一种快速扩培高质量单胞藻的方法与流程

1.本发明涉及单胞藻领域，特别涉及一种快速扩培高质量单胞藻的方法。


背景技术：

2.藻类不但能够为丰年虫等虾苗饵料提供营养物质，而且能够对虾塘发挥净化水质的作用。在虾塘中形成良性循环。单胞藻是对虾养殖过程重要的藻类。鉴于市场对虾苗的需求逐渐增大，采用传统方法培育单胞藻，其生长速度往往未能满足虾苗养殖要求，而且受天气影响容易出现死藻现象。故急需一种方法，能够更好培育单胞藻。


技术实现要素：

3.鉴于此，本发明提出一种快速扩培高质量单胞藻的方法，能够实现快速扩培高质量单胞藻的要求。
4.本发明的技术方案是这样实现的：
5.一种快速扩培高质量单胞藻的方法，包括以下步骤：
6.选择培藻池，控制水位为10～20cm，投放营养剂，所述营养剂包括以下原料制得：硝酸钠、氯化锌、氯化钴、六水氯化铁、四水氯化锰、五水硫酸铜、硼酸、乙二胺四乙酸二钠、代森锰锌和磺化琥珀酸二辛酯钠盐；
7.投放单胞藻藻种，调整水体的ph值2.8～3.2保持0.8～1.2h，控制水体的ph值为6.5～7.5，培育至收获。
8.优选地，所述培育时间为8d以上。
9.优选地，第1～3d培养温度控制在15～20℃范围；第4～6d培养温度控制在20～25℃范围；第6d后培养温度控制25～30℃范围。
10.优选地，每天给予蓝光和绿光光照，蓝光光照1～2h，绿光光照3～5h，蓝光光照强度为0.4～0.6w/m2，绿光光照强度为0.9～1.1w/m2。
11.优选地，所述培藻池中投放气石，投放量为0.1～0.2kg/m2。
12.优选地，所述营养剂包括以下原料制得：硝酸钠28～32份、氯化锌1～2份、氯化钴1～2份、六水氯化铁4～6份、四水氯化锰4～6份、五水硫酸铜1～2份、硼酸8～12份、乙二胺四乙酸二钠8～15份、代森锰锌3～5份、磺化琥珀酸二辛酯钠盐1～2份、大蒜素2～4份、鬼针草提取物3～5份。其中，鬼针草提取物的制备方法：取鬼针草药材，用95％v/v乙醇回流提取，料液比kg/l为1：10，减压浓缩，收集浓缩液，浓缩液用石油醚萃取，收集萃取液，减压浓缩，干燥，即得。
13.优选地，所述营养剂与培藻池中水体的质量体积比kg/l为1～2：100。
14.优选地，所述单胞藻为三角褐指藻和骨条藻中一种或两种。
15.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
16.(1)采用本发明方法培育单胞藻，培育后藻细胞增殖速度快，藻细胞数目增殖显著，避免死藻现象发生，能够实现快速扩培高质量单胞藻的要求。
17.(2)采用本发明配方的营养剂，含有鬼针草提取物、大蒜素、代森锰锌、磺化琥珀酸二辛酯钠盐等成分，能够更好地被单胞藻吸收，促进藻细胞增殖，明显提高单胞藻增殖速率，而且提高单胞藻质量。
18.(3)本发明投放单胞藻藻种，调整水体的ph值至酸化，利于杀灭藻类害虫，净化水体环境，利于后期培育。
19.(4)采用一定强度的蓝光和绿光的组合照射，控制照射时间，进一步有效促进藻细胞增殖，提高单胞藻质量。
20.(5)本发明培育过程，采用梯度温度进行培育，结合本发明营养剂增强作用，使得单胞藻更好适应天气变化，避免发生死藻。
具体实施方式
21.为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
22.本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
23.本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
24.本发明使用的鬼针草提取物的制备方法：取鬼针草药材，用95％v/v乙醇回流提取，料液比kg/l为1：10，减压浓缩，收集浓缩液，浓缩液用石油醚萃取3次，合并萃取液，减压浓缩，干燥，即得。
25.实施例1
26.一种快速扩培高质量单胞藻的方法，包括以下步骤：
27.选择培藻池，培藻池中投放气石，投放量为0.15kg/m2，控制水位为10～20cm，投放营养剂i，营养剂i由以下原料组成：硝酸钠30份、氯化锌1.8份、氯化钴1.3份、六水氯化铁5份、四水氯化锰5份、五水硫酸铜1.2份、硼酸10份、乙二胺四乙酸二钠10份、代森锰锌4份、磺化琥珀酸二辛酯钠盐1.5份、大蒜素3份、鬼针草提取物4份，投入营养剂i与培藻池中水体的质量体积比kg/l为1.3：100，搅拌均匀；再投放三角褐指藻藻种，接种密度为0.5*106cells/ml，调整水体的ph值2.8～3.2保持1h，控制水体的ph值为6.5～7.5，
28.第1～3d培养温度控制在15～20℃范围；第4～6d培养温度控制在20～25℃范围；第6d后培养温度控制25～30℃范围；
29.培育过程每天给予蓝光和绿光光照，蓝光光照1.5h，绿光光照4h，蓝光光照强度为0.5w/m2，绿光光照强度为1.0w/m2；
30.培育至收获。
31.实施例2
32.一种快速扩培高质量单胞藻的方法，包括以下步骤：
33.选择培藻池，培藻池中投放气石，投放量为0.1kg/m2，控制水位为10～20cm，投放营养剂i，营养剂i由以下原料组成：硝酸28份、氯化锌1份、氯化钴2份、六水氯化铁6份、四水氯化锰4份、五水硫酸铜1份、硼酸12份、乙二胺四乙酸二钠12份、代森锰锌3份、磺化琥珀酸二辛酯钠盐1份、大蒜素2份、鬼针草提取物5份，投入营养剂i与培藻池中水体的质量体积比kg/l为1：100，搅拌均匀；再投放三角褐指藻藻种，接种密度为0.5*106cells/ml，调整水体的ph值2.8～3.2保持1h，控制水体的ph值为6.5～7.5，
34.第1～3d培养温度控制在15～20℃范围；第4～6d培养温度控制在20～25℃范围；
第6d后培养温度控制25～30℃范围；
35.培育过程每天给予蓝光和绿光光照，蓝光光照1h，绿光光照4.5h，蓝光光照强度为0.5w/m2，绿光光照强度为1.0w/m2；
36.培育至收获。
37.实施例3
38.一种快速扩培高质量单胞藻的方法，包括以下步骤：
39.选择培藻池，培藻池中投放气石，投放量为0.2kg/m2，控制水位为10～20cm，投放营养剂i，营养剂i由以下原料组成：硝酸钠32份、氯化锌2份、氯化钴1份、六水氯化铁4份、四水氯化锰6份、五水硫酸铜2份、硼酸8份、乙二胺四乙酸二钠8份、代森锰锌5份、磺化琥珀酸二辛酯钠盐2份、大蒜素2份、鬼针草提取物3份，投入营养剂i与培藻池中水体的质量体积比kg/l为2：100，搅拌均匀；再投放三角褐指藻藻种，接种密度为0.5*106cells/ml，调整水体的ph值2.8～3.2保持1h，控制水体的ph值为6.5～7.5，
40.第1～3d培养温度控制在15～20℃范围；第4～6d培养温度控制在20～25℃范围；第6d后培养温度控制25～30℃范围；
41.培育过程每天给予蓝光和绿光光照，蓝光光照2h，绿光光照3.5h，蓝光光照强度为0.5w/m2，绿光光照强度为1.0w/m2；
42.培育至收获。
43.对比例1
44.与实施例1主要区别在于：培育过程仅给予红光光照，每天光照5.5h，光照强度为3.0w/m2。其他处理与实施例1一致。
45.选择培藻池，培藻池中投放气石，投放量为0.15kg/m2，控制水位为10～20cm，投放营养剂i，营养剂i由以下原料组成：硝酸钠30份、氯化锌1.8份、氯化钴1.3份、六水氯化铁5份、四水氯化锰5份、五水硫酸铜1.2份、硼酸10份、乙二胺四乙酸二钠10份、代森锰锌4份、磺化琥珀酸二辛酯钠盐1.5份、大蒜素3份、鬼针草提取物4份，投入营养剂i与培藻池中水体的质量体积比kg/l为1.3：100，搅拌均匀；再投放三角褐指藻藻种，接种密度为0.5*106cells/ml，调整水体的ph值2.8～3.2保持1h，控制水体的ph值为6.5～7.5，
46.第1～3d培养温度控制在15～20℃范围；第4～6d培养温度控制在20～25℃范围；第6d后培养温度控制25～30℃范围；
47.培育过程每天给予红光光照，红光光照5.5h，光照强度为3.0w/m2；
48.培育至收获。
49.对照例
50.与实施例1主要区别在于：投入营养剂不含代森锰锌和磺化琥珀酸二辛酯钠盐、大蒜素、鬼针草提取物。营养剂的投入量与实施例1一致。
51.具体方法：
52.选择培藻池，培藻池中投放气石，投放量为0.15kg/m2，控制水位为10～20cm，投放营养剂i，营养剂i由以下原料组成：硝酸钠30份、氯化锌1.8份、氯化钴1.3份、六水氯化铁5份、四水氯化锰5份、五水硫酸铜1.2份、硼酸10份、乙二胺四乙酸二钠10份，投入营养剂i与培藻池中水体的质量体积比kg/l为1.3：100，搅拌均匀；再投放三角褐指藻藻种，接种密度为0.5*106cells/ml，调整水体的ph值2.8～3.2保持1h，控制水体的ph值为6.5～7.5，
53.第1～3d培养温度控制在15～20℃范围；第4～6d培养温度控制在20～25℃范围；第6d后培养温度控制25～30℃范围；
54.培育过程每天给予蓝光和绿光光照，蓝光光照1.5h，绿光光照4h，蓝光光照强度为0.5w/m2，绿光光照强度为1.0w/m2；
55.培育至收获。
56.试验例
57.在海南省文昌市会文镇冯家湾基地，按照实施例1-3以及对比例1方法进行培育，设为试验组1-4，培藻池面积为50m2，培育8天后，取样检测，对培育后藻细胞计数，并计算。并与对照例(对照组)的结果进行对比。结果如下表1：
58.藻细胞增殖数目＝培育后藻细胞数目-培育前藻细胞数目
59.藻细胞增殖数目相对提高百分比＝(实施例/对比例培育后藻细胞数目-培育前藻细胞数目)-(对照组培育后藻细胞数目-培育前藻细胞数目)/(对照组培育后藻细胞数目-培育前藻细胞数目)*100％
[0060][0061]
上述结果表明，相比对照例，采用实施例1-3以及对比例1方法培育后三角褐指藻的培育后藻细胞数目均有明显提高，其中，实施例1-3的藻细胞数目增殖相对更为显著，表明其藻细胞增殖速度快。实施例1与对比例1对比，可知采用一定强度的蓝光和绿光的照射，更加促进藻细胞增殖，提高增殖速率。
[0062]
另外，采用本发明方法应用于培育骨条藻，也具有良好的效果。
[0063]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

技术特征：
1.一种快速扩培高质量单胞藻的方法，其特征在于，包括以下步骤：选择培藻池，控制水位为10～20cm，投放营养剂，所述营养剂包括以下原料制得：硝酸钠、氯化锌、氯化钴、六水氯化铁、四水氯化锰、五水硫酸铜、硼酸、乙二胺四乙酸二钠、代森锰锌和磺化琥珀酸二辛酯钠盐；投放单胞藻藻种，调整水体的ph值2.8～3.2保持0.8～1.2h，再调整水体的ph值为6.5～7.5，培育至收获。2.根据权利要求1所述的快速扩培高质量单胞藻的方法，其特征在于，所述单胞藻藻种的接种密度为(0.4～0.6)*106cells/ml。3.根据权利要求1所述的快速扩培高质量单胞藻的方法，其特征在于，所述培育时间为8d以上。4.根据权利要求3所述的快速扩培高质量单胞藻的方法，其特征在于，第1～3d培养温度控制在15～20℃范围；第4～6d培养温度控制在20～25℃范围；第6d后培养温度控制25～30℃范围。5.根据权利要求1或4所述的快速扩培高质量单胞藻的方法，其特征在于，每天给予蓝光和绿光光照，蓝光光照1～2h，绿光光照3～5h，蓝光光照强度为0.4～0.6w/m2，绿光光照强度为0.9～1.1w/m2。6.根据权利要求1所述的快速扩培高质量单胞藻的方法，其特征在于，所述培藻池中投放气石，投放量为0.1～0.2kg/m2。7.根据权利要求1所述的快速扩培高质量单胞藻的方法，其特征在于，所述营养剂包括以下原料制得：硝酸钠28～32份、氯化锌1～2份、氯化钴1～2份、六水氯化铁4～6份、四水氯化锰4～6份、五水硫酸铜1～2份、硼酸8～12份、乙二胺四乙酸二钠8～15份、代森锰锌3～5份、磺化琥珀酸二辛酯钠盐1～2份、大蒜素2～4份、鬼针草提取物3～5份。8.根据权利要求7所述的快速扩培高质量单胞藻的方法，其特征在于，所述鬼针草提取物的制备方法：取鬼针草药材，用95％v/v乙醇回流提取，料液比kg/l为1：10，减压浓缩，收集浓缩液，浓缩液用石油醚萃取，收集萃取液，减压浓缩，干燥，即得。9.根据权利要求1或7所述的快速扩培高质量单胞藻的方法，其特征在于，所述营养剂与培藻池中水体的质量体积比kg/l为1～2：100。10.根据权利要求1-9任一项所述的快速扩培高质量单胞藻的方法，其特征在于，所述单胞藻为三角褐指藻和骨条藻中一种或两种。

技术总结
本发明提供一种快速扩培高质量单胞藻的方法，本发明方法包括以下步骤：选择培藻池，控制水位为10～20cm，投放营养剂，所述营养剂包括以下原料制得：硝酸钠、氯化锌、氯化钴、六水氯化铁、四水氯化锰、五水硫酸铜、硼酸、乙二胺四乙酸二钠、代森锰锌和磺化琥珀酸二辛酯钠盐；投放单胞藻藻种，调整水体的pH值2.8～3.2保持0.8～1.2h，控制水体的pH值为6.5～7.5，培育至收获。采用本发明方法培育单胞藻后，培育后藻细胞增殖速度快，藻细胞数目增殖显著。采用本发明自制的营养剂，补充鬼针草提取物、大蒜素、代森锰锌、磺化琥珀酸二辛酯钠盐等成分，能够更好地被单胞藻吸收，促进藻细胞增殖，明显提高单胞藻增殖速率。显提高单胞藻增殖速率。


技术研发人员：云永超 云乐
受保护的技术使用者：海南禄泰海洋生物科技有限公司
技术研发日：2023.06.01
技术公布日：2023/8/28