制备。施予容量设定为10ml/kg。施予量表示按游离体换算得到的量。
[1135]
·
病毒
[1136]
使用了由国立传染病研究所分离到的sars-cov-2hcov19/jap an/ty11-927/2021株。
[1137]
·
仓鼠肺感染、给药、肺回收
[1138]
本研究中使用了无特定病原体的5周龄的雄性叙利亚仓鼠(jap an slc,inc.)。将
接种病毒的感染仓鼠1只与不接种病毒的非感染仓鼠2只在同一个笼内饲养，试验了向与感染仓鼠同住的非感染仓鼠的病毒传播。在接种病毒时，通过异氟烷的吸入施予而将仓鼠麻醉，经鼻接种200μl的hcov-19/japan/ty11-927/2021(5.00
×
103pf u)。对于感染仓鼠，将病毒接种时作为开始点，以200mg/kg的用量1天2次地口服施予式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体。对于对照的感染仓鼠，1天2次地口服施予0.5％mc。化合物施予设定为自施予开始起4天。在感染6天后回收非感染仓鼠肺，添加5ml的pbs并进行均质化，回收离心后的上清液。
[1139]
·
肺内病毒效价的测定
[1140]
利用培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)将肺匀浆液制成10倍稀释系列后，接种至预先在24孔板中进行了培养的veroe6/tmprss2细胞(jcrb1819，2.0
×
105个细胞/孔)。在co2培养箱中培养2天后，观察病毒空斑，算出肺匀浆液中包含的病毒效价。
[1141]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[1142]
在与感染仓鼠的同住开始6天后，非感染仓鼠的肺内病毒效价在0.5％mc施予组中显示为6.36-log
10
pfu/ml，在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体200mg/kg施予组中显示为检测限值以下(图10)。在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体施予组中，肺内病毒效价与0.5％mc施予组相比显示为低值，由此暗示了具有减少从感染仓鼠的病毒传播的效果。
[1143]
试验例13：通过式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体的感染后延迟施予进行的从sars-cov-2感染动物向非感染动物的病毒传播抑制试验
[1144]
《材料和方法》
[1145]
·
化合物
[1146]
式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体使用0.5％甲基纤维素(0.5％mc)溶液进行了制备。施予容量设定为5ml/kg。施予量表示按游离体换算得到的量。
[1147]
·
病毒
[1148]
使用了由国立传染病研究所分离到的sars-cov-2hcov19/jap an/ty11-927/2021株。
[1149]
·
仓鼠肺感染、给药、肺及鼻甲回收
[1150]
本研究中使用了无特定病原体的6周龄的雄性叙利亚仓鼠(jap an slc,inc.)。将接种病毒的感染仓鼠1只与不接种病毒的非感染仓鼠1只，以感染2天后作为开始点而在同一个笼内饲养，试验了向与感染仓鼠同住的非感染仓鼠的病毒传播。以各组n＝3来实施。在接种病毒时，通过包含0.07mg/ml的盐酸美托咪啶、6.98mg/ml的阿法沙龙、1.16mg/ml的酒石酸布托诺啡的200μl麻醉液的皮下施予而将仓鼠麻醉，经鼻接种100μl的hcov-19/japan/ty11-927/2021(1.00
×
102tcid
50
)。对于感染仓鼠，将病毒接种1天后作为开始点，以50mg/kg的用量1天2次地口服施予式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体。对于对照的感染仓鼠，1天2次地口服施予0.5％mc。化合物施予设定为自施予开始起4天。在感染5天后回收感染及非感染仓鼠肺及鼻甲，分别添加5ml或1ml的pbs并进行均质化，回收离心后的上清液。
[1151]
·
肺内及鼻甲内病毒效价的测定
[1152]
利用培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)将肺或鼻甲匀浆液制成10倍稀释系列
后，接种至预先在96孔板中进行了培养的ve roe6/tmprss2细胞(jcrb1819，1.5
×
104个细胞/孔)。在co2培养箱中培养5天后，对细胞病变效应(cpe)进行观察，算出肺或鼻甲匀浆液中包含的病毒效价。
[1153]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[1154]
在与感染仓鼠的同住开始3天后，非感染仓鼠的肺内病毒效价在0.5％mc施予组中显示为5.30-log
10
tcid
50
/ml，在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体50mg/kg施予组中显示为2.97-lo g
10
tcid
50
/ml(图11a)。另外，在与感染仓鼠的同住开始3天后，非感染仓鼠的鼻甲内病毒效价在0.5％mc施予组中显示为6.06-log
10
tcid
50
/ml，在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体50mg/kg施予组中显示为2.89-log
10
tcid
50
/ml(图11b)。在式(i-b)所示的化合物的富马酸共晶体i型晶体施予组中，肺内及鼻甲内的病毒效价与0.5％mc施予组相比显示为低值，由此暗示了具有减少从感染仓鼠的病毒传播的效果。
[1155]
试验例14：通过式(i-b)所示的化合物的预防施予进行的sa rs-cov-2感染小鼠的致死、体重减少抑制试验
[1156]
《材料和方法》
[1157]
·
化合物
[1158]
本发明化合物(式(i-b)所示的化合物)使用0.5％甲基纤维素(0.5％mc)溶液进行了制备。施予容量设定为10ml/kg
×
2处。
[1159]
·
病毒
[1160]
使用了由北海道大学分离到的sars-cov-2hcov19/japan/ty/wk-521/2020株小鼠驯化株ma-p10。
[1161]
·
小鼠肺感染、给药、体重测定
[1162]
本研究中使用了无特定病原体的37-57周龄的退役的雌性bal b/c小鼠(clea japan,inc.)。在接种病毒时，通过在pbs中包含0.03mg/ml的盐酸美托咪啶、0.4mg/ml的咪达唑仑、0.5mg/ml的酒石酸布托诺啡的100μl麻醉液的肌内施予而将小鼠麻醉。在麻醉下向小鼠经鼻接种50μl的ma-p10(3.00
×
102tcid
50
)。在病毒感染1天前，将式(i-b)所示的化合物以32、64、96、128mg/kg的量单次皮下施予至小鼠(n＝15/组)。对于对照小鼠，单次皮下施予0.5％mc。1天1次地监测体重，在存活率的评价中，在以即将感染之前的体重为基准计变得小于80％的情况下，视为死亡。
[1163]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[1164]
在使37-57周龄的高周龄退役小鼠感染了ma-p10 3.00
×
102tcid
50
的情况下，自感染翌日起体重减少，在感染4天后，在一部分个体中观察到死亡例，在感染8天后，全部试验例死亡。此时，在式(i-b)所示的化合物32、64、96、128mg/kg施予组中，到感染14天后为止的存活率分别为6.7％、60％、80％、100％，在32mg/kg以上的施予组中，抑制了体重减少(图12a，b)。需要说明的是，对即将感染之前、即施予1天后的血浆中浓度进行了测定，结果分别为1740、2990、3110、3370μg/ml。
[1165]
由以上的结果表明，在37-57周龄的高周龄退役小鼠中，在感染1天前皮下施予64mg/kg以上的式(i-b)所示的化合物，病毒感染时的血浆中浓度为2990μg/ml以上时具有抑制致死及体重减少的效果。
[1166]
上述试验结果表明在式(i-b)所示的化合物的预防性的皮下施予时抑制了由病毒
感染导致的重症化，支持式(i-b)所示的化合物作为由sars-cov-2导致的传染病的预防药的有用性。
[1167]
试验例15：使用了人气道上皮细胞(human airway epithelial cells)的病毒增殖抑制效果确认试验
[1168]
《操作步骤》
[1169]
·
受试试样的稀释、分注
[1170]
预先用dmso将受试试样稀释至适度的浓度，制作3倍梯度稀释系列后，用mucilair
tm
培养液稀释200倍，分注至24孔板中。
[1171]
·
sars-cov-2感染
[1172]
使接种于transwell中的mucilair
tm
(鼻腔(nasal cavity)，约5.0
×
105个细胞/孔)感染sars-cov-2 hcov-19/japan/ty11-927-p1/2021，hcov-19/japan/ty38-873/2021(5000tcid
50
/孔)，在co2培养箱中培养2小时。然后用mucilair
tm
培养液洗涤，将transwell载置于装有受试试样的孔，在co2培养箱中培养。对于hcov-19/japan/ty11-927-p1/2021，在感染2、3天后向transwell中添加mucilair
tm
培养液，对于hcov-19/japan/ty38-873/2021，在感染1、2天后向transwell中添加mucilair
tm
培养液，回收其上清液。
[1173]
·
上清液中病毒效价的测定
[1174]
利用培养基(mem，2％fbs，青霉素-链霉素)将回收到的上清液制成10倍稀释系列后，与veroe6/tmprss2细胞(jcrb1819，1.5
×
104个细胞/孔)混合，接种至96孔板。在co2培养箱中培养4天后，对细胞病变效应(cpe)进行观察，算出上清液中包含的病毒效价。
[1175]
《各测定项目值的计算》
[1176]
·
90％sars-cov-2病毒产生抑制浓度(ec
90
)计算
[1177]
在设x为化合物浓度的对数值、设y为病毒效价(log
10 tcid
50
/ml)的浓度依赖性曲线中，将与相对于病毒对照而言的1log
10 reduction相当的值根据其前后的2个浓度的病毒效价由二点法算出。
[1178]
[数学式1]
[1179]
x＝相对于对照病毒效价而言的减少的平均值小于-1时的最低浓度(the lowest conc.at the average of reduction from control viral titer of《-1)
[1180]
x＝相对于对照病毒效价而言的减少的平均值为-1以上时的最高浓度(the highest conc.at the average of reduction from controlviral titer of≥-1)
[1181]
y＝x处的相对于对照病毒效价而言的减少的平均值(the average of reduction from control viral titer at x)
[1182]
y＝x处的相对于对照病毒效价而言的减少的平均值(the average of reduction from control viral titer at x)
[1183]
通过下式计算ec
90
值。
[1184]
ec
90
＝10
[log(x)
+(-1-y)
×
(log(x)-log(x))/(y-y)]
[1185]
本质上如上所述地对本发明化合物进行试验。结果如下所示。
[1186]
[表15]
[1187][1188]
以下所示的制剂例只不过是示例，并非意在对发明范围进行任何限定。
[1189]
本发明涉及的化合物可以通过任意的以往的途径，尤其是以经肠、例如口服的方式(以例如片剂或胶囊剂的形态)、或者以肠胃外的方式(以例如注射液剂或混悬剂的形态)、在局部以例如洗剂、凝胶剂、软膏剂或霜剂的形态、或者以经鼻形态或栓剂形态，作为医药组合物来施予。以与至少1种药学上允许的载体或稀释剂一起的形式包含游离形态或药学上允许的盐的形态的本发明的化合物的医药组合物可以利用以往的方法，通过混合、造粒或包衣法来制造。例如，作为口服用组合物，可以制成含有赋形剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂等及有效成分等的片剂、颗粒剂、胶囊剂。另外，作为注射用组合物，可以制成溶液剂或混悬剂，可以进行灭菌，另外，也可以含有防腐剂、稳定剂、缓冲剂等。
[1190]
产业上的可利用性
[1191]
本发明涉及的化合物具有针对冠状病毒3cl蛋白酶的抑制活性，含有本发明涉及的化合物的医药组合物作为冠状病毒传染病的治疗剂及/或预防剂是有用的。

技术特征：
1.医药组合物，其含有式(i)所示的化合物或其制药上允许的盐，[化学式1]式(i)中，y为n；r1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；r2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；r3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；-x-为-nh-；m为0或1；r
5a
为氢原子；r
5b
为氢原子；n为1；r
4a
为氢原子；r
4b
为氢原子。2.如权利要求1所述的医药组合物，其中，r1为取代或未取代的5～6元芳香族杂环式基团。3.如权利要求1或2所述的医药组合物，其中，r2为被选自取代基组g中的1个、2个或3个取代基取代的6元芳香族碳环式基团；其中，取代基组g为由卤素、氰基及未取代烷基组成的组。4.如权利要求1～3中任一项所述的医药组合物，其中，r3为取代或未取代的9～10元芳香族杂环式基团。5.医药组合物，其含有权利要求1所述的化合物或其制药上允许的盐，其中，式(i)所示的化合物选自由化合物i-003、化合物i-005、化合物i-017及化合物i-023组成的组。6.如权利要求1～5中任一项所述的医药组合物，其为3cl蛋白酶抑制剂。7.如权利要求1～6中任一项所述的医药组合物，其用于抑制sars-cov-2的病毒增殖。8.如权利要求1～7中任一项所述的医药组合物，其为新型冠状病毒传染病(covid-19)的治疗剂及/或预防剂。9.如权利要求1～8中任一项所述的医药组合物，其用于抑制由sars-cov-2导致的传染病的重症化。10.如权利要求1～9中任一项所述的医药组合物，其以下述方式使用：在由sars-cov-2导致的传染病的症状显现之后、或者自判定sars-cov-2阳性起在72小时以内开始施予。11.如权利要求1～9中任一项所述的医药组合物，其以下述方式使用：在由sars-cov-2导致的传染病的症状显现之后、或者自判定sars-cov-2阳性起在24小时以内开始施予。12.如权利要求1～9中任一项所述的医药组合物，其用于抑制sars-cov-2的病毒传播。

技术总结
本发明提供含有显示出冠状病毒增殖抑制活性的化合物的医药组合物。医药组合物，其含有下式所示的化合物或其制药上允许的盐。(式中，Y为N；R1为取代或未取代的芳香族杂环式基团；R2为取代或未取代的6元芳香族碳环式基团；R3为取代或未取代的芳香族杂环式基团；-X-为-NH-；m为0或1；R


技术研发人员：立花裕树 上原彰太 宇纳佑斗 中原健二 垰田善之 笠松幸司 山津维子 安藤茂 深尾圭太 登治谦 黑田隆之 鸟羽晋辅 上村健太朗 丸山优树 佐佐木道仁 泽洋文
受保护的技术使用者：国立大学法人北海道大学
技术研发日：2022.09.27
技术公布日：2023/9/20