一种杨梅素与川陈皮素拼接物及其制备方法与流程

1.本发明属于医药技术领域，具体涉及一种杨梅素与川陈皮素拼接物及其制备方法。


背景技术：

2.高尿酸血症(hyperuricemia，hua)是痛风(gout)发生发展的主要危险因素，并是多种心血管疾病和代谢性疾病的独立危险因素，包括糖尿病、高血压、动脉粥样硬化，以及慢性肾脏疾病(chronic kidney disease，ckd)。无论是药物研发和评价还是高尿酸血症及相关疾病机制探讨都离不开高尿酸血症实验模型的建立，鉴于实验动物的饲养与获取的便捷性，目前用于研究高尿酸血症的动物主要是啮齿类动物。在体内，尿酸的代谢过程大致为腺嘌呤核糖核苷酸-腺苷-肌苷-次黄嘌呤-黄嘌呤-尿酸，增加尿酸或其前体物质均可引起体内血尿酸水平升高，同时也可以通过抑制尿酸进一步降解以及抑制尿酸的排泄从而减少尿酸的去路，达到升高血尿酸的目的。本研究采用酵母膏致高尿酸血症模型原理：酵母膏含有丰富的蛋白质、核苷酸、b族维生素等，在体内充分水解能产生含氮的有机碱(包括嘌呤碱类、嘧啶碱类)和磷酸，大剂量的酵母进入体内后能干扰机体正常的嘌呤代谢致嘌呤代谢紊乱，其主要表现为黄嘌呤氧化酶活性增加尿酸生成加速。
3.目前，治疗高尿酸血症西药主要有非布司他、别嘌呤醇等抑制尿酸生成药物，布立酶、塔戈洛酶等新型促尿酸分解药物，以及苯溴马隆、雷西纳德等促尿酸排泄药物。虽然西药具有明显的降尿酸作用，但对其并发症疗效较差，甚至不良反应显示具有一定的肾毒性。近年来，多项研究发现和临床观察表明，中医药及民族药物预防和治疗高尿酸血症及其并发症具有明显的疗效优势，特别在缓解并发症方面发挥了重要作用。杨梅素(myricetin)是常见的植物来源的类黄酮，具有广泛的生物活性，包括强抗氧化、抗癌、抗糖尿病及抗炎作用。先前的临床研究报道杨梅素可显著降低高尿酸血症患者的血清尿酸(ua)水平(王勇.杨梅素、葛根素对高尿酸血症的影响及其意义[j].内蒙古中医药,2010,29(19):9-10.)。川陈皮素(nobiletin)，是从柑橘果皮分离得到的柑橘黄酮，具有抗炎和抗肿瘤活性。研究发现，川陈皮素对oat4过表达单克隆细胞株的ic50为0.556μmoul/l，对oat4具有较强的抑制作用(王泽,慈小燕,崔涛,等.不同药性成分对oat4、urat1抑制作用及对急性高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响[j].中草药,2019,50(05):1157-1163.)。鉴于两者均具有很好的降尿酸作用，因此以这两类化合物作为先导化合物进行结构修饰和改造，开发新型降尿酸药物，具有重要的理论意义和现实价值。


技术实现要素：

[0004]
本发明的目的是提供一种杨梅素与川陈皮素拼接物、其制备方法及医药用途，以充分发挥拼接物在临床中的药用价值。通过科学实验发现，酵母膏饲料喂养致小鼠高尿酸血症模型复制成功，模型组小鼠血清尿酸水平、肌酐和尿素氮水平及小鼠肾脏指数和肝脏指数均明显升高，且肾脏病变情况明显。拼接物能明显降低高尿酸血症模型小鼠的尿酸、肌
酐和尿素氮水平，降低肝脏指数和肾脏指数，改善肾脏病理学变化；同时拼接物对血清尿酸、肌酐水平的降低幅度明显高于单体杨梅素和川陈皮素，表明拼接物的降尿酸效果优于单体药物，具有明显的改善高尿酸血症的作用，为拼接物作为降尿酸药物的临床开发提供理论依据。
[0005]
一种杨梅素与川陈皮素拼接物，其结构如下：
[0006][0007]
如上式化合物e所示的杨梅素与川陈皮素拼接物，其制备方法包括以下步骤：
[0008]
(1)杨梅苷与碳酸钾在乙腈溶剂中混合，加入硫酸二甲酯，控温85℃反应24小时，过滤、脱溶，得化合物a；所得到的化合物a加入乙醇溶解，再加入浓盐酸，在70℃下反应12小时，脱溶除去乙醇，所得的粗品加二氯甲烷溶解。
[0009]
经水洗涤之后，用无水硫酸钠干燥，过滤，脱溶，得到产品b，直接用于下一步。
[0010][0011]
所述杨梅苷与碳酸钾的摩尔比为1:6-8；所述乙腈与杨梅苷的体积质量比为50:1，所述硫酸二甲酯与碳酸钾的摩尔比为1:1；所述用于溶解化合物a的乙醇与乙腈的体积比为1:1；所述浓盐酸的质量浓度为37％，浓盐酸与杨梅苷的摩尔比为10:1(以hcl计)。
[0012]
(2)化合物b的n,n-二甲基甲酰胺溶液中加入碳酸钾和brch2ch2ch2co2et，在60℃下反应12小时。加水洗涤，加乙酸乙酯萃取。脱溶，得到产品加入四氢呋喃溶解，加入氢氧化钠水溶液。继续在室温下反应6小时。脱溶，得到水相，加入稀盐酸，调节ph至4。加入二氯甲烷萃取，经无水硫酸钠干燥，脱溶得到产品c。
[0013][0014]
所述化合物b与n,n-二甲基甲酰胺的质量体积比为1:15-20；所述碳酸钾与化合物b的摩尔比为3:1；所述brch2ch2ch2co2et与化合物b的摩尔比为2:1，所述四氢呋喃与n,n-二
甲基甲酰胺的体积比为1:1，所述氢氧化钠水溶液的质量浓度为5％-40％，其中氢氧化钠与化合物b的摩尔比为2:1，所述稀盐酸的摩尔浓度为4mol/l。
[0015]
(3)川陈皮素的二氯甲烷和丙酮溶液中加入碳酸钠和碳酸氢钠的水溶液，再加入过硫酸氢钾的水溶液。继续在室温下反应48小时。脱溶，粗品加入二氯甲烷溶解，加入稀盐酸洗涤。分液，水相经二氯甲烷萃取，脱溶，经硅胶柱层析得到产品d。
[0016][0017]
所述二氯甲烷和丙酮混合溶剂与川陈皮素的体积质量比为175：1，其中二氯甲烷和丙酮的体积比为4：3，所述碳酸钠水溶液的质量浓度为5％，其中碳酸钠与川陈皮素的摩尔比为20：1，碳酸氢钠水溶液的质量浓度为5％，其中碳酸氢钠与川陈皮素的摩尔比为13：1，过硫酸氢钾水溶液的质量浓度为10％，其中过硫酸氢钾与川陈皮素的摩尔比为10：1。
[0018]
(4)化合物c和d的二氯甲烷溶液中加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和4-二甲氨基吡啶，继续在室温下反应12小时。经干法上样，硅胶柱层析得到产品e即为杨梅素与川陈皮素拼接物。
[0019][0020]
所述化合物c与化合物d的摩尔比为1：1，所述二氯甲烷与化合物c的体积质量比为100：1，所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐与化合物c的摩尔比为2:1，所述4-二甲氨基吡啶与化合物c的摩尔比为1:1。
[0021]
本发明取得以下有益技术效果：
[0022]
(1)通过对两个具有临床意义的先导化合物进行修饰和改造，得到新化合物杨梅素与川陈皮素拼接物，新化合物相比于传统西药对并发症具有明显优势且不良反应较小；
[0023]
(2)拼接物对血清尿酸、肌酐水平的降低幅度明显高于单体杨梅素和川陈皮素，表明拼接物的降尿酸效果优于单体药物，具有明显的改善高尿酸血症的作用。
附图说明
[0024]
图1为不同处理对小鼠血清ua的影响(mean
±
sem)(注：与正常组比较，
###
p《0.001；与模型组比较，
**
p《0.01，
***
p《0.001。)
[0025]
图2为不同处理对小鼠血清cre和bun的影响(mean
±
sem，注：与正常组比较，
###
p《
0.001；与模型组比较，
***
p《0.001。)
[0026]
图3为不同处理对小鼠肾脏和肝脏指数的影响(mean
±
sem，注：与正常组比较，
###
p《0.001；与模型组比较，
*
p《0.05，
**
p《0.01，
***
p《0.001)
[0027]
图4为拼接物对高尿酸血症小鼠肾脏组织病理结果的影响(he染色，
×
200)
具体实施方式：
[0028]
实施例1
[0029]
杨梅苷(0.8g,1.72mmol)和碳酸钾(1.8g,12.9mmol)混合，加乙腈(40ml)搅拌均匀，再加入硫酸二甲酯(1.2ml,12.9mmol)。在85℃下反应24小时，过滤，脱溶。所得到的粗品加入乙醇(40ml)溶解，再加入浓盐酸(1.4ml)，在70℃下反应12小时。脱溶除去乙醇，所得的粗品加二氯甲烷溶解。经水洗涤之后，用无水硫酸钠干燥。过滤，脱溶，得到产品b，直接用于下一步。
[0030]
化合物b(1.25g,3.2mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(20ml)溶液中加入碳酸钾(1.33g,9.6mmol)和brch2ch2ch2co2et(1.25g，6.4mmol)，在60℃下反应12小时。加水洗涤，加乙酸乙酯萃取。脱溶，得到产品加入四氢呋喃(20ml)溶解，加入氢氧化钠水溶液。继续在室温下反应6小时。脱溶，得到水相，加入稀盐酸，调节ph至4。加入二氯甲烷萃取，经无水硫酸钠干燥，脱溶得到产品c。
[0031]
川陈皮素(0.75g,1.86mmol)的75ml二氯甲烷和56ml丙酮溶液中加入5％的碳酸钠水溶液79g和5％的碳酸氢钠的水溶液41g，再加入10％的过硫酸氢钾水溶液，继续在室温下反应48小时。脱溶，粗品加入二氯甲烷溶解，加入稀盐酸洗涤。分液，水相经二氯甲烷萃取，脱溶，经硅胶柱层析得到产品d 315mg，收率40％。
[0032]
化合物c(357mg,0.75mmol)和d(315mg,0.75mmol)的二氯甲烷溶液中加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(edci,1.5mmol)和4-二甲氨基吡啶(dmap,0.75mmol)，继续在室温下反应12小时。经干法上样，硅胶柱层析得到产品e 598mg，收率91.0％。淡黄色固体，熔点：82
–
84℃，1h nmr(400mhz,chloroform-d)δ7.57(dd,j＝8.6,2.1hz,1h),7.48(d,j＝2.1hz,1h),7.36(s,2h),6.98(d,j＝8.5hz,1h),6.51(d,j＝2.2hz,1h),6.37(d,j＝2.3hz,1h),4.15
–
4.11(m,2h),4.10(s,3h),4.00
–
3.91(m,30h),3.02
–
2.89(m,2h),2.23(p,j＝6.8hz,2h)；
13
c nmr(101mhz,chloroform-d)δ173.43,170.15,170.09,163.53,160.56,158.33,153.14,152.58,152.15,151.16,150.97,148.44,147.96,146.53,143.65,139.99,137.37,132.56,125.49,121.89,121.62,113.97,110.67,110.05,108.95,105.37,95.35,91.98,70.61,61.82,61.46,61.35,61.21,60.49,55.93,55.48,55.34,30.30,25.18；hrms(m/z):calcd for c
45h46
nao
18
[m+na]
+
)897.2576,found 897.2570.
[0033]
实施例2
[0034]
杨梅苷(0.8g,1.72mmol)和碳酸钾(1.43g,10.3mmol)混合，加乙腈(40ml)搅拌均匀，再加入硫酸二甲酯(1.0ml,10.3mmol)。在85℃下反应24小时，过滤，脱溶。所得到的粗品加入乙醇(40ml)溶解，再加入浓盐酸(1.4ml)，在70℃下反应12小时。脱溶除去乙醇，所得的粗品加二氯甲烷溶解。经水洗涤之后，用无水硫酸钠干燥。过滤，脱溶，得到产品b，直接用于下一步。
[0035]
化合物b(1.25g,3.2mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(23ml)溶液中加入碳酸钾(1.33g,
9.6mmol)和brch2ch2ch2co2et(1.25g，6.4mmol)，在60℃下反应12小时。加水洗涤，加乙酸乙酯萃取。脱溶，得到产品加入四氢呋喃(23ml)溶解，加入氢氧化钠水溶液。继续在室温下反应6小时。脱溶，得到水相，加入稀盐酸，调节ph至4。加入二氯甲烷萃取，经无水硫酸钠干燥，脱溶得到产品c。
[0036]
川陈皮素(0.75g,1.86mmol)的75ml二氯甲烷和56ml丙酮溶液中加入5％的碳酸钠水溶液79g和5％的碳酸氢钠的水溶液41g，再加入10％的过硫酸氢钾水溶液，继续在室温下反应48小时。脱溶，粗品加入二氯甲烷溶解，加入稀盐酸洗涤。分液，水相经二氯甲烷萃取，脱溶，经硅胶柱层析得到产品d 315mg，收率40％。
[0037]
化合物c(357mg,0.75mmol)和d(315mg,0.75mmol)的二氯甲烷溶液中加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(edci,1.5mmol)和4-二甲氨基吡啶(dmap,0.75mmol)，继续在室温下反应12小时。经干法上样，硅胶柱层析得到产品e 598mg，收率91.6％。
[0038]
实施例3
[0039]
杨梅苷(0.8g,1.72mmol)和碳酸钾(1.9g,13.8mmol)混合，加乙腈(40ml)搅拌均匀，再加入硫酸二甲酯(1.3ml,13.8mmol)。在85℃下反应24小时，过滤，脱溶。所得到的粗品加入乙醇(40ml)溶解，再加入浓盐酸(1.4ml)，在70℃下反应12小时。脱溶除去乙醇，所得的粗品加二氯甲烷溶解。经水洗涤之后，用无水硫酸钠干燥。过滤，脱溶，得到产品b，直接用于下一步。
[0040]
化合物b(1.25g,3.2mmol)的n,n-二甲基甲酰胺(25ml)溶液中加入碳酸钾(1.33g,9.6mmol)和brch2ch2ch2co2et(1.25g，6.4mmol)，在60℃下反应12小时。加水洗涤，加乙酸乙酯萃取。脱溶，得到产品加入四氢呋喃(25ml)溶解，加入氢氧化钠水溶液。继续在室温下反应6小时。脱溶，得到水相，加入稀盐酸，调节ph至4。加入二氯甲烷萃取，经无水硫酸钠干燥，脱溶得到产品c。
[0041]
川陈皮素(0.75g,1.86mmol)的75ml二氯甲烷和56ml丙酮溶液中加入5％的碳酸钠水溶液79g和5％的碳酸氢钠的水溶液41g，再加入10％的过硫酸氢钾水溶液，继续在室温下反应48小时。脱溶，粗品加入二氯甲烷溶解，加入稀盐酸洗涤。分液，水相经二氯甲烷萃取，脱溶，经硅胶柱层析得到产品d 315mg，收率40％。
[0042]
化合物c(357mg,0.75mmol)和d(315mg,0.75mmol)的二氯甲烷溶液中加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(edci,1.5mmol)和4-二甲氨基吡啶(dmap,0.75mmol)，继续在室温下反应12小时。经干法上样，硅胶柱层析得到产品e 598mg，收率90.8％。
[0043]
实验例1杨梅素与川陈皮素拼接物对高尿酸血症动物模型的影响
[0044]
1.1材料
[0045]
1.1.1实验动物和饲料
[0046]
spf级昆明km小鼠，雄性，5-6周龄，体重22-25g，由广东省医学实验动物中心提供，动物合格证号：scxk(粤)2022－0002。小鼠饲养在塑料鼠笼中，自由饮食和饮水，室内温度(22
±
2)℃，相对湿度维持在55％
±
5％，12h/12h开关灯，检疫并适应饲养1周后进行相关实验。实验方案由中科产业控股(深圳)有限公司动物福利伦理委员会审核通过(申请编号：20220082)，动物实验的操作和流程遵循中国实验动物学会《实验动物教学用动物使用指
南》。
[0047]
定制日粮型饲料：15％酵母膏添加饲料，符合gb13078和14924.2规定，由江苏省协同医药生物工程有限责任公司提供，生产许可证：苏饲证(2019)01008。
[0048]
1.1.2药物与试剂
[0049]
杨梅素-川陈皮素拼接物为实验室合成自制。异氟烷(深圳市瑞沃德生命科技有限公司)；尿酸检测测试盒(南京建成生物工程研究所，批号：20221013)，肌酐(cr)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所，批号：20221015)，尿素氮(bun)含量检测试剂盒(北京索莱宝科技有限公司，批号：20221014)。
[0050]
1.2实验方法
[0051]
1.2.1动物分组与给药
[0052]
spf级km小鼠在动物房适应性饲养2周后，随机分为五组，分别为正常组(control)、模型组(model)、拼接物组(pjw)、杨梅素组(myricetin)、川陈皮素组(nobiletin)，各受单体试药物组的给药剂量均为30mg/kg，药物溶解于0.5％羧甲基纤维素钠溶液中，灌胃容积为10ml/kg。除正常组采用基础饲料喂养外，其他各组采用15％酵母膏饲料喂养造模。正常组和模型组每日灌胃等量生理盐水，其余各组每日灌胃给药，持续9周。
[0053]
1.2.2样品收集和血清生化指标检测
[0054]
实验结束时，即给药9周末，小鼠禁食12h，异氟烷麻醉摘眼球取血，室温静置1h后，3500rpm/min离心15分钟，分离血清，测定尿酸、肌酐、尿素氮水平；采血后脱颈椎处死小鼠，剖取肝脏、肾脏并称重，计算肝、肾脏指数[脏器指数＝脏器重量(g)/体质量(g)
×
100％]。然后快速分装，一份用4％多聚甲醛溶液固定，用于he染色，另一份-80℃冰箱保存备用。
[0055]
1.2.3肾组织病理学观察
[0056]
取4％多聚甲醛固定的肾组织，乙醇脱水、石蜡包埋、切片，经苏木精
‑‑
伊红染色后，于正置光学显微镜下观察肾组织的病理学变化。
[0057]
1.2.4统计学方法
[0058]
所有数据采用graphpad prism 7.00软件进行统计学分析，数据用均值
±
标准误(sd
±
sem)表示。采用单因素方差分析(one-wayanova)进行多组比较，组间两两比较采用dunnett's检验，p《0.05为差异有统计学意义。
[0059]
1.3结果
[0060]
1.3.1拼接物对高尿酸血症小鼠血清尿酸(ua)的影响
[0061]
与正常组相比，模型组小鼠ua水平显著提高(p《0.001)，表明模型成功。与模型组比较，拼接物、杨梅素和川陈皮素组的小鼠血清ua水平均显著降低(p《0.001)(p《0.001，p《0.01)，且拼接物的效果优于各单体组。见图1。
[0062]
1.3.2拼接物对高尿酸血症小鼠血清肌酐和尿素氮的影响
[0063]
与正常组比较，模型组小鼠血清肌酐、尿素氮水平明显升高(p《0.001)，表明模型成功。与模型组比较，拼接物、杨梅素和川陈皮素组的小鼠血清肌酐和尿素氮水平均显著降低(p《0.001)，且对肌酐的影响中拼接物的效果优于各单体药物。见图2。
[0064]
1.3.3拼接物对高尿酸血症小鼠脏器指数的影响
[0065]
与正常组相比，模型组小鼠的肾脏指数、肝脏指数均显著升高，说明酵母膏致小鼠高尿酸血症肾病模型建模成功。与模型组比较，拼接物和川陈皮素组均可显著降低小鼠的
肾脏指数(p《0.05,p《0.001)，而拼接物、杨梅素和川陈皮素均可显著降低小鼠的肝脏指数(p《0.001，p《0.05，p《0.01)，且拼接物的效果优于各单体组。见图3。
[0066]
1.3.4拼接物对高尿酸血症模型小鼠肾脏形态学改变的影响
[0067]
he染色结果显示，正常组小鼠肾脏皮质中肾小球分布均匀，细胞间排列整齐，系膜基质无增生，肾小管上皮细胞圆润、饱满，刷状缘排列整齐规则，皮质部、髓质部正常，无闭塞、扩张、萎缩、坏死；模型组小鼠肾小管上皮细胞水肿变性，表现为细胞体积增大、胞浆疏松淡染、腔缘欠清；拼接物、杨梅素及川陈皮素组可以不同程度改善高尿酸血症小鼠的肾脏损伤，主要表现为肾小管上皮细胞无明显变性，管腔无明显扩张，且能看出拼接物对肾脏病理形态的改善作用优于单体药物。见图4。

技术特征：
1.一种杨梅素与川陈皮素拼接物，其具有如下式e表示的结构：2.一种如权利要求1所述的杨梅素与川陈皮素拼接物e的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：(1)杨梅苷与碳酸钾在乙腈溶剂中混合，加入硫酸二甲酯，控温反应，得化合物a，化合物a加入乙醇溶解，再加入浓盐酸反应，得到产品b；(2)化合物b的n,n-二甲基甲酰胺溶液中加入碳酸钾和brch2ch2ch2co2et，控温反应，得到产品c；(3)川陈皮素的二氯甲烷和丙酮溶液中加入碳酸钠和碳酸氢钠的水溶液，再加入过硫酸氢钾的水溶液反应，得到产品d；(4)化合物c和d的二氯甲烷溶液中加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和4-二甲氨基吡啶反应，到产品杨梅素与川陈皮素拼接物e:
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述杨梅苷与碳酸钾的摩尔比为1:6-8；所述乙腈与杨梅苷的体积质量比为50:1，所述硫酸二甲酯与碳酸钾的摩尔比为1:1；所述用于溶解化合物a的乙醇与乙腈的体积比为1:1；所述浓盐酸的质量浓度为37％，以hcl计，浓盐酸与杨梅苷的摩尔比为10:1。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述化合物b与n,n-二甲基甲酰胺的质量体积比为1:15-20；所述碳酸钾与化合物b的摩尔比为3:1；所述brch2ch2ch2co2et与化合物b的摩尔比为2:1，反应温度为60℃。5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述二氯甲烷和丙酮混合溶剂与川陈皮素的体积质量比为175：1，其中二氯甲烷和丙酮的体积比为4：3，所述碳酸钠水溶液的质量浓度为5％，其中碳酸钠与川陈皮素的摩尔比为20：1，碳酸氢钠水溶液的质量浓度为5％，其中碳酸氢钠与川陈皮素的摩尔比为13：1，过硫酸氢钾水溶液的质量浓度为10％，其中过硫酸氢钾与川陈皮素的摩尔比为10：1。6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述化合物c与化合物d的摩尔比为1：1，所述二氯甲烷与化合物c的体积质量比为100：1，所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐与化合物c的摩尔比为2:1，所述4-二甲氨基吡啶与化合物c的摩尔比为1:1。7.根据权利要求2-6任意一项所述的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：(1)杨梅苷与碳酸钾在乙腈溶剂中混合，加入硫酸二甲酯，控温85℃反应24小时，过滤、脱溶，得化合物a；所得到的化合物a加入乙醇溶解，再加入浓盐酸，在70℃下反应12小时，脱溶除去乙醇，所得的粗品加二氯甲烷溶解，经水洗涤之后，用无水硫酸钠干燥，过滤，脱溶，得到产品b，直接用于下一步；(2)化合物b的n,n-二甲基甲酰胺溶液中加入碳酸钾和brch2ch2ch2co2et，在60℃下反应12小时，加水洗涤，加乙酸乙酯萃取，脱溶，得到产品加入四氢呋喃溶解，加入氢氧化钠水溶液，继续在室温下反应6小时，脱溶，得到水相，加入稀盐酸，调节ph至4，加入二氯甲烷萃取，经无水硫酸钠干燥，脱溶得到产品c；(3)川陈皮素的二氯甲烷和丙酮溶液中加入碳酸钠和碳酸氢钠的水溶液，再加入过硫酸氢钾的水溶液，继续在室温下反应48小时，脱溶，粗品加入二氯甲烷溶解，加入稀盐酸洗涤，分液，水相经二氯甲烷萃取，脱溶，经硅胶柱层析得到产品d；(4)化合物c和d的二氯甲烷溶液中加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和4-二甲氨基吡啶，继续在室温下反应12小时，经干法上样，硅胶柱层析得到产品e即为
杨梅素与川陈皮素拼接物。8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述四氢呋喃与n,n-二甲基甲酰胺的体积比为1:1，所述氢氧化钠水溶液的质量浓度为5％-40％，其中氢氧化钠与化合物b的摩尔比为2:1，所述稀盐酸的摩尔浓度为4mol/l。9.如权利要求1所述的化合物e在制备降尿酸及治疗高尿酸血症疾病药物中的用途。

技术总结
本发明提供了一种杨梅素与川陈皮素拼接物化合物及其制备方法，通过对两个具有临床意义的先导化合物进行修饰和改造，得到新化合物杨梅素与川陈皮素拼接物，新化合物相比于传统西药对并发症具有明显优势且不良反应较小；拼接物对血清尿酸、肌酐水平的降低幅度明显高于单体杨梅素和川陈皮素，表明拼接物的降尿酸效果优于单体药物，具有明显的改善高尿酸血症的作用。作用。作用。


技术研发人员：吴正治 濮留洋 李芷悦 李艳 刘展艳 朱关保 李利民 刘雅倩
受保护的技术使用者：吴正治
技术研发日：2023.05.19
技术公布日：2023/9/20