一种干细胞分离提取方法与流程
未命名
09-02
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1.本发明属于干细胞技术领域,具体涉及一种干细胞分离提取方法。
背景技术:
2.干细胞具有自我更新和分化成功能上不同的细胞类型的能力,其有潜力成为不断发展的再生医学领域、尤其是需要组织替换、再生或修复的再生疗法中的有效工具。干细胞存在于所有身体组织和器官中,但是在一些组织和器官,像骨髓和血液,要比其它组织和器官,像肝脏和脑更容易获得。然而,干细胞在骨髓和血液中存在的数目非常小,因此它们在临床上使用前必需先提取出来,然后再进行培养增加数目。
3.目前干细胞的分离提取常用技术是,使用离心机高速旋转的离心力来使得培养液分层,而后通过人工使用滴管的方式对离心管内的干细胞进行提取,但是人工提取不仅会消耗大量人力,而且容易造成提取不精准,提取量不一致,严重时会出现提取错误的情况。
技术实现要素:
4.针对上述问题,本发明提出了一种干细胞分离提取方法,以克服上述问题或者至少部分地解决上述问题。
5.该干细胞分离提取方法,采用干细胞分离提取设备进行干细胞的分离提取,所述干细胞分离提取设备包括离心管支架盘、离心管、移液管和试管,所述离心管支架盘能够插装放置多个所述离心管并且带动所述离心管进行离心旋转,所述移液管能够吸取和排出干细胞并且在所述离心管和所述试管之间往复移动;
6.采用所述干细胞分离提取设备进行干细胞的分离提取,具体步骤包括:
7.步骤s1,离心管内部培养液分层:将含有干细胞的培养液放入离心管中,并将离心管插装至离心管支架盘上,启动离心管支架盘进行转动,对含有干细胞的培养液进行离心,使培养液内的干细胞集聚,完成离心管内培养液分层;
8.步骤s2,吸取干细胞:控制移液管移动至处于吸取工位的离心管中,对离心管中分层后的干细胞进行吸取;
9.步骤s3,放置干细胞与切换下一管离心管:控制移液管由离心管中移出至试管中,并将移液管中干细胞排出至试管处,控制离心管支架盘进行转动,将下一管离心管移动至吸取工位;
10.步骤s4,重复吸取:重复步骤s2-s3,完成对多个离心管中干细胞的提取。
11.优选的,所述干细胞分离提取设备包括活动支架;所述活动支架用于插装固定所述离心管,并且与所述离心管支架盘可拆卸式连接;所述活动支架上设有夹块、簧片和限位杆,所述夹块套设在所述限位杆上,所述簧片与所述夹块连接,所述簧片能够驱动所述夹块相对于所述限位杆移动以对所述离心管进行夹持,所述限位杆能够限制所述簧片驱动所述夹块移动的最大距离。
12.优选的,所述离心管支架盘上设有固定斜面和挡板平面,所述活动支架上设有水
平挡板和角度固定齿;所述活动支架通过扭簧与所述离心管支架盘转动连接,所述扭簧驱动所述活动支架带动所述离心管的底部向靠近所述离心管支架盘的中心方向转动;所述水平挡板能够随所述活动支架转动至与所述挡板平面抵接,以定位所述离心管保持竖直状态;所述角度固定齿能够随所述活动支架转动至与所述固定斜面抵接,以限制所述离心管随所述离心管支架盘转动时的最大倾斜角度。
13.优选的,所述干细胞分离提取设备包括转换轨和转换轴;所述移液管沿竖直方向固定在所述转换轨上,能够随所述转换轨进行竖直方向的往复移动以及进行水平方向的往返移动;所述转换轨采用内轨道设计,包括第一斜面、第一下水平面、第一上水平面、第二斜面、第二下水平面、第二上水平面和竖直槽,所述第一斜面的高端与所述第二斜面的高端连接,所述第一斜面的低端与所述第一下水平面连接,所述第一上水平面位于第一下水平面的对应上方,所述第二斜面的低端与所述第二下水平面连接,所述第二上水平面位于所述第二下水平面的对应上方,所述竖直槽位于所述第一上水平面和所述第二上水平面之间,并且位于所述第一斜面和所述第二斜面连接位置的上方;所述转换轴沿水平方向设置,所述转换轴的一端设有凸轮,所述凸轮上设有偏心设置的第一转换杆和第二转换杆,并且所述第一转换杆和所述第二转换杆能够分别与所述转换轨形成配合动作,所述转换轴的另一端设有沿径向设置的限位杆,所述限位杆的端部与摆动弹簧的一端连接,所述摆动弹簧的另一端固定在所述转换轴的下方位置;所述转换轴的两侧分别设有第一限位块和第二限位块,以分别限制所述限位杆往复摆动的最大位置。
14.此时,以所述第一转换杆位于所述第二转换杆上方且位于所述竖直槽的位置为初始状态,所述限位杆转动至与所述第一限位块形成抵接,所述第二转换杆沿竖直方向与所述第二斜面对齐,控制所述转换轴相对于所述转换轨向下移动,所述第二转换杆与所述第二斜面抵接并通过所述第二斜面驱动所述转换轨进行水平方向移动,所述第二转换杆移动至所述第二下水平面后,所述转换轴相对于所述转换轨向上移动,所述第一转换杆与所述第二上水平面抵接后,所述转换轴能够带动所述限位杆克服所述摆动弹簧的作用力而带动所述第二转换杆绕所述第一转换杆转动至所述竖直槽中,并且在所述摆动弹簧的恢复力作用下能够使所述第一转换杆再转动至所述第二转换杆的下方,所述限位杆摆动至与所述第二限位块形成抵接,所述第一转换杆沿竖直方向与所述第一斜面对齐,控制所述转换轴相对于所述转换轨向下移动,所述第一转换杆与所述第一斜面抵接并通过所述第一斜面驱动所述转换轨进行水平方向移动,所述第一转换杆移动至所述第一下水平面后,控制所述转换轴相对于所述转换轨向上移动,所述第二转换杆与所述第一上水平面抵接后,所述转换轴能够带动所述限位杆克服所述摆动弹簧的作用力而带动所述第一转换杆绕所述第二转换杆转动至所述竖直槽中,并且在所述摆动弹簧的恢复力作用下能够使所述第二转换杆再转动至所述第一转换杆的下方,所述限位杆摆动至与所述第一限位块形成抵接,所述第二转换杆沿竖直方向与所述第二斜面对齐。
15.优选的,所述干细胞分离提取设备包括支撑座;所述转换轨沿水平方向滑动连接在所述支撑座上,并且能够随所述支撑座进行竖直方向的往复移动。
16.优选的,所述干细胞分离提取设备包括活动夹板和固定夹板;所述固定夹板固定设置在所述转换轨上并且位于所述移液管中气囊的一侧,所述活动夹板沿水平方向滑动设置在所述转换轨上并且位于所述移液管中气囊的另一侧。
17.优选的,所述干细胞分离提取设备包括解锁板、复位板、复位杆和夹板弹簧;夹板弹簧与所述活动夹板连接,以驱动所述活动夹板向远离所述固定夹板的方向移动;所述活动夹板与所述转换轨之间设有定位件,以定位所述活动夹板位于对所述移液管中气囊保持挤压的位置;所述解锁板沿水平方向固定设置,能够相对于所述转换轨进行竖直方向移动,以驱动所述定位件解除对所述活动夹板的定位;所述复位杆与所述活动夹板连接;所述复位板倾斜固定设置,能够相对于所述转换轨进行竖直方向移动,以驱动所述复位杆带动所述活动夹板克服所述夹板弹簧移动至与所述定位件连接的位置。
18.优选的,所述干细胞分离提取设备包括棘轮和棘爪杆;所述棘轮与所述离心管支架盘同轴连接,所述棘爪杆的端部设有第一棘爪,所述棘爪杆能够带动所述第一棘爪相对于所述棘轮进行往复移动,以驱动所述棘轮带动所述离心管支架盘进行单向转动。
19.优选的,所述干细胞分离提取设备包括方轨,所述凸轮与所述转换轴偏心设置;所述方轨沿竖直方向与所述棘爪杆固定连接,所述凸轮位于所述方轨的内部并且与所述方轨中沿竖直方向的两个轨道保持滑动抵接,所述凸轮能够相对于所述方轨进行竖直方向的往复移动。
20.优选的,所述干细胞分离提取设备包括第二棘爪;所述第二棘爪与所述棘轮连接,以限制所述棘轮单向转动。
21.本发明的干细胞分离提取方法具有以下有益技术效果:
22.1、在本发明中,可以利用离心管支架盘带动多个离心管进行旋转离心后,借助移液管收集每个离心管内分层分层后的干细胞,而不需要人工对每个离心管进行收集,既减少了对人力的依赖,减少了操作步骤,也避免了干细胞大量的与空气接触,更加省时省力,更加安全。
23.2、在本方发明中,仅采用了一个推杆作为控制元件就能控制完成移液管的吸取、移动以及对吸取液的排出,结构紧凑操控简单,使用效果好,工作高效而设备简洁。
附图说明
24.图1为本实施例干细胞分离提取设备初始状态时的内部结构示意图;
25.图2为本实施例移液管位于离心管上方状态时后方视角的结构示意图;
26.图3为本实施例移液管吸液完毕位于离心管内部时后方视角的局部结构示意图;
27.图4为本实施例移液管吸液完毕位于试管上方时局部剖面结构示意图;
28.图5为本实施例移液管位于试管上方放液完毕时后方视角局部剖面结构示意图;
29.图6为图2、图3状态时凸轮与方轨关系的示意图;
30.图7为图4、图5状态时凸轮与方轨关系的示意图;
31.图8为本实施例离心管处于离心状态时的结构示意图;
32.图9为图2、图5状态时定位件处的局部剖面结构示意图;
33.图10为图6中a处的局部结构示意图;
34.图11为本实施例活动支架的局部剖面结构示意图。
具体实施方式
35.下面结合附图和实施例对本发明的技术方案作进一步详细介绍。
36.结合图1至图11所示,本实施例的干细胞分离提取设备,包括离心管支架盘1、离心管2、移液管3和试管4。其中,离心管支架盘1转动设置在底座5上,并且能够沿圆周方向依此插装放置多个离心管2,以带动多个离心管2进行离心旋转。移液管3能够吸取和排出干细胞,并且在离心管2和试管4之间进行往复移动。试管4则沿竖直方向放置在底座5上,并且位于离心管支架盘1的一侧位置。
37.采用本实施例的干细胞分离提取设备进行干细胞的分离提取时,就可以利用离心管支架盘带动多个离心管进行旋转离心后,借助移液管收集每个离心管内分层分层后的干细胞,而不需要人工对每个离心管进行收集,既减少了对人力的依赖,减少了操作步骤,也避免了干细胞大量的与空气接触,更加省时省力,更加安全。
38.结合图5-6以及图10-11所示,在本实施例的干细胞分离提取设备中,还包括多个活动支架6。活动支架6用于插装固定离心管2,并且与离心管支架盘1进行可拆卸式连接。其中,活动支架6上设有夹块7、簧片8和限位杆9,夹块7套设在限位杆9上,簧片8与夹块7连接,簧片8能够驱动夹块7相对于限位杆9移动以形成对离心管2的夹持,而限位杆9同时能够限制簧片8驱动夹块7移动的最大距离。
39.其中,在本实施例的活动支架上对称设置了两个夹块,从而对离心管形成对心定位固定,当然在其他实施例中,根据离心管的尺寸可以调整夹块的设置数量,以保证对离心管形成稳定的夹持固定。另外,在本实施例中,限位杆采用t形杆,从而利用其前端可以形成对夹块移动距离的限制,避免夹块对离心管形成过大的作用力而对离心管造成破坏,提高对离心管的保护。
40.结合图5-6以及图10-11所示,在本实施例的离心管支架盘1上还设有固定斜面10和挡板平面11,同时在活动支架6上设有水平挡板12和角度固定齿13。其中,活动支架6的两端设有转耳进行扭簧61的安装,从而通过扭簧61与离心管支架盘1形成转动连接,而扭簧61则能够驱动活动支架6带动离心管2的底部向靠近离心管支架盘1的中心方向进行转动。水平挡板12能够随活动支架6转动至与挡板平面11形成抵接,以定位离心管2保持在竖直状态。角度固定齿13倾斜设置,并且能够随活动支架6转动至与固定斜面10形成抵接,以限制离心管2随离心管支架盘1转动时的最大倾斜角度。
41.在本实施例中,通过设置活动支架进行离心管的直接安装,再将活动支架安装在离心管支架盘上,不仅可以提高对离心管的安装效率和精度,而且还可以对离心管的姿态进行固定,避免旋转过程中倾角过大以及保持离心分层后的竖直状态,以便于后续的吸取操作。
42.结合图1至图7所示,在本实施例的干细胞分离提取设备中,还包括转换轨14和转换轴15。其中,移液管3沿竖直方向固定在转换轨14的侧面,能够随转换轨14进行竖直方向的往复移动以及进行水平方向的往返移动,从而实现在离心管2和试管4之间的往复移动。
43.转换轨14采用内轨道设计,包括第一斜面141、第一下水平面142、第一上水平面143、第二斜面144、第二下水平面145、第二上水平面146和竖直槽147。其中,第一斜面141的高端与第二斜面144的高端连接,即两者形成三角形结构,第一斜面141的低端则与第一下水平面142连接,第一上水平面143位于第一下水平面142的对应上方,第二斜面144的低端与第二下水平面145连接,第二上水平面146位于第二下水平面145的对应上方,竖直槽147则位于第一上水平面143和第二上水平面146之间,并且位于第一斜面141和第二斜面144连
接位置的上方。
44.转换轴15沿水平方向转动设置在底座5上,转换轴15的一端设有凸轮16,凸轮16上设有通过两个延伸杆进行偏心设置的第一转换杆17和第二转换杆18,并且第一转换杆17和第二转换杆18能够分别与转换轨14形成配合动作。转换轴15的另一端设有沿径向设置的限位杆19,限位杆19的端部与摆动弹簧20的一端连接,摆动弹簧20的另一端则固定在转换轴15的下方位置。与此同时,在转换轴15的两侧还分别设有第一限位块43和第二限位块44,以分别限制限位杆19往复摆动的最大位置。
45.以第一转换杆17位于第二转换杆18上方且位于竖直槽147中的位置为初始状态时,限位杆19转动至与第一限位块43形成抵接,第二转换杆18沿竖直方向与第二斜面144对齐,此时,控制转换轴15相对于转换轨14向下移动,即控制转换轨14向上移动时,第二转换杆18与第二斜面144形成抵接并通过第二斜面144驱动转换轨14整体向靠近第一斜面141的方向进行水平方向移动,第二转换杆18移动至第二下水平面145后,转换轴15相对于转换轨14向上移动,即控制转换轨14向下移动,此时,第一转换杆17与第二上水平面146抵接后,转换轨14继续向下移动就可以使转换轴15带动限位杆19克服摆动弹簧20的作用力而带动第二转换杆18绕第一转换杆17转动至竖直槽147中,并且在摆动弹簧20的恢复力作用下能够使第一转换杆17再转动至第二转换杆18的下方,限位杆19则摆动至与第二限位块44形成抵接,使第一转换杆17沿竖直方向与第一斜面141对齐,此时,再控制转换轴15相对于转换轨14向下移动,即控制转换轨14向上移动,第一转换杆17与第一斜面141抵接并通过第一斜面141驱动整体向靠近第二斜面144的方向进行水平方向移动,第一转换杆17移动至第一下水平面142后,再控制转换轴15相对于转换轨14向上移动,即再次控制转换轨14向下移动,第二转换杆18与第一上水平面143抵接后,转换轴15能够带动限位杆19克服摆动弹簧20的作用力而带动第一转换杆17绕第二转换杆18转动至竖直槽147中,并且在摆动弹簧20的恢复力作用下能够使第二转换杆18再转动至第一转换杆17的下方,而限位杆19则摆动至与第一限位块43形成抵接,使第二转换杆18沿竖直方向与第二斜面144对齐,至此完成一个工作循环过程。
46.这样,通过控制转换轨进行上下往返四次之后,就可以在转换轴的作用下使转换轨形成沿水平方向的一个往返,从而实现对移液管在离心管和试管之间的一个往返转移,实现对移动管的自动化转移。
47.结合图2所示,在本实施例的干细胞分离提取设备中,还设有一个支撑座23。转换轨14沿水平方向滑动连接在支撑座23上,并且能够随支撑座23进行竖直方向的往复移动。
48.具体的,在本实施例的干细胞分离提取设备中,还设有一个推杆24。推杆24沿竖直方向固定在底座5上,并且伸出端与支撑座23连接,以驱动支撑座23进行竖直方向的往复移动,进而控制转换轨14沿竖直方向的往复移动。
49.结合图4和图5所示,在本实施例的干细胞分离提取设备中,还设有活动夹板25和固定夹板26。其中,固定夹板26固定设置在转换轨14上并且位于移液管3中气囊27的一侧,活动夹板25沿水平方向滑动设置在转换轨14上并且位于移液管3中气囊27的另一侧。
50.此时,通过控制活动夹板相对于转换轨的往复移动,就可以在固定夹板的配合下,实现对移液管中气囊的挤压,实现对干细胞的吸取和排出。
51.结合图5和图9所示,在本实施例的干细胞分离提取设备中,还设有解锁板28、复位
板29、复位杆30和夹板弹簧31。其中,夹板弹簧31与活动夹板25连接,以驱动活动夹板25向远离固定夹板26的方向移动,从而解除对气囊27的挤压。活动夹板25与转换轨14之间设有定位件32,以定位活动夹板25位于对移液管3中气囊27保持挤压的位置。解锁板28沿水平方向固定设置,能够相对于转换轨14进行竖直方向移动,以驱动定位件32解除对活动夹板25的定位,从而使活动夹板25在夹板弹簧31的驱动下进行移动。复位杆30与固定夹板26连接。复位板29倾斜固定设置,能够相对于转换轨14进行竖直方向移动,以驱动复位杆30带动活动夹板25克服夹板弹簧31移动至与定位件32连接的位置。
52.此时,随着轨道板沿竖直方向的往复移动,就可以借助解锁板、复位板、复位杆和夹板弹簧实现对活动夹板往复移动的控制,实现对移液管进行干细胞吸取和排出操作的自动化控制,提高该干细胞分离提取设备的自动化。
53.其中,在本实施例中,定位件采用定位球和定位弹簧组成的结构形式,这样通过控制解锁板对定位球进行挤压克服定位弹簧就可以将定位球从活动夹板上定位槽中推出,从而使定位件脱离与活动夹板的连接,解除对活动夹板与固定夹板之间的位置固定。
54.结合图1和图6-7所示,在本实施例的干细胞分离提取设备中,还设有棘轮33和棘爪杆34。其中,棘轮33与离心管支架盘1同轴连接,棘爪杆34的端部设有第一棘爪35,棘爪杆34和第一棘爪35之间设有第一棘爪弹簧36,棘爪杆34能够带动第一棘爪35相对于棘轮33进行往复移动,以驱动棘轮33带动离心管支架盘1进行单向转动。
55.此时,通过控制棘爪杆带动第一棘爪推动棘轮进行单向转动,就可以配合转换轨的运动,在移液管完成对干细胞的一次吸取排出时,棘爪杆推动棘轮进行一次转动,从而通过离心管支架盘的转动将下一个离心管转至吸取工位,进一步提高对干细胞分离提取的自动化和效率。
56.其中,在本实施例中,棘轮的齿分布与离心管支架盘上的离心管分布相对于,从而可以在推动棘轮进行一个齿对应角度的转动时,正好带动离心管支架盘完成对一个离心管位置的转移。
57.结合图6和图7所示,在本实施例的干细胞分离提取设备中,还设有一个方轨37,并凸轮16偏心设置在转换轴15上。其中,方轨37沿竖直方向与棘爪杆34固定连接,凸轮16位于方轨37的内部并且与方轨37中沿竖直方向的两个轨道保持滑动抵接,凸轮16能够相对于方轨37进行竖直方向的相对往复移动。
58.此时,在转换轴进行转动的过程中,就可以通过偏心设置的凸轮带动方轨进行水平方向的往返移动,从而通过方轨带动棘爪杆进行水平方向的往复移动,实现带动第一棘爪推动棘轮进行单向转动的控制效果。
59.结合图6和图7所示,在本实施例的干细胞分离提取设备中,还设有第二棘爪38。第二棘爪38与第二棘爪弹簧39连接,第二棘爪弹簧39驱动第二棘爪38转动至与棘轮33连接,以限制棘轮33单向转动,即限制棘爪杆34带动第一棘爪35移动而不驱动棘轮33转动时,第二棘爪38限制棘轮33随棘爪杆34的移动进行转动,从而避免棘轮33的意外转动,提高对棘轮33的控制精度。
60.另外,结合图7所示,在本实施例的干细胞分离提取设备中,还设有一个电机40。电机40的输出轴与离心管支架盘1连接,以驱动离心管支架盘1进行转动,离心管支架盘1与棘轮33之间通过传动轴同轴固定连接,而电机40采用非刹车设计,即电机40在停机状态时,棘
轮33能够驱动离心管支架盘1进行转动。
61.此外,结合图1所示,在本实施例的干细胞分离提取设备上还设有一个设备门41。设备门41能够启闭,以便于进行离心管2和试管4的取放操作。
62.结合图1至图11所示,采用本实施例的干细胞分离提取设备进行干细胞的分离提取,具体步骤包括:
63.步骤s1,离心管内部培养液分层:将含有干细胞的培养液放入离心管中,并将离心管插装至离心管支架盘上,启动离心管支架盘进行转动,对含有干细胞的培养液进行离心,使培养液内的干细胞集聚,完成离心管内培养液分层。
64.具体的,开启设备门41,将含有干细胞的培养液定量放入离心管2中,将多个离心管2依次插入到位于离心管支架盘1上的多个活动支架6中,利用活动支架6上的夹块7和簧片8形成对离心管2的夹持固定,完成对离心管2的安装。关闭设备门41,启动电机40,驱动离心管支架盘1进行转动,带动离心管2进行离心作业,此时离心管2由于受到离心力的作用,克服扭簧61开始进行转动,使水平挡板12脱离与挡板平面11的接触,使角度固定齿13转动至与固定斜面10抵接,从而限制离心管2的倾斜角度,直至完成离心操作后,离心管2在扭簧61的恢复力作用下,再进行反向转动,使水平挡板12重新转动至与挡板平面11形成抵接,角度固定齿13脱离与固定斜面10的接触,从而将离心管2恢复至竖直状态,使得培养液内的干细胞集聚,完成对离心管内部培养液的分层操作。
65.步骤s2,吸取干细胞:控制移液管移动至处于吸取工位的离心管中,对离心管中分层后的干细胞进行吸取。
66.具体的,当离心管2中培养液完成离心分层后,此时干细胞分离提取设备处于图2所示位置状态,移液管3位于吸取工位处离心管2的正上方位置,第一转换杆17与第一下水平面142抵接,活动夹板25处于图9所示位置状态,通过定位件32保持与固定夹板26的位置固定,夹板弹簧31处于压缩状态,即活动夹板25和固定夹板26保持对气囊27的挤压状态,然后驱动推杆24进行收缩,通过支撑座23带动转换轨14向下移动,使第二转换杆18与第一上水平面143形成抵接,转换轨14继续向下移动,通过限位杆19克服摆动弹簧20的作用力而带动第一转换杆17绕第二转换杆18转动至竖直槽147中,并且在限位杆19转过死点后,在摆动弹簧20的拉力作用下转动至与第一限位块43形成抵接,转换轴15与转换轨14的相对位置如图3所示,在此过程中,移液管3随着转换轨14的向下移动而伸入离心管2中,与此同时,在定位件32移动至与解锁板28接触而被驱动解除对活动夹板25和固定夹板26的位置固定时,使活动夹板25在夹板弹簧31的驱动下伸出,解除对气囊27的挤压,使气囊27在自身弹性作用下膨胀对离心管2中的干细胞进行吸取。
67.与此同时,在转换轴15进行转动的同时,凸轮16随转换轴15的转动而带动方轨37从图7所示状态运动至图6所示状态,即方轨37向左移动。方轨37带动棘爪杆34向左移动,第一棘爪35克服第一棘爪弹簧36而自由滑过棘轮33,第二棘爪38在第二棘爪弹簧39作用下与棘轮保持连接,从而使棘轮33保持静止状态。
68.步骤s3,放置干细胞与切换下一管离心管:控制移液管由离心管中移出至试管中,并将移液管中干细胞排出至试管中,控制离心管支架盘进行转动,将下一管离心管移动至吸取工位。
69.具体的,驱动推杆24进行伸出,通过支撑座23带动转换轨14向上移动,将移液管3
由离心管2中移出,当第二转换杆18与第二斜面144形成抵接并且转换轨14继续向上移动时,由于转换轴15整体无法进行左右移动,从而通过第二斜面144驱动转换轨14沿支撑座23进行相对于转换轴15向图4所示的右侧方向移动,直至第二转换杆18移动至与第二下水平面145接触,此时移液管3随着转换轨14的水平移动而移至试管4的正上方位置。
70.驱动推杆24进行收缩,通过支撑座23带动转换轨14向下移动,使第一转换杆17与第二上水平面146抵接,转换轨14继续向上移动,通过限位杆19克服摆动弹簧20的作用力而带动第二转换杆18绕第一转换杆17转动至竖直槽147中,并且在限位杆19转过死点后,在摆动弹簧20的拉力作用下转动至与第二限位块44形成抵接,转换轴15与转换轨14的相对位置如图5所示,在此过程中,移液管3随着转换轨14而向靠近试管4的方向移动但不伸入试管4中。在此过程中,随着转换轨14的向下移动,复位杆30移动至与复位板29抵接,并且在复位板29的导向作用下,通过复位杆30带动活动夹板25克服夹板弹簧31相对于固定夹板26移动,从而由活动夹板25和固定夹板26形成对气囊27的挤压,将移液管3中的干细胞排出至试管4中,同时活动夹板25重新移动至由定位件32将活动夹板25与固定夹板26进行固定的位置。
71.在转换轴15进行转动的同时,凸轮16带动方轨37从图6所示状态运动至图7所示状态,即方轨37向右移动。方轨37带动棘爪杆34向右移动,第一棘爪35在第一棘爪弹簧36的作用下推动棘轮33进行一个齿对应角度的转动,第二棘爪38在棘轮33的驱动下克服第二棘爪弹簧39的作用力进行回收,状态如图7所示。由于电机40没有刹车,从而由棘轮33带动离心管支架盘1进行转动,从而将下一个未被吸取干细胞的离心管2转动至吸取工位。
72.再之后,驱动推杆24进行伸出,通过支撑座23带动转换轨14向上移动,带动移液管3向上移动,当第一转换杆17与第一斜面141形成抵接并且转换轨14继续向上移动时,由于转换轴15整体无法进行左右移动,从而通过第一斜面141驱动转换轨14沿支撑座23进行相对于转换轴15向图5所示的右侧方向移动,直至第一转换杆17移动至与第一下水平面142接触,此时移液管3随着转换轨14的水平移动而移至吸取工位处离心管2的正上方位置,回到图2所示状态。
73.步骤s4,重复吸取:重复步骤s2-s3,完成对多个离心管中干细胞的提取。
技术特征:
1.一种干细胞分离提取方法,其特征在于,采用干细胞分离提取设备进行干细胞的分离提取,所述干细胞分离提取设备包括离心管支架盘、离心管、移液管和试管,所述离心管支架盘能够插装放置多个所述离心管并且带动所述离心管进行离心旋转,所述移液管能够吸取和排出干细胞并且在所述离心管和所述试管之间往复移动;采用所述干细胞分离提取设备进行干细胞的分离提取,具体步骤包括:步骤s1,离心管内部培养液分层:将含有干细胞的培养液放入离心管中,并将离心管插装至离心管支架盘上,启动离心管支架盘进行转动,对含有干细胞的培养液进行离心,使培养液内的干细胞集聚,完成离心管内培养液分层;步骤s2,吸取干细胞:控制移液管移动至处于吸取工位的离心管中,对离心管中分层后的干细胞进行吸取;步骤s3,放置干细胞与切换下一管离心管:控制移液管由离心管中移出至试管处,并将移液管中干细胞排出至试管中,控制离心管支架盘进行转动,将下一管离心管移动至吸取工位;步骤s4,重复吸取:重复步骤s2-s3,完成对多个离心管中干细胞的提取。2.根据权利要求1所述的干细胞分离提取方法,其特征在于,所述干细胞分离提取设备包括活动支架;所述活动支架用于插装固定所述离心管,并且与所述离心管支架盘可拆卸式连接;所述活动支架上设有夹块、簧片和限位杆,所述夹块套设在所述限位杆上,所述簧片与所述夹块连接,所述簧片能够驱动所述夹块相对于所述限位杆移动以对所述离心管进行夹持,所述限位杆能够限制所述簧片驱动所述夹块移动的最大距离。3.根据权利要求2所述的干细胞分离提取方法,其特征在于,所述离心管支架盘上设有固定斜面和挡板平面,所述活动支架上设有水平挡板和角度固定齿;所述活动支架通过扭簧与所述离心管支架盘转动连接,所述扭簧驱动所述活动支架带动所述离心管的底部向靠近所述离心管支架盘的中心方向转动;所述水平挡板能够随所述活动支架转动至与所述挡板平面抵接,以定位所述离心管保持竖直状态;所述角度固定齿能够随所述活动支架转动至与所述固定斜面抵接,以限制所述离心管随所述离心管支架盘转动时的最大倾斜角度。4.根据权利要求1所述的干细胞分离提取方法,其特征在于,所述干细胞分离提取设备包括转换轨和转换轴;所述移液管沿竖直方向固定在所述转换轨上,能够随所述转换轨进行竖直方向的往复移动以及进行水平方向的往返移动;所述转换轨采用内轨道设计,包括第一斜面、第一下水平面、第一上水平面、第二斜面、第二下水平面、第二上水平面和竖直槽,所述第一斜面的高端与所述第二斜面的高端连接,所述第一斜面的低端与所述第一下水平面连接,所述第一上水平面位于第一下水平面的对应上方,所述第二斜面的低端与所述第二下水平面连接,所述第二上水平面位于所述第二下水平面的对应上方,所述竖直槽位于所述第一上水平面和所述第二上水平面之间,并且位于所述第一斜面和所述第二斜面连接位置的上方;所述转换轴沿水平方向设置,所述转换轴的一端设有凸轮,所述凸轮上设有偏心设置的第一转换杆和第二转换杆,并且所述第一转换杆和所述第二转换杆能够分别与所述转换轨形成配合动作,所述转换轴的另一端设有沿径向设置的限位杆,所述限位杆的端部与摆动弹簧的一端连接,所述摆动弹簧的另一端固定在所述转换轴的下方位置;所述转换轴的两侧分别设有第一限位块和第二限位块,以分别限制所述限位杆往复摆动的最大位置。
5.根据权利要求4所述的干细胞分离提取方法,其特征在于,所述干细胞分离提取设备包括支撑座;所述转换轨沿水平方向滑动连接在所述支撑座上,并且能够随所述支撑座进行竖直方向的往复移动。6.根据权利要求4所述的干细胞分离提取方法,其特征在于,所述干细胞分离提取设备包括活动夹板和固定夹板;所述固定夹板固定设置在所述转换轨上并且位于所述移液管中气囊的一侧,所述活动夹板沿水平方向滑动设置在所述转换轨上并且位于所述移液管中气囊的另一侧。7.根据权利要求6所述的干细胞分离提取方法,其特征在于,所述干细胞分离提取设备包括解锁板、复位板、复位杆和夹板弹簧;夹板弹簧与所述活动夹板连接,以驱动所述活动夹板向远离所述固定夹板的方向移动;所述活动夹板与所述转换轨之间设有定位件,以定位所述活动夹板位于对所述移液管中气囊保持挤压的位置;所述解锁板沿水平方向固定设置,能够相对于所述转换轨进行竖直方向移动,以驱动所述定位件解除对所述活动夹板的定位;所述复位杆与所述活动夹板连接;所述复位板倾斜固定设置,能够相对于所述转换轨进行竖直方向移动,以驱动所述复位杆带动所述活动夹板克服所述夹板弹簧移动至与所述定位件连接的位置。8.根据权利要求4所述的干细胞分离提取方法,其特征在于,所述干细胞分离提取设备包括棘轮和棘爪杆;所述棘轮与所述离心管支架盘同轴连接,所述棘爪杆的端部设有第一棘爪,所述棘爪杆能够带动所述第一棘爪相对于所述棘轮进行往复移动,以驱动所述棘轮带动所述离心管支架盘进行单向转动。9.根据权利要求8所述的干细胞分离提取方法,其特征在于,所述干细胞分离提取设备包括方轨,所述凸轮与所述转换轴偏心设置;所述方轨沿竖直方向与所述棘爪杆固定连接,所述凸轮位于所述方轨的内部并且与所述方轨中沿竖直方向的两个轨道保持滑动抵接,所述凸轮能够相对于所述方轨进行竖直方向的往复移动。10.根据权利要求9所述的干细胞分离提取方法,其特征在于,所述干细胞分离提取设备包括第二棘爪;所述第二棘爪与所述棘轮连接,以限制所述棘轮单向转动。
技术总结
本发明公开了一种干细胞分离提取方法,采用干细胞分离提取设备进行干细胞的分离提取,所述干细胞分离提取设备包括离心管支架盘、离心管、移液管和试管,所述离心管支架盘能够插装放置多个所述离心管并且带动所述离心管进行离心旋转,所述移液管能够吸取和排出干细胞并且在所述离心管和所述试管之间往复移动;步骤S1,离心管内部培养液分层:步骤S2,吸取干细胞:步骤S3,放置干细胞与切换下一管离心管。该干细胞分离提取方法,既可以减少对人力的依赖,减少了操作步骤,也可以避免干细胞大量的与空气接触,更加省时省力,更加安全。更加安全。更加安全。
技术研发人员:巩晓红 冯敏 汤晓杰
受保护的技术使用者:长沙代何生物科技有限公司
技术研发日:2023.07.13
技术公布日:2023/8/28
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